04HPV人乳頭瘤病毒核酸檢測試劑盒產(chǎn)品介紹131217

人乳頭瘤病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)宮頸癌篩查新產(chǎn)品-系列講座（一）產(chǎn)品介紹江蘇省分子診斷工程技術(shù)研究中心浙江大學(xué)中國醫(yī)藥城研發(fā)中心江蘇默樂生物科技有限公司25十二月20241目錄宮頸癌現(xiàn)狀12人乳頭瘤病毒（HPV）介紹3臨床HPV檢測方法新品介紹4產(chǎn)品與其他類似產(chǎn)品優(yōu)勢比對5產(chǎn)品市場容量分析625十二月2024225十二月20243全球發(fā)病率大約50萬/年，女性第二號殺手；我國新發(fā)病例約13萬/年；新發(fā)病例逐年增加，呈年輕化趨勢；隨年齡的增大，感染率逐漸增加；我國宮頸癌死亡率約2萬/年；宮頸癌25十二月20244獲2008年諾貝爾生理學(xué)獎——哈拉爾德·楚爾·豪森；發(fā)現(xiàn)了HPV高危型病毒引起宮頸癌的分子機制；唯一病因明確的腫瘤——高危型HPV持續(xù)感染；97%的宮頸癌患者都發(fā)現(xiàn)高危型人乳頭瘤病毒HPV感染；從HPV感染到宮頸癌，一般需要10－20年；早發(fā)現(xiàn)、早治療，可以預(yù)防和根治的癌癥；宮頸癌——目前唯一病因明確腫瘤25十二月20245病毒DNA主要衣殼蛋白次要衣殼蛋白雙鏈閉環(huán)小DNA病毒；大小8000個bps；無包膜；球形；二十面立體對稱結(jié)構(gòu)；表面有72個殼體；

直徑52～55nm；人乳頭瘤病毒—HPV25十二月20246人類是HPV的唯一宿主；高度的宿主特異親和力；嗜上皮性病毒，主要寄宿于人體皮膚及黏膜;在空氣中可存活10+小時；龐大家族：目前有200+種型別HPV；約40多種型別與生殖道感染有關(guān)；大約20多種型與癌癥相關(guān)；傳播途徑：直接感染（性接觸/主要傳播途徑）

間接感染人乳頭瘤病毒—HPV25十二月20247HPV分型和分類根據(jù)感染部位生殖器類非生殖器類根據(jù)組織類型嗜皮膚性嗜粘膜性根據(jù)與癌發(fā)生危險性高危型中高危型低危型25十二月20248HPV分型與宮頸癌高危型：16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68等；中高危型：HPV53、66、73、83、MM4和cp8304等低度子宮頸病變高度子宮頸病變子宮頸癌低危型：HPV6、11、42、43和44等良性的低度子宮頸改變尖銳濕疣(生殖器疣)已知的HPV型別有150多種，約有40種型別可感染婦女生殖道根據(jù)導(dǎo)致宮頸癌風(fēng)險程度劃分：即高危型（HR）、中高危型（IR）和低危型（LR）25十二月20249HPV感染其它疣類疾病宮頸炎、宮頸糜爛、CINI潛伏感染亞臨床感染顯性感染被清除宮頸癌、陰莖癌、外陰癌、肛門癌等高、低危型HPV高危型HPV尖銳濕疣HPV與宮頸癌25十二月202410HPV感染與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展出現(xiàn)HPV相關(guān)的細(xì)胞學(xué)改變正常宮頸高度鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL,CINII,III/CIS)

宮頸浸潤癌HPV

感染HPV持續(xù)感染約60%在2到3年內(nèi)自然逆轉(zhuǎn)30%-70%在10年內(nèi)演變?yōu)榈投洒[狀上皮內(nèi)病變(LSIL,CINI)約15%在3-4年內(nèi)演變?yōu)?5十二月202411宮頸癌前病變各期及宮頸癌的病理模式圖正常宮頸輕度不典型增生中度不典型增生重度不典型增生浸潤癌

CINICINIICINIII/CISInvasiveCA25十二月202412權(quán)威組織一致推薦：采用細(xì)胞學(xué)檢查和HPVDNA聯(lián)檢進(jìn)行宮頸癌篩查。宮頸癌篩查方案25十二月202413我國的宮頸癌篩查推薦方案經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)：醫(yī)生取材HPVDNA檢測＋液基細(xì)胞學(xué)檢查（TCT）經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū)：醫(yī)生取材HPVDNA檢測＋傳統(tǒng)巴氏圖片貧困地區(qū)：肉眼觀察（VIA）引自：宮頸癌篩查及早診早治方案/喬友林等.2003.725十二月202414宮頸癌臨床主要檢測方法（一）（1）細(xì)胞學(xué)檢查:

巴氏涂片法(PAP)

液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測法（TCT)細(xì)胞學(xué)自動閱片系統(tǒng)（2）肉眼觀察:醋酸白試驗：用3%~5%的冰醋酸染色碘黃試驗：用4%~5%的碘液染色（3）陰道鏡檢查:

陰道鏡可將宮頸放大16～40倍形態(tài)學(xué)檢測25十二月202415１、假陰性結(jié)果(10-30%)面臨醫(yī)療糾紛；２、重復(fù)性不好；３、經(jīng)驗性:需要富有經(jīng)驗的專家；４、增加篩查成本:復(fù)診率過高；５、在等待復(fù)查中承受焦慮和精神壓力；形態(tài)學(xué)篩查存在的問題25十二月202416宮頸癌臨床主要檢測方法（二）---熒光PCR法(默樂生物）---雜交信號放大法(HC2)---基因芯片（凱普、亞能）HPVDNA分型檢測方法特色新產(chǎn)品人乳頭瘤病毒核酸檢測試劑盒熒光PCR法25十二月202417宮頸癌早期篩查新產(chǎn)品——人乳頭瘤病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)25十二月202418HPV熒光PCR檢測流程和原理——人乳頭瘤病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)DNA提取PCR反應(yīng)實驗熒光檢測結(jié)果判讀適合多種熒光PCR儀器判讀準(zhǔn)確、數(shù)字信號一次實驗三個結(jié)果時間短無交叉污染高通量可96孔板操作沉淀后煮沸法獨特的引物設(shè)計MS2內(nèi)標(biāo)全程質(zhì)控一管檢三型——適合早期篩查25十二月202419高危13型：16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68等；中危6型：HPV53、66、73、83、MM4和cp8304等低危5型：HPV6、11、42、43和44等本試劑盒用于婦女宮頸脫落細(xì)胞；人乳頭瘤病毒(HPV)核酸DNA的定性檢測；一個反應(yīng)檢測三個（高危、中高危、低危）結(jié)果；產(chǎn)品特點——提取&質(zhì)控25十二月202420質(zhì)控1、競爭性內(nèi)標(biāo)技術(shù)：監(jiān)測整個核酸抽提和檢測過程是否有誤，有利于消除反應(yīng)出現(xiàn)的假陰性，結(jié)果更可靠。提取采用直接煮沸法1、離心沉淀細(xì)胞2、95℃煮沸裂解3、離心沉淀4、上清液模板產(chǎn)品特點——獨特探針引物設(shè)計高保守?zé)o交叉陰陽性無漏檢25十二月202421基于HPV分型原理：

根據(jù)HPVL1區(qū)基因保守序列設(shè)計一系列擴增引物富集24種型別的HPVPCR產(chǎn)物，再針對不同亞型設(shè)計不同探針，進(jìn)行熒光PCR反應(yīng)，通過熒光信號，和ct值實現(xiàn)高危、中高危、低危分型檢測。25十二月202422產(chǎn)品特點——靈敏度高三家省級醫(yī)院臨床試驗：浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院

浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院浙江省人民醫(yī)院比對實驗：基因測序法實驗結(jié)果：

靈敏度：99.51%

高危符合率：98.32%

中危符合率：

96.49%

低危符合率：

96.97%總體符合率：92.63%產(chǎn)品特點——獨立知識產(chǎn)權(quán)25十二月20242325十二月202424產(chǎn)品特點——質(zhì)量認(rèn)證安全——三家省級醫(yī)院大規(guī)模臨床試驗;準(zhǔn)確——熒光定量PCR檢測技術(shù);有效——陽性符合率達(dá)到95%以上，

陰性符合率達(dá)到90%以上;認(rèn)證——13485質(zhì)量管理體系認(rèn)證；獲得中國藥監(jiān)局SFDA注冊產(chǎn)品;配圖SFDA注冊證HPV檢測（25~64歲婦女）HPV（+）定期重復(fù)HPV檢測HPV（—）細(xì)胞學(xué)檢查細(xì)胞學(xué)≥LSIL6~12個月重復(fù)HPV檢測和細(xì)胞學(xué)檢查細(xì)胞學(xué)正?；駻SCUS陰道鏡檢查HPV(—)細(xì)胞學(xué)HPV(+)細(xì)胞學(xué)＜LSIL細(xì)胞學(xué)≥LSIL按ASCCP指南處理定期重復(fù)HPV檢測6~12個月重復(fù)HPV檢測和細(xì)胞學(xué)檢查與細(xì)胞學(xué)檢查相比，HPV具有更高的靈敏度和重復(fù)性國際權(quán)威機構(gòu)——歐洲生殖道感染和腫瘤研究組織（EUROGIN)推薦將HPV檢測作為宮頸癌篩查的首選方法25十二月202425產(chǎn)品臨床應(yīng)用——宮頸癌早期篩查25十二月202426中國癌癥基金會推薦的聯(lián)合篩查方案高危HPV檢測+液基細(xì)胞學(xué)檢查HPV陰性Cyto≤ASC-USHPV陽性Cyto≤ASC-USHPV陰性Cyto≥ASC-HHPV陽性Cyto≥ASC-H陰道鏡檢查/多點活檢+ECC隨訪（次/3年）隨訪（次/1年）相應(yīng)治療(+)(—)產(chǎn)品臨床應(yīng)用——宮頸癌早期篩查25十二月202427---單獨和聯(lián)合細(xì)胞學(xué)用于宮頸癌篩查---ASCUS，ASC-H和LSIL病人的分流與管理---CIN、CC治療后隨訪產(chǎn)品臨床應(yīng)用HPV檢測聯(lián)合細(xì)胞學(xué)檢測作為初篩首選方法,HPV檢測比細(xì)胞學(xué)具有更高的敏感性HPV檢測比細(xì)胞學(xué)更客觀，更標(biāo)準(zhǔn)化25十二月202428產(chǎn)品檢測——適用人群人群普查:有三年以上性行為或21歲以上有性行為的婦女高危人群篩查:宮頸細(xì)胞學(xué)檢測異常或可疑的患者宮頸炎、宮頸糜爛患者尖銳濕疣患者男性尖銳濕疣患者的配偶有不潔性生活史的患者“特殊職業(yè)”婦女人群25十二月202429人乳頭瘤病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)——優(yōu)點總結(jié)一管檢三型，高危型、中危型、低危型；靈敏度高；獨特內(nèi)標(biāo)、全程質(zhì)控；操作流程簡單，時間短；閉管實驗，無交叉污染；無需洗滌；數(shù)字結(jié)果判讀，客觀可靠；可96孔板操作，適用于大規(guī)模篩查；適用多款熒光PCR儀器、無需專門的設(shè)備；反應(yīng)時間短無需洗滌數(shù)字信號25十二月202430技術(shù)熒光PCR法雜交捕獲法基因芯片廠商默樂生物QIAGEN凱普、亞能亞型241324分型高危13型

中危6型

低危5型高危13型高危13型

中危6型

低危5型雜交1.5小時1小時約30分種洗滌無4小時3.5小時耗時2小時5小時4小時特點一管檢三型，適合早期篩查只檢測高危型不適合早期篩查靈敏度高靈敏度較低；靈敏度較低；MS內(nèi)標(biāo)、內(nèi)部質(zhì)控單獨質(zhì)控單獨質(zhì)控判讀準(zhǔn)確、數(shù)字信號化學(xué)發(fā)光信號放大圖形結(jié)果不易判斷無需雜交雜交時間長雜交時間長無需洗滌洗滌過程煩瑣洗滌煩瑣無交叉污染存在交叉反應(yīng)存在交叉反應(yīng)高通量可96孔板操作通量低通量低適合多種熒光PCR儀器需配備獨立設(shè)備需配備設(shè)備HPVDNA檢測競爭產(chǎn)品比較產(chǎn)品市場容量分析國家統(tǒng)計局最近一次人口普查統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示（2010），全國總?cè)丝?3.4億人人口計生統(tǒng)計報表顯示，全國已婚育齡婦女27769萬人HPV檢測將作為已婚婦女的常規(guī)檢查項目，每位育齡婦女一年常規(guī)體檢一次，每次收費80元