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生化檢測(cè)過(guò)程中的異常值分析生化產(chǎn)品部:黎程2016年7月21日2021/6/271臨床生化檢測(cè)主要是利用物理學(xué)、生物化學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)和分子生物學(xué)的理論與技術(shù),探討疾病的發(fā)病機(jī)制,研究其病理過(guò)程中的特異性化學(xué)標(biāo)志物或體內(nèi)特定成分的改變,進(jìn)而對(duì)疾病的診斷、治療和預(yù)后形成參考依據(jù)。2021/6/272鑒于這種參考意義,結(jié)果的可靠性就尤為重要。而生化檢測(cè)過(guò)程中,異常值也是屢見(jiàn)不鮮的。為了分析這些異常值,我們把異常值的類(lèi)型分為三類(lèi):2021/6/2731樣本本身的因素2測(cè)試本身的因素3表觀(guān)異常值這里的異常值指臨床判斷為健康人而生化某些指標(biāo)卻超出正常值范圍。2021/6/274

樣本本身的因素12021/6/275樣本本身的因素性別:如CK:通常男子比女子肌肉發(fā)達(dá),釋放至血清中的CK也就更多,參考:女24~170U/L,男0-190U/LGGT:雌激素可以抑制GGT的合成,因此女性GGT通常較低,參考:女≤32U/L,男≤47U/L我們的試劑參考范圍沒(méi)有對(duì)性別予以區(qū)分,但有些項(xiàng)目的結(jié)果是因性別而不同的,結(jié)果異常時(shí)需要考慮。2021/6/276樣本本身的因素年齡:如新生兒PA僅為成人的一半(150以?xún)?nèi)),由于生理性黃疸,TBIL在100μmol/L以?xún)?nèi),DBIL小于35μmol/L以?xún)?nèi)應(yīng)視為正常。14歲以?xún)?nèi)兒童CKMB常高于成人,45U/L以?xún)?nèi)應(yīng)視為正常。TC、TG、LDL、ApoB通常較低。60以上老人則由于代謝廢物累積、組織器官老化等原因,ALT、AST、LDL、ApoB通常較高,5'NT常為青壯年的2倍。2021/6/277樣本本身的因素人種:我國(guó)人的ApoA1、HDL-C水平與歐美人相仿,而TC、LDL-C、ApoB則明顯低于歐美人。非洲黑人(文獻(xiàn)中的案例為利比里亞當(dāng)?shù)厝耍㏕P、LDH顯著高于我國(guó)人,TBIL、UA、UREA、TC、TG顯著低于我國(guó)人。有關(guān)不同地域的生化檢測(cè)區(qū)別,文獻(xiàn)很少,但理論上各醫(yī)院都會(huì)形成針對(duì)科室服務(wù)人群的參考范圍,以后在調(diào)試中可以多加留意。2021/6/278樣本本身的因素飲食:飲酒特別是長(zhǎng)期酗酒,可能引起一段時(shí)間的GGT、UREA、TBA、AST、ALT的顯著升高。高鹽飲食會(huì)加重肝、腎負(fù)擔(dān),引起ALT、AST活性升高,HDL下降,血液濃度上升,其余各項(xiàng)指標(biāo)也可能有一定程度上升。藥物干擾則根據(jù)其機(jī)理不同而不同,如膽堿類(lèi)藥物、利尿劑等可引起ALT、AST升高。2021/6/2792021/6/27102021/6/2711樣本本身的因素體型:主要影響TG項(xiàng)目,通常體型魁梧的人TG偏高,HDL、性激素偏低。體型瘦弱的,通常PA較低,但不能排除可能的肝病影響。其余因素,如運(yùn)動(dòng)、抽血時(shí)的臥位、立位等也會(huì)有一定影響。2021/6/27122021/6/2713樣本本身的因素脂血:TG≥3.0mmol/L時(shí),血清出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的渾濁,我們稱(chēng)之為脂血。 脂血對(duì)結(jié)果的影響主要由于乳糜微粒引起,使入射光發(fā)生反射和散射,嚴(yán)重影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。如UREA、ALT、AST吸光度超限無(wú)結(jié)果,RBP反應(yīng)曲線(xiàn)改變,出現(xiàn)負(fù)值,UA、TB、DB增高,CRE、TP、ALP、Ca偏低(pH>10時(shí),TG皂化,使反應(yīng)液變清)2021/6/2714樣本本身的因素脂血:通常速率法和雙試劑終點(diǎn)法有助于削弱這種干擾,但乳糜嚴(yán)重時(shí)可能效果甚微,需要進(jìn)行稀釋、高速離心、乙醚處理。2021/6/2715樣本本身的因素溶血:除在540-550nm處有光吸收,形成干擾外,由于胞內(nèi)物質(zhì)的釋放還可以引起一些物質(zhì)的濃度變化或副反應(yīng)。如紅細(xì)胞內(nèi)AST活性約為血清活性的40倍,ALT約7倍,LDH約180倍,因此溶血樣本測(cè)定ALT、LDH、AST結(jié)果均上升,同類(lèi)原理的項(xiàng)目還有CK、CKMB、HBDH。2021/6/2716另外,血紅素中Fe2+、胞內(nèi)VC、谷胱甘肽等能競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)體系中的氧化劑如H2O2,而Trinder反應(yīng)的終產(chǎn)物也是546波長(zhǎng)有最大吸收的紅色醌亞胺物質(zhì),因此這類(lèi)試劑干擾情況視溶血程度及方法學(xué)而定,如GLU-OX、TC(↑)、TG(↑)、UA(↓)。樣本本身的因素2021/6/2717樣本本身的因素黃疸:膽紅素在400-540nm處有吸收,遇到氧化劑可被氧化為膽綠素、膽褐素。如GLU-OX、TG、UA、TC等,由于膽紅素競(jìng)爭(zhēng)H2O2,結(jié)果常偏低。處理方式可以考慮加膽紅素氧化酶、稀釋。2021/6/27182

測(cè)試本身的因素2021/6/2719測(cè)試本身的因素重復(fù)性:部分項(xiàng)目,由于本身的靈敏度、儀器吸樣、光源穩(wěn)定性方面的原因,引起測(cè)試重復(fù)性不好,比如ALT、AST、UREA、LAP、DD等,我們通常考慮重測(cè)。2021/6/2720測(cè)試本身的因素曲線(xiàn)異常:原因可能較復(fù)雜,如吸樣(異物、氣泡)、攪拌(氣泡,攜帶物)、光源不穩(wěn)定、水質(zhì)、清洗系統(tǒng)、試劑等。。個(gè)別異常我們通常采取重測(cè)的方式,但大片出現(xiàn)時(shí),則應(yīng)檢查儀器各部位,把清洗、杯空白、光增益處理一次,再觀(guān)察結(jié)果,同時(shí)也考慮更換試劑進(jìn)行測(cè)定。2021/6/2721測(cè)試本身的因素定標(biāo)、質(zhì)控:每個(gè)項(xiàng)目,通過(guò)校準(zhǔn)品定標(biāo),定標(biāo)因子一般都穩(wěn)定在一段區(qū)間內(nèi),質(zhì)控也應(yīng)在控,這是測(cè)定臨床的基礎(chǔ)。質(zhì)控若有失控,應(yīng)先重測(cè)質(zhì)控,仍然失控時(shí)進(jìn)行定標(biāo),比對(duì)前后空白和因子看是否有改善。2021/6/2722原始曲線(xiàn)為黑色線(xiàn),方程式為:a:在校準(zhǔn)品濃度和吸光度不變的情況下,空白反應(yīng)度上升。b:空白反應(yīng)度度和校準(zhǔn)品反應(yīng)度均下降或校準(zhǔn)品濃度上升。ab2021/6/2723c:在校準(zhǔn)品濃度和吸光度不變的情況下,空白反應(yīng)度下降。d:空白反應(yīng)度度不變,校準(zhǔn)品反應(yīng)度上升或濃度下降。cd2021/6/2724a:QC1下降,QC2上升。b:QC1、QC2等差值上升。c:QC1上升,QC2下降。d:QC1、QC2等比值下降。2021/6/2725

表觀(guān)異常值32021/6/2726表觀(guān)異常值臨界值:大部分項(xiàng)目,在臨界值上,一般都會(huì)判斷為正常,主要是考慮到機(jī)體本身的差異性和不確定性,且并未超過(guò)危機(jī)值。即使是血糖這種國(guó)家規(guī)定了參考范圍的項(xiàng)目,也不能在一次體檢超過(guò)6.1時(shí)既判斷糖尿病。

2021/6/2727表觀(guān)異常值不明臨床判

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