第七章真核細(xì)胞型微生物

第七章真核細(xì)胞型微生物

第一節(jié)真菌（Fungus）概述真核細(xì)胞型微生物（具有細(xì)胞壁和典型細(xì)胞核，細(xì)胞結(jié)構(gòu)比較完整，不含葉綠素，無根、莖、葉的分化）廣泛存在自然界，少數(shù)為單細(xì)胞（酵母）

，多數(shù)為多細(xì)胞（霉菌和蕈菌

）多數(shù)對人類有益，僅少數(shù)致病，也多為條件致病，稱為病原性真菌。比細(xì)菌大幾倍至幾十倍，用普通光學(xué)顯微鏡放大100-500倍就可看清。

真菌細(xì)菌細(xì)胞真核細(xì)胞原核細(xì)胞細(xì)胞核有，還有核仁、核膜擬核，無核仁、核膜細(xì)胞器有只有核糖體細(xì)胞壁無肽聚糖，有葡聚糖和幾丁質(zhì)有肽聚糖對青霉素或頭孢菌素敏感不敏感敏感細(xì)胞膜含固醇、麥角固醇不含固醇大小，復(fù)雜程度比細(xì)菌大幾倍至幾十倍，結(jié)構(gòu)復(fù)雜小，簡單

真菌不是植物真菌不含葉綠素，以吸收為營養(yǎng)方式，寄生或腐生，無根、莖、葉的分化。具有典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，分單細(xì)胞和多細(xì)胞兩大類。1、單細(xì)胞真菌：圓形或卵圓形。酵母型真菌：由母細(xì)胞以芽生方式繁殖，如新生隱球菌；類酵母型真菌：芽生方式繁殖，有假菌絲（芽管延長不脫落），如白假絲酵母菌。生物學(xué)性狀形態(tài)與結(jié)構(gòu)單細(xì)胞真菌形態(tài)新生隱球菌新生隱球菌酵母菌出芽繁殖芽生孢子成熟后脫落成獨立個體2、多細(xì)胞真菌：菌絲與孢子交織成團(tuán)----絲狀菌（霉菌,mold）。各種絲狀菌的菌絲和孢子形態(tài)不同，是鑒別真菌的重要標(biāo)志。多細(xì)胞真菌形態(tài)sporehyphaPenicillium（1）菌絲hypha有隔菌絲多數(shù)致病性真菌無隔菌絲營養(yǎng)菌絲氣中菌絲生殖菌絲在環(huán)境適宜情況下由孢子長出芽管，逐漸延長呈絲狀，稱菌絲，菌絲交織成團(tuán)稱菌絲體。菌絲形態(tài)多樣，故菌絲形態(tài)有助于菌種鑒別（2）孢子（spore)：是真菌的繁殖器官。由生殖菌絲產(chǎn)生而成，一條菌絲可長出多個孢子。在適宜條件下，孢子可發(fā)芽伸出芽管形成菌絲。無性孢子：菌絲上的細(xì)胞分化而成，并不發(fā)生細(xì)胞融合。大多數(shù)病原性球菌屬之。有性孢子：由同一菌體或不同菌體上的二個細(xì)胞融合形成。

孢子的形態(tài)多樣，可作為鑒別及分類的依據(jù)。大分生孢子大小、細(xì)胞數(shù)和顏色是鑒定的重要依據(jù)小分生孢子真菌都能產(chǎn)生，診斷意義不大芽生孢子假菌絲

厚膜孢子關(guān)節(jié)孢子

分生孢子葉狀孢子由菌絲內(nèi)細(xì)胞直接形成孢子囊孢子由菌絲末端膨大成孢子囊，內(nèi)含許多孢子，如毛霉，根霉分生孢子由菌絲末端的細(xì)胞分裂形成，單個、成簇或鏈狀排列真菌孢子一條菌絲可產(chǎn)生多個孢子抵抗力較強，煮沸時間短不死抵抗力不強，60-70°C短時間即死是一種繁殖方式不是繁殖方式一個細(xì)菌只產(chǎn)生一個芽胞1、2、3、細(xì)菌芽胞犬小孢子菌之大分生孢子培養(yǎng)與繁殖特點：營養(yǎng)要求不高最適PH(4.0-6.0)

高濕度和氧最適溫度：22-28℃，深部真菌為37℃。培養(yǎng)基：沙保弱(Sabouraud)培養(yǎng)基，生長緩慢，1-4周才出現(xiàn)典型菌落繁殖方式：單細(xì)胞---出芽多細(xì)胞---孢子菌落：單細(xì)胞--酵母型菌落、

類酵母型菌落（假菌絲），如念珠菌多細(xì)胞--絲狀菌落染色：小培養(yǎng)和乳酚棉藍(lán)染色觀察菌絲和孢子的結(jié)構(gòu)和排列酵母型菌落：單細(xì)胞真菌的菌落形式，菌落濕潤，柔軟而致密，形態(tài)與一般菌落相似。如隱球菌。絲狀菌落：多細(xì)胞真菌的菌落形式，由許多疏松的菌絲體構(gòu)成，菌落呈棉絮狀，絨毛狀或粉末狀。類酵母型菌落：部分單細(xì)胞真菌在出芽繁殖后，芽管延長不與母細(xì)胞脫離，形成假菌絲，假菌絲由菌落向下生長，伸入培養(yǎng)基。如假絲酵母菌。酵母型菌落C.albicans菌落(類酵母型)曲霉屬青霉菌落抵抗力對干燥、日光、紫外線及一般消毒劑抵抗力強對熱敏感，60℃1小時菌絲、孢子均被殺死對2%石碳酸、0.1%升汞、2.5%碘酊或10%甲醛敏感對常用于抗細(xì)菌感染的抗生素不敏感。對灰黃霉素、解霉菌素、二性霉素B、制霉菌素、咪康唑、克霉唑、酮康唑、氟康唑和伊曲康唑敏感真菌的毒力

37℃生長粘附因子酵母相－菌絲相轉(zhuǎn)換侵襲性酶類如蛋白酶、磷脂酶莢膜（隱球菌）

致病性和免疫性致病性感染：

淺部真菌感染，如皮膚癬真菌病，這些真菌有嗜角質(zhì)性，在皮膚局部大量繁殖后，通過機械刺激和代謝產(chǎn)物的作用，引起局部炎癥和病變。深部感染真菌遭吞噬細(xì)胞吞噬后，不被殺死而能在細(xì)胞內(nèi)繁殖，引起組織慢性肉芽腫性炎癥和組織壞死潰瘍形成。

條件致病性感染：

內(nèi)源性真菌感染,機體免疫力低下時發(fā)生，如白假絲酵母菌、曲霉、毛霉等引起。

超敏反應(yīng)：敏感患者吸如孢子或菌絲,引起超敏反應(yīng)如蕁麻疹、哮喘、變應(yīng)性鼻炎等。

真菌性中毒：

糧食受潮霉變，攝入真菌或其產(chǎn)生的毒素后可引起急、慢性中毒稱為真菌中毒癥（mycotoxicosis)。主要有：黃曲霉毒素和鐮刀菌毒素地區(qū)性、季節(jié)性、無傳染性免疫性

1.天然免疫免疫力與機體免疫狀態(tài)有關(guān)皮膚粘膜屏障作用（皮脂腺分泌不飽和脂肪酸）正常菌群的拮抗作用如白色念珠菌吞噬細(xì)胞的作用：中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞在抗真菌感染中起重要作用，真菌的孢子或酵母相的真菌易被其吞噬。近年來發(fā)現(xiàn)tuftsin（促癬吞噬肽）可增強中性粒細(xì)胞的吞噬和殺菌作用免疫性

2.獲得性免疫真菌感染的痊愈與細(xì)胞免疫有關(guān)細(xì)胞免疫，Th1細(xì)胞產(chǎn)生IFN-IL-2等激活巨噬細(xì)胞，Th1細(xì)胞還可誘發(fā)遲發(fā)型超敏反應(yīng)，控制真菌感染的擴散特異性抗體可通過中和作用抑制真菌吸附，通過調(diào)理作用增強吞噬細(xì)胞的吞噬，但抗體與補體對真菌的溶菌作用不明顯，可能與其胞壁較厚有關(guān)微生物學(xué)檢查法標(biāo)本淺部感染真菌毛發(fā)、皮屑、指甲深部感染真菌痰、血液、腦脊液等直接鏡檢：淺部標(biāo)本---KOH處理后鏡檢，通常不染色假絲酵母菌---革蘭染色（芽生孢子、假菌絲）隱球菌---墨汁負(fù)染（厚莢膜）其他多細(xì)胞真菌----特殊染色如乳酚棉蘭染色，鏡檢

分離培養(yǎng)

常用于直接鏡檢不能確定有無及種類，常用沙氏培養(yǎng)基，培養(yǎng)方法常用試管法和小培養(yǎng)。菌落特征是鑒定的重要依據(jù)。組織病理學(xué)檢查血清學(xué)檢查淺部感染真菌不作血清學(xué)檢查，深部感染真菌可檢測其特異性抗原皮試

如皮膚癬菌素、孢子絲菌素假絲酵母菌抗原，類似于PPD皮試防治原則皮膚癬菌的傳播主要靠孢子深部感染真菌大多是一些條件致病菌，預(yù)防的關(guān)鍵是提高機體抵抗力局部感染治療：外用藥有酮康唑、咪康唑和克霉唑系統(tǒng)感染治療：口服有兩性霉素B、伊曲康唑及咪唑類抗真菌藥等

第二節(jié)常見的病原性真菌

一、皮膚癬真菌（Dermatophytes）引起皮膚淺部感染嗜角質(zhì)蛋白，侵犯部位：角化的表皮，毛發(fā)，指（趾）甲病理變化：由真菌增殖及代謝產(chǎn)物刺激宿主引起一種皮膚癬菌可在不同部位引起病變

相同部位的病變也可由不同的皮膚癬菌引起

指（趾）甲皮膚毛發(fā)毛癬菌+++表皮癬菌屬++-小孢子癬菌屬-+

+

腳癬灰指甲臨床意義皮膚癬菌易侵犯人體皮膚、指甲、毛發(fā)的角蛋白組織并生長繁殖致病，是因為其能產(chǎn)生角質(zhì)溶解酶。皮膚癬菌是接觸傳染，只要反復(fù)接觸患者均有可能被感染。在同一病人有不同的臨床表現(xiàn)，如毛癬菌屬可引起發(fā)癬、體癬、甲癬；而相同部位的病可由不同皮膚癬菌引起，如甲癬(俗稱灰指甲)可由毛癬菌屬和表皮癬菌屬引起。微生物檢驗1．標(biāo)本采集采集新發(fā)生的皮膚損害邊緣皮屑；指甲近尖端下面甲屑；拔取無光澤病發(fā)，黃癬采集黃癬痂。將標(biāo)本盛于清潔紙袋，鱗屑要用黑紙包好。2．直接顯微鏡檢查皮屑標(biāo)本用10％KOH液制成濕片，指甲用25％KOH或25％NaOH含5％甘油處理。鏡檢可見透明、有隔，常有分支的菌絲及成鏈的關(guān)節(jié)孢子，三個癬菌屬難以鑒別。毛癬菌屬感染病發(fā)有發(fā)外型和發(fā)內(nèi)型孢子，而小孢子菌屬只有發(fā)外型孢子。3．分離培養(yǎng)與鑒定皮屑、甲屑和病發(fā)標(biāo)本，先用70％乙醇或在青、鏈霉素混合液內(nèi)處理5min，再用生理鹽水洗3次，然后接種沙氏瓊脂斜面，25℃培養(yǎng)，每周觀察菌落形態(tài)及顏色，直至第四周。挑取菌落鏡檢菌絲和孢子，也可作棉蘭染色后鏡檢或作小培養(yǎng)后鏡檢。必要時作其他鑒定如毛發(fā)穿孔試驗、脲酶試驗和特殊營養(yǎng)需要試驗等來鑒定皮膚癬菌。毛發(fā)穿孔試驗是將頭發(fā)發(fā)剪成lcm長，置于已加入25ml蒸餾水和2—3滴10％酵母浸膏液的平皿內(nèi)，高壓滅菌。將待檢皮膚真菌接種于平皿內(nèi)，置25℃孵育四周，每周檢查一次，每次取數(shù)根毛發(fā)置載玻片上，經(jīng)乳酚棉藍(lán)染色后，置低倍鏡下觀察。若毛發(fā)有裂口或陷凹者為陽性，否則為陰性。4．藥物敏感試驗皮膚癬菌對灰黃霉素、伊曲康唑等藥物敏感。防治方法：預(yù)防主要靠注意清潔衛(wèi)生，避免接觸，保持鞋襪干燥等；治療采用抗真菌藥，灰黃霉素，制霉菌素等目前尚無有效疫苗預(yù)防皮膚癬病。

二、白色念珠菌是假絲酵母菌屬中最常見的病原菌。念珠菌病是最常見條件致病性真菌。生物學(xué)性狀1、形態(tài)與結(jié)構(gòu)：圓形或卵圓形，革蘭氏陽性，但染色均；在組織內(nèi)形成芽生孢子和假菌絲；培養(yǎng)后可形成厚膜孢子。2、培養(yǎng)特性：在普通瓊脂培養(yǎng)基、血平板及沙保弱瓊脂培養(yǎng)基上均生長良好；37℃培養(yǎng)2~3天后可出現(xiàn)典型的類酵母菌落。在玉米粉瓊脂培養(yǎng)基上可形成假菌絲，并產(chǎn)生厚膜孢子。致病性皮膚粘膜念珠菌?。葫Z口瘡，口角糜爛等

內(nèi)臟念珠菌?。耗钪榫阅c炎、肺炎及腦膜炎泌尿生殖道念珠菌?。号裕幍姥?、尿道炎男性，龜頭包皮炎等

微生物學(xué)檢查：直接鏡檢假菌絲和厚膜孢子可幫助診斷1、除去危險因素如潮濕、停止長期應(yīng)用抗生素等；2、鵝口瘡及皮膚黏膜念珠菌病治療可局部涂敷制霉菌素、龍膽紫、酮康唑等；3、深部感染可用兩性霉素B治療或與口服氟胞嘧啶合用；4、目前尚未建立起有效的預(yù)防措施。防治原則三、新生隱球菌在自然界分布廣泛；也存在于人體的體表、口腔和糞便中；大量存在于干燥的鴿糞中生物學(xué)性狀1、形態(tài)與結(jié)構(gòu)：圓形的酵母樣細(xì)胞，菌體外周有一層肥厚的莢膜。一般染色法不易著色，故稱隱球菌。用墨汁負(fù)染色后可見黑色的背景中見到圓形或卵圓形透亮菌體。菌體可見出芽，但不形成假菌絲。2、培養(yǎng)特性：在血平板及沙保弱瓊脂培養(yǎng)基上25~37℃培養(yǎng)數(shù)天后可出現(xiàn)酵母型菌落；致病性外源性感染，肺是主要入侵途徑，多數(shù)癥狀不明顯，能自愈；有的引起支氣管肺炎；嚴(yán)重肺呈暴發(fā)性感染，死亡。經(jīng)血行傳播至中樞神經(jīng)及其它組織，引起隱球菌慢性腦膜炎一、直接鏡檢標(biāo)本作墨汁負(fù)染色后檢出透亮莢膜和芽生孢子。二、分離培養(yǎng)與鑒定：沙保弱瓊脂培養(yǎng)基上25~37℃培養(yǎng)數(shù)天后可出現(xiàn)酵母型菌落；37℃培養(yǎng)檢查尿素酶可鑒定此菌。微生物學(xué)檢查法治療治療可用二性霉素B、5-氟胞嘧啶、咪康挫等抗真菌藥物。四、產(chǎn)毒性真菌食物中毒產(chǎn)毒性真菌多數(shù)屬于曲霉菌屬、青霉菌屬及鐮刀菌屬，其中產(chǎn)毒最強的有：1.黃曲霉菌2.鐮刀菌3.桔青霉菌1、字體安裝與設(shè)置如果您對PPT模板中的字體風(fēng)格不滿意，可進(jìn)行批量替換，一次性更改各頁面字體。在“開始”選項卡中，點擊“替換