2019屆江蘇專版高考生物一輪復習專題24生物技術在食品加工中的應用微生物的利用講義

專題24生物技術在食品加工中的應用、微生物的利用高考生物

(江蘇專用)考點1發(fā)酵食品加工的基本方法1.(2018江蘇單科,16,2分)某高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進行葡萄酒主發(fā)酵過程的研究,下列敘

述錯誤的是

()

A.夏季生產果酒時,常需對罐體進行降溫處理B.乙醇為揮發(fā)性物質,故發(fā)酵過程中空氣的進氣量不宜太大C.正常發(fā)酵過程中罐內的壓力不會低于大氣壓五年高考A組

自主命題·江蘇卷題組D.可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發(fā)酵答案

B生產果酒是利用酵母菌的無氧呼吸產生酒精的過程,酒精發(fā)酵時一般將溫度控制

在18~25℃,夏季溫度高,且發(fā)酵過程有熱量產生,故夏季生產果酒時,常需對罐體進行降溫處

理,A項正確;在發(fā)酵產酒精過程中需保持無氧狀態(tài)B項錯誤;酵母菌的呼吸過程會產生CO2,故

正常發(fā)酵過程中罐內的壓力不會低于大氣壓,C項正確;可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃

度決定何時終止發(fā)酵,D項正確。考點突破準確把握果酒的生產原理是酵母菌的無氧呼吸,產物是C2H5OH和CO2,同時產生能

量。疑難突破果酒制作的原理與條件菌種原理條件酵母菌C6H12O6

2C2H5OH+2CO2+能量溫度:18~25℃時間:10~12d氣體:前期需O2,后期不需O22.(2017江蘇單科,10,2分)下列關于“腐乳的制作”實驗,敘述正確的是

()A.控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調味B.腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用C.毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉D.成品腐乳表面的粘性物質主要由細菌產生答案

B本題考查腐乳制作的相關知識。控制發(fā)酵溫度的主要目的是使毛霉等微生物正常

生長增殖,A錯誤;腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐和調味作用,B正確;毛霉等微生物可

分泌蛋白酶和脂肪酶,催化豆腐中的蛋白質水解為小分子肽和氨基酸,催化脂肪水解為脂肪酸

和甘油,C錯誤;成品腐乳表面的粘性物質主要由毛霉產生,D錯誤。3.(2016江蘇單科,7,2分)下列關于中學“腐乳的制作”實驗,敘述正確的是

()A.加鹽主要是為了調節(jié)水分,利于毛霉生長B.加料酒主要是為了滅菌,避免腐敗變質C.發(fā)酵過程中起主要作用的是乳酸桿菌D.實驗室制作的腐乳不宜直接食用答案

D加鹽主要是為了調節(jié)水分,同時也能抑制微生物的生長,A錯誤;加料酒可以抑制微

生物的生長,同時能使腐乳具有獨特的香味,并非滅菌,B錯誤;發(fā)酵過程中起主要作用的是毛

霉,C錯誤;實驗室制作的腐乳,未經嚴格檢測,不宜直接食用,D正確。名師點睛解答本題的關鍵在于理解腐乳制作的過程:前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。理解后期發(fā)酵

過程中加鹽、加料酒、加香辛料的作用。4.(2015江蘇單科,17,2分)關于“腐乳的制作”實驗,下列敘述錯誤的是

()A.將腐乳坯堆積起來會導致堆內溫度升高,影響毛霉生長B.腐乳坯若被細菌污染,則腐乳坯表面會出現(xiàn)黏性物C.勤向腐乳坯表面噴水,有利于毛霉菌絲的生長D.裝壇階段加入料酒,可有效防止雜菌污染答案

C本題考查腐乳制作的相關知識。毛霉生長需要適宜的溫度(范圍是15~18℃)和濕

度,將腐乳坯堆積起來時會因毛霉等的呼吸作用釋放能量而使堆內溫度升高,影響了毛霉生長,

勤向腐乳坯表面噴水,會改變腐乳坯的濕度,又會導致雜菌污染,不利于毛霉菌絲的生長,故A正

確、C錯誤;腐乳坯若被細菌污染,細菌會在腐乳坯上進行代謝,產生黏性物,B正確;裝壇階段加

入料酒,不僅可以調味,還能有效防止雜菌污染,D正確。知識拓展適宜的溫度、氧氣、水分是微生物生長所必需的環(huán)境條件,細菌、酵母菌、霉菌

等不同的微生物的生長對環(huán)境條件的要求也是不同的。因此,在相關的實驗中,應結合“環(huán)境

條件對微生物生長影響”的原理,來分析鞏固。5.(2015江蘇單科,24,3分)如圖為蘋果酒的發(fā)酵裝置示意圖,下列敘述錯誤的是(多選)

()

A.發(fā)酵過程中酒精的產生速率越來越快B.集氣管中的氣體是酵母菌無氧呼吸產生的CO2C.發(fā)酵過程中酵母種群呈“J”型增長D.若發(fā)酵液表面出現(xiàn)菌膜,最可能原因是發(fā)酵瓶漏氣答案

ABC本題主要考查果酒發(fā)酵裝置分析等相關知識。隨著發(fā)酵時間延長,酒精積累量

越來越多,由于過高濃度酒精對酵母菌發(fā)酵起抑制作用,所以發(fā)酵后期酒精產生速率越來越慢,

A錯誤;酵母菌發(fā)酵瓶需留1/3空間,有少量空氣存在,因此集氣管中的CO2氣體由有氧呼吸和無

氧呼吸產生,B錯誤;發(fā)酵過程中酵母菌受原料、代謝產物影響,其種群呈“S”型增長,C錯誤;

發(fā)酵液表面出現(xiàn)菌膜,應主要為醋酸桿菌,醋酸桿菌為好氧菌,因此可推測出現(xiàn)的原因是發(fā)酵瓶

漏氣,D正確。易錯警示由于果酒發(fā)酵的主要過程是厭氧發(fā)酵,在發(fā)酵過程中產生的CO2主要源于酵母菌

的無氧呼吸,但發(fā)酵初期發(fā)酵瓶中還存在氧氣,酵母菌會進行有氧呼吸產生CO2。6.(2014江蘇單科,24,3分)某同學設計了如圖所示的發(fā)酵裝置,下列有關敘述正確的是(多選)

()

A.該裝置可阻止空氣進入,用于果酒發(fā)酵B.該裝置便于果酒發(fā)酵中產生的氣體排出C.去除彎管中的水,該裝置可滿足果醋發(fā)酵時底層發(fā)酵液中大量醋酸菌的呼吸D.去除彎管中的水后,該裝置與巴斯德的鵝頸瓶作用相似答案

ABD圖中球形U形彎管充滿水,營造封閉的無氧環(huán)境,可阻止空氣進入,利于果酒發(fā)

酵,A正確;果酒發(fā)酵中產生的CO2使瓶內氣壓增大,該裝置可以實現(xiàn)CO2氣體排出,B正確;去除

彎管中的水,由于導管未插入到發(fā)酵液底層,故無法滿足果醋發(fā)酵時醋酸菌的有氧呼吸,C錯誤;

去除彎管中的水,該裝置可防止其他病原微生物進入發(fā)酵液,與巴斯德的鵝頸瓶作用相似,D正確。解題關鍵審題圖、弄清各組成部分的作用是解題的關鍵。閱卷發(fā)現(xiàn)有超過82%的考生未

選擇A選項,54%的考生未選擇D選項,究其原因:一是對水封是否能隔絕空氣不了解,二是對

“巴斯德鵝頸瓶”不熟悉?？键c2微生物的分離和培養(yǎng)1.(2016江蘇單科,25,3分)漆酶屬于木質素降解酶類,在環(huán)境修復、農業(yè)生產等領域有著廣泛用

途。如圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程,相關敘述正確的是(多選)

()

A.生活污水中含有大量微生物,是分離產漆酶菌株的首選樣品B.篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物,通過菌落特征挑出產漆酶的菌落C.在涂布平板上長出的菌落,再通過劃線進一步純化D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物,可在常溫下長期保存菌株答案

BC產漆酶的微生物主要生活在木質素含量較高的環(huán)境中,生活污水中含有大量的微

生物,不是分離產漆酶菌株的首選樣品;篩選產漆酶微生物的培養(yǎng)基中應加入木質素等漆酶降

解的底物,因不同菌種的菌落特征不同,故可通過菌落特征挑選產漆酶的菌落;圖示顯示,通過

涂布平板法進行初步篩選,再通過平板劃線法進一步純化;微生物長期保存應用甘油管藏法,保

存溫度為-20℃。知識歸納微生物純化方法:常采用選擇培養(yǎng)基,用稀釋涂布平板法、平板劃線法純化微生

物。用稀釋涂布平板法接種的微生物經培養(yǎng)后,其菌落在培養(yǎng)基上接近均勻分布,且該接種法

可以對微生物活菌計數(shù)。2.(2015江蘇單科,19,2分)做“微生物的分離與培養(yǎng)”實驗時,下列敘述正確的是

()A.高壓滅菌加熱結束時,打開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋B.倒平板時,應將打開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C.為了防止污染,接種環(huán)經火焰滅菌后應趁熱快速挑取菌落D.用記號筆標記培養(yǎng)皿中菌落時,應標記在皿底上答案

D本題考查微生物的分離與培養(yǎng)的相關知識。高壓滅菌加熱結束時,需先切斷電源,

讓滅菌鍋內溫度降至100℃以下,壓力表的指針回到零時,再打開鍋蓋,A錯誤;倒平板時,應將培

養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,而不能將培養(yǎng)皿蓋完全打開,以防污染,B錯誤;接種環(huán)經火焰

滅菌后需待冷卻后挑取菌落,C錯誤。易錯分析錯選的學生對高壓滅菌鍋使用方法不太了解。高壓滅菌通常采用的溫度為121℃,

滅菌剛結束時滅菌鍋中的液體溫度都超過100℃,必須緩慢降溫、降壓。如未能充分冷卻,鍋

內尚有剩余壓力,打開放氣閥會使鍋內壓力驟減,液體就會發(fā)生爆沸,沖出容器。3.(2018江蘇單科,31,8分)酵母的蛋白質含量可達自身干重的一半,可作為飼料蛋白的來源。有

些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進行培養(yǎng),這樣既可減少污染又可降低生產成本。研究

人員擬從土壤樣品中分離該類酵母,并進行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程,請回答下列問題:

(1)配制培養(yǎng)基時,按照培養(yǎng)基配方準確稱量各組分,將其溶解、定容后,調節(jié)培養(yǎng)基的

,及時對培養(yǎng)基進行分裝,并進行

滅菌。(2)取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標記好的無菌培養(yǎng)皿中,在步驟③中將溫度約

(在25℃、50℃或80℃中選擇)的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻,冷凝后倒置培養(yǎng)。(3)挑取分離平板中長出的單菌落,按步驟④所示進行劃線。下列敘述合理的有

。a.為保證無菌操作,接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b.劃線時應避免劃破培養(yǎng)基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落時,應挑取多個菌落,分別測定酵母細胞中甲醇的含量d.可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度,獲得甲醇高耐受株(4)步驟⑤中,為使酵母數(shù)量迅速增加,培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和

供應。為監(jiān)測

酵母的活細胞密度,將發(fā)酵液稀釋1000倍后,經等體積臺盼藍染液染色,用25×16型血細胞計

數(shù)板計數(shù)5個中格中的細胞數(shù),理論上

色細胞的個數(shù)應不少于

,才能達到每

毫升3×109個活細胞的預期密度。答案(8分)(1)pH高壓蒸汽(濕熱)(2)50℃(3)a、b、d(4)氧氣無30解析本題主要考查微生物的培養(yǎng)與計數(shù)的相關知識。(1)培養(yǎng)基在定容后、分裝前需要調

節(jié)pH;分裝后還需要進行高壓蒸汽(濕熱)滅菌。(2)倒平板時溫度不宜過高,以防燙傷;同時溫

度也不能太低,以防培養(yǎng)基凝固而無法形成平板,因此倒平板時溫度應選擇50℃左右。(3)平

板劃線時,需保證無菌操作,以防混入雜菌而影響分離結果。因此操作過程中所用的接種針、

接種環(huán)在使用之前都必須滅菌;劃線時不能劃破培養(yǎng)基表面,以免影響菌落的正常形態(tài)進而影

響后期觀察;挑取菌落時,應挑取單個菌落;通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度,可獲得利用甲

醇能力強的菌株,即甲醇高耐受株。(4)⑤為擴大培養(yǎng)過程,欲使酵母數(shù)量迅速增加,應為酵母

菌提供充足的營養(yǎng)和O2。臺盼藍染液能將死的酵母菌染成藍色,而活的酵母菌不能被染色。

假設5個中方格中有x個活酵母菌,由題意可知:[(x×5)÷10-4]×1000×2=3×109,由此解得x=30。方法技巧酵母菌計數(shù)的常用方法——血細胞計數(shù)板(1)以25格×16格的計數(shù)板為例,計數(shù)時除了4個角上的中方格外,還要加上中央的一個中方格,

共計數(shù)5個中方格(共80個小方格)內的酵母菌。(2)計數(shù)公式:1mL懸液中的酵母菌數(shù)量=(80個小方格內酵母菌數(shù)量/80)×400×104×稀釋倍數(shù)。4.(2017江蘇單科,31,7分)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對環(huán)境有嚴重危害。小明同

學準備依據(jù)下圖操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列

問題:

(1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有

。(2)將采集到的樣品接種培養(yǎng),苯酚用量應隨轉接次數(shù)增加而逐漸

,以達到富集酚降解

菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集,應進一步

,以便于菌落計數(shù)與分離。制

備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質外,還必須添加

。(3)如圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中

(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。

(4)采用比色測定法(使用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯

度并進行顯色反應,表中1~5號比色管的苯酚濃度應分別為

。管號123456苯酚濃度(mg/L)

1如果廢水為50mg/L苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,則需將殘留液稀釋

(填序

號:①5②10③20)倍后,再進行比色。答案(7分)(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀釋涂布凝固劑(3)③(4)0、0.2、0.4、0.6、

0.8③解析本題考查微生物分離的相關知識。(1)酚降解菌培養(yǎng)基中的蛋白胨和苯酚為酚降解菌

生長提供碳源。(2)轉接的目的之一是富集降解苯酚能力強的酚降解菌,隨轉接次數(shù)增多,培養(yǎng)

基中的苯酚含量應逐漸增加。若平板中菌落過于密集,則需進一步稀釋,降低菌體密度后再涂

布培養(yǎng),以便于菌落分離與計數(shù)。制備平板培養(yǎng)基時,需添加瓊脂等凝固劑。(3)連續(xù)劃線時,

在劃線的末端菌體密度最低,即在劃線的末端最易獲得單菌落。(4)1號比色管應為空白對照

組,由6號比色管中苯酚濃度知,1~5號比色管苯酚濃度應為0、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L。廢水為50mg/L苯酚溶液,降解后殘留的苯酚濃度約為50×21%=10.5(mg/L),則需對殘留液進行20倍稀釋后[10.5÷20=0.525(mg/L)],才可以進行比色。5.(2014江蘇單科,30,8分)為了獲得β-胡蘿卜素產品,某小組開展了產β-胡蘿卜素酵母的篩選與

色素提取實驗。請回答下列問題:(1)實驗用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是

;為了減少滅菌后器皿被污染,滅菌前應該

。(2)為了篩選出酵母菌,培養(yǎng)基中添加了青霉素,其目的是

。(3)如圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖,圖中甲、乙、丙指示的依次是

。(填序號)①安全閥、放氣閥、壓力表②放氣閥、安全閥、壓力表③安全閥、放氣閥、溫度表④放氣閥、安全閥、溫度表(4)為了將分離到的菌株純化,挑取了菌落在3塊相同平板上劃線,結果其中一塊平板的各劃線

區(qū)均未見菌生長,最可能的原因是

。(5)為增加β-胡蘿卜素提取量,在研磨酵母細胞時,添加石英砂的目的是

;

研磨時

(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3,理由是

。答案(8分)(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)用牛皮紙(報紙)包扎器皿(2)抑制細菌(放線菌)生長(3)①(4)接種環(huán)溫度過高,菌被殺死(5)有助于研磨充分不需要

β-胡蘿卜素較耐酸解析(1)培養(yǎng)皿滅菌方法通常有干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)兩種。用牛皮紙(或報

紙)包扎器皿后再滅菌,可防止滅菌后的器皿被再次污染。(2)青霉素可抑制細菌、放線菌的生

長,但對酵母菌生長無影響,故培養(yǎng)基中添加青霉素可以篩選出酵母菌。(3)滅菌鍋中的甲、

乙、丙分別表示安全閥、放氣閥和壓力表。(4)該接種過程中的3塊平板相同,菌種來源相同,

只有一塊平板接種培養(yǎng)后無菌落,對比知,問題出現(xiàn)在接種過程中,最可能的原因是接種環(huán)灼燒

后未充分冷卻,菌種被殺死。(5)對酵母菌的研磨過程中加入石英砂有助于充分研磨,因β-胡蘿

卜素較耐酸,故該過程不需要加入CaCO3。B組統(tǒng)一命題·?。▍^(qū)、市）卷題組考點1發(fā)酵食品加工的基本方法1.(2017課標全國Ⅱ,37,15分)[生物——選修1:生物技術實踐]豆豉是大豆經過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素,某小組將等量的

甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻,再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)

酵,并在32h內定期取樣觀測發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}:(1)該實驗的自變量是

、

。(2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好,說明該發(fā)酵菌是

。(3)如果在實驗后,發(fā)現(xiàn)32h內的發(fā)酵效果越來越好,且隨發(fā)酵時間呈直線上升關系,則無法確定

發(fā)酵的最佳時間;若要確定最佳發(fā)酵時間,還需要做的事情是

。(4)從大豆到豆豉,大豆中的成分會發(fā)生一定的變化,其中,蛋白質轉變?yōu)?/p>

,脂肪

轉變?yōu)?/p>

。答案(1)菌種發(fā)酵時間(2)好氧菌(3)延長發(fā)酵時間,觀測發(fā)酵效果,最好的發(fā)酵效果所

對應的時間即為最佳發(fā)酵時間(4)氨基酸和肽脂肪酸和甘油解析本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術的相關知識。(1)根據(jù)題中“甲、乙兩菌種”和“32h內定期

取樣觀測發(fā)酵效果”可確定該實驗的自變量是菌種類型和發(fā)酵時間。(2)發(fā)酵容器底層缺氧,

上層氧氣相對充足,上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好,說明該發(fā)酵菌屬于好氧菌。(3)由于32h

內發(fā)酵效果隨發(fā)酵時間呈直線上升,所以若要確定最佳發(fā)酵時間,應該繼續(xù)延長發(fā)酵時間,觀測

發(fā)酵效果,最好發(fā)酵效果所對應的時間即為最佳發(fā)酵時間。(4)發(fā)酵過程中微生物會產生多種

蛋白酶和脂肪酶,蛋白酶可使蛋白質分解為小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可使脂肪分解為甘油

和脂肪酸。知識歸納關于傳統(tǒng)發(fā)酵技術的3個誤區(qū):(1)誤認為微生物培養(yǎng)基中都需有機碳源、氮源,自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)不需加有機碳源、固氮

菌的培養(yǎng)不需加氮源。(2)誤認為泡菜制作過程中乳酸和亞硝酸鹽的含量都是先增加后減少,在泡菜制作過程中乳酸

含量先增加后保持穩(wěn)定。(3)誤認為果酒、果醋制作過程中都需要無氧條件,果醋制作過程中利用的是醋酸菌的有氧呼

吸,因此需要有氧條件。2.(2016課標全國Ⅱ,39,15分)蘋果醋是以蘋果汁為原料經發(fā)酵而成的?；卮鹣铝袉栴}:(1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產的第一階段,在酵母菌細

胞的

中進行,其產物乙醇與

試劑反應呈現(xiàn)灰綠色,這一反應可用于乙

醇的檢驗;過程③在酵母菌細胞的

中進行。與無氧條件相比,在有氧條件下,酵母菌的

增殖速度

。

(2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產生的乙醇轉變?yōu)榇姿岬倪^程,根據(jù)醋酸桿菌

的呼吸作用類型,該過程需要在

條件下才能完成。(3)在生產過程中,第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同,第一階段的溫度

(填“低

于”或“高于”)第二階段的。(4)醋酸桿菌屬于

核生物,其細胞結構中

(填“含有”或“不含有”)線粒體。答案(1)細胞質基質重鉻酸鉀線粒體快(2)有氧(3)低于(4)原不含有解析(1)圖中過程①和②表示酵母菌無氧呼吸的第一、二階段,發(fā)生場所是細胞質基質;乙醇

可在酸性條件下與重鉻酸鉀試劑發(fā)生顏色反應;過程③表示有氧呼吸的第二、三階段,發(fā)生在

線粒體中;與無氧呼吸相比,有氧呼吸過程釋放的能量多,所以在有氧條件下酵母菌的繁殖速度

較快。(2)醋酸桿菌是好氧菌,所以乙醇轉變?yōu)榇姿岬倪^程需要在有氧條件下才能完成。(3)酵

母菌和醋酸桿菌的最適生長溫度分別是20℃和30~35℃。(4)醋酸桿菌屬于細菌,是原核生物,

原核細胞中不含有線粒體。解題關鍵熟知酵母菌的有氧呼吸和無氧呼吸過程、場所、代謝產物的鑒定及果酒制作和

果醋制作之間的聯(lián)系是解題的關鍵?？键c2微生物的分離和培養(yǎng)1.(2018課標全國Ⅰ,37,15分)[生物——選修1:生物技術實踐]將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定

量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉栴}:(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選,則培養(yǎng)基中應加入鏈霉素以抑制

的生長,加入了鏈霉素

的培養(yǎng)基屬于

培養(yǎng)基。(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質,營養(yǎng)物質類型除氮源外還

有

(答出兩點即可)。氮源進入細胞后,可參與合成的生物大分子有

(答出兩點即可)。(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養(yǎng),平板上長出菌落后可通過加入顯色

劑篩選出能產淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是

,該方法能篩選出產淀粉酶微生物的

原理是

。(4)甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下

得到以下結果:甲同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133;乙同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認為這兩位同學的結果中,乙同學的結果可信度低,其原因是

。答案(1)細菌選擇(2)碳源、無機鹽蛋白質、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍色,產淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解,形成透明圈(4)乙同學的結

果中,1個平板的計數(shù)結果與另2個相差懸殊,結果的重復性差解析本題主要考查微生物的培養(yǎng)與應用。(1)鏈霉素可抑制細菌生長,從功能上看,添加鏈霉

素的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)微生物正常生長需要的營養(yǎng)物質有無機鹽、氮源、碳源

等。氮源進入細胞后,可以用于合成含氮大分子物質,如核酸、蛋白質等。(3)淀粉遇碘液顯藍

色,若淀粉被水解,則產淀粉酶的菌落周圍的淀粉被水解,形成以菌落為中心的透明圈。(4)用

稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時,為保證統(tǒng)計結果的準確性,一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板

進行計數(shù),取結果差別不大組別的平均值,進而得出計數(shù)結果。而乙同學的結果中,1個平板的

計數(shù)結果與另2個相差懸殊,即乙同學的結果可信度低。知識歸納微生物的計數(shù)方法(1)顯微鏡直接計數(shù)法:利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板,在顯微鏡下計數(shù)一定容積的樣品

中微生物的數(shù)量。缺點:因不能區(qū)分死菌與活菌而使計數(shù)結果偏大。(2)活菌計數(shù)法:利用稀釋涂布平板法接種,通過統(tǒng)計菌落數(shù)目計算樣品中的活菌數(shù)。缺點:當

兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落,因此統(tǒng)計結果偏小。2.(2018課標全國Ⅱ,37,15分)[生物——選修1:生物技術實踐]在生產、生活和科研實踐中,經常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}:(1)在實驗室中,玻璃和金屬材質的實驗器具

(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅

菌箱中進行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點是

。(3)密閉空間內的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外線能

。在照

射前,適量噴灑

,可強化消毒效果。(4)水廠供應的自來水通常是經過

(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時,若壓力達到設定要求,而鍋內并沒有達到相應溫度,最可

能的原因是

。答案(1)可以(2)在達到消毒目的的同時,營養(yǎng)物質損失較少(3)破壞DNA結構消毒液

(4)氯氣(5)未將鍋內冷空氣排盡解析(1)能耐高溫的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金屬用具可以采用干熱滅菌法滅

菌。(2)用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法對牛奶消毒,可以殺死牛奶中的微生物,并且使牛奶的

營養(yǎng)成分損失較少,而煮沸消毒法會破壞牛奶的營養(yǎng)成分。(3)紫外線照射可以破壞DNA結

構,殺死物體表面或空氣中的微生物;在照射前,適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液,可以

加強消毒效果。(4)水廠供應的自來水通常是經過氯氣消毒的。(5)高壓蒸汽滅菌時,若不排盡

鍋內的冷空氣,會使鍋內溫度不達標。知識歸納消毒與滅菌(1)消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物(不包括芽孢

和孢子)。常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法,對實驗室的空氣常用紫外線或化學藥

物消毒。(2)滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物,包括芽孢和孢子。常用的滅

菌方法有:灼燒滅菌法、干熱滅菌法和高壓蒸汽滅菌法等。3.(2018課標全國Ⅲ,37,15分)[生物——選修1:生物技術實踐]回答下列與酵母菌有關的問題:(1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用

(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊

脂”)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基應采用

滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培

養(yǎng)一段時間后可觀察到菌落,菌落的含義是

。(2)酵母菌液體培養(yǎng)時,若通入氧氣,可促進

(填“菌體快速增殖”“乙醇產

生”或“乳酸產生”);若進行厭氧培養(yǎng),可促進

(填“菌體快速增殖”“乙醇產

生”或“乳酸產生”)。(3)制作面包時,為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的原

因是

。答案(1)麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體(2)菌體

快速增殖乙醇產生(3)酵母菌分解葡萄糖會產生CO2,CO2使面包松軟解析(1)常用含葡萄糖較多的麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基分離培養(yǎng)酵母菌。培養(yǎng)基常采用高壓蒸汽

滅菌法滅菌。菌落是由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體。(2)有氧氣存在時,酵母

菌有氧呼吸產生的大量能量可用于快速增殖;無氧氣存在時,酵母菌進行無氧呼吸產生乙醇和

CO2。(3)酵母菌進行細胞呼吸可產生CO2,故用酵母菌制作的面包會變得松軟。易錯警示不同培養(yǎng)基的用途牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)細菌,MS培養(yǎng)基常用于植物組織培養(yǎng),麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基常

用于培養(yǎng)酵母菌。4.(2017課標全國Ⅰ,37,15分)[生物——選修1:生物技術實踐]某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列問題:(1)有些細菌能分解尿素,有些細菌則不能,原因是前者能產生

。能分解尿素的細菌不能

以尿素的分解產物CO2作為碳源,原因是

。但可用葡萄糖作為碳源,進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是

(答出兩點即可)。(2)為了篩選可分解尿素的細菌,在配制培養(yǎng)基時,應選擇

(填“尿素”“NH4NO3”或

“尿素+NH4NO3”)作為氮源,不選擇其他兩組的原因是

。(3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有

(答出兩點即可)。答案(1)脲酶分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物,不能利用CO2來合成有機物為細胞生命活動

提供能量,為其他有機物的合成提供原料(2)尿素其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4

NO3,不能起到篩選作用(3)為細菌生長提供無機營養(yǎng),作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定解析此題考查微生物的培養(yǎng)與利用。(1)尿素不能直接被植物吸收,但土壤中某些細菌可以

產生脲酶將尿素分解成氨和CO2,進而被植物吸收。土壤中能分解尿素的細菌是異養(yǎng)型細菌,

它們不能直接利用CO2合成有機物,只能以現(xiàn)成的葡萄糖等有機物為碳源。構成微生物培養(yǎng)

基的成分主要是水、無機鹽、碳源和氮源,葡萄糖在微生物培養(yǎng)基中既可作為碳源,也可作為

能源。(2)不同微生物對營養(yǎng)物質的需求不同,在培養(yǎng)基中加入特定的某種化學物質以抑制其

他微生物的生長或促進所需微生物的生長,這樣的培養(yǎng)基就可以起選擇作用。為獲得分解尿

素的細菌,可以把尿素作為唯一氮源。(3)微生物培養(yǎng)基中應包括水、無機鹽、碳源和氮源等,

另外,不同的微生物對pH的要求不同。培養(yǎng)基中的KH2PO4和Na2HPO4既可為細菌生長提供無

機營養(yǎng),又可保持培養(yǎng)基的特定pH。易錯警醒培養(yǎng)基中只加入尿素一種氮源,可將可分解尿素的細菌分離出來,這樣的培養(yǎng)基為

選擇培養(yǎng)基;培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,可分解尿素的細菌可將尿素分解形成氨,氨與水結合呈

堿性,會使酚紅指示劑呈紅色,從而形成紅色的透明圈,這樣的培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基。5.(2016課標全國Ⅰ,39,15分)空氣中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究

小組欲用平板收集教室空氣中的微生物,以了解教室內不同高度空氣中微生物的分布情況。

實驗步驟如下:①配制培養(yǎng)基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);②制作無菌平板;③設置空白對照組和若干實驗組,進行相關操作;④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間,統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉栴}:(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于

。若要完成步驟②,該培養(yǎng)基中的成分

X通常是

。(2)步驟③中,實驗組的操作是

。(3)若在某次調查中,某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板,而空白對照組的一個平板上

出現(xiàn)了6個菌落,這種結果說明在此次調查中出現(xiàn)了

現(xiàn)象。若將30(即36-6)個/平板作

為本組菌落數(shù)的平均值,該做法

(填“正確”或“不正確”)。答案(1)牛肉膏、蛋白胨瓊脂(2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上,開蓋暴露一段時間(3)污染不正確解析(1)培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨可為培養(yǎng)基中的微生物提供氮源;制備固體培養(yǎng)基需加

入瓊脂。(2)該實驗的目的是了解教室內不同高度空氣中微生物的分布情況,所以需在教室不

同高度的位置分別用平板收集微生物即開蓋暴露一段時間。(3)該實驗中空白對照組不應出

現(xiàn)菌落,若空白對照組出現(xiàn)了菌落,則說明此次調查中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象,實驗組的污染情況不能

確定,故不能用實驗組與空白對照組菌落數(shù)的差值作為實驗結果,而應重新進行實驗。解后反思本題15分只有5個空,這意味著某些空的賦分很高,答案肯定有較長的文字描述。

如(2)問實驗組的操作,實質上是考實驗組如何控制自變量和微生物培養(yǎng)中的接種操作,在回答

的時候應從這兩方面進行具體詳細的描述。C組

教師專用題組考點1發(fā)酵食品加工的基本方法1.(2013江蘇單科,14,2分)某研究性學習小組以櫻桃番茄為材料進行果酒、果醋發(fā)酵實驗。下

列相關敘述正確的是

()A.酵母菌是嗜溫菌,所以果酒發(fā)酵所需的最適溫度較高B.先供氧進行果醋發(fā)酵,然后隔絕空氣進行果酒發(fā)酵C.與人工接種的發(fā)酵相比,自然發(fā)酵獲得的產品品質更好D.適當加大接種量可以提高發(fā)酵速率、抑制雜菌生長繁殖答案

D本題考查果酒和果醋的制作的相關知識。果酒發(fā)酵一般將溫度控制在18~25℃,而

果醋發(fā)酵的適宜溫度為30~35℃,因此果醋發(fā)酵所需的最適溫度較高;應該先隔絕空氣進行果

酒發(fā)酵,然后植入醋酸桿菌,通入空氣,進行果醋發(fā)酵,因為醋酸桿菌可以將酒精轉變?yōu)榇姿?與

人工接種的發(fā)酵相比,自然發(fā)酵過程中菌種量比較少,且菌種本身品質不好,因此,自然發(fā)酵獲

得的產品品質較差;適當加大接種量,能提高發(fā)酵速率、抑制雜菌生長繁殖。解題思路①確定菌種,并比較兩菌種的代謝類型及溫度范圍;②聯(lián)系已學的相關知識,確定培

養(yǎng)的先后順序;③接種量大,有利于菌種快速達到一定數(shù)量,且可抑制其他雜菌的生長。2.(2012江蘇單科,21,3分)下列關于制作果酒、果醋和腐乳的敘述,合理的是(多選)

()A.在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時間可延長B.條件適宜時醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸C.果酒發(fā)酵過程中發(fā)酵液密度會逐漸減小D.將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時,底層和近瓶口處需加大用鹽量答案

ABC本題主要考查果酒、果醋和腐乳制作的知識。在果酒發(fā)酵的后期,酵母菌無氧

呼吸產生的CO2量較前期有氧呼吸產生的CO2量少,故A正確;當O2、糖源都充足時,醋酸菌將葡

萄汁中的糖分解成醋酸,故B正確;果酒發(fā)酵過程中葡萄糖逐漸被分解并釋放CO2,發(fā)酵液密度

會逐漸減小,故C正確;選項D中,腐乳制作過程中應隨層數(shù)的加高而增加鹽量,接近瓶口表面要

鋪厚一些,故D錯。3.(2010江蘇單科,7,2分)下圖表示果酒和果醋制作過程中的物質變化過程,下列敘述正確的是

()A.過程①和②都只能發(fā)生在缺氧條件下B.過程①和③都發(fā)生在酵母細胞的線粒體中C.過程③和④都需要氧氣的參與D.過程①~④所需的最適溫度基本相同答案

C生產果酒的菌種是酵母菌,屬于兼性厭氧型真核單細胞生物;生產果醋的菌種是醋

酸菌,屬于好氧型原核生物。圖中過程①不在線粒體內進行,且與氧氣存在與否無關,故A、B

不正確;酵母菌發(fā)酵的最適溫度為20℃左右,醋酸菌發(fā)酵的最適溫度為30~35℃,故D不正確;

而③、④過程都需要氧氣參與。4.(2016天津理綜,10,12分)天津獨流老醋歷史悠久、獨具風味,其生產工藝流程如下圖。淀粉類原料

成熟酒醅

成熟醋醅

(1)在糖化階段添加酶制劑需要控制反應溫度,這是因為酶

。(2)在酒精發(fā)酵階段,需添加酵母菌。在操作過程中,發(fā)酵罐先通氣,后密閉。通氣能提高

的數(shù)量,有利于密閉時獲得更多的酒精產物。(3)在醋酸發(fā)酵階段,獨流老醋采用獨特的分層固體發(fā)酵法,發(fā)酵30天。工藝如下。

①發(fā)酵過程中,定期取樣測定醋酸桿菌密度變化,趨勢如圖。據(jù)圖分析,與顛倒前相比,B層醋酸

桿菌在顛倒后密度變化的特點是

,由此推測,影響醋酸桿菌密度

變化的主要環(huán)境因素是

。②乳酸含量高是獨流老醋風味獨特的重要成因。發(fā)酵過程中,發(fā)酵缸中

層的醋醅有利于乳酸菌繁殖,積累乳酸。③成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少,主要原因是發(fā)酵后期營養(yǎng)物質消耗等環(huán)境因素的改變,

加劇了不同種類乳酸菌的

,淘汰了部分乳酸菌種類。答案(12分)(1)在最適溫度條件下催化能力最強(2)酵母菌(3)①先快速增長后趨于穩(wěn)定

氧氣、營養(yǎng)物質、pH②顛倒前的B層和顛倒后的A(或不翻動,或下)③種間競爭(或競爭)解析(1)因酶在最適溫度下的催化能力最強,故發(fā)酵過程中需控制好反應溫度。(2)酵母菌是

兼性厭氧型微生物,在有氧條件下分解有機物釋放能量多,繁殖快。(3)曲線圖顯示,與翻動前

相比,B層在翻動后醋酸桿菌密度先快速增加而后趨于穩(wěn)定,對比翻動前后B層醋酸桿菌所處

環(huán)境條件知,影響醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因素有氧氣濃度、pH及營養(yǎng)物質含量等。乳

酸菌是厭氧型微生物,處于發(fā)酵缸下層的醋醅有利于乳酸菌發(fā)酵產生乳酸。隨著發(fā)酵時間的

推移,環(huán)境中營養(yǎng)物質減少,代謝廢物增多,微生物生存條件惡劣,不同種乳酸菌間的競爭加劇,

部分菌種因不適應環(huán)境而被淘汰。審題方法解答本題的關鍵是理解獨流老醋的分層固體發(fā)酵的原理為有氧與無氧發(fā)酵環(huán)境

的更替?？键c2微生物的分離和培養(yǎng)1.(2013江蘇單科,18,2分)某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確

的是

()A.培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌B.轉換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進行劃線C.接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次答案

B本題考查了微生物實驗室培養(yǎng)的相關知識。培養(yǎng)基滅菌后再分裝到培養(yǎng)皿中;轉

換劃線角度前要灼燒接種環(huán),冷卻后再從上次劃線的末端開始進行劃線;接種后的培養(yǎng)皿需放

在恒溫箱中進行培養(yǎng),一般12h和24h后觀察記錄。錯因分析錯選A的主要原因是學生沒有親手做過這個動作或者做的時候沒有注意到這方面

的細節(jié),只是按照老師的要求做。而實際上先倒平板再滅菌是很難操作的,培養(yǎng)基很容易溢出

來,因為培養(yǎng)皿的高度只有1cm左右。2.(2015江蘇單科,31,8分)人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動物的胃,可用來發(fā)酵處理秸稈,提高秸

稈的營養(yǎng)價值。為了增強發(fā)酵效果,研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產菌株,并對其降解纖

維素能力進行了研究。請回答下列問題:(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中,下列選項不需要的是

(填序號)。①酒精燈②培養(yǎng)皿③顯微鏡④無菌水(2)在涂布平板時,滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是

。(3)向試管內分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時,若試管口粘附有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈的原因是

。(4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物,但并不與纖維素降解產物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這

種反應。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩到了幾株有透明降解圈的菌落(見圖)。圖中降

解圈大小與纖維素酶的

有關。圖中降解纖維素能力最強的菌株是

(填

圖中序號)。(5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產菌株J1和J4,在不同溫度和pH條件下進行發(fā)酵,測得發(fā)酵

液中酶活性的結果見圖,推測菌株

更適合用于人工瘤胃發(fā)酵,理由是

。

答案(8分)(1)③(2)培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液,導致菌體堆積,影響分離效果(3)避免培養(yǎng)基污染棉塞(4)量與活性①(5)J4發(fā)酵過程會產熱和產酸,J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高解析本題考查微生物培養(yǎng)與分離的相關知識。(1)樣品稀釋需用無菌水,在培養(yǎng)基中涂布接

種時需在酒精燈的火焰旁進行。(2)涂布平板時,滴加到培養(yǎng)基表面的菌液一般為0.1mL,量過

大將導致菌體密度過大而影響分離效果。(3)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時,試管口粘有培養(yǎng)基易造

成雜菌滋生,故應用酒精棉球擦凈。(4)纖維素酶活性越大,菌落周圍被分解的纖維素量也越

大,菌落周圍的透明圈也就越大。故圖中降解纖維素能力最強的菌株為①。(5)發(fā)酵過程中由

于呼吸作用產生較多的熱量和有機酸,故應選擇較高溫度和酸性環(huán)境中活性較高J4酶。審題技巧①審讀題干,獲取關鍵信息:“篩選纖維素酶高產菌株,并對其降解纖維素能力”。

“篩選”所用的稀釋涂布平板法中不需要顯微鏡;稀釋涂布的目的就是讓懸浮在水體中的微

生物盡量均勻地散布在瓊脂平板上,使長出的菌落彼此分開,便于挑取單個菌落,獲得純化菌

株。如果菌懸液過多,則難以形成獨立的單菌落。②由關鍵詞“酒精”,聯(lián)想到酒精用于消

毒。③由關鍵詞“纖維素”,聯(lián)想到其分解及鑒定的方法等。3.(2016四川理綜,10,12分)圖甲是從土壤中篩選產脲酶細菌的過程,圖乙是脲酶基因轉錄的

mRNA部分序列。

圖甲

圖乙(1)圖中選擇培養(yǎng)基應以

為唯一氮源;鑒別培養(yǎng)基還需添加

作指示劑,產脲酶細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后,其菌落周圍的指示劑將變成

色。(2)在5個細菌培養(yǎng)基平板上,均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1mL,培養(yǎng)一段時間后,平

板上長出的細菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程采取的接種方法是

,每克土壤樣品中的細菌數(shù)量為

×108個;與

血細胞計數(shù)板計數(shù)法相比,此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)較

。(3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活,突變后基因轉錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增

加了70個核苷酸,使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UAA)。突變基因轉

錄的mRNA中,終止密碼為

,突變基因表達的蛋白含

個氨基酸。答案(12分)(1)尿素酚紅紅(2)稀釋涂布平板法1.75少(3)UGA115解析(1)脲酶由分解尿素的細菌產生,故需用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選該類微生物。

分解尿素的細菌合成的脲酶可以將尿素分解成氨,故培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑后,菌落周圍將

出現(xiàn)紅色。(2)稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù),在計數(shù)時一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù),并取平均值。每克樣品中的菌株數(shù)=(C/V)×M。因培養(yǎng)基上兩個或多個細

胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落,故統(tǒng)計結果往往較實際數(shù)目少;而用血細胞計數(shù)

板計數(shù)時,死亡的、活的菌體都計數(shù)在內。(3)乙圖顯示,mRNA在箭頭以前有273個核苷酸(為

91個密碼子),箭頭處增加的70個核苷酸與后續(xù)的AG剛好組成24個密碼子,后面的UGA為終止

密碼。突變基因表達的蛋白質含91+24=115(個)氨基酸。知識歸納微生物菌體計數(shù)方法通常有稀釋涂布平板法、顯微鏡直接計數(shù)法、濾膜法等。

稀釋涂布平板法為活菌計數(shù)法,顯微鏡直接計數(shù)的是死、活菌的總數(shù)。評析本題綜合考查了分解尿素的細菌的篩選及基因表達的相關知識,難度適中。三年模擬A組2016—2018年高考模擬·基礎題組考點1發(fā)酵食品加工的基本方法1.(2016江蘇蘇、錫、常、鎮(zhèn)第二次調研,19)下圖表示利用蘋果制備果酒、果醋的流程圖。下

列有關敘述錯誤的是

()A.過程①接種人工培育的酵母菌可以提高蘋果酒的品質B.蘋果原醋可以為過程③提供所需菌種C.過程①所需的最適溫度低于過程②D.整個發(fā)酵過程都必須在嚴格無菌條件下才能正常進行答案

D人工培育的酵母菌純度高、性質單一,過程①接種人工培育的酵母菌可以提高蘋

果酒的品質,A正確;蘋果原醋中含有醋酸發(fā)酵所需的菌種,B正確;過程①所需的最適溫度是18

~25℃,過程②所需的最適溫度是30~35℃,C正確;對果酒發(fā)酵所用的果汁的滅菌并不嚴格,這些

雜菌通常不會引起發(fā)酵液的污染,主要原因是發(fā)酵過程主要處于缺氧環(huán)境,且發(fā)酵液為酸性,這

樣的條件絕大多數(shù)微生物無法適應,D錯誤。解題關鍵對果酒和果醋制作的原理和條件等的掌握是解答本題的關鍵。本題中的①為酒

精發(fā)酵,②③為兩種不同條件下的醋酸發(fā)酵。2.(2017江蘇揚、通、泰、淮、宿、徐二模,16)有關果酒、果醋和腐乳制作的比較,錯誤的是

()A.主要菌種不一定是真核生物B.溫度控制必須保證微生物繁殖最快C.發(fā)酵過程會產生CO2并釋放熱量D.可通過色、香、味等對產品進行評價答案

B醋酸菌為原核生物,A正確;需要根據(jù)培養(yǎng)目的來掌握溫度,而不一定保證微生物繁

殖最快,B錯誤;發(fā)酵過程菌種必須呼吸,會產生CO2并釋放熱量,C正確;可通過色、香、味等對

產品進行評價,D正確。解后反思本題綜合考查果酒、果醋和腐乳制作的內容。從試題考查角度分析,給我們的啟

發(fā)是學習備考中需善于綜合,經常性地將某一類相似知識放在一起進行比較,找出它們的聯(lián)系。3.(2017江蘇連云港三模,19)關于果酒、果醋、腐乳制作的敘述,正確的是

()A.發(fā)酵使用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌B.為了提高發(fā)酵產出量,果汁或豆腐應盡量裝滿發(fā)酵瓶C.制作過程均需先通入無菌空氣,短時間后將發(fā)酵瓶密閉D.發(fā)酵過程中控制好溫度、pH既有利于目的菌的生長,也可抑制雜菌的生長答案

D果酒、果醋、腐乳制作使用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌、毛霉,A錯誤;果酒發(fā)

酵時所使用的果汁不能裝滿發(fā)酵瓶,通常留下1/3的空間,B錯誤;醋酸菌和毛霉都屬于需氧生

物,全程都需要氧氣,C錯誤;不同微生物所需的最適溫度、pH不同,因此可通過控制溫度、pH

來抑制雜菌的生長,D正確。易錯提醒①果酒發(fā)酵時,果汁裝瓶時只能裝至2/3,留下1/3空間。②制作過程是否需氧氣要

看具體菌種的代謝特點。4.(2018江蘇揚、通、泰、連、徐、淮、宿三模,18)下列有關腐乳制作的敘述,錯誤的是

(

)A.材料選擇:豆腐含水量在70%左右、切小塊有利于接種毛霉孢子B.毛霉生長:發(fā)酵溫度控制在15~18℃,菌絲呈淡黃色時終止發(fā)酵C.加鹽腌制:隨豆腐小塊層數(shù)增加而增加鹽量,析出豆腐中全部水分D.配制鹵湯:鹵湯酒含量控制在12%左右,含量過低容易導致豆腐腐敗答案

C豆腐含水量通常在70%左右,不能太高或太低,將豆腐切成小塊有利于接種更多的

毛霉孢子,便于快速發(fā)酵,A正確;毛霉生長繁殖所需的溫度在15~18℃,當菌絲呈淡黃色時,說明

發(fā)酵成熟,終止發(fā)酵,B正確;加鹽會讓豆腐中的水分析出,但不可能析出豆腐中全部的水分,C錯

誤;鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右,加酒可以抑制微生物的生長,同時能使腐乳具有獨特

香味,D正確。解后反思解答這一類題時只有記住相關的基礎知識,才能很好地作出判斷?？键c2微生物的分離和培養(yǎng)5.(2018江蘇揚、通、泰、連、徐、淮、宿三模,19)下列有關微生物培養(yǎng)的敘述,正確的是

()A.溶化牛肉膏時,稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯B.涂布接種時,涂布器應在干熱滅菌箱中滅菌冷卻后再使用C.純化培養(yǎng)時,培養(yǎng)皿應倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內的搖床上培養(yǎng)D.觀察菌落時,應將培養(yǎng)皿蓋拿掉后在顯微鏡下進行觀察計數(shù)答案

A在制備培養(yǎng)基時,由于牛肉膏比較黏稠,稱取時放在稱量紙上稱量,溶化時連同稱量

紙一同放入燒杯加水溶化,當牛肉膏溶化并與稱量紙分離后,用玻璃棒取出稱量紙,A正確;涂布

器應放在酒精中消毒,B錯誤;純化培養(yǎng)時,培養(yǎng)皿應倒置放在恒溫箱中靜置培養(yǎng),使用時,將沾

有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,C錯誤;觀察菌落時不能將培養(yǎng)皿蓋拿掉,以防被其他雜菌

污染,D錯誤。易錯提醒對制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的過程和操作步驟不清楚,對每一步驟的操作及

目的一知半解,都是不能正確解答的關鍵因素。對于題中其他三個選項涉及的內容同樣存在

這一問題。6.(2016江蘇南京、鹽城一模,17)下列有關用平板劃線法和稀釋涂布平板法純化培養(yǎng)大腸桿菌

的敘述,正確的是

()①都需要用固體培養(yǎng)基②都需要使用接種針進行接種③都需要在火焰旁進行接種④都可以用菌落數(shù)來計數(shù)活菌A.①②B.①③C.②④D.③④答案

B平板劃線法和稀釋涂布平板法使用的都是固體培養(yǎng)基,①正確;平板劃線法使用的

接種工具是接種針或接種環(huán),稀釋涂布平板法使用的是涂布器,②錯誤;都需要在酒精燈火焰旁

進行接種,以防雜菌污染,③正確;平板劃線法不能用來計數(shù)菌落,稀釋涂布平板法可用來計數(shù)

菌落數(shù),④錯誤。關鍵知識①平板劃線法和稀釋涂布平板法所利用的培養(yǎng)基都是固體培養(yǎng)基;②接種時所用

的接種工具分別是接種環(huán)(或接種針)和涂布器;③二者都需要在酒精燈火焰旁進行接種;平板

劃線法只能用于分離,不能用于計數(shù)菌落數(shù)。7.(2017江蘇江浦高中三模,20)下圖為實驗室培養(yǎng)和純化大腸桿菌的部分操作步驟,下列說法

正確的是

()A.步驟①中待培養(yǎng)基冷卻后才能蓋上培養(yǎng)皿蓋B.步驟④中接種環(huán)共需5次灼燒處理C.將接種后的圖④平板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時無需倒置D.①②③步驟操作時都需要在酒精燈火焰旁進行答案

D步驟①將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中應立即蓋上培養(yǎng)皿蓋,A錯誤;每次劃線

前后都要對接種環(huán)進行灼燒處理,因此步驟④中接種環(huán)共需6次灼燒處理,B錯誤;劃線接種結

束后,將平板倒置后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),防止冷凝水污染培養(yǎng)基,C錯誤;培養(yǎng)與純化大腸桿菌的過

程需要在酒精燈火焰旁進行,D正確。名師點睛本題以“實驗室培養(yǎng)和純化大腸桿菌的部分操作步驟示意圖”為情境,綜合考查學生對微生物培養(yǎng)的相關知識的理解能力。正確解答此類問題需要明確相關的基礎知識、形成清晰的知識網絡;在平時的復習中一定要注意圖文結合,進而達到鞏固熟記基礎知識的目的。8.(2018江蘇蘇、錫、常、鎮(zhèn)三模,18)下列有關微生物分離、純化及計數(shù)的敘述,錯誤的是

()A.常用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素分解菌B.平板劃線法通過連續(xù)劃線將聚集的菌種分散并計數(shù)C.稀釋涂布平板法通過系列梯度稀釋可將微生物分散D.用血細胞計數(shù)板計數(shù)微生物時,實驗結果往往偏大答案

B用富含纖維素的培養(yǎng)基培養(yǎng)可獲得能利用纖維素的微生物,微生物可以在上面生

長繁殖,A正確;平板劃線法不能用來計數(shù),B錯誤;稀釋涂布平板法通過系列梯度稀釋可以將微

生物分散,C正確;由于用血細胞計數(shù)板計數(shù)時,對細胞死活沒有區(qū)分的功能,因此計數(shù)后所得到

的數(shù)值往往偏大,D正確。易錯提醒平板劃線法能分離微生物,但不能用來計數(shù);稀釋涂布平板法既能分離微生物,又能

計數(shù)。9.(2018江蘇南通考前卷六,17)下列生物學實驗操作中,能順利達到實驗目的的是

()A.利用五點取樣法抽樣調查國道兩側隔離帶中一枝黃花的密度B.在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入尿素篩選能分解尿素的細菌C.在固體培養(yǎng)基上涂布稀釋大腸桿菌培養(yǎng)液獲得單菌落D.切取小塊植物葉片直接接種到某種植物組織培養(yǎng)基上獲得植株答案

C用樣方法調查種群密度的常用取樣方法包括五點取樣法和等距取樣法,國道兩側

隔離帶呈長方形,調查國道兩側隔離帶中一枝黃花的密度應用等距取樣法,A錯誤;應用只以尿

素為唯一碳源和氮源的培養(yǎng)基篩選能分解尿素的細菌,B錯誤;在固體培養(yǎng)基上涂布稀釋大腸

桿菌培養(yǎng)液可以獲得單菌落,C正確;植物組織培養(yǎng)中的外植體應進行消毒,然后在無菌的條件

下接種到某種植物組織培養(yǎng)基上,給予合適的條件才能獲得植株,D錯誤。10.(2018江蘇揚、通、泰、徐、淮、宿六市二模,33)下圖1表示研究人員為篩選纖維素酶高產

菌株進行的相關實驗流程,其中透明圈是微生物在固體培養(yǎng)基上消耗特定營養(yǎng)物質形成的。

請回答下列問題:

圖1

(1)本實驗中,選擇蘑菇培養(yǎng)基質作為纖維素酶高產菌株的來源,這是因為

。(2)篩選用的培養(yǎng)基應以

作為唯一碳源,并在配制培養(yǎng)基時加入

作為凝固劑。篩選時應選擇D/d較大的菌株,因為這一指標值越大說明

。(3)圖2、圖3是研究纖維素酶的最適溫度和熱穩(wěn)定性的結果。①研究纖維素酶的熱穩(wěn)定性時,首先將纖維素酶液置于35~65℃的不同溫度條件下保溫2h,再取上述不同溫度處理的纖維素酶液和

,并在

℃下測定纖維素酶的催化速率,計算酶活性殘留率。②生產中使用該纖維素酶時,最好將溫度控制在40℃左右,依據(jù)是

。答案(1)蘑菇培養(yǎng)基質中富含纖維素,會聚集較多的纖維素分解菌(2)纖維素瓊脂單個

菌體產生的纖維素酶的活性越強(3)未經保溫處理的纖維素酶液50該溫度下,纖維素酶

的熱穩(wěn)定性高,作用時間持久,且酶活性相對較高解析本題主要考查纖維素分解菌的篩選及纖維素酶活性測定的相關內容,意在強化相關知

識點的識記與理解。土壤中存在大量的纖維素分解菌,包括真菌、細菌與放線菌等,它們可以

產生纖維素酶。纖維素酶是一種復合酶,可以把纖維素分解為纖維二糖,進一步分解為葡萄糖

供微生物利用,故在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中,纖維素分解菌能夠很好地生長,其他微生

物則不能生長。在培養(yǎng)基中加入剛果紅,剛果紅可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物,當纖

維素被分解后,紅色復合物不能形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,從而可

篩選纖維素分解菌。(1)蘑菇培養(yǎng)基質中富含纖維素,會聚集較多的纖維素分解菌,因此本實驗

中選擇蘑菇培養(yǎng)基質作為纖維素酶高產菌株的來源。(2)篩選纖維素分解菌,用的培養(yǎng)基應以

纖維素作為唯一碳源,這樣纖維素分解菌能正常生長,其他微生物則不能生長。篩選用的培養(yǎng)

基是固體培養(yǎng)基,應加入瓊脂作為凝固劑。篩選時應選擇D/d較大的菌株,因為這一指標值越

大說明單個菌體產生的纖維素酶的活性越強。(3)①根據(jù)對照實驗的基本原則,應選擇上述不

同溫度處理的纖維素酶液和未經保溫處理的纖維素酶液,又據(jù)圖2可知,在50℃時酶的活性最

高,因此在50℃測定纖維素酶的催化速率,計算酶活性殘留率。②據(jù)圖3可知,在40℃左右,纖維

素酶的熱穩(wěn)定性高,作用時間持久,且酶活性相對較高,因此生產中使用該纖維素酶時,最好將溫度控制在40℃左右。一、選擇題(單選每題2分,多選每題3分,共19分)B組2016—2018年高考模擬·綜合題組(時間：30分鐘分值：50分)1.(2016江蘇揚、通、泰第二次調研,18)在分離、純化大腸桿菌實驗中,劃線接種(甲)、培養(yǎng)結

果(乙)如圖。有關敘述錯誤的是

()A.接種前應對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌B.連續(xù)劃線的目的是獲得單個細菌形成的菌落C.接種過程中至少需要對接種環(huán)灼燒5次D.甲中a區(qū)域為劃線的起始位置答案

D培養(yǎng)基滅菌通常用高壓蒸汽滅菌法,A正確;菌液經過連續(xù)劃線,線上的菌體越來越

少,容易形成單菌落,B正確;在每次劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌,因此按照圖中劃線順序,

整個劃線過程至少需要對接種環(huán)灼燒5次,C正確;每次劃線的菌種來自上一區(qū)域的末端,因此

起始區(qū)域的菌落應相對較多,由圖乙可知,d區(qū)域菌落多,為劃線的起始位置,D錯誤。分析方法①分析圖甲,確定甲中劃線4次,分析圖確定劃線的先后;②對接種環(huán)灼燒次數(shù)的分

析:每次接種前都需灼燒接種環(huán),最后一次劃線結束還需灼燒接種環(huán),以防污染環(huán)境。2.(2018江蘇南通考前卷三,20)高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產中有很大的實用性。研究者從熱

泉中篩選了高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌,其篩選過程如下圖所示。下列說法錯誤的是

(

)

A.①過程的目的是稀釋B.②過程所使用的接種方法是稀釋涂布平板法C.Ⅰ號、Ⅱ號培養(yǎng)基都屬于固體培養(yǎng)基,先滅菌后調節(jié)pHD.從Ⅰ號培養(yǎng)基挑出透明圈大的菌落,接種到Ⅱ號培養(yǎng)基上答案

C圖中①過程是稀釋嗜熱菌培養(yǎng)液的過程,A正確;接種嗜熱菌即②過程所使用的接

種方法是稀釋涂布平板法,B正確;分析圖示信息可知,Ⅰ號、Ⅱ號培養(yǎng)基都屬于固體培養(yǎng)基,培

養(yǎng)基配制和滅菌過程中,應注意先調節(jié)pH后滅菌,C錯誤;部分嗜熱菌在Ⅰ號培養(yǎng)基上生長時可

產生淀粉酶,分解培養(yǎng)基中的淀粉后會在菌落周圍形成透明圈,透明圈越大,說明產生的淀粉酶

越多,因此應挑選透明圈大的菌落接種在Ⅱ號培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),D正確。易錯提醒關于制備培養(yǎng)基時pH調節(jié)的時間:溶化后、滅菌前。3.(2016江蘇蘇、錫、常、鎮(zhèn)第二次調研,25)下列有關生物技術實踐操作的敘述,錯誤的是(多

選)

()A.倒平板操作中,待平板冷卻凝固后將平板倒過來放置B.利用平板劃線法分離純化大腸桿菌時,只能分離大腸桿菌但不能對其進行計數(shù)C.在腐乳制作過程中,向腐乳表面噴水有利于毛霉菌絲的生長D.配制植物組培的培養(yǎng)基時,用等量葡萄糖代替蔗糖不會影響細胞的分裂分化答案

CD倒平板操作中,待平板冷卻凝固后將平板倒過來放置,以防冷凝水落入培養(yǎng)基,造

成污染,A正確;平板劃線法不能用于計數(shù),B正確;在腐乳制作過程中,向腐乳表面噴水會造成濕

度過大,不利于毛霉菌絲的生長,C錯誤;配制植物組培的培養(yǎng)基時,等量葡萄糖代替蔗糖會影響

細胞的分裂分化,D錯誤。易錯分析有同學誤認為向腐乳表面噴水有利于毛霉的生長,沒有考慮毛霉的代謝特點;蔗糖

不僅能為組織細胞提供能源物質,還能維持滲透壓。4.(2017江蘇蘇、錫、常、鎮(zhèn)調研二,18)下列有關菌種保藏的敘述中,錯誤的是

()A.頻繁使用的菌種,可用斜面培養(yǎng)基保藏在4℃的冰箱中B.臨時保藏菌種的培養(yǎng)基不需要定期更換C.長期保藏的菌種,需要降低代謝和變異發(fā)生概率D.長期保藏菌種時,可各取1mL滅菌甘油和培養(yǎng)菌液混合后保存在冷凍箱中答案

B頻繁使用的菌種,可用斜面培養(yǎng)基保藏在4℃的冰箱中,A正確;臨時保藏菌種的培養(yǎng)

基也需要定期更換,B錯誤;長期保藏的菌種,需要降低代謝和變異發(fā)生概率,可以采用甘油管藏

的方法,C、D正確。解題關鍵對教材基礎知識的掌握是解答這一題的關鍵。5.(2018江蘇南通考前卷四,19)下列有關用平板劃線法和稀釋涂布平板法純化培養(yǎng)大腸桿菌的

敘述,正確的是

()①都需要用固體培養(yǎng)基②都需要使用接種針進行接種③都需要在火焰旁進行接種④都可以用菌落數(shù)來計數(shù)活菌A.①②B.①③C.②④D.③④答案

B平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落,都需要用固體培

養(yǎng)基,①正確;稀釋涂布平板法不需要使用接種針進行接種,②錯誤;為防止雜菌污染,操作時都

需要在火焰旁進行接種,③正確;平板劃線法不能用于計數(shù)活菌,只能用于分離菌種;稀釋涂布

平板法可以用來計數(shù)活菌,④錯誤。6.(2017江蘇南京、鹽城二模,17)某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物

A,研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素等配制的培養(yǎng)基,成功篩選到能高效降

解化合物A的細菌(目的菌),實驗的主要步驟如圖所示。下列有關敘述錯誤的是

()A.培養(yǎng)基中加入化合物A作為唯一碳源,目的是篩選目的菌B.實驗培養(yǎng)過程中進行振蕩培養(yǎng),可使目的菌和培養(yǎng)液充分接觸C.實驗操作過程中,獲得純凈“目的菌”的關鍵是防止外來雜菌污染D.將固體培養(yǎng)基得到的目的菌重復多次上述實驗的目的是獲得大量菌種答案

D本實驗的目的是“篩選到能高效降解化合物A的細菌”,因此培養(yǎng)基中加入化合物

A作為唯一碳源,目的是篩選目的菌,A正確;實驗培養(yǎng)過程中進行振蕩培養(yǎng),可使目的菌和培養(yǎng)

液充分接觸,B正確;實驗操作過程中,獲得純凈“目的菌”的關鍵是防止外來雜菌污染,C正確;

本實驗中需要振蕩培養(yǎng),因此所用培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基,D錯誤。7.(2018江蘇淮陰、南師附中、海門、天一四校聯(lián)考,13)下圖是草莓酒制作的步驟。下列分析

中錯誤的是

()A.步驟②是對草莓進行沖洗處理B.步驟⑤為加入酵母菌液或含酵母菌的凝膠珠C.發(fā)酵過程中放氣量先增加后減少D.利用溴麝香草酚藍水溶液檢測酒精的含量答案

D步驟②是對草莓進行沖洗,A正確;步驟⑤為加入酵母菌液或含酵母菌的凝膠珠,B

正確;發(fā)酵過程中,開始一段時間酵母菌進行有氧呼吸,釋放的二氧化碳多,隨著氧氣量的減少,

酵母菌進行無氧呼吸產生酒精,釋放的二氧化碳減少,C正確;利用酸性重鉻酸鉀溶液檢測酒精

的含量,D錯誤。名師點睛溴麝香草酚藍水溶液可用來檢測CO2,檢測酒精用的試劑通常是酸性重鉻酸鉀溶液。8.(2018江蘇蘇、錫、常、鎮(zhèn)調研一,17)總狀毛霉和米根霉是常見的霉菌。研究人員將總狀毛

霉和米根霉的孢子懸液分別接種到兩組豆腐切塊上,完成前期發(fā)酵后,分別測定兩組霉菌產生

的蛋白酶的活力,結果如下圖。據(jù)圖分析,下列有關敘述正確的是

()A.總狀毛霉與米根霉都能利用蛋白酶將分解產生的肽和氨基酸分泌到細胞外B.總狀毛霉與米根霉接種量與蛋白酶活力呈正相關C.相同適宜條件下接種等量的兩種菌,總狀毛霉使豆腐塊中的蛋白質減少更多D.接種量為5CFU/mL時發(fā)酵制作的腐乳品質最好答案

C總狀毛霉與米根霉都能將蛋白酶分泌到細胞外,進而將豆腐塊中的蛋白質分解產

生肽和氨基酸,A錯誤;據(jù)圖分析,隨著接種量的增加,總狀毛霉與米根霉產生的蛋白酶的活力都

是先增加后減弱,酶活力并不是一直與接種量呈正相關,B錯誤;相同適宜條件下接種等量的兩