2024年高考生物二輪復(fù)習(xí)選修一問題清單提綱

2024年高考生物二輪復(fù)習(xí)選修一問題清單提綱

（精編版）

專題1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

課題1果酒和果醋的制作

1、果酒制作的菌種是？其代謝類型（同化作用和異化作用）和生殖方式是什么？

菌種：酵母菌（單細(xì)胞真菌、真核生物）

代謝類型：異養(yǎng)兼性厭氧性同化作用類型:異養(yǎng)異化作用類型：兼性厭氧型

生殖方式：無性生殖（出芽生殖、抱子生殖、分裂生殖）

2、菌種進(jìn)行有氧呼吸的目的？其方程式是？并寫出酒精發(fā)酵的方程式：

在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖。反應(yīng)式：0^1206+602+6^0-6€02+12H20

在無氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。反應(yīng)式：CsHi206f2c2H5OH+2c

3、是酵母菌發(fā)酵和生長的重要條件？繁殖和發(fā)酵時(shí)應(yīng)將其控制在什么范圍內(nèi)？

溫度是酵母菌發(fā)酵和生長的重要條件。20℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵時(shí)一般將

溫度控制在18—25℃o

4、什么在葡萄酒的自然發(fā)醉中其主要作用？（附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。）

5、為什么葡萄泗呈深紅色？

在發(fā)酵過程中，隨著酒精度數(shù)的提高，紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅

色。

6、在發(fā)酵過程中，為什么不需要另行消毒或滅菌？

在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適

應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。

7、果醋制作的菌種是？其代謝類型（同化作用和異化作用）和生殖方式是？

第1頁共38頁

菌種：醋酸菌（單細(xì)胞細(xì)菌、原核生物）

代謝類型:異養(yǎng)需氧型同化作用類型：異養(yǎng)異化作用類型：需氧型

生殖方式：二分裂

8、為什么密封不嚴(yán)的酒會變酸？在變酸的酒的表面為什么會出現(xiàn)一層白色的膜？

醋酸菌在有氧條件下，將乙醇氧化成醋酸。

在變酸的酒的表面觀察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。

9、為什么醋酸發(fā)酵需要充足的氧氣？

醋酸菌是好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動。醋酸菌對氧氣的含

量特別敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡。

1。、果醋制作的實(shí)驗(yàn)原埋是什么？（相關(guān)的反應(yīng)式）

當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；

當(dāng)氧氣充足、缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。（反?yīng)式如下）

CAOH+-CH3COOH+H20

11、醋酸菌的最適生長溫度為？（30—35℃）

12、制作果酒果醋的實(shí)驗(yàn)流程是什么？挑選葡萄一沖洗一榨汁一酒精發(fā)酵一果酒（一醋

酸發(fā)酵一果醋）

13、用帶蓋的瓶子制葡萄酒時(shí)，在發(fā)酵過程中每隔12h將瓶蓋擰松一?次，目的是什么？為

什么不能打開瓶蓋？

放出C02,防止CO2過多導(dǎo)致發(fā)酵瓶爆裂。不打開瓶蓋的目的：防止和其他雜菌進(jìn)入。

14、P4頁圖1—4b的發(fā)酵裝置，充氣口、排氣口和出料口分別有什么作用？為什么排氣口

要通過一個(gè)長而彎曲的膠管與瓶身連接？

充氣口：在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣。

排氣口：排出酒精發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生的C02。

第2頁共38頁

出料口：用來取樣。

與瓶身相連的長而彎曲的膠管：防止空氣中微生物的污染。

15、制果酒時(shí)，充氣口應(yīng)該如何操作？制果醋呢？

制果酒時(shí)，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制果醋時(shí)，應(yīng)將充氣口連接充氣泵進(jìn)行充氣。

16、沖洗葡萄的目的為？能否反復(fù)沖洗？為什么？

沖洗1—2遍除去污物，不能反復(fù)沖洗，防止菌種流失。

17、先沖洗葡萄還是先出去枝梗？簡述原因：

先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會。

18、應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？

榨汁機(jī)和發(fā)酵瓶要清洗干凈，且發(fā)酵瓶要用70%的酒精進(jìn)行消毒；

清洗葡萄時(shí)要先清洗后除枝梗；

發(fā)酵瓶排氣管用曲頸管不用直管。

19、葡萄汁裝入發(fā)酵瓶中，為什么要留大約1\3的空間？

①先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，耗盡后再進(jìn)行酒精發(fā)酵；

②防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2造成發(fā)酵液溢出。

20、制葡萄酒時(shí)，為什么要將溫度控制在？制葡萄醋時(shí)，為什么要將溫度控制在33—35℃?

溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。18-25℃是酵母菌生長和繁殖的最適溫度；而醋

酸菌是嗜熱菌，30—35℃有利于醋酸菌的繁殖和醋酸發(fā)酵。

21、檢測果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，用什么來檢驗(yàn)？在什么條件下？有什么顏色變化？

用重輅酸鉀來檢驗(yàn)。在酸性條件下，重銘酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。先在試管中加入

發(fā)酵液2mL,再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L的H2s043滴，振蕩混勻，最后滴加常溫下飽

和的重錨酸鉀溶液3滴，振蕩試管，觀察顏色。

22、為提高果酒品質(zhì)，更好地抑制其他微生物的生長，可直接在果汁中加入什么？

第3頁共38頁

加入人工培養(yǎng)的酵母菌。

23、制作葡萄醋時(shí)為什么要適時(shí)通入空氣？

（醋酸菌是好氧細(xì)菌。）

24、果酒發(fā)酵裝置發(fā)酵后期能否產(chǎn)生大量的果醋？原因是？

果酒發(fā)酵裝置發(fā)酵后期不能產(chǎn)生大量的果醋，原因是：①醋酸菌的最適生長溫度為30—

35℃,而醋酸菌的最適生長溫度為18-25℃；②果酒發(fā)酵后期裝置內(nèi)缺氧，而醋酸菌是好

氧細(xì)菌，沒有氧氣無法生活。

課題2：腐乳的制作

1、為什么腐乳經(jīng)過微生物的發(fā)酵，味道會很鮮美且易于消化和吸收？

豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的肽和氨基酸，味道鮮美，易于消化和吸收。

2、多種微生物參與了腐乳的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉，其中起主要作用的

是一毛霉。

3、毛霉（一種絲狀真菌）屬于真核（“原核”或“真核”）生物，代謝類型為異

養(yǎng)需養(yǎng)型。生長迅速,具有發(fā)達(dá)的白色菌絲；以抱子生殖為主。

4、豆腐長白毛是怎么回事？（毛霉的白色菌絲。）

5、制作腐乳的原理:毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和

氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。

6、挑選什么樣的豆腐？理由是什么？

所用豆腐的含水量為70%左右，水分過多則腐乳不易成形。含水量過低，不利于毛霉的

生長繁殖。

7、腐乳外部有一層致密的皮，這層皮是怎樣形成的？對人體有害嗎？作用是什么？

“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長的菌絲（匍匐菌絲），對人體無害。它能形成腐乳

的“體”，使腐乳成形。

8、傳統(tǒng)生產(chǎn)腐乳的毛霉來自于哪里？現(xiàn)代工藝生產(chǎn)呢？

第4頁共38頁

傳統(tǒng)生產(chǎn)腐乳的毛霉來自空氣中的毛霉殉子；現(xiàn)代工藝生產(chǎn)：直接接種優(yōu)良毛霉菌種。

9、在腐乳制作的過程中應(yīng)該怎么加鹽？加鹽的目的是什么？

加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地?cái)[放在瓶中，同時(shí)逐層加鹽，隨著層數(shù)的加高

而增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽腌制的時(shí)間約為8天左右。

食鹽的作用：①抑制微生物的生長，避免腐敗變質(zhì)；②析出水分，使豆腐變硬，在后期

制作過程中不易酥爛。

10、在腐乳制作的過程中鹽的濃度過高會導(dǎo)致什么問題？過低呢？

用鹽腌制時(shí)，注意控制鹽的用量：鹽的濃度過低，不足以抑制微生物的生長，可能導(dǎo)致

豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高會影響腐乳的口味。

11、鹵湯由什么組成？香辛料的作用？

配制鹵湯：鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。

香辛料的作用：①調(diào)制腐乳的風(fēng)味；②具有防腐殺菌的作用。

12、酒的含量為多少？加酒的作用有哪些？濃度過高和過低分別會導(dǎo)致什么？

酒的含量一般控制在12%左右。

酒的作用：①抑制微生物的生長；②使腐乳具有獨(dú)特的香味。

酒精含量過高，對蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，不

足于抑制微生物生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。

13、腌制腐乳時(shí)，為什么要隨著豆腐層的加高而增加鹽的用量？

越接近瓶口，被雜菌污染的可能性越大。

14、為什么在接近瓶口的表面要將鹽鋪厚一些？（防止雜菌污染。）

15、用來腌制腐乳的玻璃瓶可通過什么方式來處理？目的是什么？

用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水消毒。目的是方式雜菌污染。

16、裝瓶時(shí)，要怎樣處理瓶口？

第5頁共38頁

裝瓶時(shí)，操作要迅速小心。整齊地?cái)[放好豆腐、加入鹵湯后，要用膠條將瓶口密封。

封瓶時(shí)，最好將瓶口通過酒精燈的火焰，防止瓶口被污染。

17、腐乳制作的流程：

讓豆腐上長出毛霉一加鹽腌制一加鹵湯裝瓶一密封腌制

18、毛霉生長溫度應(yīng)該控制在多少？為什么控制到該溫度？

15?18C,并保持一定的濕度。因?yàn)?5?18c是毛霉生長繁殖的最適溫度。

19、哪些因素可以影響腐乳的風(fēng)味？請舉例論述。

①水的控制：豆腐含水量70%,含水量過高，腐乳不易成形；含水量過低，不利于毛霉

的生長。②溫度的控制：15?18℃。③鹽量的控制：鹽濃度過低，不足于抑制微生物生長，

可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽濃度過高，會影響腐乳的口味。④酒含量的控制：酒精含量過

高，腐乳成熟的時(shí)間將會延長；酒精含量過低，不足丁抑制微生物生長，可能導(dǎo)致豆腐腐

敗。⑤發(fā)酵時(shí)間的控制：發(fā)酵時(shí)間短，蛋白質(zhì)未完全水解，加鹽后蛋白質(zhì)變性，豆腐變硬；

發(fā)酵時(shí)間過長，豆腐會軟化，不易成形。

課題3：泡菜的制作

1、在泡菜腌制過程中，我們需要檢測什么的含量？（亞硝酸鹽。）

2、制作泡菜需要什么菌種？其代謝類型是？

乳酸菌（單細(xì)胞原核生物）

代謝類型：異養(yǎng)厭氧型同化作用類型：異養(yǎng)異化作用類型：厭氧

3、制作泡菜的原理是什么？

在無氧條件下，乳酸菌進(jìn)行無氧呼吸將葡萄糖糖分解為乳酸，反應(yīng)式為：C6H加6-2C3HA

4、常見的乳酸菌有哪兩類？常用于生產(chǎn)的酸奶的是什么？

常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于生產(chǎn)酸奶。

5、為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶？

抗生素能夠殺死或抑制乳酸菌的生長。

第6頁共38頁

6、亞硝酸鹽的攝入量達(dá)到多少引起中毒？多少引起死亡？

達(dá)到0.3-0.5g時(shí)，會引起中毒；達(dá)到3g時(shí)會引起死亡。

7、亞硝酸鹽會在人體內(nèi)積累嗎？會轉(zhuǎn)變成什么致癌物質(zhì)？

亞硝酸鹽被吸收后隨尿液排出體外，不會再人體內(nèi)積累，但在適宜pH、溫度和一定微

生物作用下會形成致癌物質(zhì)亞硝胺。

8、為什么不宜多吃腌制食品？

人體攝入亞硝酸鹽含量達(dá)到0.3—0.5g時(shí)，會引起中毒；達(dá)到3g時(shí)會引起死亡。并且在

適宜pH、溫度和一定微生物作用下形成致癌物質(zhì)亞硝胺。

9、泡菜的制作流程？

選擇泡菜壇一選擇原料——原料處理一一配制鹽水一一裝壇一一封壇發(fā)酵一成品

10、制作泡菜時(shí)，鹽和清水的比例是多少？（清水：鹽=4:1）

11、將鹽水煮沸冷卻的目的是？

煮沸的作用：一是除去水中二是殺滅鹽水中的其他細(xì)菌。

冷卻的目的：防止高溫殺死乳酸菌。

12、為什么要向壇蓋邊緣的水槽中注滿水？

以保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境。

13、測定亞硝酸含量的原理是什么？測定亞硝酸鹽含量的方法是什么？

測定亞硝酸鹽含量的方法是：比色法

原理是：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-蔡

基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液目測比較，估算泡菜中

亞硝酸鹽含量。

14、應(yīng)選擇什么樣的泡菜壇？（選擇氣密性好的，以創(chuàng)造無氧環(huán)境，有利于乳酸菌發(fā)酵，

防止蔬菜腐爛。）

第7頁共38頁

15、如何檢測泡菜壇的氣密性？（將壇口向上壓入水中，看壇內(nèi)有無滲水現(xiàn)象。）

16、腌制過程中，哪些因素會造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加？

在泡菜的腌制過程中，要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量。溫度過高、食鹽用

量過低、腌制時(shí)間過短，容易滋生細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。

①溫度：溫度過高，不利于乳酸菌生長，容易滋生雜菌，亞硝酸鹽含量增加；溫度過低，

則發(fā)酵時(shí)間延長。

②食鹽：食鹽用量過低，不足于抑制其他微生物的生長，容易滋生雜菌，亞硝酸鹽含量增

加；食鹽用量過高，則抑制乳酸菌生長，導(dǎo)致泡菜“咸而不酸”。

③腌制時(shí)間：腌制時(shí)間過短，產(chǎn)生的乳酸少，容易滋生雜菌，亞硝酸含量增加；腌制時(shí)間

過長，產(chǎn)生的乳酸多，影響泡菜的風(fēng)味。

17、一般在腌制幾天后，亞硝酸鹽的含量開始下降？（一般在腌制10d后，亞硝酸鹽含

量開始下降。）

18、導(dǎo)致泡菜“咸而不酸”的原因是什么？（食鹽用量過高，抑制了乳酸菌的生長。）

19、在制作泡菜的過程中，有機(jī)物的干重如何變化？泡菜壇內(nèi)有機(jī)物的種類如何變化？

干重減少（因?yàn)槿樗峋M(jìn)行無氧呼吸消耗葡萄糖）；有機(jī)物種類增加（因?yàn)樵谌樗岚l(fā)酵的

過程中產(chǎn)生了丙酮酸等中間產(chǎn)物，及乳酸）

20、為什么在泡菜制作過程中會加入陳泡菜水？（增加乳酸菌的數(shù)量。）

21、為什么泡菜壇內(nèi)有時(shí)候會長一層白膜？你認(rèn)為這層白膜是怎樣形成的？

產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物，泡菜發(fā)酵液營養(yǎng)豐富，其表面氧氣含量豐

富，適合酵母菌繁殖。

22、檢測亞硝酸鹽含量的操作步驟依次有哪些？

配制溶液一一制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液一一制備樣品處理液一一比色

23、制備樣品處理液時(shí)，加入氫氧化鋁乳液的目的？（吸附雜質(zhì)，使泡菜濾液脫色變澄清。）

24、畫出亞硝酸鹽含量、乳酸菌含量、乳酸含量隨時(shí)間的變化趨勢圖，并解釋其原因。

第8頁共38頁

乳酸菌乳酸亞硝酸鹽

發(fā)酵少（有乳酸菌活動受到抑少增多（乳酸含量少，亞硝酸還原

初期制）菌大量繁殖）

發(fā)酵最多（乳酸抑制其他雜菌活動）增加,PH下降減少（乳酸含量增加，抑制了亞

中期硝酸還原菌）

此時(shí)乳酸菌數(shù)量增加，雜菌數(shù)

量減少的原因：乳酸菌比雜菌

更耐酸

發(fā)酵減少（乳酸繼續(xù)積累，PH下降，繼續(xù)增多，PH減少至相對穩(wěn)定（亞硝酸還原菌

后期抑制了乳酸菌的活動）繼續(xù)下降被完全抑制）

乳酸含量的變化：增加PH的變化：下降

乳酸菌含量的變化：先增加后減少亞硝酸鹽含量的變化：先增加后減少

25、在整個(gè)泡菜制作過程中，如何防止泡菜被污染？

每次取樣用具要洗凈，取樣后迅速封壇，防止泡菜被污染。

專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

1、研究和應(yīng)用微生物的前提是什么？（防止雜菌入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物。）

2、實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物需要注意哪兩方面？

一方面需要為培養(yǎng)的微生物提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件

另一方面需要確保無處不在的其他微生物無法混入。

3、什么叫做培養(yǎng)基？

培養(yǎng)基：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。

4、瓊脂是什么？性質(zhì)有哪些？

瓊脂是一種從紅藻中提取的多糖.瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)

第9頁共38頁

條件下呈現(xiàn)固態(tài)。

5、培養(yǎng)基的種類，按物理性質(zhì)可分為哪些？他們各自有哪些作用？

培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。

液體培養(yǎng)基（不含凝固劑）：配制成的液體狀態(tài)的基質(zhì)。

固體培養(yǎng)基：在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體

培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。

用途：液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn)，常用來擴(kuò)大培養(yǎng)微生物數(shù)量；固體培養(yǎng)基應(yīng)

用于微生物的分離和鑒定；半固體培養(yǎng)基則常用于觀察微生物的運(yùn)動及菌種保藏等。

6、培養(yǎng)基的種類，按功能可以分為哪些？請舉例說明。

按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。

選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長，促進(jìn)所需

要的微生物的生長。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)

藥品配制而成的，用以鑒別不同類別的微生物。

7、培養(yǎng)基的成分主要有哪些？

水、碳源、氮源、無機(jī)鹽。

碳源：能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如CO?、NaHCOs等無機(jī)碳源；糖類、石油、

花生餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。

氮源：能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如心、Nit、NO,NH；等無機(jī)氮源；蛋白

質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白陳等有機(jī)氮源。只有固氮微生物才能利用四。

8、培養(yǎng)基除滿足幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，還需要滿足什么條件？

滿足微生物生長對PH、溫度、氧氣以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)的要求。

9、培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，還需要在培養(yǎng)基中添加什么？霉菌呢？厭氧微生物呢？

培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素；培養(yǎng)霉菌時(shí)須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性；

培養(yǎng)細(xì)菌是需要將pH調(diào)至中性或微堿性；培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無氧的條件。

第10頁共38頁

10、牛肉膏和蛋白陳主要能提供哪些營養(yǎng)物質(zhì)？（碳源和氮源。）

11、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是？（防止外來雜菌的入侵。）

12、無菌技術(shù)對實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手要進(jìn)行什么操作？（清潔和消毒。）

13、無菌技術(shù)對用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基要進(jìn)行什么操作？（滅菌。）

14、實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在什么附近進(jìn)行？（酒精燈火焰。）

15、無菌技術(shù)的目的？（①防止培養(yǎng)物被污染；②防止污染環(huán)境；③避免感染操作者。）

16、消毒和滅菌的定義是什么？

消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包括

芽抱和抱子）。

滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽抱和抱子。

比較項(xiàng)理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽狗和抱子能否被消

滅

消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生不能

物

火菌強(qiáng)烈全部微生物能

17、實(shí)峪至留用的消毒方隔哪國?留用的滅菌方法看哪些？

消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（對于一些不耐高溫的液體）還有化學(xué)藥劑（如

酒精、氯氣、石炭酸等）消毒、紫外線消毒。

滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。

18、煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒、紫外線消毒法的方法操作及適用對象？

方法操作適用對象

煮沸消毒法100℃煮沸5—6min耐高溫的日常用品

第11頁共38頁

巴氏消毒法75℃煮30min或在80℃煮15min不耐高溫的液體，如牛奶

化學(xué)藥劑消毒酒精、氯氣、石炭酸、煤酚皂溶液如用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒

法等消毒液水源

紫外線消毒法紫外線照射接種室、接種箱、超凈工作臺

19、灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌的方法操作及適用對象?

方法操作適用對象

灼燒滅菌酒精燈火焰上灼燒接種環(huán)、接種針或其他金屬用具

干熱滅菌干熱滅菌箱內(nèi)，在160—170℃加熱耐高溫的、需要保持干燥的物品，

1—2h如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和

金屬用具

高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，壓力為培養(yǎng)基

lOOkPa,溫度為121°C,維持15—

30min

20、高壓蒸汽滅菌為達(dá)到良好的滅菌效果，壓力為多少？溫度為多少？維持多長時(shí)間？

壓力為lOOkPa,溫度為121°C,維持15—30min

21、高壓蒸汽滅菌中把鍋內(nèi)的水加熱煮沸的原因是什么？（排除冷空氣。）

22、紫外線消毒，在照射前噴灑什么可以加強(qiáng)消毒效果？（石炭酸或煤酚皂溶液等消毒

液。）

23、培養(yǎng)基丟棄前要做什么操作？為什么？（滅菌，防止培養(yǎng)基上滋生細(xì)菌污染環(huán)境。）

24、配制牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基的流程是什么？（計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。）

25、應(yīng)該在什么時(shí)候調(diào)節(jié)PH?（熔化之后、滅菌之前。）

26、為什么稱取時(shí)動作要迅速？（牛肉膏和蛋白陳都容易吸潮。）

27、溶化過程中不斷用玻璃棒攪拌的作用？（防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂。）

第12頁共38頁

28、培養(yǎng)基滅菌后，溫度要冷卻到多少左右時(shí)才能用來倒平板？用什么來估計(jì)培養(yǎng)基的溫

度？

50℃o可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，

就可以進(jìn)行倒平板了。

29、為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？（通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染

培養(yǎng)基。）

30、倒平板操作中，平板冷卻凝固后還需要如何操作？目的是什么？

平板冷凝后，將平板倒置。可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

31、在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能

用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？

空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培

養(yǎng)微生物。

32、微生物的接種方法包括平板劃線法、稀釋涂布平板法、斜面接種、穿刺接種，

其中最常用的是一平板劃線法、稀釋涂布平板法，其核心是防止雜菌的污染，保證

培養(yǎng)物的純凈度。

33、用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是：使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)

胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，以便于純化菌種。

34、平板劃線法的原理是什么？

平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步

稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可

見的子細(xì)胞群體，這就是菌落。

35、平板劃線法的操作步驟？

①將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。

②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞。

③將試管口通過火焰。

第13頁共38頁

④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。

⑤將試管通過火焰，并塞上棉塞。

⑥左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條

平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)皿。

⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以

上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。

⑧將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

36、為什么使錐形瓶的瓶口通過火焰？（防止雜菌污染。）

37、為什么在操作的每一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束以后，仍

然要灼燒，為什么？說出每一次灼燒的原因。

①操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；

②每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃

線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃

線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。

③劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操

作者。

38、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后在進(jìn)行劃線？（以免接種環(huán)溫度太高，殺

死菌種。）

39、在做第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？

劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使

細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。

40、為什么最后一次劃線區(qū)不能與第一區(qū)相連？

最后一次劃線區(qū)的細(xì)菌數(shù)目最少，不能與第一區(qū)相連，可以保證最終能得到單個(gè)細(xì)菌繁

殖而來的菌落。

第14頁共38頁

41、稀釋涂布平板法的原理是什么？

稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到

瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被

分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。

42、用何種物質(zhì)來對菌液進(jìn)行梯度稀釋？為什么要進(jìn)行梯度稀釋？

無菌水。進(jìn)行梯度稀釋的原因：菌液中的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落。

43、在用移液管進(jìn)行稀釋時(shí)？應(yīng)該在菌液中吹吸三次，目的是什么？

使菌液與水充分混勻，從而達(dá)到稀釋的目的。

44、移液管需要經(jīng)過滅菌，操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰l-2cm處。

45、涂布平板的操作步驟？

①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。

②取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。

③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8?10s。

④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。

46、如何檢驗(yàn)培養(yǎng)基的滅菌是否合格？

將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入在37℃恒溫箱中培養(yǎng)12h和24ho若

未接種的培養(yǎng)基無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。

47、培養(yǎng)時(shí)放在什么中進(jìn)行培養(yǎng)？培養(yǎng)的溫度多少？（恒溫箱，37℃o）

48、如果培養(yǎng)基上觀察到了不同形態(tài)的菌落，說明了什么？

說明在接種過程中受到了雜菌的污染；或者培養(yǎng)基的制備不合格。

49、為了保持菌種的純凈，需要進(jìn)行菌種的保藏。對于頻繁使用的菌種采用」

對于需要長期保存的菌種采用甘油管藏法。

50、臨時(shí)保藏法需要將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,在合適的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)

第15頁共38頁

菌落長成后，將試管放入—￡￡的冰箱中保藏。

51、臨時(shí)保藏法有什么缺點(diǎn)？

保存的時(shí)間不長，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。

52、甘油管藏法：在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘

油瓶中，與甘油充分混勻后，放在一20℃的冷凍箱中保存。

課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)

1、尿素能不能直接被農(nóng)作物吸收？需要被分解成什么才可以被植物利用？

尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿

素分解成氨之后，才能被植物利用。

2、土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)槟芎铣墒裁矗?/p>

土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻倜浮?/p>

3、如何尋找目的菌株？

在尋找目的菌株時(shí)，要根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。

4、實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是什么？

人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時(shí)抑制或阻止其他

微生物生長。

5、為什么以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基能夠選擇出分解尿素的微生物？

培養(yǎng)基中尿素作為唯一氮源，只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。

6、什么是選擇培養(yǎng)基？

將允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做選

擇培養(yǎng)基。

7、培養(yǎng)基中加入青霉素能分離出什么微生物？加入高濃度食鹽能分離出什么微生物？

加入青霉素能分離出酵母菌和霉菌。（青霉素抑制細(xì)菌、放線菌的生長）

第16頁共38頁

加入高濃度食鹽能分離出金黃色葡萄球菌。

8、培養(yǎng)基中缺乏氮源能分離出什么微生物？缺乏有機(jī)碳源能分離出什么微生物？

培養(yǎng)基中不加入氮元素，可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物；

培養(yǎng)基中不加入有機(jī)碳源可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物；

9、培養(yǎng)基中以N”作為唯一氮源能分離出什么微生物？以石油作為唯一碳源能分離出什么

微生物？

以阿3作為唯一氮源能分離出硝化細(xì)菌；

以石油作為唯一碳源能分離出能分解石油的微生物。

10、測定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。

11、常用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是什么？

稀釋涂布平板法。

12、為什么通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中的活菌數(shù)？（稀釋涂布平板法統(tǒng)

計(jì)樣品中活菌的數(shù)目的原理）

當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活

菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活細(xì)菌。

13、為了保證結(jié)果正確，一般選擇菌落數(shù)在什么范圍的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)？（30—300。）

14、某位同學(xué)在IO'濃度下涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230,他的結(jié)果是否合理？為

什么？

不合理。沒有設(shè)置重復(fù)組，結(jié)果不具有說服力。

15、某位同學(xué)在同樣的濃度下涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為21、212和256,他

的結(jié)果是否合理？為什么？

合理。因?yàn)樵谕粋€(gè)稀釋度下得到兩個(gè)菌落數(shù)目接近的平板，且菌落數(shù)在30—300之間。

16、某位同學(xué)在同樣的濃度下涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為21、212和256,該

同學(xué)以這三個(gè)平板上菌落數(shù)的平均值163作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果。他的結(jié)果是否合理？為什么？

第17頁共38頁

不合理。設(shè)置的重復(fù)組中有一組結(jié)果相差太遠(yuǎn)，且菌落數(shù)不在30—300之間。

17、統(tǒng)計(jì)樣品菌落數(shù)目，為使結(jié)果具有說服力，應(yīng)設(shè)置重復(fù)組。

18、如何根據(jù)平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的細(xì)菌數(shù)？

統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板，計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值

每克樣品中的菌落數(shù)二（C/V）*M其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V

代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（嘰）,M代表稀釋倍數(shù).

19、用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目/L，（實(shí)際活菌數(shù)量比測

得的數(shù)量偏高>原因是什么？

因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。

20、除了稀釋涂布平板法外，還有什么測定微生物數(shù)量的方法？用到什么工具？

顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。

21、用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目原因是什么？

顯微鏡直接計(jì)數(shù)法不能區(qū)分活菌和死菌，死菌也計(jì)數(shù)在內(nèi)。

22、設(shè)置對照的目的是什么？

設(shè)置對照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可

信度。對照實(shí)驗(yàn)是指除了被測試的條件以外，其他條件都相同的實(shí)驗(yàn)，其作用是比照試驗(yàn)

組，排除任何其他可能原因的干擾，證明確實(shí)是所測試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。

23、檢驗(yàn)選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，應(yīng)該如何設(shè)置對照？

用接種了菌液的牛肉膏蛋白腺培養(yǎng)基和接種了菌液的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行對照，在牛肉膏蛋

白陳培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，則說明選擇培養(yǎng)基起到了

選擇作用。

24、分離和計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)流程？

土壤取樣一制備培養(yǎng)基一樣品的稀釋一取樣涂布一培養(yǎng)觀察一菌落計(jì)數(shù)

25、土壤取樣時(shí)，為什么要鏟去表層土？

第18頁共38頁

土壤中的微生物，大約70%—90%是細(xì)菌。細(xì)菌適宜在酸堿度接近中性的潮濕土壤中生

長，絕大多數(shù)分布在距地表3-8cm的土壤層。

26、測定土壤中細(xì)菌、放線菌、真菌的數(shù)量分別選用什么稀釋倍數(shù)進(jìn)行平板培養(yǎng)？

測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量，一般選用10\10\106

測定放線菌的數(shù)量，一般選用10\10\105

測定真菌的數(shù)量，一般選用10\10\104

27、為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度？（因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量是

不同的。）

28、細(xì)菌、放線菌、霉菌各自的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間？

不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間。細(xì)菌30—37℃1—2天；

放線菌25—28℃5—7天；霉菌25—28℃3—4天。

29、微生物培養(yǎng)時(shí)要每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取什么的記錄作為結(jié)果？原因是什么？

選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果。防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。

30、一般來說，在一定條件下（相同培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間），同種微生物表現(xiàn)出_穩(wěn)

定______的菌落特征。

31、菌落特征包括哪些方面？（菌落的性狀、大小、隆起程度和顏色等方面。）

32、在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該從哪些方面注意無菌操作？（至少3點(diǎn)）

①取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都需要滅菌。

②應(yīng)在火焰旁稱取土壤。在火焰附近將稱好的土樣倒入錐形瓶中，塞好棉塞。

③在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁操作。

33、什么是鑒別培養(yǎng)基？（根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)

藥品。）

34、在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，會有什么顏色變化？（指示劑將

第19頁共38頁

變紅。）

35、為什么能通過酚紅指示劑來鑒定能分解尿素的細(xì)菌？

在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的服酶將尿素分解成了氨。氨會使培養(yǎng)基的堿

性增強(qiáng)，PH升高，酚紅指示劑將變紅。

36、測定飲用水中的大腸桿菌數(shù)目可以用什么方法？

濾膜法。將已知體積的水過濾后，將漉膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上,大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)

黑色。可以根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量。

課題3分解纖維素的微生物的分離

1、纖維素是由什么首尾相連而成的高分子化合物？（葡萄糖。）

2、地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)是什么？（纖維素。）

3、為什么纖維素能被土壤中某些微生物分解利用？（因?yàn)樗鼈兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶。）

4、纖維素酶是一種復(fù)合酶，由哪些組分組成？

纖維素酶是一種復(fù)合酶，它至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖昔酶。

5、纖維素是如何被纖維素晦分解成葡萄糖的？

C1酶、CX酶使纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖昔酶將纖維二糖分解成葡萄糖。

6、篩選纖維素分解菌的方法是什么？（剛果紅染色法。能夠通過顏色反應(yīng)直接對微生

物進(jìn)行篩選。）

7、篩選纖維素分解菌的原理是什么？通過什么現(xiàn)象來判斷有纖維素分解菌？

剛果紅（簡稱CR）是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，

但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入

剛果紅時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，

剛果紅一纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。

這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。

8、分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程？

第20頁共38頁

土壤取樣一選擇培養(yǎng)（此步是否需要，應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定）f梯

度稀釋f將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上f挑選產(chǎn)生透明圈的菌落

9、為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌？

由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對提

高，因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。

10、土壤取樣時(shí)，為什么將濾紙埋在土壤中？

將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對聚集，實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的

適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。

11＞選擇培養(yǎng)的目的是什么？

通過選擇培養(yǎng)增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。

12、為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物？

在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那

些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮”的作用。

13、選擇培養(yǎng)用固體培養(yǎng)基還是液體培養(yǎng)基，為什么？

液體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基可以使?fàn)I養(yǎng)成分充分消耗，有利于菌種大量繁殖。

14、選擇培養(yǎng)時(shí)振蕩培養(yǎng)的目的是什么？

提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量；同時(shí)使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。

15、如何判斷一個(gè)培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基還是液體培養(yǎng)基？（是否加入瓊脂（凝固劑）。）

16、以纖維素作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基可以選擇出什么微生物？為什么？

可以選擇出纖維素分解菌，因?yàn)橐岳w維素作為唯一碳源，有利于纖維素分解菌生長，同

時(shí)抑制其他微生物生長。

17、鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基用固體培養(yǎng)基還是液體培養(yǎng)基？（固體培養(yǎng)基。）

18、剛果紅染色法有哪兩種方法？分別是如何操作的？

第21頁共38頁

一種是先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng),另一種是在倒平板時(shí)就加入剛果紅。

方法一：在長出菌落的培養(yǎng)基上，覆蓋質(zhì)量濃度為的CR溶液，10-15min后，倒

去CR溶液，加入lmol/L的NaCl溶液，15min后倒掉NaCl溶液，此時(shí)，產(chǎn)生纖維素酶的

菌落周圍將會出現(xiàn)透明圈。

方法二：配制質(zhì)量濃度為的CR溶液，滅菌后，按照每200ml培養(yǎng)基加入1ml的比

例加入CR溶液，混勻后倒平板。等培養(yǎng)基上長出菌落后，產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會出

現(xiàn)明顯的透明圈。

19、兩種剛果紅染色法中哪種方法剛果紅需要滅菌？哪種方法剛果紅不需要滅菌？

菌落形成后加入剛果紅，剛果紅不需要滅菌；菌落形成前倒平板時(shí)加入剛果紅，剛果紅

需要滅菌。

20、為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行什么實(shí)驗(yàn)？（發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)。

21、纖維素酶的發(fā)酵方法有哪兩種？（液體發(fā)酵和固體發(fā)酵。）

22、纖維素酶的測定是通過對什么物質(zhì)進(jìn)行定量測定？

對纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測定。

專題6植物有效成分的提取

課題1植物芳香油的提取

1、天然香料的來源？（植物、動物。）

2、植物芳香油的特點(diǎn)及組成？（植物芳香油揮發(fā)性強(qiáng)，成分復(fù)雜，主要包括菇類化合

物及其衍生物。）

3、植物芳香油的提取方法有哪些？（蒸饋、壓榨和萃取。）

4、植物芳香油提取的常用方法是什么？（水蒸氣蒸儲法。）（注意：“氣”字不要寫錯(cuò)）

5、水蒸氣蒸播法的原理、適用范圍、不足？

原理：利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來形成油水混合物，冷卻后混合

物又會重新分出油層和水層。

第22頁共38頁

適用范圍：適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油。

不足：水中蒸儲會導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題。

6、壓榨法的原理、適用范圍、不足？

原理：通過機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油。

適用范圍：適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取。

不足：出油率低。

7、萃取法的原理、適用范圍、不足？

原理：使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)出有機(jī)溶劑后就可獲得芳香油。

適用范圍：適用范圍廣，要求原料的顆粒盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶劑中。

不足：使用的有機(jī)溶劑必須事先精制，除去雜質(zhì)，否則會影響芳香油的質(zhì)量。

8、根據(jù)蒸憎過程中原料放置的位置，可以將水蒸氣蒸譚法分為哪兒類？

水中蒸儲：原料放在沸水中加熱蒸儲。

水上蒸儲：原料隔放在沸水上加熱蒸儲。

水氣蒸儲：利用外來高溫水蒸氣加熱蒸儲。

9、為什么柑橘和檸檬中的芳香油不能用蒸儲法提??？應(yīng)用什么方法提??？

因?yàn)樗姓魞?dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題。因此，柑橘和檸檬芳香油的制備

通常使用壓榨法。

10、提取玫瑰精油的實(shí)驗(yàn)流程：

鮮玫瑰花+清水f水蒸氣蒸傅f油水混合物f分離油層（加入NaCl）-除水（加入無水

NaS04）f過濾f玫瑰油

11、在提取玫瑰精油時(shí)要用的哪兩種物質(zhì)？作用分別是？

NaCl：促使油水分離。無水Na2s除去油層中的水分。

12、玫瑰花瓣與清水的質(zhì)量比？（玫瑰花瓣與清水的質(zhì)量比為1:4。）

第23頁共38頁

13、用于提煉玫瑰精油的玫魄花期是？（每年5月上、中旬，此階段花朵含油量最高。）

14、玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)有哪些？

玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，能隨水蒸氣一同蒸鏘。

15、用水蒸氣蒸僧法提取玫瑰精油，在水中蒸儲、水上蒸儲和水氣蒸播的方法中，水中蒸

館更簡便易行。16、如何處理水蒸氣蒸餛后收集到的乳白色的乳濁液？

錐形瓶中收集到的乳白色的乳濁液，這是玫瑰油與水的混合物。

①向乳濁液中加入NaCL增加鹽的濃度，就會出現(xiàn)明顯的分層。

②然后再用分液漏斗將油層和水層分開。

③加入無水Na2s（X除去油層中的水分。

④過濾除去固體NazSQ就可以得到玫瑰油了。

17、哪些因素會導(dǎo)致玫瑰精油的品質(zhì)較差？提高玫瑰精油品質(zhì)的方法是什么？

影響玫瑰精油品質(zhì)的因素：蒸饋溫度和蒸儲時(shí)間。

蒸儲溫度太高，蒸儲時(shí)間太短，產(chǎn)品品質(zhì)就比較差。

如果要提高玫瑰精油的品質(zhì)，可以延長蒸儲的時(shí)間。

18、橘皮精油的主要成分是什么？（檸檬烯。）

19、為什么不能用水蒸氣蒸窗法提取橘皮精油？

橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸儲時(shí)會發(fā)生部分水解，使用水中蒸儲又會產(chǎn)生原料焦

糊的問題。

20、提取橘皮精油的方法是什么？（壓榨法。）

21、提取橘皮精油的實(shí)驗(yàn)流程：（石灰水浸泡一漂洗一壓榨一過濾-靜置一再次過濾一

橘皮油）

22、石灰水的作用？（能夠破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，分解果膠，防止橘皮壓榨時(shí)滑脫，提高出油

率。）

第24頁共38頁

23、柑橘皮中有大量的果蠟、果膠和水分，如果直接壓榨，出油率較低。為了提高出油率,

應(yīng)該怎么做？

將柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。

24、壓榨是一個(gè)什么過程？

（壓榨是機(jī)械加壓過程，既將原料壓緊，防止原料滑脫，又要將油分?jǐn)D壓出來。）

25、為了使橘皮油易于與水分離，要加入哪兩種物質(zhì)？（相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0.25%的NaHCOs

和5%的Na2S04?）

26、壓榨液的處理？

①先用登通譴過濾除去固體物和殘?jiān)?/p>

②然后離心進(jìn)一步除去質(zhì)量較小的殘留固體物；

③再用分液漏斗將上層的橘皮油分離出來:

④然后靜量5-7d,使雜質(zhì)沉淀，用吸管吸出上層澄清橘皮油，其余部分通過遮紙過濾，

濾液與吸出的上層橘油合并，成為最終的橘皮精油。

27、橘皮在石灰水中的浸泡時(shí)間為？目的是什么？

10h以上。為了使橘皮浸透，這樣壓榨時(shí)不會滑脫，出油率高，并且壓榨液的黏稠度不

會太高，過濾時(shí)不會堵塞篩眼。

課題2胡蘿卜素的提取

1、胡蘿卜素可以分為哪幾類？分類依據(jù)是什么？

根據(jù)碳碳雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分為a、B、Y三類。

2、胡蘿卜素中最主要的組成成分是哪一類？（胡蘿卜素。）

3、為什么可以用B一胡蘿卜素來治療夜盲癥、幼兒生長發(fā)育不良、干皮癥等？

一分子的6—胡蘿卜素在人或動物的小腸、肝臟等器官被氧化成兩分子的維生素Ao夜

盲癥、幼兒生長發(fā)育不良、干皮癥都是因缺乏維生素A而引起的疾病。

第25頁共38頁

4、胡蘿卜素除了用來治療各種疾病外，還有什么用途？

常用的食品色素；天然胡蘿卜素還具有使癌變細(xì)胞恢復(fù)成正常細(xì)胞的作用。

5、胡蘿卜素的性質(zhì)？

橘黃色結(jié)晶，化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油酸等有機(jī)溶劑。

6、在用胡蘿卜做菜時(shí)，為什么會呈現(xiàn)出橘黃色？在用胡蘿卜做菜時(shí)要多加些油，原因是什

么？

胡蘿卜素溶解在油中產(chǎn)生的。多加油的原因：胡蘿卜素易溶解在油中，溶解的胡蘿卜素

容易被人體吸收，因此炒胡蘿卜時(shí)要多加些油。

7、在工業(yè)生產(chǎn)上，提取天然13—胡蘿卜素的方法有哪幾種？

①從植物中提取；②從大面積養(yǎng)殖的巖藻中獲得；③利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)。

8、從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是什么？原因是？（萃取法。因?yàn)楹}卜素易溶

于有機(jī)溶劑。）

9、胡蘿卜素能用水蒸氣蒸健法提取嗎？原因是？

不能用水蒸氣蒸儲法。因?yàn)樗魵庹魞Ψㄟm用于分離揮發(fā)性較強(qiáng)的物質(zhì)，而胡蘿卜素不

易揮發(fā)，不能隨水蒸氣蒸儲出來。

10、提取胡蘿卜素的實(shí)驗(yàn)流程：（粉碎一干燥一萃取一過濾一濃縮一胡蘿卜素）

11、水溶性有機(jī)溶劑有哪些？水不溶性有機(jī)溶劑有哪些？

水溶性有機(jī)溶劑（能與水混溶）：乙醇、丙酮

水不溶性有機(jī)溶劑（不能與水混溶）：石油酸、乙酸乙酯、乙酸、苯、四氯化碳等

12、萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)具備什么條件？

（具有較高沸點(diǎn)，能夠充分溶解胡蘿卜素，且不與水混溶。）

13、乙醇和丙酮能夠用于胡蘿卜素的萃取嗎？為什么？

不能。乙醇和丙酮是水溶性有機(jī)溶劑，在萃取中能與水混溶而影響萃取效果。

第26頁共38頁

14、萃取的效率主要取決于什么？同時(shí)還受到哪些因素的影響？

主要因素：萃取劑的性質(zhì)和使用量。

次要因素：原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時(shí)間等。

15、一般來說，要想萃取效果好，要保證什么？

一般來說，原料顆粒小，萃取溫度高，時(shí)間長，需要提取的物質(zhì)就能夠充分溶解，萃取

效果就好。因此，萃取前，要將胡蘿卜進(jìn)行粉碎和干燥。

16、為什么萃取前要將胡蘿卜進(jìn)行粉粹和干燥？

使原料與有機(jī)溶劑充分接觸，充分溶解在有機(jī)溶劑中，提高萃取的效率。

15、萃取過程中應(yīng)該避免明火加熱，采用水浴加熱，原因是什么？

有機(jī)溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸。

16、在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置的原因是什么？（防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā)。）

17、萃取液的濃縮可直接使用什么裝置？（蒸儲裝置。）

18、濃縮的目的是什么？（濃縮的目的是去除萃取液中的萃取劑。）

1。、在濃縮之前，還要進(jìn)行什么過程？目的是什么？

在濃縮之前，還要進(jìn)行過濾。過濾的目的是除去萃取液中的不溶物。

20、在胡蘿卜干燥時(shí)要控制好什么條件？原因是什么？

干燥溫度和干燥時(shí)間。因?yàn)闇囟忍?、干燥時(shí)間太長會導(dǎo)致胡蘿卜素分解。

21、胡蘿卜干燥的速度和效果與什么有關(guān)？（與破碎程度、干燥方式有關(guān)。）

22、用什么方法鑒定胡蘿卜素？（紙層析法。）

（1）能否將濾紙兩邊對齊捏??？

將點(diǎn)好樣的濾紙卷成筒狀，卷紙時(shí)注意濾紙兩邊不能相互接觸，以免因毛細(xì)現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑

沿濾紙兩邊的移動加快，影響結(jié)果。

第27頁共38頁

（2）將濾紙卷成圓筒狀放在密封玻璃瓶中的原因是什么？（防止層析液揮發(fā)。）

（3）鑒定時(shí)常用什么溶劑？（石油酸。）

（4）點(diǎn)樣時(shí)有什么要求？（①快速細(xì)致；②在基線上形成細(xì)小的圓點(diǎn)；③保持濾紙

干燥。）

（4）層析液不能沒及樣點(diǎn)的原因是什么？（防止胡蘿卜素溶解在層析液中。）

（5）鑒定時(shí)對照組是什么？實(shí)驗(yàn)組是什么？（對照組：標(biāo)準(zhǔn)樣品；實(shí)驗(yàn)組：萃取

樣品。）

（6）如果萃取樣品中除了111現(xiàn)利標(biāo)準(zhǔn)樣品一樣的層析帶，還出現(xiàn)了不同的層析帝，說明了

什么？

如果萃取樣品中出現(xiàn)了和標(biāo)準(zhǔn)樣品一樣的層析帶，說明提取胡蘿卜素的實(shí)驗(yàn)成功。另外

一條不同于標(biāo)準(zhǔn)樣品的色素帶，是其他色素或雜質(zhì)。

果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用

由水果制作果汁要解決兩個(gè)主要問題：一是果肉的出汁率低，耗時(shí)長；二是榨取的果汁

渾濁、黏度高，容易發(fā)生沉淀。

1、植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成成分有纖維素和理膠并且兩者不溶于水，在果

汁加工中，既影響出汁率，又使果汁渾濁。

2、果膠是植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成成分之一，它是由半乳糖醛酸聚合而成的一

種高分子化合物，不溶于水。在果汁加工中，果膠不僅會影響出汁率，還會使果汁渾濁。

果膠酶的作用是能夠?qū)⒐z_分解成可溶性的生乳醛酸，瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層，并且

使果汁變得澄清。

3、果膠酶是一類酶總稱，包括果膠分解酶、多聚半乳糖醛酸酶、果膠酯酶等。

4、酶的活性是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的的能力。酶活性的高低可以用在一定條件下,

酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度來表示。在科學(xué)研究與工業(yè)生產(chǎn)中，酶反應(yīng)速度用單

位時(shí)間內(nèi)、單位體積中反應(yīng)物的減小量或產(chǎn)物的增加量來表示。

5、影響酶活性的因素包括：溫度、PH、酶的抑制劑等。

第28頁共38頁

（二）.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

（設(shè)計(jì)一）探究溫度對酶活性的影響

當(dāng)前處于最適溫度或最適P11時(shí)，酶的活性最高；若溫度過高、過酸或過堿，見導(dǎo)致酶變

性失活。在一定范圍內(nèi)，果肉的出汁率和果汁的澄清度與果膠酶的活性成正比。

此實(shí)驗(yàn)的自變量是溫鼠;根據(jù)單一變量原則，你應(yīng)確保各實(shí)驗(yàn)組相同的變量有晅底物

濃度底物量實(shí)驗(yàn)?zāi)懿拿傅挠昧康润摇?/p>

1設(shè)計(jì)二）探究PH對酶活性的影響

探究pH對果膠酶活性的影響，只須將溫度梯度改成pH梯度，并選定一個(gè)適宜的溫度進(jìn)

行水浴加熱。反應(yīng)液中的pH可以通過體積分?jǐn)?shù)為0.1*的氫氧化鈉或鹽酸溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。

（設(shè)計(jì)三）探究果膠酶的用量

探究果膠酶的用量是建立在探究最適溫度和pH對果膠酶活性影響的基礎(chǔ)之上的。此時(shí)，

研究的變量是果膠酶的用量，其他因素都應(yīng)保持不變。實(shí)驗(yàn)時(shí)可以配制不同濃度的果膠酶

溶液，也可以只配制一種濃度的果膠酶溶液，然后使用不同的體積即可。需要注意的是，

反應(yīng)液的pH必須相同，否則將影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)

旁欄思考題

1.為什么在混合蘋果泥和果膠酶之前，要將果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處

理？

提示：將果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處理，可以保證底物和酶在混合時(shí)的溫

度是相同的，避免了果泥和果膠酶混合時(shí)影響混合物的溫度，從而影響果膠酶活性的問題。

2.在探究溫度或川的影響時(shí)，是否需要設(shè)置對照？如果需要，又應(yīng)該如何設(shè)置？為什

么？

提示：需要設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)，不同的溫度梯度之間或不同的pH梯度之間就可以作為對照,

這種對照稱為相互對照。

3.A同學(xué)將哪個(gè)因素作為變量，控制哪些因素不變？為什么要作這樣的處理？B同學(xué)呢？

第29頁共38頁

提示：A同學(xué)將溫度或pH作為變量，控制不變的量有蘋果泥的用量、果膠酶的用量、反

應(yīng)的時(shí)間和過濾的時(shí)間等。只有在實(shí)驗(yàn)中保證一個(gè)自變量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果才能說明問題。B同

學(xué)對于變量的處理應(yīng)該與A同學(xué)相同，只是觀察因變量的角度不同。

4.想一想，為什么能夠通過測定濾出的蘋果汁的體積大小來判斷果膠酶活性的高低？

提示：果膠酶將果膠分解為小分子物質(zhì)，小分子物質(zhì)可以通過濾紙，因此蘋果汁的體積

大小反應(yīng)了果膠酶的催化分解果膠的能力。在不同的溫度和pH下，果膠酶的活性越大，蘋

果汁的體積就越大。