《藥物分析》維生素類藥物的分析

第九章維生素類藥物的分析

AnalysisofVitamines⊙維生素A⊙維生素B1⊙維生素C⊙維生素E⊙第一節(jié)維生素A(

VitA)2-CisNeovitaminAa

2,6-dicisIsovitamin

Ab4-CisNeovitaminAb2,4-dicisNeovitaminAc6-CisIsovitaminAa

Retinol(VitAalcohol)VAacetateVApolmitate912345678VitA含量表示I.U.(internationalUnit)國(guó)際單位效價(jià)(I.U./g)按WHO規(guī)定VAacetate

VAalcohol效價(jià)(I.U./g)2.907×106

3.33×106

1gpure

VA

acetate≈2.907×106I.U.

按WHO規(guī)定VAacetate

VAalcoholVitA含量表示I.U.(internationalUnit)國(guó)際單位效價(jià)(I.U./g)效價(jià)(I.U./g)2.907×1063.33×1061gpure

VA

acetate≈2.907×106I.U.

第一法測(cè)定VAacetate→環(huán)己烷為溶劑

λmax＝328nm吸收度比值0.5550.9071.0000.8110.299測(cè)定吸收度

λ(nm)

300316328340360

⊕如果λmax為326～329nm;-規(guī)定值≤±0.02則不需要校正⊕如果λmax為326～329nm;但是，-規(guī)定值＞0.02，則需校正VitAUV法校正公式

第一法

A328(校正)=3.25(2A328-A316-A340)若在±3%范圍，則仍以A328計(jì)算含量若在-15%～-3%范圍，則以A325(校正)計(jì)算含量若＞3%，或＜-15%，則采用第二法第二法測(cè)定其他維生素第一法未通過，包括：則A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334λmax不在326～329nm，必須經(jīng)皂化：酯乙醚提取VA醇，洗滌，過濾溶于異丙醇在300，310，325，334nm處分別測(cè)A⊕當(dāng)λmax為323～327nm，A300nm/A325nm≤0.73⊕

若在±3%范圍，則仍以A325計(jì)算含量⊕若λmax不在323～327nm，或者

A300nm/A325nm＞0.73表明干擾雜質(zhì)含量過高，則可采用色譜法將未皂化部分純化后再進(jìn)行測(cè)定第一法

A328(校正)=3.25(2A328-A316-A340)Aλ2λ1λ3nmAλ2λ1λ3nmVitAsamplepureVAacetateimpurities校正公式由來用幾何圖形推導(dǎo)出公式A325(校正)=7A325-2.625A310-4.375A334比實(shí)際值高出2.6~2.7%故扣除2.65%得第二法校正公式A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334

稱取VitA滴劑0.1082g(標(biāo)示量50000I.U./g)，加環(huán)已烷至50.0ml，取出5.0ml置于另一50ml量瓶中，加環(huán)已烷至刻度，搖勻后置石英比色皿中，以環(huán)已烷為空白，分別于以下波長(zhǎng)處測(cè)得相應(yīng)的吸收度值，試求此滴劑中VitA的標(biāo)示量百分率：λ(nm)300

316

328

340

360A0.3300.5080.5700.477

0.190精密稱取VitA滴劑0.06126g(標(biāo)示量50000

I.U./g)，置于25ml量瓶中，加環(huán)已烷至刻度，精密吸取2ml置于另一25ml量瓶中，加環(huán)已烷至刻度，并混勻，置石英比色皿中，以環(huán)已烷為空白，分別于以下波長(zhǎng)處測(cè)得吸收度值，試求此滴劑中VitA為標(biāo)示量的百分含量：λ(nm)300

316

328

340

360A0.3300.5080.5700.477

0.190⊙第二節(jié)維生素B1(

VitB1)VitB1ThiamineHydrochlorideNaOH－H2O環(huán)合[O]－2H硫色素Thiochtome結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與鑒別噻唑環(huán)在堿性介質(zhì)中可被高鐵氰化鉀等氧化劑氧化，然后與嘧啶環(huán)上的-NH2縮合生成具有熒光的硫色素，后者易溶于異丁醇中顯強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光，該反應(yīng)又稱為硫色素?zé)晒夥磻?yīng)。為維生素B1所特有生成沉淀反應(yīng)分子結(jié)構(gòu)中含有雜環(huán)，易與生物堿沉淀劑(碘化鉍鉀、碘化汞鉀、苦味酸等)，硅鎢酸，雷氏鹽等作用形成組成恒定的沉淀維生素B1在堿性加熱條件下反應(yīng)放出H2S,與Pb(Ac)2試液形成黑色PbS↓含量測(cè)定Assay硅鎢酸重量法SilicotungsticAcid

Gravimetry非水溶液滴定法Non-aqueous

Titrimetry硫色素?zé)晒夥═hiochroneFluoremetryVitB1

硅鎢酸重量法2VitB1+過量硅鎢酸*濾過洗滌*用熱的稀HCl洗干燥恒重*80℃H+煮沸*2~3分鐘；過長(zhǎng)，沉淀易于附著于器壁上[VitB1]2·SiO2(OH)2·12WO3·4H2O沉淀⊙第三節(jié)維生素C(

VitC)612345L-抗壞血酸L-去氫抗壞血酸L-二酮古羅糖酸有生物活性有生物活性無生物活性-2H+2HH2OOH-(H+)H2O50℃藍(lán)色-3H2O糠醛-CO2戊糖含量測(cè)定＊碘量法＊2,6-二氯靛酚法⊙第五節(jié)維生素E(

VitE)R1R2﹡﹡VitE(dl-α-TocopherylAcetate)SyntheticNaturalProductR1

R2content(%)α-Tocopheryl52.0

68.0β-Tocopheryl9.3

22.0γ-Tocopheryl28.0

5.0δ-Tocopheryl10.7

5.0ChPVE

中檢查生育酚取VitE0.1g，加無水乙醇5ml溶解后，加二苯胺T.S.1滴，用硫酸鈰滴定液(0.01mol/L)滴定，消耗硫酸鈰滴定液(0.01mol/L)不得過1.0ml固定液：5%SE30

柱溫：255±10℃

檢測(cè)器：FID

內(nèi)標(biāo)：十六酸十六醇酯鈰量法(%)GC(%)97.9183.5397.9982.5198.4885.0914.54′VE24.40′內(nèi)標(biāo)VE丸劑GC法VE(純品)測(cè)得量(mg)17.2217.15加入量(mg)17.3回收率(%)99.5499.13中國(guó)藥典維生素E

色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

SystemSuitabilityTestsSST以硅酮(OV-17)為固定相，涂布濃度為2%；柱溫為265℃，理論板數(shù)按VE峰計(jì)算，應(yīng)不低于500，VE峰與內(nèi)標(biāo)峰的分離度應(yīng)大于2。內(nèi)標(biāo)：正三十二烷校正因子測(cè)定取正三十二烷適量，加正已烷溶解并稀釋成每1ml中含1.0g的溶液，搖勻，作為內(nèi)標(biāo)溶液。另取VitE對(duì)照品約20mg，精密稱定，置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液10ml，密塞，振搖使溶解；取1~3μl注入氣相色譜儀，計(jì)算校正因子測(cè)定法取本品約20mg，精密稱定，置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液10ml，密塞，振搖使溶解；取1~3μl注入氣相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得JPVitE:dl-α生育酚色譜柱：ODS15~30cm4mm5~10μm流動(dòng)相：甲醇-水(491)流速：調(diào)整到生育酚的tr≈10minUVD：292nmR≥2.6人血清中VA和VE的含量測(cè)定Watersμ-BondapakC1830cm3.9mmResolveC18

預(yù)柱甲醇-水(964)，1.2ml/minUVD：0~8min330nm8min后292nm血清樣品的制備血樣離心后，分離血清，置5ml塑料試管中，充N2密封，于-40℃保存?zhèn)溆忙?,6Cholestadienol膽甾醇，膽固醇Cholesteral膽甾-5烯-3β-醇VitD2

骨化醇Ergocalciferol9,10-開鏈麥角甾-5,7,10(19),22-四烯-3β-醇22123456710VitD3

膽骨化醇Cholecalciferol膽鈣化醇9,10-開鏈膽甾-5,7,10(19)-三烯-3β-醇USP24Cleanupcolumn30cm4.6mmC8MobilephaseA

CH3CNCH3OHH2O25251TheamountofH2O&theflowratemaybevariedtomeetsystemsuitabilityrequirement.Analyticalcolumn25cm4.6mmp