(高清版)DB52∕T 1154-2016 流蘇石斛組培種苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

DB52DB52/T1154—2016流蘇石斛組培種苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程2016-11-08發(fā)布2017-05-08實施貴州省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I I 1 1 1 2 3 4 4 5 6 7 81流蘇石斛組培種苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了貴州省流蘇石斛種苗生產(chǎn)的術(shù)語、定義、組培件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB3095大氣環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)GB4285農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)GB5084農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)GB15618土壤環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)GB50073潔凈廠房設(shè)計規(guī)范3術(shù)語和定義本標(biāo)準(zhǔn)原植物符合《中國植物志》收載的蘭科(Orchidaceae)石斛屬(Dendrobium)多年生植物流2糖4.3.1蒴果選擇34.3.2消毒滅菌取流蘇石斛蒴果置超凈工作臺上用75%酒精浸泡的棉球檫蒴果表皮2次，無菌水沖洗2～3次，用吸培養(yǎng)室溫度應(yīng)控制在25±2℃;可根據(jù)培養(yǎng)物所需的最適宜溫度進行調(diào)節(jié)。培養(yǎng)室應(yīng)保持40～60%的空氣濕度。一般培養(yǎng)室光照強度應(yīng)控制在1500~30001x,可根據(jù)培養(yǎng)物的需光特性調(diào)整光照強度。工廠化生產(chǎn)時，為降低成本可考慮利用自然光照。4.5初代培養(yǎng)4.5.1初代培養(yǎng)基以MS改良培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基，添加馬鈴薯汁液2.0%,蔗糖2.0%,瓊脂0.65%,培養(yǎng)基滅4.5.2外植體的接種在超凈工作臺上，用無菌解剖刀將消毒處理好的蒴果切開，用無菌鑷子將種子接種在配制好的培養(yǎng)基表面。4.5.3繼代培養(yǎng)與增殖以1/2MS為基本培養(yǎng)基，添加馬鈴薯汁液2.0%,蔗糖2.0%,瓊脂0.65%,培養(yǎng)基滅菌前pH值為5.8;組培苗的不斷增殖通過周期性的繼代培養(yǎng)來實現(xiàn)，繼代培養(yǎng)時間3050d;繼代培養(yǎng)1～2次。4.5.4組培苗生根以1/2MS為基本培養(yǎng)基，添加香蕉泥2.0%,蔗糖2.0%,瓊脂0.65%,培養(yǎng)基滅菌前pH值為5.8;養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，采用生長素誘導(dǎo)組培苗5組培苗馴化5.1設(shè)施設(shè)備與選址5.1.1設(shè)施設(shè)備普通大棚，覆蓋單層薄膜、1～2層遮陽網(wǎng)、噴灌系統(tǒng)，鋼架苗床寬1.5m、高30～50cm,馴化基質(zhì)普通蒸煮。4馴化大棚建設(shè)靠近水源，光照充足，通風(fēng)良好。環(huán)5.5.1水分5.5.2施肥用于種植的苗應(yīng)不帶檢疫性病害，無污染、無爛莖、無爛根，葉片數(shù)4-6，夜色嫩綠或翠綠，5分級/項目莖粗(cm)株高(cm)葉片(片)根(條)8.1標(biāo)志6流蘇石斛DendrobiumfimbriatumHook爪，唇盤上表面密被短柔毛，近基部有1個腎形紫色7(資料性附錄)常用培養(yǎng)基成分表(單位：mg/L)曹孜義等381512注：資料來源《植物組織培養(yǎng)技術(shù)》(梁明勤，陳世昌，2013)8細(xì)胞分裂素先用少量0.5N～1.0N的鹽酸（HCl）溶解，促進細(xì)胞分裂與擴大，誘導(dǎo)芽的分化，促進側(cè)芽萌發(fā)生長，抑制頂端優(yōu)勢；常與生長素配合使用，用以調(diào)