氣相色譜法檢查法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程QC-SOP-00012-00PAGE第2頁共3頁第1頁共3頁XXX有限公司GMP文件文件名稱氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程編碼QC-SOP-000X-00編制人審核人批準(zhǔn)人編制日期年月日審核日期年月日批準(zhǔn)日期年月日頒發(fā)部門質(zhì)量部版本第四版實施日期年月日分發(fā)部門質(zhì)量部1目的制定氣相色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,規(guī)范氣相色譜法檢驗操作。2適用范圍適用于氣相色譜法檢查。3責(zé)任人QC員4內(nèi)容4.1制定依據(jù)《中國藥典》2010年版二部附錄ⅤE“氣相色譜法”及《中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范》2010版“氣相色譜法”4.2實驗環(huán)境、儀器與用具4.2.1氣相色譜儀：主要包括載氣源、進(jìn)樣部分、色譜柱、柱溫箱、檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等組成。主機儀器應(yīng)經(jīng)過定期檢定，且在檢定有效期內(nèi)，并符合有關(guān)規(guī)定。4.2.2環(huán)境條件：應(yīng)在常溫且干燥少灰塵的地方使用。4.3檢查人員條件4.3.1基本理論：了解并熟悉有關(guān)色譜分析的基礎(chǔ)知識，并對所用儀器及工作站有全面了解。4.3.2基本技能：應(yīng)熟悉對儀器的一般要求和常用色譜條件的設(shè)置包括進(jìn)樣部分、色譜柱及檢測器等的配置，及對樣品的處理及測定。4.4對儀器的一般要求4.4.1載氣源：氣相色譜法的流動相為氣體，稱為載氣。氦、氮和氫可用作載氣，多由高壓鋼瓶或高純度氣體發(fā)生器提供。常用載氣為氮氣。4.4.24.4.2.1溶液直接進(jìn)樣：采用微量注射器，或有分流裝置的氣化室進(jìn)樣。此時進(jìn)樣口溫度應(yīng)該高于柱溫30～50°C，進(jìn)樣量一般不超過數(shù)微升。采用毛細(xì)管柱4.4.2.2頂空進(jìn)樣：適合于固體和液體供試品中揮發(fā)性組分的分離和測定。樣品配置好之后應(yīng)該待氣液平衡后由進(jìn)樣器自動吸取一定體積的頂空氣注入色譜柱中。4.4.3色譜柱：色譜柱多為填充柱或毛細(xì)管柱，填充柱材質(zhì)多為不銹鋼或玻璃。常用載體為經(jīng)酸洗并硅烷化處理的硅藻土或高分子多孔小球，常用固定液有甲基聚硅氧烷、聚乙二醇等。毛細(xì)管柱的材質(zhì)多為玻璃或石英，內(nèi)壁或載體經(jīng)涂漬或交聯(lián)固定液。常用固定液有甲基聚硅氧烷，不同比例組成的苯基甲基聚硅氧烷，聚乙二醇等。4.4.4柱溫箱：柱溫箱控溫精度應(yīng)在±1°C，且溫度波動小于每小時0.14.4.5檢測器：最常用為火焰離子化檢測器（FID）。該檢測器對碳?xì)浠衔镯憫?yīng)良好，適合檢測大多數(shù)的藥物。該檢測器用氫氣做燃?xì)猓諝庾鲋細(xì)?。檢測器溫度應(yīng)該高于柱溫，并不得低于150°C，以免水汽凝結(jié)，通常為250～350°C，并依據(jù)儀器維護(hù)保養(yǎng)計劃4.4.6數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)：為達(dá)到系統(tǒng)適用性要求，可對色譜柱內(nèi)徑、長度、載體牌號、粒度、固定液涂布濃度、載氣流速、柱溫、進(jìn)樣量、檢測器的靈敏度作適當(dāng)改變。一般色譜圖約于30分鐘內(nèi)記錄完畢4.5系統(tǒng)適用性試驗4.5.1系統(tǒng)適用性通常包括理論板數(shù)、分離度4.5.1.1理論板數(shù)：評價色譜柱的分離效能。多為待測組分或內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的理論板數(shù)。4.5.1.2分離度：評價待測組分與相鄰共存物或難分離物質(zhì)之間的分離程度，是衡量色譜系統(tǒng)效能的關(guān)鍵指標(biāo)。且待測組分與相鄰共存物之間的分離度應(yīng)大于1.5。4.5.1.3重復(fù)性：用于評價連續(xù)進(jìn)樣中，色譜系統(tǒng)響應(yīng)值的重復(fù)性能。外標(biāo)法多用對照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，其峰面積測量值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于2.0%；內(nèi)標(biāo)法通常配制相當(dāng)于80%、100%和120%的對照品溶液，加入規(guī)定量的內(nèi)標(biāo)溶液，配制成3種不同濃度的溶液，分別至少進(jìn)樣24.5.1.4拖尾因子：用于評價色譜峰的對稱性。峰高法定量時T應(yīng)在0.95～1.05之間。峰面積法定量時，不能有嚴(yán)重拖尾。4.6操作方法4.6.14.6.1.1精密量取對照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，分別配成溶液，精密量取適量，混合配成校正因子測定用對照品溶液。進(jìn)樣后記錄色譜圖，測量對照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高，計算校正因子。再取各品種項下含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液，進(jìn)樣后記錄色譜圖，測量供試品中待測成分和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高，計算含量。4.6.1.2采用內(nèi)標(biāo)法，可避免因樣品前處理及進(jìn)樣體積誤差對測定結(jié)果的影響。4.6.24.6.2.1精密量（稱）取對照品和供試品，配制成溶液，分別精密取一定量，進(jìn)樣后計算。4.6.2.2外標(biāo)法測定成分或雜質(zhì)含量時，以定量環(huán)或自動進(jìn)樣器進(jìn)樣為好。4.6.3標(biāo)準(zhǔn)溶液加入法：精密量取某個雜質(zhì)或待測成分對照品適量，配制成適當(dāng)濃度的對照品溶液，取一定量，精密加入到供試品溶液中，根據(jù)外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法測定雜質(zhì)或主成分含量，再扣除加入的對照品溶液含量，即得供試品溶液中某個雜質(zhì)和主成分4.6.4面積歸一化法：按各品種項下規(guī)定，配制供試品溶液，取一定量注入儀器，記錄色譜圖。測量各峰的面積和色譜圖上除溶劑峰以外的總色譜峰面積，計算各峰面積占總峰面積的百分率4.7注意事項4.7.1手動進(jìn)樣法多用內(nèi)標(biāo)法定量以減小進(jìn)樣誤差。4.7.2頂空進(jìn)樣時，可采用標(biāo)準(zhǔn)溶液加入法以消除基質(zhì)效應(yīng)的影響。4.7.3進(jìn)樣密封硅橡膠墊應(yīng)先加熱老化，除去揮發(fā)性物質(zhì)再用，并注意經(jīng)常更換，另外也要注意經(jīng)常更換襯管上端的密封硅橡膠圈。4.7.4一般情況下，氮氣（尾吹氣+載氣）、空氣和氫氣三者的比例接近或等于1：1：10（如：氮氣30～40ml/min，空氣300～400ml/min，氧氣30～40ml/min）時，F(xiàn)ID的靈敏度最高。4.7.5為防止檢測器被污染，檢測器溫度設(shè)置應(yīng)不低于色譜柱實際工作的最高溫度，一般情況下，檢測器的溫度不應(yīng)低于150°C4.7.6新毛細(xì)管柱需要老化，以除去殘留溶劑及低分子量的聚合物。此外，用過的柱也應(yīng)定期老化，尤其是出現(xiàn)基線漂移，某些色譜峰開始拖尾時，應(yīng)該進(jìn)行老化以除去樣品中的難揮發(fā)物在柱