DB32T-傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范 第8部分：標(biāo)本的采集、保存和運(yùn)輸

Q/LB.□XXXXX-XXXXDB32/TXXXX—XXXX目次TOC\o"1-1"\h前言 II引言 III1范圍 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14生物安全要求 15采集前準(zhǔn)備 26標(biāo)本采集 37標(biāo)本保存、運(yùn)輸和交接 3附錄A（資料性）各癥候群對(duì)應(yīng)病原體及標(biāo)本類型 5附錄B（資料性）標(biāo)本采集方法 7前言本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件是DB32/TXXX《傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范》的第8部分。DB32/TXXX已經(jīng)發(fā)布了以下部分：——第1部分：監(jiān)測(cè)預(yù)警；——第2部分：事件報(bào)告和管理；——第3部分：風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估；——第4部分：現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查；——第5部分：恢復(fù)評(píng)估；——第6部分：應(yīng)急消毒處置及應(yīng)急人員個(gè)人防護(hù)；——第7部分：媒介生物應(yīng)急監(jiān)測(cè)、評(píng)估與控制；——第8部分：標(biāo)本的采集、保存和運(yùn)輸；——第9部分：應(yīng)急檢測(cè)流程；——第10部分：病毒類應(yīng)急檢測(cè)技術(shù)；——第11部分：細(xì)菌類應(yīng)急檢測(cè)技術(shù)。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由江蘇省衛(wèi)生健康委員會(huì)提出并組織實(shí)施。本文件由江蘇省衛(wèi)生健康標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本文件起草單位：江蘇省疾病預(yù)防控制中心、東部戰(zhàn)區(qū)疾病預(yù)防控制中心。本文件主要起草人：王慎驕、張錦海、樊歡、呂恒、朱寶立、談忠鳴、付建光、鄧斐、孔筱筱、田華、彭杰夫、崔侖標(biāo)。引言傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件是公共衛(wèi)生安全的主要威脅，對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)和人群健康存在巨大影響。本文件為貫徹落實(shí)《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》《中華人民共和國(guó)突發(fā)事件應(yīng)對(duì)法》《突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例》等法律法規(guī)對(duì)傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件的應(yīng)急處置要求，提升江蘇省傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件的應(yīng)急處置能力，保障人民群眾的生命安全和社會(huì)穩(wěn)定而制定。DB32/TXXX《傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范》擬由十一個(gè)部分構(gòu)成：——第1部分：監(jiān)測(cè)預(yù)警；——第2部分：事件報(bào)告和管理；——第3部分：風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估；——第4部分：現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查；——第5部分：恢復(fù)評(píng)估；——第6部分：應(yīng)急消毒處置及應(yīng)急人員個(gè)人防護(hù)；——第7部分：媒介生物應(yīng)急監(jiān)測(cè)、評(píng)估與控制；——第8部分：標(biāo)本的采集、保存和運(yùn)輸；——第9部分：應(yīng)急檢測(cè)流程；——第10部分：病毒類應(yīng)急檢測(cè)技術(shù)；——第11部分：細(xì)菌類應(yīng)急檢測(cè)技術(shù)。DB32/TXXX的制定是對(duì)傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件處置工作相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的有力補(bǔ)充，為開展傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件的監(jiān)測(cè)預(yù)警、報(bào)告和管理、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查、恢復(fù)評(píng)估、應(yīng)急消毒處置和個(gè)人防護(hù)、媒介生物的應(yīng)急監(jiān)測(cè)評(píng)估與控制、標(biāo)本的采集和檢測(cè)等應(yīng)急處置工作提供有力的科學(xué)依據(jù)和技術(shù)支撐，對(duì)保障公眾健康和公共衛(wèi)生安全具有重要意義。傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范第8部分：標(biāo)本的采集、保存和運(yùn)輸范圍本文件規(guī)定了傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置中微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的生物安全要求、標(biāo)本采集前準(zhǔn)備、標(biāo)本采集、標(biāo)本的保存、運(yùn)輸和交接的技術(shù)要求。本文件適用于各級(jí)疾控機(jī)構(gòu)和醫(yī)療機(jī)構(gòu)在傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件中開展標(biāo)本的采集、保存和運(yùn)輸。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用標(biāo)準(zhǔn)GB/T5750-2023生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法WS233-2017病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則WS/T640-2018臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的采集和轉(zhuǎn)運(yùn)WS/T799-2022污水中新型冠狀病毒富集濃縮和核酸檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)Doc9284危險(xiǎn)物品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。生物安全要求個(gè)人防護(hù)4.1.1實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)根據(jù)GB19489和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的要求，配備不同類型傳染病感染的個(gè)人防護(hù)裝備，包括但不限于防護(hù)服、手套、外科口罩或醫(yī)用防護(hù)口罩、防護(hù)面屏、防護(hù)帽。4.1.2個(gè)人防護(hù)裝備宜每隔4h更換一次。在發(fā)生意外暴露時(shí)，根據(jù)應(yīng)急處置預(yù)案采取必要措施。4.1.3采樣人員、采樣場(chǎng)所、感染性標(biāo)本處置及消毒滅菌應(yīng)符合WS233-2017中的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理要求。廢棄物處理4.2.1標(biāo)本采集過程中產(chǎn)生的醫(yī)療廢物，包括且不限于一次性使用后廢棄的醫(yī)療器械、個(gè)人防護(hù)用品和被患者血液、體液、排泄物污染的廢棄物，將上述醫(yī)療廢棄物除銳器外密封收集于醫(yī)療廢物包裝袋中，銳器需置于銳器桶中，再放入另一層醫(yī)療廢物包裝袋進(jìn)行雙層包裝。4.2.2廢棄物密閉后用含有效氯2000mg/L的消毒液對(duì)醫(yī)療廢棄物包裝袋外表面噴灑消毒，消毒后移交醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)或醫(yī)療廢物集中處置單位進(jìn)行集中處置。4.2.3工作人員全程做好防護(hù)，在處理完醫(yī)療廢棄物后應(yīng)立即采用75%酒精或速干型手消毒劑進(jìn)行手消毒，并采用含有效氯2000mg/L的消毒液對(duì)采樣場(chǎng)所進(jìn)行噴灑消毒。廢棄物處理應(yīng)有書面記錄并存檔。標(biāo)本包裝參考《人間傳染的病原微生物目錄》、WS233-2017和Doc9284的要求選擇合適的標(biāo)本包裝容器。航空運(yùn)輸標(biāo)本，應(yīng)視情況粘貼Doc9284中6.2項(xiàng)危險(xiǎn)品標(biāo)簽。陸路運(yùn)輸標(biāo)本包裝標(biāo)簽和標(biāo)記可參照航空運(yùn)檢要求。采集前準(zhǔn)備標(biāo)本采集方案制定標(biāo)本采集機(jī)構(gòu)應(yīng)有用于處理標(biāo)本采集請(qǐng)求的程序，該程序包括書面和口頭采樣要求，根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查納入疑似病例，篩選符合五大癥候群采樣要求的對(duì)象進(jìn)行采樣，標(biāo)本采樣方案流程圖見圖1。圖1標(biāo)本采樣方案流程圖標(biāo)本采集前應(yīng)該明確以下內(nèi)容：a)根據(jù)流行病學(xué)特征初步懷疑病原方向，擬定檢測(cè)項(xiàng)目。b)標(biāo)本類型。c)采集方法。d)標(biāo)本采集轉(zhuǎn)運(yùn)所需要的耗材、裝置/容器和轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基。e)轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)限、儲(chǔ)存條件。根據(jù)初步檢測(cè)結(jié)果，如有需要可根據(jù)病原體種類對(duì)病毒或者細(xì)菌采用特殊培養(yǎng)基或采樣液進(jìn)行針對(duì)性采樣，以進(jìn)一步明確病原體。對(duì)采樣信息進(jìn)行收集整理，包括不限于：標(biāo)本名稱、標(biāo)本類型、標(biāo)本采集日期和時(shí)間、病例姓名、病例性別、病例年齡或出生日期、臨床診斷及主要臨床表現(xiàn)、采樣單位、采樣單位聯(lián)系人及聯(lián)系方式、檢驗(yàn)項(xiàng)目和病例聯(lián)系電話(適用時(shí))。采樣機(jī)構(gòu)應(yīng)有標(biāo)本采集方法、采樣信息填報(bào)、預(yù)防和控制感染、記錄任何偏差的程序，有發(fā)生生物安全意外事故（如采集咽拭子時(shí)發(fā)生受檢者嘔吐、采集標(biāo)本時(shí)發(fā)生噴濺）的應(yīng)急處置程序和應(yīng)急演練；采樣機(jī)構(gòu)應(yīng)按照程序要求備齊標(biāo)本采集材料。標(biāo)本采集一般要求從事標(biāo)本采集的技術(shù)人員應(yīng)具備相應(yīng)的采樣技能并經(jīng)過生物安全培訓(xùn)。宜在發(fā)病早期和抗生素/抗病毒藥物使用前采集標(biāo)本。針對(duì)不同病原體采用相應(yīng)標(biāo)本的保存液。對(duì)已使用了抗生素/抗病毒藥物的患者，采集后的標(biāo)本宜使用相關(guān)的中和液進(jìn)行處理。根據(jù)癥候群和檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)合患者病程的不同階段采集不同標(biāo)本。對(duì)于血液、腦脊液、胸腔積液、腹水、組織活檢和尸檢標(biāo)本的采集,應(yīng)無菌操作。標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)對(duì)標(biāo)本信息進(jìn)行登記并填寫樣品送檢單。應(yīng)使用可靠的標(biāo)記方法，包括但不限于耐凍記號(hào)筆、耐凍標(biāo)簽。標(biāo)識(shí)內(nèi)容具有唯一性并與采樣記錄表格一一對(duì)應(yīng)。標(biāo)本類型基于癥候群的病原體快速篩查方法確定采集標(biāo)本類型。各癥候群主要病原體及需要采集的標(biāo)本見附錄A中表A.1。標(biāo)本采集方法各標(biāo)本采集方法注意事項(xiàng)見附錄中表B.1。標(biāo)本保存、運(yùn)輸和交接保存運(yùn)輸根據(jù)病例流行病學(xué)特征進(jìn)行標(biāo)本采集前，應(yīng)當(dāng)明確某些特殊病原體的保存和轉(zhuǎn)運(yùn)方法，以保證采樣人員和標(biāo)本運(yùn)送人員能獲得有關(guān)標(biāo)本的準(zhǔn)確信息。標(biāo)本的保存和運(yùn)輸應(yīng)由經(jīng)過培訓(xùn)的專人負(fù)責(zé)。提前評(píng)估劇烈震蕩和溫度對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的影響，并采取干預(yù)措施。標(biāo)本采集后，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)運(yùn)達(dá)實(shí)驗(yàn)室，并盡可能縮短轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間。用于細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)本：a)用于普通細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)本宜在2h內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。若轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間超過2h，宜使用轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基轉(zhuǎn)運(yùn)；用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本室溫下保存不能超過24h；用于血培養(yǎng)的標(biāo)本不能冷藏轉(zhuǎn)運(yùn)；僅用于分子診斷的標(biāo)本，宜冷藏或冷凍保存（-70℃以下最佳，避免反復(fù)凍融）。b)對(duì)環(huán)境敏感的細(xì)菌標(biāo)本采集后立即送檢。對(duì)周圍環(huán)境敏感的細(xì)菌包括但不限于百日咳鮑特菌、志賀菌屬、淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和厭氧菌。c)對(duì)低溫敏感的細(xì)菌標(biāo)本采集后不宜冷藏。對(duì)低溫敏感的細(xì)菌包括但不限于腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌。標(biāo)本應(yīng)注意立即保溫運(yùn)送（不可超過8h）。d)用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本在常溫下轉(zhuǎn)運(yùn)，宜在采集后30min內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室，轉(zhuǎn)運(yùn)過程中標(biāo)本隔絕空氣。用于病毒學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)本：a)用于病毒核酸檢驗(yàn)的標(biāo)本：采集后在2h～4h內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。血液標(biāo)本室溫運(yùn)送，其他標(biāo)本在2℃～8℃下轉(zhuǎn)運(yùn)；若運(yùn)送時(shí)間超過24h，標(biāo)本宜在-70℃或更低的溫度下保存和轉(zhuǎn)運(yùn)。b)用于病毒培養(yǎng)和抗原檢驗(yàn)的標(biāo)本在運(yùn)送過程中宜保存在適當(dāng)?shù)牟《巨D(zhuǎn)運(yùn)液或其他相應(yīng)的緩沖液中。c)液體標(biāo)本包括但不限于血液、腦脊液、尿液和支氣管肺泡灌洗液可直接送檢，不需使用轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基。用于真菌培養(yǎng)的標(biāo)本（除頭發(fā)、皮膚和指甲宜干燥送檢外），宜濕潤(rùn)條件下送檢。根據(jù)WS/T640-2018當(dāng)標(biāo)本需要進(jìn)行多種微生物學(xué)檢驗(yàn)（包括但不限于病毒檢測(cè)、細(xì)菌檢測(cè)和真菌檢測(cè)）時(shí)，選擇合適的采樣拭子、轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基、培養(yǎng)液，分別采樣并將標(biāo)本保存于合適的保存液及容器中。疑似高致病性標(biāo)本運(yùn)輸由專人專車護(hù)送。任何單位及個(gè)人不得通過公共交通工具運(yùn)輸。運(yùn)輸過程應(yīng)保留完整的文件記錄，保證可回顧、可溯源。運(yùn)輸過程中應(yīng)保護(hù)被采樣者個(gè)人信息不被泄露。運(yùn)送者至少為兩人，應(yīng)接受培訓(xùn)，經(jīng)考核合格后方可上崗。用于分子診斷的樣本或分離的毒株宜于-70℃以下長(zhǎng)期保存，避免反復(fù)凍融。對(duì)樣本中分離到菌株短期采用甘油凍存，長(zhǎng)期宜進(jìn)行凍干保存。所有采集到的傳染性樣本應(yīng)保存于規(guī)范的樣本庫(kù)中，雙人雙鎖管理。交接標(biāo)本在運(yùn)輸送達(dá)后包裝的開啟，應(yīng)當(dāng)在符合生物安全規(guī)定的場(chǎng)所中進(jìn)行。標(biāo)本交接的質(zhì)量控制要做到以下幾點(diǎn)：a)核查標(biāo)本質(zhì)量：標(biāo)本的基本性狀需符合要求，記錄有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況；對(duì)照病人發(fā)病時(shí)間,檢查標(biāo)本種類應(yīng)與病程相符合、送樣是否及時(shí)；判斷標(biāo)本取材是否正確、是否采用合適容器、送樣過程是否提供標(biāo)本適宜條件。b)核對(duì)標(biāo)本信息：觀察標(biāo)本上是否有標(biāo)識(shí)，字跡是否能辦認(rèn),標(biāo)本信息與送檢單是否一致。c)保留紙質(zhì)記錄：填寫標(biāo)本接收單與回執(zhí)單，并注明交接時(shí)間、雙方姓名和聯(lián)系方式。d)妥善處置不合格標(biāo)本：如樣品污染或其他原因認(rèn)為樣品不合格,應(yīng)安全廢棄；與送樣人交接時(shí)填寫標(biāo)本拒收單，寫明標(biāo)本拒收原因，并及時(shí)補(bǔ)充采集標(biāo)本。

（資料性）

各癥候群對(duì)應(yīng)病原體及標(biāo)本類型各癥候群對(duì)應(yīng)病原體及標(biāo)本類型見表A.1表A.1各癥候群對(duì)應(yīng)病原體及標(biāo)本類型癥候群病毒類細(xì)菌類其他病原體標(biāo)本類型發(fā)熱伴呼吸道癥候群流行性感冒病毒、冠狀病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、?？刹《?、偏肺病毒、博卡病毒、腺病毒、鼻病毒、柯薩奇病毒等金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、A組鏈球菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、嗜肺軍團(tuán)菌、百日咳鮑特菌、肺炎支原體、肺炎衣原體和鸚鵡熱衣原體等鼻/咽拭子、痰液、鼻咽抽吸物、支氣管肺泡灌洗液、胸腔穿刺液、抗凝血、急性期/恢復(fù)期血清、尿液發(fā)熱伴出疹癥候群水痘-帶狀皰疹病毒、人類細(xì)小病毒B19、腸道病毒、風(fēng)疹病毒、麻疹病毒、EB病毒、人皰疹病毒6型、登革病毒、埃博拉病毒、猴痘病毒等鏈球菌、傷寒沙門菌、副傷寒沙門菌、立克次體和布氏疏螺旋體等抗凝血、急性期/恢復(fù)期血清、鼻/咽拭子、皰疹液、皮膚化膿性病灶膿液、糞便、尿液發(fā)熱伴出血癥候群漢坦病毒、登革病毒、出血熱病毒、大別班達(dá)病毒、埃博拉病毒等鼠疫耶爾森菌、腦膜炎奈瑟菌、鉤端螺旋體、豬鏈球菌、立克次體、查菲埃立克體、人嗜吞噬細(xì)胞無形體等抗凝血、急性期/恢復(fù)期血清、腦脊液、尿液、淋巴液、分泌物腹瀉癥候群輪狀病毒、腸道腺病毒、諾如病毒、札如病毒、星狀病毒等致瀉性大腸埃希菌、致病性弧菌(霍亂弧菌、副溶血弧菌、擬態(tài)弧菌、河弧菌）、致病性耶爾森菌（小腸結(jié)腸炎耶爾森菌、假結(jié)核耶爾森菌）、彎曲菌（空腸彎曲菌、結(jié)腸彎曲菌）、非傷寒沙門菌、志賀菌、嗜水氣單胞菌、類志賀鄰單胞菌、艱難梭菌、阪崎克羅諾桿菌等溶組織內(nèi)阿米巴蟲、藍(lán)氏賈第鞭毛蟲、隱孢子蟲、環(huán)孢子蟲、微孢子蟲等糞便、肛拭子、抗凝血、嘔吐物腦炎腦膜炎癥候群腸道病毒、乙腦病毒、西尼羅病毒、蜱傳腦炎病毒、尼帕病毒、單純皰疹病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、呼吸道合胞病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒等腦膜炎奈瑟菌、B型流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、豬鏈球菌、大腸桿菌、B族鏈球菌、單增李斯特菌、克羅諾桿菌屬（阪崎腸桿菌）、結(jié)核分支桿菌等新型隱球菌、惡性瘧原蟲、弓形蟲、豬囊尾蚴、帶絳蟲、肺吸蟲、旋毛蟲、廣州管圓線蟲、裂頭蚴等腦脊液、抗凝血、急性期/恢復(fù)期血清、鼻/咽拭子、糞便標(biāo)本注：可根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果，按照需要，采集相應(yīng)的環(huán)境的涂抹樣、水樣、空氣樣、嚙齒類及節(jié)肢動(dòng)物等

（資料性）

標(biāo)本采集方法表B.1標(biāo)本采集方法序號(hào)采集種類采集方法采集要求1咽拭子1.核對(duì)患者信息。2.手部消毒。3.取出采樣拭子，囑被采集者頭稍后仰，張口充分暴露咽部。4.采集順序：用拭子輕柔快速地在被采集者咽后壁及扁桃體隱窩、側(cè)壁等處反復(fù)旋轉(zhuǎn)擦拭3次～5次，收集粘膜細(xì)胞。5.將咽拭子插入采集管中，折斷棄去尾部，旋緊管蓋。6.再次核對(duì)患者信息無誤。嚴(yán)格規(guī)范手部衛(wèi)生，認(rèn)真核對(duì)患者信息，采樣輕柔快速，避免觸及舌、口腔粘膜和唾液。2鼻拭子1.核對(duì)患者信息。2.手部消毒。3.取出采樣拭子，囑被采集者頭部自然放松微仰，將采樣拭子貼鼻孔壁平行于上顎插入鼻孔觸及鼻腭處，停留片刻吸收分泌物后邊擦拭邊緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出，另取一個(gè)拭子以同樣方法采集另一側(cè)鼻孔。4.將咽拭子插入采集管中，折斷棄去尾部，旋緊管蓋。5.再次核對(duì)患者信息無誤。嚴(yán)格執(zhí)行個(gè)人防護(hù)，核對(duì)患者信息，同一病人的鼻拭子和咽拭子可以分別保存，也可以放入同一采樣管中作為鼻咽拭子管。3肛拭子1.核對(duì)患者信息。2.被采集者通常采用側(cè)臥屈膝姿勢(shì)或雙手支撐桌椅站立前屈姿勢(shì)或膝胸位（跪趴），暴露肛門。3.將采樣拭子輕輕插入肛門3cm～5cm（小兒2cm～3cm），輕輕旋轉(zhuǎn)3圈～5圈后旋轉(zhuǎn)拔出。4.立即插入采集管中，折斷棄去尾部，旋緊管蓋。采樣拭子前端可先濕潤(rùn)，即蘸取生理鹽水或采集管內(nèi)非刺激性保存液，擠去多余液體后插入，保證進(jìn)入肛門內(nèi)部，旋轉(zhuǎn)時(shí)輕柔，盡量帶有部分糞便，增加檢出率。4血液1.核對(duì)檢驗(yàn)項(xiàng)目、檢驗(yàn)時(shí)間、試管、姓名、年齡。2.根據(jù)醫(yī)囑采集血標(biāo)本，根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康呐c要求確定采集時(shí)間、方法和試管，并通知患者準(zhǔn)備。3皮膚消毒程序：按常規(guī)方法進(jìn)行。4采血操作程序：（1）通常采血部位為肘靜脈，將止血帶扎在靜脈取血部位的上方，采血部位的局部皮膚用消毒液由采血部位向外周嚴(yán)格消毒，消毒后不可接觸采血部位，待消毒液揮發(fā)后，進(jìn)行取血操作。（2）采用商品化的一次性注射器或真空采血管采血標(biāo)本。（3）拿下止血帶，用無菌棉壓迫止血。（4）用過的采血針不要回蓋針帽，直接將其放在銳器盒內(nèi)。5.采血后指導(dǎo)患者按壓穿刺點(diǎn)5min～10min，勿揉，凝血機(jī)制差的患者適當(dāng)延長(zhǎng)按壓時(shí)間。必須核對(duì)患者信息。應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，嚴(yán)禁在正在輸液或輸血的肢體或針頭、輸液或輸血穿刺點(diǎn)上方、皮管內(nèi)采血標(biāo)本，應(yīng)在對(duì)側(cè)肢體采血。如同時(shí)采多個(gè)項(xiàng)目的標(biāo)本，采血順序：血培養(yǎng)→不含添加劑的試管→凝血標(biāo)本管→其他標(biāo)本管，需抗凝的試管拔出后按要求輕輕搖勻。注意標(biāo)本溶血問題，采樣后盡快送檢，用于血清學(xué)檢測(cè)的標(biāo)本保存在4℃～8℃。5糞便采集糞便應(yīng)使用無菌容器（如痰盂內(nèi)套無菌塑料袋），自然排出新鮮糞便后，迅速挑取糞便盛入無菌的便盒或采樣杯。挑取的糞便標(biāo)本，應(yīng)該選擇具有明顯性狀改變的部分，如有膿血或黏液應(yīng)挑取膿血、黏液部分；液體糞便則應(yīng)取絮狀物的部分。固體形態(tài)的糞便可用滅菌的壓舌板或棉簽挑取；液體糞便則需要使用吸管。建議多點(diǎn)采集以提高檢出率，便盒中糞便量不少于5g（5mL），由于癥候群病原學(xué)檢測(cè)要求同時(shí)進(jìn)行多種病原體的檢測(cè)，因此采集的標(biāo)本量大于一般進(jìn)行單個(gè)病種檢測(cè)的量。在整個(gè)采集過程中注意不能有尿液混入。6尿液可選擇下述方法中任一種，取約10mL~15mL尿標(biāo)本于無菌容器中：（一）清潔中段尿：不中止排尿，在排去數(shù)毫升尿液后用無菌寬口容器收集第二段尿，即為所需中段尿。（二）恥骨上膀胱穿刺：使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮穿入膀胱吸取尿液。（三）直接導(dǎo)尿：按常規(guī)方法對(duì)會(huì)陰部進(jìn)行清洗消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液。（四）小兒收集包：對(duì)于無控制能力的小兒可應(yīng)用收集包收集尿液。（五）留置導(dǎo)尿管收集尿液?；颊吣驑?biāo)本采集時(shí)盡量選擇晨尿。女性患者經(jīng)期應(yīng)避免尿標(biāo)本采集。尿標(biāo)本收集后應(yīng)及時(shí)送檢，及時(shí)接種，室溫下保存時(shí)間不得超過2h（夏季保存時(shí)間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏保存），4℃冷藏保存時(shí)間不得超過8h。7嘔吐物在患者嘔吐時(shí)或中毒患者洗胃時(shí)，用彎盤或痰杯接取新鮮嘔吐物。用無菌壓舌板或拭子挑取少量嘔吐物（3g～5g）放入滅菌螺口塑料管中，密封。同時(shí)采集可疑食物和中毒病人的嘔吐物。8痰液（一）自然咳痰法：晨痰最佳，患者清晨起床后，用清水或冷開水漱口數(shù)次，用力深咳出呼吸道深部的痰，直接吐入無菌采集容器中，標(biāo)本量應(yīng)≥1mL，立即送檢。（二）誘導(dǎo)咳痰法：對(duì)于痰量少、無痰或咳痰困難者可霧化吸入，使痰液易于排出。于超聲霧化器霧化杯中加入4％的NaCl溶液40mL，吸入高滲鹽溶液15min～25min，囑病人漱口，用力咳出深部痰，收集入無菌采集容器中送檢。（三）支氣管鏡采集法：按常規(guī)支氣管鏡檢的的方法進(jìn)行，在有痰和病變部位用導(dǎo)管吸引直接取得標(biāo)本，置于無菌采集容器中。（四）小兒取痰法：用彎壓舌板向后壓舌，將拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時(shí)，可噴出肺部或氣管分泌物，將粘在拭子上的分泌物置于無菌采集容器中。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。痰標(biāo)本應(yīng)進(jìn)行合格痰液的判定：采用痰涂片觀察法，選取5個(gè)低倍鏡視野，計(jì)白細(xì)胞（WBC）數(shù)和鱗狀上皮細(xì)胞（SC）平均數(shù)，鱗狀上皮細(xì)胞<10個(gè)/低倍視野、白細(xì)胞>25個(gè)/低倍視野，或二者比例<12.5的痰標(biāo)本為合格標(biāo)本。凡不符合上述合格標(biāo)準(zhǔn)的痰標(biāo)本應(yīng)重新采集。9肺泡灌洗液支氣管肺泡灌洗液標(biāo)本的采集的操作規(guī)程如下：于局部麻醉后將纖維支氣管鏡插入右肺中葉或左肺舌段的支氣管，將其項(xiàng)端契入支氣管分支開口，經(jīng)氣管活檢孔緩緩注入37℃滅菌生理鹽水，每次30mL～50mL，總量100mL～250mL，不應(yīng)超過300mL。每次注液后以-13.3kpa~-19.95kpa負(fù)壓吸出回收灌洗液，要防止負(fù)壓過大，過猛。分別收集于用硅化處理過的容器中，容器周圍宜用冰塊包圍，并及時(shí)送檢。灌洗液回收率>30%為宜。采集標(biāo)本置入無菌采集容器中，標(biāo)本量應(yīng)≥5mL，立即送檢，必須注意采集標(biāo)本時(shí)盡可能避免咽喉部正常菌群的污染。10腦脊液1.患者側(cè)臥于硬板床上，背部與床面垂直，頭向前胸部屈曲，兩手抱膝緊貼腹部，使軀干呈弓形,或由助手立于術(shù)者對(duì)面，用一手摟住患者頭部，另一手摟住雙下肢腘窩處并用力抱緊，使脊柱盡量后突，以增加椎間隙寬度，便于進(jìn)針。2.以髂后上棘連線與后正中線交會(huì)處為穿刺點(diǎn)，通常取第3～4腰椎棘突間隙，也可在上一個(gè)或下一個(gè)椎間隙進(jìn)行。3.常規(guī)消毒皮膚，戴無菌手套、鋪消毒濕巾，以2%利多卡因自皮膚至椎間韌帶作局部浸潤(rùn)麻醉。4.術(shù)者以左手拇、食二指固定穿刺點(diǎn)皮膚，右手持穿刺針以垂直背部方向緩慢刺入，當(dāng)針頭穿過韌帶與硬脊膜時(shí)，可感到阻力突然消失（成人進(jìn)針深度為4cm～6cm，兒童為2cm～4cm），此時(shí)將針芯緩慢拔出，即可見無色透明腦脊液流出。5.當(dāng)見到腦脊液即將流出時(shí)，接上測(cè)壓管測(cè)量壓力，準(zhǔn)確讀數(shù)，亦可計(jì)數(shù)腦脊液滴數(shù)估計(jì)壓力（正常為70mmH2O～180mmH2O或40滴/min～50滴/min）。若壓力不高，可令助手壓迫一側(cè)頸靜脈約10s，然后再壓另一側(cè)，最后同時(shí)按壓雙側(cè)頸靜脈，若腦脊液壓力迅速升高一倍左右，解除壓迫后10s～20s，又迅速降至原來水平，表示蛛網(wǎng)膜下腔通暢，若壓迫靜脈后壓力不升高，表示蛛網(wǎng)膜下腔完全阻塞，若壓迫后壓力緩慢上升，放松后又緩慢下降，表示不完全阻塞。6.撤除測(cè)壓管，收集腦脊液，成人3mL，兒童1mL；送驗(yàn)常規(guī)、生化及細(xì)菌培養(yǎng)等。7.術(shù)畢將針芯插入后一起拔出穿刺針，覆蓋消毒紗布，膠布固定。8.術(shù)后去枕仰臥4h～6h，可避免術(shù)后低顱壓性頭痛。9.采樣分裝：每份樣品分裝成250μl每管。1.嚴(yán)格無菌操作，穿刺時(shí)避免引起微血管損傷。2.穿刺時(shí)如患者出現(xiàn)呼吸、脈搏、面色蒼白等異常改變時(shí)，應(yīng)立即停止操作。3.如患者出現(xiàn)顱內(nèi)壓升高現(xiàn)象，需對(duì)患者先進(jìn)行脫水處理后再進(jìn)行采樣。11環(huán)境涂抹樣可選取地漏、養(yǎng)殖區(qū)域、食品加工工具、人體接觸物品