紅樹土壤浸出液對(duì)海洋微藻的影響研究

.序言1.1研究意義及背景紅樹林作為生長(zhǎng)在熱帶和亞熱帶地區(qū)的主要濱海植被，與生態(tài)文明建設(shè)息息相關(guān)，提供著重要的生態(tài)系統(tǒng)和保護(hù)服務(wù)功能，具有高生產(chǎn)力、高分解率、高歸還率的特征，大量污染物通過(guò)多種路徑最終聚集到紅樹林，加上紅樹林的獨(dú)特環(huán)境因子，會(huì)從而加速了重金屬在紅樹林生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)的富集REF_Ref9724\w[1]。海洋生態(tài)系統(tǒng)中的重金屬的來(lái)源主要有三種途徑：大氣沉降、陸源輸入和天然源，并且陸源輸入是最常見的REF_Ref17907\w[3]REF_Ref17910\w[4]。但是目前的污水處理并不能有地徹底清除有害物質(zhì)，長(zhǎng)期的暴漏污染可能會(huì)對(duì)海洋生態(tài)系統(tǒng)造成不容忽視的威脅REF_Ref132669788\w[2]。海洋微藻是原始植物，是地球上最古老的生命之一，細(xì)胞內(nèi)具有葉綠素可以進(jìn)行光合作用產(chǎn)生氧氣，并且占全球氧氣的七成，在生態(tài)系統(tǒng)中是最重要的氧氣來(lái)源，同時(shí)在海洋生態(tài)系統(tǒng)中作為初級(jí)生產(chǎn)力的基礎(chǔ)，在物質(zhì)循環(huán)以及能量流動(dòng)環(huán)節(jié)中起著不可替代的作用REF_Ref19295\w[5]REF_Ref19311\w[6]，海洋微藻群落的動(dòng)態(tài)變化對(duì)海洋生態(tài)系統(tǒng)的平衡和穩(wěn)定具有重要意義。目前，紅樹林土壤浸出液對(duì)海洋微藻影響的相關(guān)研究相對(duì)較少，本研究探索紅樹林土壤浸出液對(duì)海洋微藻的影響作用，研究結(jié)果有利于對(duì)海洋微藻的保護(hù)提供有價(jià)值的數(shù)據(jù)。1.2國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展1.2.1紅樹林的重要性紅樹林生長(zhǎng)在熱帶、亞熱帶潮間帶特殊的植被類型，受到周期性潮水的濕地木本生物群落REF_Ref18671\w[7]，具有豐富的物種多樣性，蘊(yùn)含著大量豐富的生物資源，也為許多生物提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生存場(chǎng)所REF_Ref18671\w[7]REF_Ref20392\w[8]。在海洋生態(tài)系統(tǒng)中，紅樹林作為重要的生態(tài)系統(tǒng)起著至關(guān)重要的作用，包括維持沿岸環(huán)境的穩(wěn)定、保護(hù)海岸線免受海浪侵蝕、提供棲息地和食物來(lái)源等，是海洋生態(tài)系統(tǒng)不可或缺的一部分REF_Ref4713\w[9]。由于紅樹林所處的地理位置，使得紅樹林的生態(tài)環(huán)境受到海洋以及陸地的雙重影響，由于社會(huì)的快速發(fā)展以及人類的活動(dòng)加劇導(dǎo)致紅樹林土壤受到污染，并且污染物成分復(fù)雜,致使其環(huán)境壓力日益增加，尤其注意的是重金屬。因?yàn)橹亟饘倬哂卸拘浴㈦[蔽性和持久性，可能會(huì)對(duì)紅樹林濕地系統(tǒng)造成潛在風(fēng)險(xiǎn)，而那些還會(huì)進(jìn)入海洋生態(tài)系統(tǒng)，長(zhǎng)期累積會(huì)導(dǎo)致海洋生態(tài)系統(tǒng)中的一些生物遭受到危害REF_Ref5569\w[10]REF_Ref5572\w[11]。但對(duì)于良好的紅樹林生態(tài)系統(tǒng)，土壤中一些重金屬在低濃度是會(huì)促進(jìn)海洋生物的生長(zhǎng)。1.2.2紅樹林土壤浸出液對(duì)藻類的影響紅樹淡水土壤浸出液是紅樹林地區(qū)土壤中被降雨或灌溉水沖洗出來(lái)的液體，它含有豐富的有機(jī)物質(zhì)和無(wú)機(jī)鹽。研究發(fā)現(xiàn)，紅樹淡水土壤浸出液中含有大量的有機(jī)酸、重金屬以及無(wú)機(jī)鹽物質(zhì)，這些有機(jī)物質(zhì)和無(wú)機(jī)鹽的豐富組成為紅樹淡水土壤浸出液的特性特點(diǎn)之一。其中有機(jī)酸是紅樹土壤浸出液的重要組成部分，其中包括乙酸、丁酸、檸檬酸等多種有機(jī)酸。這些有機(jī)酸對(duì)海洋生態(tài)系統(tǒng)的影響很大，它們可以降低水體的pH值，影響海水中溶解氧的濃度，進(jìn)而影響海洋藻類的生長(zhǎng)和繁殖。有機(jī)酸還可以作為海洋生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)海洋生物的生長(zhǎng)發(fā)育。重金屬也是紅樹土壤浸出液的組成部分，Cd和Zn是兩種常見的重金屬元素，它們?cè)诩t樹淡水土壤浸出物中的濃度可能對(duì)海洋小球藻產(chǎn)生不同程度的影響。研究表明，Cd和Zn的高濃度會(huì)對(duì)海洋小球藻的生長(zhǎng)和代謝產(chǎn)生負(fù)面影響導(dǎo)致海洋生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定遭到破壞REF_Ref16387\w[15]，但同時(shí)在較低且適宜的濃度下重金屬又是一些海洋生長(zhǎng)必不可少的元素。總的來(lái)說(shuō)，紅樹淡水土壤浸出液的組成成分豐富多樣，它對(duì)海洋生態(tài)系統(tǒng)的影響既有積極的一面，又有負(fù)面的一面。因此，研究紅樹淡水土壤浸出液對(duì)海洋生態(tài)系統(tǒng)的影響，有助于我們更好地理解海洋生態(tài)系統(tǒng)的運(yùn)行機(jī)制，為海洋環(huán)境保護(hù)與管理提供科學(xué)依據(jù)REF_Ref14565\w[12]。1.2.3海洋小球藻的重要性海洋小球藻（Chlorellasp.）是一種單細(xì)胞藻，屬于綠藻門綠藻綱綠球藻目小球藻科REF_Ref15111\w[13]，海洋小球藻中富含多種營(yíng)養(yǎng)成分包括維生素、蛋白質(zhì)、類胡蘿卜素等。根據(jù)研究顯示，海洋小球藻是一種理想的蛋白質(zhì)資源REF_Ref15137\w[14]。海洋小球藻還可以吸收大氣中的二氧化碳，有助于減緩氣候變化的發(fā)展，不僅如此，小球藻還能減少水體中的氮和磷等營(yíng)養(yǎng)鹽，減少水體富營(yíng)養(yǎng)化的程度，保護(hù)海洋生態(tài)系統(tǒng)的平衡，在海洋生態(tài)系統(tǒng)中也扮演著重要的地球系統(tǒng)調(diào)節(jié)角色。海洋小球藻的細(xì)胞雖然結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，但它的功能具有多樣性。它們具有高度的生物多樣性，既可以單獨(dú)生長(zhǎng)，也可以形成大規(guī)模的海洋小球藻藻華。海洋小球藻在藻華中具有協(xié)同作用，通過(guò)共同生存和合作，提高了其在海洋生態(tài)系統(tǒng)中的適應(yīng)能力?？偟膩?lái)說(shuō)，海洋小球藻在海洋浮游植物中比例較大，對(duì)海洋生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定有著重要的作用。深入研究海洋小球藻的生態(tài)習(xí)性、分布情況和生物學(xué)特征，有助于更好地保護(hù)海洋生態(tài)環(huán)境，維護(hù)全球生態(tài)平衡1.3研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線1.3.1研究?jī)?nèi)容（1）選擇不同地區(qū)具有代表性的紅樹林區(qū)域開展研究：海南省儋州市春馬大橋紅樹林保護(hù)區(qū)、海南省三亞市青梅港紅樹林保護(hù)區(qū)。（2）探究不同地區(qū)紅樹林土壤浸出液的差異：通過(guò)鹽度、pH值、Zn、Cd等指標(biāo)來(lái)判斷不同地區(qū)土壤浸出液的特征，并探討深度的影響。（3）探究紅樹土壤浸出液對(duì)海洋小球藻的影響，通過(guò)測(cè)定藻液OD680判斷土壤浸出液對(duì)海洋小球藻生長(zhǎng)狀況的影響。1.3.2技術(shù)路線2實(shí)驗(yàn)材料與儀器2.1紅樹林土壤紅樹林土壤取自海南省儋州市春馬大橋紅樹林保護(hù)區(qū)、海南省三亞市青梅港紅樹林保護(hù)區(qū)2.2實(shí)驗(yàn)試劑表1材料與試劑試劑名稱生產(chǎn)商鹽酸（分析純）阿拉丁生化科技公司鋅Zn單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心鎘Cd單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心2.3培養(yǎng)基表2海水培養(yǎng)基（F/2培養(yǎng)基）營(yíng)養(yǎng)鹽化學(xué)藥品母液含量氮NaNO375g/L磷NaH2PO4·2H2O5.62g/L硅NaSi2O3·9H2O30g/L微量1Na2EDTA4.36g/LFeCl3·6H2O3.15g/L微量2CuSO4·5H2O0.0098g/LZnSO4·7H2O0.022g/LCoCl2·6H2O0.01g/LMnCl2·4H2O0.18g/L維生素1VitaminB10.1g/L維生素2VitaminB120.0005g/LVitaminH0.0005g/L2.4實(shí)驗(yàn)器材與儀器實(shí)驗(yàn)器材：三角燒瓶、封口膜、橡皮筋、玻璃棒、稱量紙、一次性過(guò)濾膜、針管、移液槍、離心管。表3設(shè)備與儀器儀器名稱型號(hào)廠家智能人工氣候箱HP250GS武漢瑞華儀器設(shè)備有限公司電子天平PX223ZH/E奧豪斯（常州）有限公司紫外可見分光光度計(jì)T6新世紀(jì)北京譜析通用儀器有限公司光學(xué)顯微鏡CX21FXS1奧林巴斯（中國(guó)）有限公司離心機(jī)TDZ5湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器有限公司高壓蒸汽滅菌鍋GR85DA致微（廈門）儀器有限公司鹽度計(jì)LS10T廣州市速為電子科技有限公司-20℃冰箱BCD-192MT康佳集團(tuán)股份有限原子吸收光譜儀NovAA350德國(guó)耶拿分析儀器股份公司隔膜真空泵GM-0.33Ⅱ天津市津騰實(shí)驗(yàn)有限公司3實(shí)驗(yàn)步驟3.1紅樹土壤采集與浸出液制備分別于2023年7月25日和7月26日在海南省儋州市春馬大橋和海南省三亞市青梅港紅樹林保護(hù)區(qū)選取合適的地點(diǎn)，用采樣器采集兩個(gè)地區(qū)四個(gè)深度的土樣（分別為0~5cm、5~10cm、10~15cm、15~20cm），分別裝在潔凈的自封袋中，同一地區(qū)四種深度的土樣放在一個(gè)大的自封袋中，在袋子上作好記錄，帶回實(shí)驗(yàn)室后，進(jìn)行零下20°冷凍處理。取冷凍的土樣首先解凍成常溫狀態(tài)下的土壤，用電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱烘干后進(jìn)行研磨過(guò)篩，用去離子水作為溶劑，取每種土樣100g分別置于三角瓶?jī)?nèi)，加無(wú)菌水300mL，在25℃下144r/min振蕩24h，靜置48h，首先用濾紙進(jìn)行初步過(guò)濾，然后在超凈工作臺(tái)內(nèi)經(jīng)0.22μm的濾膜過(guò)濾于三角燒瓶中。在三角燒瓶上標(biāo)記好土壤來(lái)源，觀察每組土壤顏色、渾濁度等的不同，做好記錄。3.2土壤浸出液pH值、鹽度pH測(cè)定：取制備好的土壤浸出液加入15mL離心管中，利用電子pH計(jì)測(cè)定樣品pH值，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)量3次，求取平均值作為最終pH值。鹽度測(cè)定：每種樣品取5mL使用鹽度計(jì)測(cè)量紅樹林土壤浸出液的鹽度，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)量3次，求取平均值作為最終鹽度。3.3土壤浸出液重金屬Zn以及Cd的測(cè)定首先配置Zn以及Cd的校正標(biāo)準(zhǔn)溶液。Zn的校正標(biāo)準(zhǔn)溶液：用1000μg/mL的Zn標(biāo)準(zhǔn)樣品稀釋成1μg/mL、2μg/mL、3μg/mL、4μg/mL、5μg/mL的校正標(biāo)準(zhǔn)溶液，首先計(jì)算出配置最高濃度的校正標(biāo)準(zhǔn)液，需要取250μL標(biāo)準(zhǔn)樣品于50mL容量瓶中，加入1mL鹽酸，最后用去離子水定容至容量瓶刻度線處。再逐級(jí)稀釋配置較低濃度的校正標(biāo)準(zhǔn)溶液。Cd的校正標(biāo)準(zhǔn)溶液：用1000μg/mL的Cd標(biāo)準(zhǔn)樣品稀釋成0.2μg/mL、0.4μg/mL、0.6μg/mL、0.8μg/mL、1.0μg/mL的校正標(biāo)準(zhǔn)溶液，首先計(jì)算出配置最高濃度的校正標(biāo)準(zhǔn)液需要50μL標(biāo)準(zhǔn)樣品于50mL容量瓶中，加入1mL鹽酸，用去離子水定容至刻度線。再逐級(jí)稀釋配置較低濃度的校正標(biāo)準(zhǔn)溶液。（1）然后用原子光譜吸收儀進(jìn)行土壤浸出液的測(cè)定，原子光譜吸收儀的使用方法如下：在使用原子吸收光譜儀前，需要進(jìn)行儀器的預(yù)熱和波長(zhǎng)調(diào)整。預(yù)熱時(shí)間一般為30分鐘至1小時(shí)，以保證儀器達(dá)到穩(wěn)定的工作狀態(tài)。（2）波長(zhǎng)調(diào)整到Zn以及Cd的特定波長(zhǎng)，以保證測(cè)定的準(zhǔn)確性。（3）在測(cè)定過(guò)程中，將土壤浸出液注入原子吸收光譜儀的樣品室中，通過(guò)霧化器將樣品轉(zhuǎn)化為氣溶膠狀態(tài)，然后在火焰或石墨爐中原子化。（4）當(dāng)特定波長(zhǎng)的光通過(guò)原子化后的樣品時(shí)，樣品中的重金屬原子會(huì)吸收光能，進(jìn)而產(chǎn)生吸收光譜。（5）通過(guò)測(cè)量吸收光譜的強(qiáng)度，可以得出樣品中重金屬Cd和Zn的含量。（6）根據(jù)吸光度和濃度的關(guān)系，可以得出校正標(biāo)準(zhǔn)曲線，用土壤浸出液的吸光度與校正標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較后得出樣品中Zn和Cd的濃度。3.4海洋小球藻的培養(yǎng)本實(shí)驗(yàn)選用海洋小球藻藻由上海光語(yǔ)生物科技有限公司提供。實(shí)驗(yàn)所使用的海水通過(guò)0.25μm濾膜過(guò)濾并滅菌后待用，在滅過(guò)菌的海水中按比例加入配置F/2培養(yǎng)基所需要的物質(zhì)，在超凈工作臺(tái)中將海洋小球藻接種到已經(jīng)滅過(guò)菌的三角燒瓶中REF_Ref17184\w[16]，將恒溫培養(yǎng)箱溫度設(shè)置為25℃，明暗周期為12h：12h，光照強(qiáng)度為6000lx，將海洋小球藻放置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)至藻液生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期后重復(fù)上述步驟繼續(xù)培養(yǎng)，反復(fù)接種傳代3~5次后，在顯微鏡下觀察直至沒有其他雜質(zhì)后留樣進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。在培養(yǎng)藻液時(shí)，為了防止微藻黏附到瓶壁上，需要每天搖晃培養(yǎng)瓶。3.4.1藻細(xì)胞計(jì)數(shù)充分搖勻海洋小球藻藻藻液，用計(jì)數(shù)框?yàn)?6×25的血球計(jì)數(shù)板在400×400顯微鏡下計(jì)數(shù)．每個(gè)樣品計(jì)數(shù)兩次，兩次誤差在15%以上重復(fù)計(jì)數(shù)，求四次的平均數(shù)，將藻液稀釋為1×10^6cells/mL的藻液，進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。3.5土壤浸出液對(duì)海洋小球藻生長(zhǎng)的影響實(shí)驗(yàn)3.5.1土壤浸出液對(duì)海洋小球藻的培養(yǎng)為了研究紅樹土壤浸出液對(duì)海洋小球藻生長(zhǎng)的影響，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行操作，實(shí)驗(yàn)組加入紅樹土壤浸出液75ml、藻液75ml于三角燒瓶中，對(duì)照組則加入等量的已經(jīng)滅菌的海水75ml，同樣的藻液75ml于三角燒瓶中，共8組實(shí)驗(yàn)組和1組對(duì)照組，每組設(shè)置三個(gè)平行樣，以減小實(shí)驗(yàn)誤差，放置在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，等到第五天停止培養(yǎng)，對(duì)藻液進(jìn)行Zn、Cd含量的測(cè)定以及測(cè)量藻液吸光度。3.5.2土壤浸出液培養(yǎng)小球藻的重金屬測(cè)定在超凈工作臺(tái)中，取對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組每個(gè)平行樣藻液各10mL于離心管中，5000rpm，離心15min，取上清液進(jìn)行用原子光譜吸收儀進(jìn)行土壤浸出液的測(cè)定，配置Zn、Cd的校正標(biāo)準(zhǔn)液的方法以及原子光譜吸收儀的使用方法同上。3.5.3土壤浸出液培養(yǎng)小球藻的吸光度測(cè)定使用紫外可見分光度計(jì)和比色皿（光徑為1.0cm）測(cè)定藻液光密度OD680值來(lái)觀察藻液生長(zhǎng)率。首先將每組藻液混勻后靜置幾分鐘，讓死亡的小球藻沉到三角燒瓶底部，用移液槍取中部的藻液至比色皿中加滿，使用紫外可見分光度計(jì)測(cè)量在680nm處藻液的吸光度，做好記錄。3.6數(shù)據(jù)處理與分析實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，我們收集并整理了所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，包括OD680值、pH值、鹽度、重金屬Zn和Cd的含量等。為了更直觀地了解紅樹土壤浸出液對(duì)海洋小球藻生長(zhǎng)的影響，我們利用Excel和Oringin等軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行了處理和分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析4.1土壤浸出液的分析4.1.1土壤浸出液的顏色圖1春馬大橋土壤浸出液顏色依次為0-5cm、5-10cm、10-15cm、15-20cm深度）圖1春馬大橋土壤浸出液顏色依次為0-5cm、5-10cm、10-15cm、15-20cm深度） 圖2青梅港土壤浸出液顏色依次為0-5cm、5-10cm、10-15cm、15-20cm深度）圖2青梅港土壤浸出液顏色依次為0-5cm、5-10cm、10-15cm、15-20cm深度）制備土壤浸出液得到圖1和圖2,觀察圖1和圖2土壤浸出液的顏色存在一定的差異，由圖可以得出隨著土壤深度的增加，土壤浸出液的透明度增加，土壤浸出液的顏色逐漸變淺，春馬大橋以及青梅港兩個(gè)地區(qū)均呈現(xiàn)這個(gè)規(guī)律。4.1.2土壤浸出液的鹽度圖4青梅港紅樹林土壤浸出液的鹽度值圖3春馬大橋紅樹林土壤浸出液的鹽度值圖4青梅港紅樹林土壤浸出液的鹽度值圖3春馬大橋紅樹林土壤浸出液的鹽度值值將制備好的土壤浸出液進(jìn)行鹽度測(cè)定，得到圖3和圖4，對(duì)比分析得到在同一地區(qū)的紅樹林土壤在0-20cm的深度中，土壤深度越深，浸出液的鹽度較高，不同地區(qū)間的土壤的鹽度存在差異。4.1.3土壤浸出液的pH值圖5土壤浸出液的pH值圖5土壤浸出液的pH值用pH計(jì)測(cè)得兩個(gè)地區(qū)的pH值如圖5所示，春馬大橋以及青梅港紅樹林土壤浸出液不同深度的pH值，兩個(gè)地區(qū)土壤的pH值較為接近，且在0-20cm深度中pH值變化很小。4.1.4土壤浸出液中重金屬的含量圖6春馬大橋紅樹林土壤浸出液Zn含量圖7青梅港紅樹林土壤浸出液Zn含量圖6春馬大橋紅樹林土壤浸出液Zn含量圖7青梅港紅樹林土壤浸出液Zn含量圖8春馬大橋紅樹林土壤浸出液Cd含量圖9青梅港紅樹林土壤浸出液Cd含量圖8春馬大橋紅樹林土壤浸出液Cd含量圖9青梅港紅樹林土壤浸出液Cd含量根據(jù)圖6-9，得出兩個(gè)地區(qū)土壤浸出液中重金屬Zn的含量均高于Cd的含量。春馬大橋紅樹林不同深度的土壤浸出液中Zn以及Cd的含量差別不大，無(wú)明顯規(guī)律，青梅港紅樹林不同深度的土壤浸出液中Zn以及Cd的含量有細(xì)微差別，其中Zn含量最高的深度為5-10cm，Cd的含量隨深度增加而增加。4.2土壤浸出液對(duì)海洋小球藻生長(zhǎng)的影響4.2.1培養(yǎng)小球藻之后土壤浸出液的重金屬含量圖10春馬大橋紅樹林圖10春馬大橋紅樹林圖11青梅港紅樹林培養(yǎng)小球藻后土壤浸出液Zn含量培養(yǎng)小球藻后土壤浸出液Zn含量圖12春馬大橋紅樹林圖13青梅港紅樹林圖12春馬大橋紅樹林圖13青梅港紅樹林培養(yǎng)小球藻后土壤浸出液Cd含量培養(yǎng)小球藻后土壤浸出液Cd含量根據(jù)圖10-13與圖6-9的Zn以及Cd含量對(duì)比可知兩者數(shù)值均降低，表明小球藻生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)吸收Z(yǔ)n以及Cd，且兩個(gè)地區(qū)土壤浸出液培養(yǎng)的小球藻吸收Z(yǔ)n、Cd的規(guī)律有所不同，青梅港地區(qū)土壤深度越深小球藻所吸收的Zn和Cd越少，春馬大橋地區(qū)0-15cm的Zn吸收呈現(xiàn)此規(guī)律，總體上看春馬大橋地區(qū)15-20cm處的土壤浸出液培養(yǎng)小球藻對(duì)這兩種金屬的吸收規(guī)律與0-15cm深度的對(duì)比較為特殊。4.2.2小球藻吸附的金屬含量圖14春馬大橋紅樹林圖15青梅港紅樹林圖14春馬大橋紅樹林圖15青梅港紅樹林小球藻生長(zhǎng)吸附Zn的含量小球藻生長(zhǎng)吸附Zn的含量圖16春馬大橋紅樹林圖17青梅港紅樹林小球藻生長(zhǎng)吸附Cd的含量小球藻生長(zhǎng)吸附Cd的含量圖16春馬大橋紅樹林圖17青梅港紅樹林小球藻生長(zhǎng)吸附Cd的含量小球藻生長(zhǎng)吸附Cd的含量由圖14-17可得小球藻生長(zhǎng)過(guò)程中所吸附的Zn以及Cd的含量，小球藻對(duì)于金屬Zn的吸附量比對(duì)Cd的吸附量大，與圖6-9土壤浸出液中金屬原有的含量對(duì)比可以計(jì)算出小球藻對(duì)Zn和Cd的吸附率。表4春馬大橋紅樹土壤浸出液培養(yǎng)的小球藻對(duì)Zn和Cd的吸附率春馬大橋紅樹林深度（cm）Zn吸附率（％）Cd吸附率（％）0-599.073.65-1087.973.610-1582.971.615-2086.849.9表5青梅港紅樹土壤浸出液培養(yǎng)的小球藻對(duì)Zn和Cd的吸附率青梅港紅樹林深度（cm）Zn吸附率（％）Cd吸附率（％）0-579.865.05-1080.834.310-1576.141.215-2068.337.8兩個(gè)地區(qū)小球藻對(duì)Zn以及Cd的吸附率規(guī)律相同，都為Zn的吸附率＞Cd的吸附率，兩個(gè)地區(qū)之間Zn和Cd的吸附率差別較大，并且春馬大橋紅樹林地區(qū)土壤浸出液培養(yǎng)的小球藻對(duì)兩種金屬的吸附率都大于青梅港地區(qū)的。4.2.3測(cè)定土壤浸出液培養(yǎng)小球藻的OD680值的結(jié)果圖18春馬大橋土壤浸出液培養(yǎng)小球藻的生長(zhǎng)情況圖18春馬大橋土壤浸出液培養(yǎng)小球藻的生長(zhǎng)情況圖19青梅港土壤浸出液培養(yǎng)小球藻的生長(zhǎng)情況圖19青梅港土壤浸出液培養(yǎng)小球藻的生長(zhǎng)情況空白對(duì)照組海水培養(yǎng)的小球藻測(cè)得藻液的OD680值為2.084，根據(jù)圖18和圖19可知用兩個(gè)地區(qū)的土壤浸出液培養(yǎng)的小球藻的OD680值均比2.084大，從而可以得出總體上用土壤浸出液培養(yǎng)小球藻可以促進(jìn)其生長(zhǎng)。4.2.4小球藻吸附Zn和Cd的含量與OD680值的Pearson相關(guān)性表6春馬大橋土壤浸出液中小球藻吸附的Zn和Cd的含量與OD680的相關(guān)性O(shè)D680值Zn含量Cd含量OD68010.5270.382Zn含量10.154Cd含量1表7青梅港土壤浸出液中小球藻吸附Zn和Cd的含量與OD680的相關(guān)性O(shè)D680值Zn含量Cd含量OD68010.762**-0.625*Zn含量1-0.348Cd含量1注：**在0.01級(jí)別（雙尾），相關(guān)性顯著；*在0.05級(jí)別（雙尾），相關(guān)性顯著。由表6和表7結(jié)果所示，用春馬大橋紅樹林土壤浸出液培養(yǎng)的小球藻的OD680值與所吸附的Zn含量存在一定的正相關(guān)性，但與吸附的Cd的含量不存在相關(guān)性。而青梅港紅樹林土壤浸出液培養(yǎng)小球藻的OD680值與吸附的Zn含量呈現(xiàn)顯著正相關(guān)性，當(dāng)所吸附的Zn含量增加，OD680值也隨之增大，吸附的Cd含量呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)性，當(dāng)所吸附的Cd含量增加，OD680值也隨之減小。5結(jié)論根據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以明顯看出紅樹土壤浸出液對(duì)海洋小球藻的生長(zhǎng)具有顯著影響。我們可以發(fā)現(xiàn)紅樹林土壤浸出液的顏色、鹽度以及重金屬含量均存在一定的差異。這些差異可能會(huì)對(duì)海洋小球藻的生長(zhǎng)產(chǎn)生影響。首先，從土壤浸出液的顏色來(lái)看，隨著土壤深度的增加，浸出液的透明度增加。這可能是由于隨著土壤深度的增加，土壤中的有機(jī)物和其他色素物質(zhì)逐漸減少，使得浸出液的顏色變得更清澈。而這種顏色的變化可能會(huì)影響藻類的光合作用，從而影響其生長(zhǎng)。其次，從土壤浸出液的鹽度來(lái)看，同一地區(qū)的紅樹林土壤在0-20cm的深度中，土壤深度越深，浸出液的鹽度較高，這種鹽度的變化可能會(huì)影響藻類的滲透壓平衡，從而影響其生長(zhǎng)和代謝。在重金屬含量方面，我們發(fā)現(xiàn)土壤浸出液中的Zn和Cd含量較高，但經(jīng)過(guò)小球藻吸收后，含量均有所降低。這表明小球藻在生長(zhǎng)過(guò)程中能夠吸收并利用這些重金屬元素，從而可能具有一定的重金屬耐受性和富集能力，并且在同一地區(qū)Zn被吸附量要大于Cd被吸附量，此外，我們還發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)、不同深度的土壤浸出液培養(yǎng)的小球藻對(duì)重金屬的吸收規(guī)律有所不同，這可能與土壤浸出液中的其他成分以及小球藻的生理特性有關(guān)。通過(guò)對(duì)比實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的的OD680值，我們發(fā)現(xiàn)用土壤浸出液培養(yǎng)的小球藻生長(zhǎng)狀況普遍優(yōu)于空白對(duì)照組。這說(shuō)明土壤浸出液中可能含有一些促進(jìn)小球藻生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或微量元素。同時(shí)，我們也注意到，不同地區(qū)的土壤浸出液對(duì)小球藻生長(zhǎng)的影響程度有所不同，這可能與土壤本身的性質(zhì)以及環(huán)境因素有關(guān)。通過(guò)小球藻吸附Zn和Cd的含量與OD680值的Pearson相關(guān)性結(jié)果分析，可得土壤浸出液中鋅是會(huì)被釋放出來(lái)的一類重要金屬，也是小球藻生長(zhǎng)一種必需元素，低濃度的Zn可以促進(jìn)小球藻的生長(zhǎng)，而土壤浸出液中的Cd有毒性對(duì)小球藻可能會(huì)有抑制效果，但土壤浸出液中含量較少，相對(duì)于Zn的吸收較少，沒有起到很強(qiáng)的抑制作用。然而，不同地區(qū)的土壤浸出液對(duì)小球藻生長(zhǎng)的影響程度可能存在差異。這可能是由于不同地區(qū)土壤浸出液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和微量元素的種類和含量不同所致。6展望本實(shí)驗(yàn)通過(guò)制備紅樹林土壤浸出液并研究其對(duì)海洋小球藻生長(zhǎng)的影響，發(fā)現(xiàn)土壤浸出液中的顏色、鹽度和重金屬含量均可能對(duì)藻類的生長(zhǎng)產(chǎn)生影響。同時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明總體上用土壤浸出液培養(yǎng)小球藻可以促進(jìn)其生長(zhǎng)。然而，不同地區(qū)、不同深度的土壤浸出液對(duì)藻類生長(zhǎng)的影響程度可能存在差異。為了更深入地了解紅樹土壤浸出液對(duì)海洋小球藻生長(zhǎng)的影響機(jī)制，未來(lái)的研究可以從以下幾個(gè)方面展開：首先，可以進(jìn)一步分析不同地區(qū)、不同深度的土壤浸出液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和微量元素的種類和含量；其次，可以研究不同濃度的土壤浸出液對(duì)藻類生長(zhǎng)的影響；最后，可以探討紅樹林土壤浸出液中的重金屬對(duì)藻類生長(zhǎng)的影響機(jī)制及其生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。此外，紅樹林作為一種重要的濕地生態(tài)系統(tǒng)，在維護(hù)海洋生態(tài)平衡和生物多樣性方面發(fā)揮著重要作用。因此，未來(lái)的研究還可以關(guān)注紅樹林生態(tài)系統(tǒng)的保護(hù)和恢復(fù)，以及如何通過(guò)合理利用紅樹林資源來(lái)促進(jìn)海洋生態(tài)的可持續(xù)發(fā)展。參考文獻(xiàn)劉景春,嚴(yán)重玲.福建漳江口紅樹林濕地沉積物中四種重金屬的空間分布特征[J].亞熱帶植物科學(xué),2006,(04):1-5.Sánchez-Quiles

D,

Tovar-Sánchez

A.

Are

sunscreensa

newenvironmentalriskassociatedwithcoastaltourism?[J].Environment

International,

2015,

83:

158-170.LIRY,LIRL,CHAIM,etal.HeavymetalcontaminationandecologicalriskinFutianmangroveforestsedimentinShenzhenBay,SouthChina[J].MarinePollutionBulletin,2015,101(1):448–456.熊慧,楊麗虹,鄧永智.福建省安海灣、圍頭灣海域表層沉積物重金屬含量分布特征及潛在生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)[J].應(yīng)用海洋學(xué)學(xué)報(bào),2019,38(1):68–74.CaiZP,DuanSS,WeiW.DarknessandUVradiationprovokedcompensatorygrowthinmarinephytoplanktonPhaeodactylumtricornutum(Bacillariophyceae)[J].AquacultureResearch,2009,40(13):1559-1562.CaiZP,HuangWW,AnM,DuanSS.Coupledeffectsofirradianceandirononthegrowthofaharmfulalgalbloom-causingmicroalgaScrippsiellatrochoidea[J].ActaEcologicaSinica,2009,29