2025年魯教版選擇性必修3生物上冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年魯教版選擇性必修3生物上冊月考試卷318考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、下列是有關(guān)腐乳制作的幾個問題，其中不合理的是（）A.在腐乳制作過程中必須有能產(chǎn)生蛋白酶的微生物參與B.含水量大約85%的豆腐有利于保持濕度，適宜制作腐乳C.腐乳制作后期加鹽腌制和加酒都能夠抑制微生物的生長D.裝瓶密封瓶口時，最好進(jìn)行灼燒滅菌，以防止瓶口污染2、研究人員將猴的胚胎細(xì)胞（a）中的細(xì)胞核取出，移植人一雌猴的去核卵母細(xì)胞（b）中，得到重組細(xì)胞（c），經(jīng)培養(yǎng)獲得胚胎并移植到另一雌猴（d）體內(nèi)進(jìn)一步發(fā)育，最終產(chǎn)出幼猴（e）。下列敘述正確的是（）A.a、b、c過程都在體外進(jìn)行，屬于細(xì)胞工程范疇B.e的細(xì)胞內(nèi)的全部基因都來自a，而b、d僅提供營養(yǎng)C.該項研究屬于胚胎工程，目的是在短時間內(nèi)能獲得大量優(yōu)質(zhì)猴D.a必須是雄性猴的胚胎細(xì)胞，得到的c相當(dāng)于受精卵，所以e屬于有性生殖的后代3、下列用病人的胚胎干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化進(jìn)行治療性克隆的說法，錯誤的是（）A.胚胎干細(xì)胞可取自早期胚胎或原始性腺B.可使用核移植技術(shù)及胚胎培養(yǎng)技術(shù)獲得早期胚胎C.胚胎干細(xì)胞體積大、細(xì)胞核小，具有發(fā)育的全能性D.定向誘導(dǎo)ES細(xì)胞分化的實質(zhì)是基因人為控制下的選擇性表達(dá)4、作物脫毒；改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)、抗除草劑作物、可保存的干擾素、檢測有毒物質(zhì)、胚胎培養(yǎng)依次是下列哪項生物技術(shù)的應(yīng)用（）

①基因工程②細(xì)胞工程③蛋白質(zhì)工程④胚胎工程A.①②②③④④B.②①①③②④C.②①②③②④D.②①②④③②5、在利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的實驗中，相關(guān)敘述正確的是（）A.用蒸餾水將NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度調(diào)至0．14mol/L，濾去析出物B.調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)C.將絲狀物溶解在物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色D.用菜花替代雞血作為實驗材料，其實驗操作步驟相同6、為獲取青梅果酒釀造專用菌，從糖漬青梅液和果皮中分離、篩選獲得6株野生酵母菌。以下操作及分析不正確的是（）A.對配制的培養(yǎng)基進(jìn)行紫外線照射消毒B.根據(jù)菌落形態(tài)、顏色等特征進(jìn)行初步篩選C.利用不同pH發(fā)酵液篩選低pH耐受性菌株D.比較各菌株消耗相同底物產(chǎn)酒精量等指標(biāo)7、下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是（）A.用于植物組織培養(yǎng)的外植體就是指離體培養(yǎng)的植物器官、組織或細(xì)胞B.進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時，常常需要添加植物激素，但是菊花莖段的組織培養(yǎng)比較容易，可以不必添加植物激素C.培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的只是提供營養(yǎng)物質(zhì)D.用莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得脫毒苗時，作物不會或者極少感染病毒8、含C、H、O、N、P等元素的化合物最不可能具有的功能是（）A.構(gòu)成動物細(xì)胞膜的重要成分，在人體內(nèi)還參與血液中脂質(zhì)的運輸B.可以作為基因工程中，將外源基因送入受體細(xì)胞所必需的運載體C.在蛋白質(zhì)合成過程中，有合成蛋白質(zhì)的模板、攜帶氨基酸等作用D.細(xì)胞內(nèi)流通的能量“通貨”，是生物體生命活動能量的直接來源評卷人得分二、多選題(共5題，共10分)9、格瓦斯是一種廣泛流傳于東歐的低度酒精飲料。制作過程：①將發(fā)酵面包制成的面包液、糖化液裝入發(fā)酵罐，加入保加利亞乳酸菌、酵母菌進(jìn)行發(fā)酵；②發(fā)酵液經(jīng)過嚴(yán)格的過濾；③過濾液經(jīng)5～8s迅速升溫到127℃進(jìn)行高溫殺菌，冷卻后即可飲用。酵母菌產(chǎn)生酒精的能力差異較大，其產(chǎn)酒精能力與其耐受酒精的能力有關(guān)。下列說法正確的是（）A.保加利亞乳酸菌和酵母菌都能同時進(jìn)行有氧呼吸和無氧呼吸B.面包液、糖化液可為微生物的生長提供碳源、氮源以及水和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)C.若想得到產(chǎn)酒精能力比較強的酵母菌，可向培養(yǎng)基中添加較高濃度的酒精進(jìn)行篩選D.過程③中瞬時高溫滅菌可使微生物蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)迅速破壞，從而達(dá)到滅菌效果10、基因敲除技術(shù)針對某個序列已知但功能未知的序列，通過改變生物的遺傳基因，令特定的基因功能喪失作用，從而使部分功能被屏蔽，并可進(jìn)一步對生物體造成影響，進(jìn)而推測出該基因的生物學(xué)功能。研究人員將某實驗動物的第5號染色體上的一段DNA敲除，結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實驗動物血液甘油三酯極高，具有動脈硬化的傾向，并可以遺傳給后代。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.敲除的DNA片段具有遺傳效應(yīng)B.動脈硬化的產(chǎn)生與遺傳物質(zhì)發(fā)生基因重組有關(guān)C.控制甘油三酯合成的基因就位于第5號染色體上D.利用DNA片段的敲除技術(shù)可以研究相關(guān)基因功能11、我國首例綠色熒光蛋白“轉(zhuǎn)基因”克隆豬的培育過程如圖所示，其中字母代表結(jié)構(gòu)或生物，數(shù)字代表過程，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.為了①和②的順利完成，需要用滅活的病毒對細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)B.將C的細(xì)胞核去掉，實質(zhì)上是去除紡錘體—染色體復(fù)合物C.為避免將E植入F時產(chǎn)生排斥反應(yīng)，移植前應(yīng)給F注射免疫抑制劑D.移入F的桑葚胚要經(jīng)歷囊胚、原腸胚等階段才能形成豬的幼體12、北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白有11個氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關(guān)敘述不正確的是（）

A.過程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測序B.將多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白C.過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D.應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其表達(dá)13、2020年7月20日，國際醫(yī)學(xué)權(quán)威期刊《柳葉刀》上發(fā)表了新冠病毒疫苗II期臨床試驗的成果。該試驗是由陳薇院士等人領(lǐng)銜的團(tuán)隊開展的研究，試驗中使用的疫苗是一種腺病毒載體重組新冠病毒疫苗(基因重組疫苗)。試驗結(jié)果表明，單次接種疫苗28天后，99．5%的受試者產(chǎn)生了特異性抗體，95．3%受試者產(chǎn)生了中和抗體，89%的受試者產(chǎn)生了特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)。這表明，陳薇團(tuán)隊研發(fā)的新冠疫苗可為健康人群提供“三重保護(hù)”，將新冠病毒“拒之門外”。下列敘述正確的是（）A.該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B.受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后，體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的效應(yīng)T細(xì)胞C.主要通過檢測受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來評價試驗的有效性D.新冠肺炎康復(fù)患者可以不注射該疫苗評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)14、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的______——“分子運輸車”15、轉(zhuǎn)化的概念：是______進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持______的過程。16、假設(shè)PCR反應(yīng)中，只有一個DNA片段作為模板，請計算在30次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有個這樣的_______個DNA片段，一共需要加入______________個引物。17、_______mol/L濃度下，DNA溶解度最大。18、隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，有些新的致病微生物被發(fā)現(xiàn)，它們的危害可能更大。通過互聯(lián)網(wǎng)或圖書館搜集近年發(fā)現(xiàn)的致病微生物的相關(guān)資料，分析和歸納這些資料__________。19、蛋白質(zhì)工程在生物制藥上有廣泛的應(yīng)用。如果已經(jīng)確認(rèn)某種新蛋白質(zhì)可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經(jīng)確認(rèn)，如何通過蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請教或通過互聯(lián)網(wǎng)查找答案。_____評卷人得分四、實驗題(共1題，共6分)20、近年來；紀(jì)錄片《舌尖上的中國》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮，其中多次講述了利用不同微生物的發(fā)酵作用制作的美味食品。請分析回答下列問題：

（1）在果醋制作時；運用醋酸菌在供應(yīng)________________和糖源充足時，將糖分解成醋酸；在糖源不充足時，也可以生成醋酸。反應(yīng)式為：________________________。

（2）制作泡菜的腌制過程中；會產(chǎn)生亞硝酸鹽。在____________________條件下，亞硝酸鹽與對氨苯磺酸發(fā)生________________反應(yīng)后，與N—1—萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成__________色染料。

（3）腐乳制作的流程是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時；應(yīng)注意控制________；配制鹵湯時，要使鹵湯中酒的含量控制在_____________%左右。

（4）在果酒制作時，變酸的原因是_____________________________。評卷人得分五、綜合題(共4題，共12分)21、環(huán)境雌激素（EEs）是指能夠擾亂動物內(nèi)分泌活動；生理活性與雌激素較為相似的動物體外化學(xué)物質(zhì)。斑馬魚幼魚的卵黃蛋白原（vtg）基因在正常情況下不表達(dá)，在EEs誘導(dǎo)下可表達(dá)且表達(dá)水平與EEs的濃度呈正相關(guān)。為了簡便直觀地檢測水體中EEs污染情況，研究人員培育了一種轉(zhuǎn)基因斑馬魚，部分過程如圖所示，相關(guān)限制酶識別序列及切割位點如表。

限制酶識別序列及切割位點SphICGTAC↓GHindIIIA↓AGCTTKpnIGGTAC↓C

請根據(jù)圖表回答下列問題：

(1)上圖的操作屬于基因工程基本操作步驟中的______；當(dāng)EEs存在時，野生斑馬魚的vtg基因啟動子可以激活______基因的表達(dá)，從作用效果上來看該啟動子是一種______型啟動子。

(2)對vtg基因啟動子進(jìn)行擴(kuò)增前，應(yīng)設(shè)計合適的引物，并在引物的______（填“3′端””或“5′端”）添加特定的序列，使擴(kuò)增后的啟動子DNA片段首末兩端分別含有______酶識別序列及切割位點；以便vtg基因啟動子能夠定向插入原始質(zhì)粒的正確位置。

(3)獲得的重組質(zhì)?？赏ㄟ^______方法導(dǎo)入到斑馬魚的______細(xì)胞中；為鑒定是否成功導(dǎo)入，應(yīng)檢測細(xì)胞中是否含有______（填“vtg”或“EGFP”）基因。

(4)為檢測某水樣M中EEs的污染情況；研究小組進(jìn)行了如下實驗操作：

①選取成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的斑馬魚幼魚若干尾隨機均分為A、B、C三組，B組培養(yǎng)環(huán)境為含較低濃度EEs的培養(yǎng)液，A組和C組的培養(yǎng)環(huán)境分別是______；

②一段時間后觀察并統(tǒng)計各組斑馬魚的綠色熒光強度，結(jié)果如下。組別ABC綠色熒光強度無+++++

注：“+”數(shù)量越多表示熒光強度越高。

實驗結(jié)論：________________________。22、小麥純合自交系川農(nóng)16具有粒多、抗病等優(yōu)良特性，可通過導(dǎo)入抗除草劑基因bar使其獲得抗除草劑性狀，具體技術(shù)路線如下圖1所示。其中抗除草劑基因bar來源于野生型植物甲，抗草甘膦基因aroA是選擇標(biāo)記基因；報告基因能在特定情況特定組織中表達(dá)。

(1)圖1中構(gòu)建表達(dá)載體的過程需要用兩種不同的限制酶切割，比用一種限制酶切割的優(yōu)點是_________。很多啟動子具有物種特異性，在圖中Ti質(zhì)粒的TDNA中插入抗除草劑基因bar時其上游啟動子應(yīng)該選擇_________。

A.野生植物甲啟動子B.農(nóng)桿菌啟動子C.小麥川農(nóng)16的啟動子。

(2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化愈傷組織時，TDNA攜帶插入其內(nèi)的片段轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞。篩選已轉(zhuǎn)化的愈傷組織，需使用含_________的選擇培養(yǎng)基。但在轉(zhuǎn)化過程中，愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化愈傷組織也可能在選擇培養(yǎng)基上生長。含有內(nèi)含子的報告基因只能在真核生物中正確表達(dá)，其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。用K分別處理以下愈傷組織，出現(xiàn)藍(lán)色的是_________。

①無農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織。

②無農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織。

③農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織。

④農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織。

(3)轉(zhuǎn)化后經(jīng)篩選的愈傷組織需轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，此時培養(yǎng)基需添加的植物激素為_________。培養(yǎng)獲得的轉(zhuǎn)基因植株不一定穩(wěn)定遺傳，須將轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行_________；繼續(xù)篩選，最終選育出抗除草劑純合系。

(4)TDNA序列可隨機插入愈傷組織DNA中導(dǎo)致插入位點基因功能喪失。上述實驗中偶然獲得了一個突變體F，產(chǎn)量明顯低于小麥川農(nóng)16。研究者用某種限制酶處理突變體F的DNA，得到下圖2，若以此為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增出TDNA插入位置兩側(cè)的未知序列，需選擇的引物是_________。

23、大白菜是重要的蔬菜作物；有顯著的雜種優(yōu)勢。科研人員用EMS誘變白菜A品系，獲得了雄性不育植株Am。為研究該雄性不育性狀的遺傳特性，科研人員做了如下研究。

(1)A品系與Am雜交，F(xiàn)2代可育株377株，不育株136株，該實驗結(jié)果符合孟德爾_________定律，說明該性狀受________________基因控制。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)在突變體Am中，Br基因?qū)?yīng)的mRNA第160號位為U（在A植株中為C），導(dǎo)致___________，使蛋白質(zhì)_________變化；該基因功能喪失。

(2)為驗證Br基因功能，進(jìn)行了異源轉(zhuǎn)基因?qū)嶒灐Ｊ紫刃枰肞CR技術(shù)篩選擬南芥Br基因突變的純合植株M（引物結(jié)合位點如圖1）：T-DNA插入位點兩側(cè)的引物分別為LP和RP；T-DNA區(qū)段上的引物為BP，則PCR結(jié)果應(yīng)為___________（若PCR目的片段包括完整T-DNA，則由于T-DNA過長，無條帶）。

A．利用LP+RP能擴(kuò)增出條帶B．利用LP+RP不能擴(kuò)增出條帶C．利用BP+RP能擴(kuò)增出條帶D．利用BP+RP不能擴(kuò)增出條帶(3)將正常的Br基因?qū)隡植株，質(zhì)粒結(jié)構(gòu)如圖2所示，圖中______________基因一般用于檢測農(nóng)桿菌是否導(dǎo)入了質(zhì)粒，然后利用添加了_____________的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因植株。獲得轉(zhuǎn)基因擬南芥后，檢測該植株、M植株以及野生型植株的花粉粒數(shù)和單莢結(jié)種數(shù)，若結(jié)果為_______________，說明Br基因異常是導(dǎo)致雄性不育的原因；可用于后續(xù)研究。

24、回答下列（一）；（二）小題。

（一）回答與利用大豆種子提取；分離并鑒定超氧化物歧化酶（SOD酶）的有關(guān)問題：

（1）浸泡24h后的大豆種子需放入高速組織搗碎機中搗碎；其原因是________；往搗碎后的組織中加入適量pH7．8磷酸緩沖液，并離心除去固形物，所得的上清液即為SOD酶粗提取液，推測pH7．8磷酸緩沖液除可作為SOD酶的溶劑外，還具有________作用。

（2）葡萄糖凝膠（SephadexG-75）可用于分離；純化SOD酶?？蓪⑦m量葡萄糖凝膠裝入注射器中制成________柱；并將其固定于支架上，再用________（儀器）滴加SOD酶粗提取液，保持一定的流速過柱，最后用緩沖液進(jìn)行洗脫，洗脫液即為________。

（3）光照條件下核黃素與NBT反應(yīng)生成藍(lán)色產(chǎn)物；SOD酶則會抑制這一過程?？衫眠@一原理，使用分光光度計在560nm波長處測定光密度值（OD值），用于鑒定SOD酶的活力，相關(guān)的表格設(shè)計如下。

。杯號核黃素、NBT混合液（mL）酶液（mL）蒸餾水（mL）條件1300．15黑暗2300．15光照330．050．10光照430．100．05光照530．150光照表中1號杯的作用是________。實驗中測得的OD值與加入的酶量在一定范圍內(nèi)呈________（正相關(guān)/負(fù)相關(guān)）。若將第4組加入的酶液改為澄清的SOD酶粗提取液（粗提取液中其他成分對測定結(jié)果的影響忽略不計）；則OD值將________（偏大/不變/偏?。?/p>

（二）回答與基因工程和動物克隆有關(guān)的問題：

（1）重組腺病毒是高效的重組病毒表達(dá)系統(tǒng)之一；它作為表達(dá)載體可在哺乳動物細(xì)胞中高水平表達(dá)目的蛋白。已知經(jīng)改造的某腺病毒株在受體細(xì)胞內(nèi)既無自我復(fù)制能力，也不能整合到染色體上，利用該病毒株進(jìn)行基因治療時，對受體細(xì)胞的處理是________（先細(xì)胞增殖，后病毒感染/先病毒感染，后細(xì)胞增殖）。該項技術(shù)________（適用/不適用）轉(zhuǎn)基因動物的克隆繁殖。

（2）若從某動物體內(nèi)提取得到目的蛋白的mRNA；可采用________法合成目的基因，它通常與動物基因組中相應(yīng)基因的核苷酸序列________（一致/不一致）。

（3）已知新冠病毒的刺突蛋白（S蛋白）在感染受體細(xì)胞的過程中起到關(guān)鍵作用?？衫肈NA連接酶將________與腺病毒DNA拼接，再將重組腺病毒導(dǎo)入受體細(xì)胞，以獲得針對新冠病毒的疫苗。還可將S蛋白注入動物體內(nèi)，一段時間后從脾臟中獲取B淋巴細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)過________技術(shù)進(jìn)行高效細(xì)胞融合，再經(jīng)多次篩選獲得針對S蛋白的單克隆抗體。相對新冠患者完全康復(fù)后的血清，單克隆抗體的治療效果更好，原因是________（至少寫出2點）。從S蛋白所占比例________（高/低）的抗原混合物中研制獲得單抗，是雜交瘤技術(shù)制備單抗的最大優(yōu)點。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、B【分析】【分析】

腐乳的制作是多種微生物共同作用的結(jié)果；毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成肽和氨基酸，豆腐的表面長出毛霉僅是制作腐乳的第一步，還需要加鹽腌制；配制鹵湯等，加鹽一方面有利于析出水分，另一方面可以抑制微生物的生長。

【詳解】

A；微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；A正確；

B；含水量為70%左右的豆腐適于制作腐乳；含水量過高的豆腐制腐乳不易成形；B錯誤；

C；加鹽和加酒都能防止雜菌污染；避免豆腐塊腐敗變質(zhì)，C正確；

D；越接近瓶口；雜菌污染的可能性越大，因此密封瓶口前最好將瓶口通過酒精燈火焰以防雜菌污染，D正確。

故選B。2、A【分析】【分析】

根據(jù)試題分析，該克隆猴e的細(xì)胞質(zhì)基因來自b，細(xì)胞核基因來自a，故該克隆猴的大部分性狀和e相同，小部分性狀和b相同；據(jù)此答題。

【詳解】

A、a、b；c過程都在體外進(jìn)行；屬于細(xì)胞工程范疇，A正確；

B、克隆猴e的細(xì)胞質(zhì)基因來自b，細(xì)胞核基因來自a，b；d還能提供營養(yǎng)；B錯誤；

C；項研究屬于細(xì)胞工程；目的是在短時間內(nèi)能獲得大量優(yōu)質(zhì)猴，C錯誤；

D；a可是雌性或雄性猴的胚胎細(xì)胞；得到的c是重組細(xì)胞，e屬于無性生殖的后代，D錯誤。

故選A。

【點睛】3、C【分析】【分析】

胚胎干細(xì)胞：（1）哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞；來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來。（2）具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

【詳解】

A；胚胎干細(xì)胞來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來；A正確；

B；可使用核移植技術(shù)；將體細(xì)胞核移植到去核的卵母細(xì)胞，用胚胎培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)這樣的重組細(xì)胞，獲取早期胚胎，B正確；

C；胚胎干細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為體積??；細(xì)胞核大，核仁明顯，在功能上，具有發(fā)育的全能性，C錯誤；

D；細(xì)胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)；定向誘導(dǎo)分化的實質(zhì)是基因人為控制下的選擇性表達(dá)，D正確。

故選C。4、A【分析】【分析】

1；通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)可獲得脫毒苗；通過基因工程可獲得抗毒苗。

2；通過基因工程可生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)；通過蛋白質(zhì)工程可生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)。

【詳解】

作物脫毒是植物組織培養(yǎng)技術(shù)；屬于②細(xì)胞工程；改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)，將乳糖酶基因?qū)肽膛；蚪M，使得轉(zhuǎn)基因奶牛分泌的乳汁中，乳糖的含量大大降低，屬于①基因工程；抗除草劑是DNA重組技術(shù)，屬于①基因工程；干擾素是一種蛋白質(zhì)，用于治療癌癥和病毒感染，很難保存，運用③蛋白質(zhì)工程可獲得易保存的干擾素；檢測有毒物質(zhì)，判斷某物質(zhì)的毒性，利用②細(xì)胞工程中動物細(xì)胞的培養(yǎng)；性別鑒定，在囊胚中取滋養(yǎng)層細(xì)胞做分析，屬于④胚胎工程。

故選C。

【點睛】5、B【分析】【分析】

DNA的粗提取與鑒定的實驗原理：①DNA在氯化鈉溶液中的溶解度；是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時，DNA的溶解度最低。利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理，可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA；③洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜但是對DNA沒有影響；④蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度，在80℃條件下會變性，而DNA對溫度的耐受性較高；⑤DNA遇二苯胺（沸水?。境伤{(lán)色，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；DNA的粗提取實驗原理是0.14mol/LNaCl溶液中DNA溶解度最低；DNA不溶于95%的冷酒精等。用蒸餾水將2mol/LNaCl溶液濃度調(diào)制0.14mol/L，析出的是DNA，丟棄的是濾液，A錯誤；

B；DNA在不同濃度的NaCl溶液中DNA溶解度不同；DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度最大，在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小。酶具有專一性，木瓜蛋白酶可以水解DNA中的蛋白質(zhì)類雜質(zhì)，B正確；

C；DNA絲狀物溶解在2mol/LNaCl溶液中；加入二苯胺試劑后需要沸水浴才會呈現(xiàn)藍(lán)色，C錯誤；

D；植物細(xì)胞有細(xì)胞壁保護(hù)著；所以用菜花做實驗材料時，需要研磨，加入食鹽和洗滌劑，D錯誤。

故選B。

【點睛】6、A【分析】【分析】

選擇培養(yǎng)基是指允許特定種類的微生物生長；同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。能在低pH的培養(yǎng)基中生長的是低pH耐受性菌株。

【詳解】

A；對配制的培養(yǎng)基需要經(jīng)過高壓蒸汽滅菌；A錯誤；

B；不同菌體形成的菌落的形態(tài)、顏色等特征不同；因此可根據(jù)菌落形態(tài)、顏色等特征進(jìn)行初步篩選，B正確；

C；不同菌株對pH的耐受性不同；可利用不同pH發(fā)酵液篩選低pH耐受性菌株，C正確；

D；篩選青梅果酒釀造專用菌；需要其分解葡萄糖產(chǎn)生酒精的量較高，因此可比較各菌株消耗相同底物產(chǎn)酒精量等指標(biāo)來篩選青梅果酒釀造專用菌，D正確。

故選A。7、C【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下；將離體的植物器官；組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化兩個重要的步驟，這兩個步驟都需要植物激素誘導(dǎo)，但植物激素的比例不同。

【詳解】

A；用于植物組織培養(yǎng)的外植體就是指離體培養(yǎng)的植物器官、組織或細(xì)胞；外植體應(yīng)選擇分裂旺盛的部分，如根尖、莖尖等，A正確；

B；植物組織培養(yǎng)時；常常需要添加植物激素，比如生長素和細(xì)胞分裂素，但是菊花莖段的組織培養(yǎng)比較容易，可以不必添加植物激素，B正確；

C；培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓；C錯誤；

D；莖尖位于植物分生區(qū)附近；病毒極少，甚至無病毒。因此，用莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得脫毒苗時，作物不會或者極少感染病毒，D正確。

故選C。8、A【分析】【分析】

載體的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)；蛋白質(zhì)主要有C；H、O、N組成；磷脂的元素組成為C、H、O、N、P；纖維素的元素組成為C、H、O。化合物分為有機物和無機物，無機物包括水和無機鹽。

【詳解】

A；含C、H、O、N、P等元素的化合物主要有DNA、RNA；磷脂、ATP等，膽固醇是構(gòu)成細(xì)胞膜的重要成分，在人體內(nèi)還參與血液中脂質(zhì)的運輸，但元素組成為C、H、O，A錯誤；

B；基因工程中；將外源基因送入受體細(xì)胞所必需的運載體之一為質(zhì)粒，質(zhì)粒是一種環(huán)狀的DNA，含有C、H、O、N、P，B正確；

C；含C、H、O、N、P元素的化合物可能是RNA；RNA分為三類，其中tRNA攜帶氨基酸的作用；mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板；RNA參與形成核糖體，是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的主要場所，C正確；

D；含C、H、O、N、P元素的化合物可能是ATP；ATP作為細(xì)胞內(nèi)流通的能量“通貨”，儲存和傳遞化學(xué)能，是生物體生命活動所需能量的直接來源，D正確。

故選A。二、多選題(共5題，共10分)9、B:C:D【分析】1；酵母菌的新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型；在利用酵母菌發(fā)酵時最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時間使其繁殖，再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；乳酸菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型；在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑵咸烟欠纸鉃槿樗帷?/p>

【詳解】

A；乳酸菌為嚴(yán)格厭氧菌；只能進(jìn)行無氧呼吸，A錯誤；

B；面包液、糖化液主要成分為糖類；也含有其他物質(zhì)，可為微生物的生長提供碳源、氮源、水和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，B正確；

C；酵母菌產(chǎn)酒精能力與其耐受酒精的能力有關(guān)；利用選擇培養(yǎng)基，向培養(yǎng)基中添加較高濃度的酒精篩選出產(chǎn)酒精能力比較強的酵母菌，C正確；

D；過程③中瞬時高溫會破壞微生物的蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)；進(jìn)而將微生物殺死達(dá)到滅菌效果，D正確。

故選BCD。10、B:C【分析】【分析】

根據(jù)題意；將某實驗動物的第5號染色體上的一段DNA敲除，結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實驗動物血液甘油三酯極高，具有動脈硬化的傾向，并可以遺傳給后代，說明該變異是一種可遺傳的變異。

【詳解】

A；DNA敲除后結(jié)果發(fā)現(xiàn)培育出的實驗動物血液甘油三酯極高；具有動脈硬化的傾向，并可以遺傳給后代，說明敲除的DNA片段具有遺傳效應(yīng)，A正確；

B；動脈硬化的產(chǎn)生與遺傳物質(zhì)發(fā)生可遺傳的變異有關(guān)；不能說明是基因重組，B錯誤；

C；上述信息只能表明敲除的DNA片段與甘油三酯代謝有關(guān)；不能表明控制甘油三酯合成的基因就位于第5號染色體上，C錯誤；

D；由題干信息可知；利用DNA片段的敲除技術(shù)可以研究相關(guān)基因功能，D正確。

故選BC。11、A:C【分析】【分析】

分析圖解，可以看出綠色熒光蛋白“轉(zhuǎn)基因”克隆豬涉及了多項生物工程技術(shù)。圖中B表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建；然后將目的基因?qū)胴i胎兒的成纖維細(xì)胞，經(jīng)過動物細(xì)胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，然后該細(xì)胞的細(xì)胞核與豬的卵細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核移植獲得重組細(xì)胞。重組細(xì)胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚期，最后經(jīng)過胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內(nèi)，最后生成轉(zhuǎn)基因克隆豬。由此可見，該過程中利用基因工程、動物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

【詳解】

A；①是將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞；直接采用顯微注射法，無需對受體細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)，②過程通常是將細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞中，然后利用電融合法使D構(gòu)建成功，A錯誤；

B；C是處于MⅡ期的卵母細(xì)胞；這個時期的“核”實際上是紡錘體—染色體復(fù)合物，B正確；

C；受體對移入的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；因此無需給F注射免疫抑制劑，C錯誤；

D；移入F的通常是桑葚胚；它要經(jīng)歷囊胚、原腸胚階段的發(fā)育才能成為豬的幼體，D正確。

故選AC。12、A:C:D【分析】【分析】

分析題圖：①表示反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因的過程；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；之后采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；將目的基因?qū)敕呀M織塊；最后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，將導(dǎo)入目的基因的番茄組織細(xì)胞培養(yǎng)成抗凍番茄植株?；虮磉_(dá)載體通常由啟動子；目的基因、終止子和標(biāo)記基因構(gòu)成，其中標(biāo)記基因的作用是篩選重組質(zhì)粒，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法能將質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞。

【詳解】

A；過程①是通過人工合成法獲取的目的基因；由于真核生物體內(nèi)的基因含有不能編碼蛋白質(zhì)的序列（內(nèi)含子），導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄合成的目的基因與原基因有較大的差異，因此人工合成的目的基因不能用于比目魚基因組測序，A錯誤；

B；抗凍蛋白的11個氨基酸的重復(fù)序列重復(fù)次數(shù)越多；抗凍能力越強，并不是抗凍基因的編碼區(qū)重復(fù)次數(shù)越多抗凍能力越強，抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的新基因已不是原來的抗凍基因，因此不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白，B正確；

C；②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；基因表達(dá)載體通常由啟動子、目的基因、終止子和標(biāo)記基因構(gòu)成，其中標(biāo)記基因的作用是篩選重組質(zhì)粒，過程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，可以通過DNA分子雜交或PCR技術(shù)檢測受體細(xì)胞是否含有目的基因，C錯誤；

D；利用DNA探針技術(shù)檢測目的基因是否導(dǎo)入到受體細(xì)胞；但表達(dá)的產(chǎn)物通常是蛋白質(zhì)，可利用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否表達(dá)出來，D錯誤。

故選ACD。

【點睛】13、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已經(jīng)發(fā)展了三代：

第一代疫苗指的是滅活疫苗和減毒活疫苗；通過體外培養(yǎng)病毒，然后用滅活的病毒刺激人體產(chǎn)生抗體，它是使用最為廣泛的傳統(tǒng)疫苗；

第二代疫苗又稱為亞單位疫苗；是通過基因工程原理獲得的具有免疫活性的病原特異性結(jié)構(gòu)蛋白，刺激人體產(chǎn)生抗體；

第三代疫苗是核酸疫苗；又稱基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是將編碼某一抗原蛋白的基因作為疫苗，注射到人體中，通過正常的人體生理活動產(chǎn)生抗原蛋白，誘導(dǎo)機體持續(xù)作出免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體。

【詳解】

A；該疫苗是基因重組疫苗；需要將腺病毒載體和新冠病毒的基因進(jìn)行連接，所以該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，A正確；

B；受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后；體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的漿細(xì)胞，B錯誤；

C；主要通過檢測受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來評價試驗的有效性；C正確；

D；新冠肺炎康復(fù)患者體內(nèi)產(chǎn)生了新冠病毒抗體和和相應(yīng)的記憶細(xì)胞；可以不注射該疫苗，D正確。

故選ACD。三、填空題(共6題，共12分)14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】載體15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因穩(wěn)定和表達(dá)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2030×22030×2－217、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】0．1418、略

【分析】【詳解】

致病微生物是指可以侵犯人體，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細(xì)菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細(xì)菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，從一個宿主轉(zhuǎn)移到另一個宿主，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。同時近年來由于溫室效應(yīng)加劇，也會使致病微生物的繁殖周期變短，可能會使危害性更大，因此我們需要積極開展科學(xué)研究，掌握防范的措施和防范，實現(xiàn)最好的防護(hù)，目前對致病微生物最好的防護(hù)措施還是疫苗的研究和使用?！窘馕觥恐虏∥⑸锸侵缚梢郧址溉梭w，引起感染甚至傳染病的微生物，包括病毒、細(xì)菌、真菌、原生動物和蠕蟲等，其中以細(xì)菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通過空氣、體液、食品、水等傳播途徑，致病微生物由于看不見、摸不著，難于防范，且存在傳染性，因而危害極大。目前對致病微生物最好的防護(hù)措施還是疫苗的研究和使用。19、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。該蛋白質(zhì)的氨基酸序列已知，因此通過蛋白質(zhì)工程，生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥的基本過程為：根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥?！窘馕觥扛鶕?jù)已知的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥四、實驗題(共1題，共6分)20、略

【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為兼性厭氧型，果酒制作原理是酵母菌在無氧條件下，利用葡萄糖產(chǎn)生酒精和CO2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，當(dāng)氧氣；糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）在果醋制作時；醋酸菌在供應(yīng)氧氣和糖源充足時，能將糖分解成醋酸；在糖源不充足時，也可以利用酒精生成醋酸。反應(yīng)式為：C?H?OH+O?→CH?COOH+H?O

（2）制作泡菜的腌制過程中；會產(chǎn)生亞硝酸鹽。在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N—1—萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰色染料。

（3）腐乳制作的流程是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時；應(yīng)注意控制鹽的用量；配制鹵湯時，要使鹵湯中酒的含量控制在12%左右，若酒精含量過高會延長腐乳成熟的時間，若酒精含量過低則不足以殺菌。

（4）在果酒制作時；混有雜菌可能會讓果酒變酸。

【點睛】

本題考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作、泡菜的制作等知識，要求學(xué)生掌握果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的原理及條件，掌握亞硝酸鹽的測定方法，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題?！窘馕觥垦鯕釩?H?OH+O?→CH?COOH+H?O鹽酸酸化重氮化玫瑰色鹽的用量12混有雜菌五、綜合題(共4題，共12分)21、略

【分析】【分析】

基因工程的操作步驟：獲取目的基因（基因文庫；PCR、人工合成）；構(gòu)建基因表達(dá)載體（含標(biāo)記基因、啟動子、終止子、目的基因、復(fù)制原點等）；把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法、鈣離子處理法）；目的基因的檢測和鑒定（分子水平和個體水平檢測；前者包括DNA分子雜交、分子雜交和抗原抗體雜交；后者如抗蟲抗病接種實驗）。

【詳解】

（1）上圖的操作屬于基因表達(dá)載體的構(gòu)建；這是基因工程的核心步驟。斑馬魚幼魚的卵黃蛋白原（vtg）基因在正常情況下不表達(dá)，當(dāng)EEs存在時，野生斑馬魚的vtg基因啟動子可以激活卵黃蛋白原(vtg)基因的表達(dá)，且表達(dá)水平與EEs的濃度呈正相關(guān)。啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，能啟動轉(zhuǎn)錄過程，從作用效果上來看該啟動子是一種誘導(dǎo)型啟動子。

（2）DNA聚合酶延伸時；將脫氧核苷酸加到引物的3'端，為了不破壞目的基因，該限制酶識別序列應(yīng)添加在引物的5'端。為了使vtg基因啟動子能夠定向插入原始質(zhì)粒的正確位置，應(yīng)選擇啟動子兩側(cè)的限制酶HindIII和KpnI切割質(zhì)粒（不選擇SphI的原因是SphI的粘性末端與KpnI的粘性末端相同，會造成自身環(huán)化和啟動子反向插入質(zhì)粒）。

（3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到動物細(xì)胞的受精卵中；一般選擇通過顯微注射的方法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到斑馬魚受精卵中。由于導(dǎo)入前斑馬魚基因組已含vtg基因，而EGFP基因為外源基因，導(dǎo)入成功的斑馬魚才含有EGFP基因，故要鑒定是否成功導(dǎo)入，應(yīng)檢測細(xì)胞中是否含有vtg基因。

（4）為檢測某水樣M中EEs的污染情況，本實驗的自變量為EEs的濃度，A組為對照組，A組的培養(yǎng)環(huán)境是等量不含EEs的培養(yǎng)液，B、C為實驗組，B組培養(yǎng)環(huán)境為含較低濃度EEs的培養(yǎng)液，C組培養(yǎng)環(huán)境為等量的水樣M。由圖表數(shù)據(jù)可知，與AB組對比，C組綠色熒光強度較高，說明該水樣存在環(huán)境雌激素（EEs）污染，且污染程度較高。【解析】(1)基因表達(dá)載體的構(gòu)建卵黃蛋白原(vtg)誘導(dǎo)型。

(2)5′端HindIII和KpnI

(3)顯微注射受精卵EGFP

(4)等量不含EEs的培養(yǎng)液和等量的水樣M該水樣存在環(huán)境雌激素（EEs）污染，且污染程度較高22、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體用到兩種不同的限制酶對DNA分子進(jìn)行切割，與使用一種限制酶進(jìn)行切割相比，其優(yōu)點是可以防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化、防止目的基因和質(zhì)粒反向連接。啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，用于驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄；根據(jù)題意，將野生型植物甲的抗除草劑基因bar導(dǎo)入小麥，最終讓抗除草劑基因bar在小麥中成功表達(dá)；所以應(yīng)當(dāng)選擇小麥川農(nóng)16的啟動子，C符合題意。

故選C。

（2）導(dǎo)入抗除草劑基因并成功表達(dá)的小麥具有抗除草劑特性；故而篩選轉(zhuǎn)化的愈傷組織需使用含除草劑的選擇培養(yǎng)基。

①含內(nèi)含子的報告基因只能在真核生物中正確表達(dá)；含內(nèi)含子的報告基因位于農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的TDNA中，無農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織不含內(nèi)含子的報告基因，不會出現(xiàn)藍(lán)色，①不符合題意；

②④無論有無農(nóng)桿菌附著；轉(zhuǎn)化愈傷組織中都含有Ti質(zhì)粒，含內(nèi)含子的報告基因，出現(xiàn)藍(lán)色，②④符合題意；

③農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織；含內(nèi)含子的報告基因位于農(nóng)桿菌中，農(nóng)桿菌屬于原核生物，其中的報告基因不能正確表達(dá)，不會出現(xiàn)藍(lán)色，③不符合題意。

故選②④。

（3）轉(zhuǎn)化后經(jīng)篩選的愈傷組織需轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)；此時培養(yǎng)基需添加的植物激素為生長素；細(xì)胞分裂素。培養(yǎng)獲得的轉(zhuǎn)基因植株不一定穩(wěn)定遺傳，須將轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行自交，繼續(xù)篩選，最終選育出抗除草劑純合系。

（4）以獲得的突變體DNA為模板，擴(kuò)增出TDNA插入位置兩側(cè)的未知序列，根據(jù)DNA聚合酶“不能從頭開始合成DNA，而只能從3′端延伸DNA鏈”的特點，引物要與兩條模板鏈互補，結(jié)合圖中突變體DNA兩條鏈的方向，應(yīng)利用圖中的引物①（該引物的左邊是3′端）、④（該引物的右邊是3′端）組合進(jìn)行PCR，以達(dá)到目的?！窘馕觥?1)防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化；防止目的基因和質(zhì)粒反向連接C

(2)除草劑②④

(3)生長素；細(xì)胞分裂素自交。

(4)①④23、略

【分析】【分析】

質(zhì)粒上常有特殊的標(biāo)記基因；如四環(huán)素抗性基因；氨芐青霉素抗性基因等，便于重組DNA分子的篩選。

【詳解】

（1）A品系與Am雜交，F(xiàn)2代可育株377株，不育株136株，符合3：1的性狀分離比，實驗結(jié)果符合孟德爾的分離定律；說明雄性不育性狀受一對隱性基因的控制。突變體Am中，Br基因?qū)?yīng)的mRNA第160號位為U（在A植株中為C）；說明根本原因是發(fā)生了堿基對的替換，導(dǎo)致氨基酸改變進(jìn)而使蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)變化，該基因功能喪失。

（2）根據(jù)題目信息；若PCR目的片段包括完整T-DNA，則由于T-DNA過長，無條帶，故用利用LP+RP不能擴(kuò)增出條帶，利用BP+RP能擴(kuò)增出條帶，故選BC。

（3）農(nóng)桿菌對卡那霉素敏感，白菜對潮霉素敏感，而基因工程中，標(biāo)記基因的作用是便于重組DNA分子的篩選，故圖中卡那霉素抗性基因一般用于檢測農(nóng)桿菌