（新教材適用）高中生物第1章發(fā)酵工程第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術及應用第1課時微生物的基本培養(yǎng)技術課后習題新人教版選擇性必修3

第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術及應用第1課時微生物的基本培養(yǎng)技術基礎鞏固1.防止雜菌入侵,獲得純凈的培養(yǎng)物,是研究和應用微生物的前提。下列有關敘述錯誤的是()A.實驗室里可以用紫外線或化學藥物進行消毒B.接種環(huán)、接種針等金屬用具,直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌C.在實驗室中,切記不可吃東西、喝水,離開實驗室時一定要洗手,以防止被微生物感染D.使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進行滅菌處理,以免污染環(huán)境答案:B解析:將接種環(huán)等金屬用具直接在酒精燈火焰的充分燃燒層(外焰部位)灼燒,可以迅速徹底地滅菌。2.下列關于滅菌的敘述,正確的是()A.用于培養(yǎng)細菌等微生物的培養(yǎng)基都必須用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌B.錐形瓶、培養(yǎng)皿、移液管等器具的高壓蒸汽滅菌時間一般為15min(121℃條件下)C.超凈工作臺或接種箱用紫外線照射30min即可滅菌D.滅菌后的培養(yǎng)基、器具已達到了完全無菌答案:B解析:培養(yǎng)基通?？梢赃M行高壓蒸汽滅菌,若培養(yǎng)基中有碳酸氫鈉、尿素等高溫易分解的成分,就不能用此方法。超凈工作臺或接種箱用紫外線照射30min,可以殺死物體表面或空氣中的微生物,但達不到滅菌的效果。滅菌后的培養(yǎng)基、器具不一定達到了完全無菌,而且要防止二次污染。3.下列有關培養(yǎng)基配制的敘述,正確的是()A.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水及特殊營養(yǎng)物質(zhì)B.碳源和氮源必須具有一定的比例,碳元素的含量最多,其次為氮元素C.微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外,還受溫度、pH、O2、滲透壓等的影響D.營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好答案:C解析:各種培養(yǎng)基的配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基中碳源和氮源必須具有一定的比例,但含量最多的元素不是碳元素,而應是氧元素。營養(yǎng)物質(zhì)的濃度并不是越高越好,濃度過高會導致培養(yǎng)物細胞失水。4.下列關于培養(yǎng)基的說法,正確的是()A.培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B.培養(yǎng)基只有兩類:液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C.除水以外的無機物只能提供無機鹽D.有機氮源不能為微生物提供能量答案:A解析:根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì),可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)基的用途,可分為鑒別培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基等。除水以外的無機物如NH4HCO3,既可以是碳源,也可以是氮源,不僅僅提供無機鹽。有機氮源在為微生物提供氮源的同時,也能提供能量。5.下列依次表示倒平板、接種的位置以及平板劃線法接種的路徑,其中錯誤的是()答案:D6.下列關于微生物培養(yǎng)的敘述,錯誤的是()A.獲得純培養(yǎng)物的關鍵是防止外來雜菌入侵B.劃線分離可在培養(yǎng)基上獲得均勻分布的單菌落C.高溫滅菌的目的是殺死微生物的細胞、孢子和芽孢D.培養(yǎng)時應把接種微生物的培養(yǎng)皿和未接種的培養(yǎng)皿一起培養(yǎng),作為對照答案:B解析:獲得純培養(yǎng)物的關鍵是無菌操作,防止外來雜菌入侵。劃線分離獲得的菌落在培養(yǎng)基上的分布是不均勻的,在劃線的最后區(qū)域可以得到單菌落。高溫滅菌的目的是高溫殺死一切微生物,包括芽孢和孢子。培養(yǎng)時為了檢驗培養(yǎng)基滅菌是否合格,應把接種微生物的培養(yǎng)皿和未接種的培養(yǎng)皿一塊培養(yǎng),作為對照。7.下列有關平板劃線操作的敘述,正確的是()A.使用滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿,操作過程中不再滅菌B.打開含菌種的試管后需要將試管口通過火焰,蘸取菌種后需要馬上塞上棉塞C.培養(yǎng)皿蓋打開后將蘸有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線即可D.待接種環(huán)冷卻后再伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液答案:D解析:平板劃線過程中,接種環(huán)在每次劃線之前和之后均需要灼燒滅菌,A項錯誤。打開含菌種的試管需通過火焰滅菌,取出菌種后還需通過火焰滅菌,再塞上棉塞,B項錯誤。將蘸有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線,蓋上皿蓋,灼燒接種環(huán),冷卻后從第一次劃線的末端開始作第二次劃線,重復上述過程,作第三、四、五次劃線,注意不要將第五次的劃線與第一次劃線相連,C項錯誤。接種環(huán)在每次劃線之前和之后均需要灼燒滅菌,將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液,D項正確。8.平板冷凝后,要將平板倒置,其主要原因是()A.接種時再拿起來方便B.方便在皿底上標記日期等C.正著放置平板容易破碎D.防止皿蓋上的冷凝水珠落入培養(yǎng)基造成污染答案:D解析:平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面濕度也比較高。將平板倒置,可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。9.微生物的分離和培養(yǎng)是現(xiàn)代生物工程應用中的重要環(huán)節(jié)。下圖甲、乙、丙是酵母菌分離和培養(yǎng)過程中部分操作和實驗結(jié)果示意圖。請據(jù)圖回答下列問題。(1)圖甲所示是制備固體培養(yǎng)基時的實驗操作步驟之一,它稱為。

(2)培養(yǎng)酵母菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是

。

(3)圖乙是平板劃線法接種操作示意圖,正確的操作順序是A→B→(用字母和箭頭表示);找出圖乙中一處錯誤的操作:(用字母表示)。

(4)圖丙是某同學用平板劃線法接種后的培養(yǎng)基培養(yǎng)12h后的實驗結(jié)果,如果培養(yǎng)基上,則說明無菌操作基本符合要求。

答案:(1)倒平板(2)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(3)G→F→E→C→D→HC(4)生長的菌落顏色、形狀、大小基本一致,并符合酵母菌菌落的特點10.某小組同學為了調(diào)查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察等。請回答下列與實驗相關的問題。(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了和。除此之外,培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是和。

(2)對培養(yǎng)基進行滅菌,應該采用的方法是。

(3)為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果,應將接種了湖水樣品的平板置于中培養(yǎng),培養(yǎng)的溫度設定在37℃。要使該實驗所得結(jié)果可靠,還應該同時在另一平板上接種無菌水作為對照進行實驗。

(4)培養(yǎng)20h后,觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落,這說明湖水樣品中有多種細菌。一般說來,菌落總數(shù)越多,湖水遭受細菌污染的程度越。

答案:(1)氮源(碳源不作要求)碳源無機鹽水(2)高壓蒸汽滅菌(3)恒溫培養(yǎng)箱(4)大能力提升1.下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方。下列說法錯誤的是()成分含量NaNO33gK2HPO41gKCl0.5gMgSO4·7H2O0.5gFeSO40.01g(CH2O)30gH2O定容至1000mL青霉素0.1萬單位A.此培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基,其中的碳源是(CH2O)B.配制培養(yǎng)基時,溶化后分裝前,必須要進行的是調(diào)整pH和滅菌C.接種時應在酒精燈火焰附近操作D.若用該培養(yǎng)液培養(yǎng)細菌,不用除去青霉素答案:D解析:若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌,應除去的物質(zhì)是青霉素,因為青霉素對細菌有殺傷作用。2.細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽滅菌、酒精、火焰灼燒、干熱滅菌等幾種不同的處理,這些方法依次用于殺死哪些部位的雜菌?()A.接種環(huán)、手、培養(yǎng)基、涂布器B.高壓鍋、手、接種環(huán)、培養(yǎng)基C.培養(yǎng)基、手、接種環(huán)、吸管D.接種環(huán)、手、高壓鍋、培養(yǎng)皿答案:C解析:通常采用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進行滅菌,用酒精對操作者的手進行消毒,對接種針、瓶口采用火焰灼燒的方法進行灼燒滅菌,吸管、培養(yǎng)皿可用干熱滅菌法滅菌。3.在進行“酵母菌的純培養(yǎng)”實驗時,下列有關敘述正確的是()A.高壓蒸汽滅菌加熱結(jié)束時,立即開啟鍋蓋,拿出培養(yǎng)基和工具待用B.倒平板時,應將打開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌后應趁熱快速挑取菌落D.用記號筆標記培養(yǎng)皿時,為了查看方便,應標記在皿底上答案:D解析:滅菌結(jié)束后,切斷熱源,讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降(不需打開放氣閥),當壓力表的壓力降到零時,打開排氣閥,旋松螺栓,打開蓋子,拿出培養(yǎng)基和工具待用。倒平板時,用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(10~20mL)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌后應在火焰旁冷卻后再挑取菌落。由于培養(yǎng)時培養(yǎng)皿是倒置的,因此做標記時應用記號筆標記在皿底上。4.某同學在以下三種條件下培養(yǎng)大腸桿菌:①以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基,不斷補充培養(yǎng)基,及時去除代謝物;②以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基,不補充培養(yǎng)基,不去除代謝物;③以葡萄糖和乳糖為碳源的培養(yǎng)基,不補充培養(yǎng)基,不去除代謝物。根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果繪制的一段時間內(nèi)菌體數(shù)的對數(shù)隨時間變化的趨勢如下圖所示。假設三種培養(yǎng)基中初始總糖量和大腸桿菌數(shù)量分別相等,則①②③三種條件依次對應的趨勢圖是()A.甲、乙、丙 B.乙、丙、甲C.丙、甲、乙 D.丙、乙、甲答案:C解析:在總糖量和大腸桿菌數(shù)量分別相等的情況下,用葡萄糖培養(yǎng)大腸桿菌后,①不斷補充培養(yǎng)基,及時去除代謝物,微生物的數(shù)量將不斷增加;②不補充培養(yǎng)基,不去除代謝物,微生物數(shù)量達到一定程度后不再增加,甚至減少;③用以葡萄糖和乳糖為碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物,不補充培養(yǎng)基,不去除代謝物,當葡萄糖耗盡后,經(jīng)過調(diào)整期,大腸桿菌可利用乳糖,其數(shù)量會再有所增加。所以三者對應曲線應依次為丙、甲、乙。5.(不定項選擇題)在“酵母菌的純培養(yǎng)”實驗中,劃線接種、培養(yǎng)結(jié)果分別如圖甲、圖乙所示。下列有關敘述錯誤的是()A.接種前應對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌,然后調(diào)pHB.連續(xù)劃線的目的是獲得單個細菌形成的菌落C.接種過程中至少需要對接種環(huán)灼燒兩次D.甲中a區(qū)域為劃線的起始位置答案:ACD解析:培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌,滅菌前調(diào)pH。連續(xù)劃線使菌液中的菌體不斷被稀釋,最后可得到由單個微生物繁殖形成的單菌落。在每次劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌,因此按照圖中劃線順序(d→c→b→a),整個劃線過程中至少需要對接種環(huán)灼燒5次。從第二次劃線開始,每次劃線的菌種來自上一區(qū)域的末端,因此劃線的起始區(qū)域酵母菌數(shù)量多,由圖乙可知,甲中d區(qū)域菌落多,為劃線的起始位置。6.大腸桿菌是人和動物腸道寄生菌,在一定條件下會引起胃腸道等局部組織感染。檢驗水樣中大腸桿菌數(shù)目是否符合生活飲用水衛(wèi)生標準,常用濾膜法測定,其操作流程如下圖所示。大腸桿菌的代謝物能與伊紅美藍(EMB培養(yǎng)基的指示劑)反應,使菌落呈黑色。下列對實驗操作的分析,錯誤的是()A.測定前,濾杯、濾膜和濾瓶均需滅菌處理B.配制好的培養(yǎng)基一般倒置,防止冷凝水滴至培養(yǎng)基造成污染C.配制EMB培養(yǎng)基時,需考慮大腸桿菌所需要的營養(yǎng)物質(zhì)及pH等條件D.EMB培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,只有大腸桿菌能正常生長并形成黑色菌落答案:D解析:EMB培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基,沒有選擇作用。7.炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。炭疽桿菌兩端截平,呈竹節(jié)狀排列,菌落呈卷發(fā)狀。對炭疽病疑似患者,可根據(jù)噬菌體的宿主專一性,通過實驗確診。(1)細菌培養(yǎng):采集疑似患者的樣本,分離培養(yǎng),獲得可疑菌落。(2)細菌鑒定:實驗流程如下圖所示。①對配制的液體培養(yǎng)基等需采用法滅菌;實驗所用液體培養(yǎng)基的碳源為(填“無機碳”或“有機碳”)。

②挑選可疑菌落制片后,用觀察,可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。

③接種可疑菌后,在溫度為35℃的環(huán)境中培養(yǎng)24h,液體培養(yǎng)基變渾濁,原因是。對照組試管中應加入,與實驗組同時培養(yǎng)6h后,若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組(填“高”或“低”),則可確定疑似患者被炭疽桿菌感染;反之,則排除。

④對排除的疑似患者及易感人群,可接種炭疽桿菌疫苗,刺激機體產(chǎn)生相應抗體。與產(chǎn)生抗體相關的細胞除T細胞、B細胞外,還有

。

答案:(2)高壓蒸汽滅菌有機碳顯微鏡細菌大量繁殖等量的生理鹽水低吞噬細胞、漿細胞解析:(2)①培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌;由于炭疽桿菌是異養(yǎng)型微生物,培養(yǎng)基中應加有機碳作碳源。②炭疽桿菌呈竹節(jié)狀排列,需借助顯微鏡觀察。③接種培養(yǎng)后,液體培養(yǎng)基由澄清變渾濁,應是細菌大量繁殖所致。實驗應遵循單一變量原則和等量原則,實驗組加入了生理鹽水配制的澄清噬菌體液,對照組應加入等量的生理鹽水;若疑似患者被炭疽桿菌感染,則培養(yǎng)6h后,實驗組中的炭疽桿菌由于噬菌體侵染而大量裂解死亡,渾濁度會明顯低于對照組。④接種疫苗后,機體通過體液免疫產(chǎn)生抗體,與此相關的細胞有吞噬細胞、T細胞、B細胞和漿細胞。8.某中學生物興趣小組在進行A細菌的培養(yǎng)過程中,發(fā)現(xiàn)了另一種B細菌,在B細菌周圍A細菌的生長繁殖受到抑制,這有可能是B細菌產(chǎn)生了不利于(抑制)A細菌