第十三章巴比妥類藥物的分析課件

第五章巴比妥類藥物的分析

巴比妥類藥物是一類臨床常用的催眠鎮(zhèn)靜藥。由于這類藥物應(yīng)用廣泛，容易因不合理使用而引起中毒。本章重點(diǎn)介紹巴比妥類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)與分析方法間的關(guān)系，介紹鑒別、檢查和含量測(cè)定的原理與方法。一、巴比妥類藥物的基本結(jié)構(gòu)通式

5,5-取代的巴比妥類藥物

5區(qū)別各種巴比妥類藥物

環(huán)狀丙二酰脲、1,3-二酰亞胺基團(tuán)決定巴比妥類藥物的特性

1.環(huán)狀母核部分2.取代基部分二、理化性質(zhì)（一）物理性質(zhì)

1.白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉未，具有固定的熔點(diǎn)。

2.游離巴比妥類藥物微溶或極微溶于水，易溶于乙醇及有機(jī)溶劑；其鈉鹽則易溶于水，而不溶于有機(jī)溶劑。

化學(xué)性質(zhì)

巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中都有1,3-二酰亞胺基團(tuán)，能發(fā)生酮式和烯醇式的互變異構(gòu)，在水溶液中可以發(fā)生二級(jí)電離。因此，本類藥物的水溶液顯弱酸性（pKa為7.3-8.4），可與強(qiáng)堿形成水溶性的鹽類。1.弱酸性與強(qiáng)堿的成鹽反應(yīng)：2.水解反應(yīng)

（1）與銀鹽的反應(yīng)

3、與重金屬離子的反應(yīng)（2）與銅鹽的反應(yīng)

有色配位化合物（3）與鈷鹽的反應(yīng)

無(wú)水;所用試劑均應(yīng)不含水分。反應(yīng)條件：堿性：異丙胺（4）與汞鹽的反應(yīng)巴比妥類藥物+汞鹽→白色↓（可溶于氨試液）4、與香草醛（vanillin）的反應(yīng)

紫色-藍(lán)色乙醇5、紫外吸收光譜特征H2SO4溶液(0.05mol/L)pH9.9緩沖溶液NaOH溶液(0.1mol/L)(pH13)巴比妥類藥物的紫外吸收光譜Anm硫噴妥的紫外吸收光譜HCl溶液(0.1mol/L)NaOH溶液(0.1mol/L)巴比妥類藥物的紫外吸收光譜特征和其電離的程度有關(guān)

5,5-取代的巴比妥類藥物在pH=2的酸性溶液中，因不電離，幾乎無(wú)明顯的紫外吸收。在pH=10的堿性溶液中，發(fā)生一級(jí)電離于240nm處有最大吸收。在pH=13的強(qiáng)堿性溶液中，發(fā)生二級(jí)電離，最大吸收紅移至255nm處。硫代巴比妥類藥物在酸性或堿性溶液中，均有較明顯的紫外吸收。

7、顯微結(jié)晶特征藥物本身的晶形巴比妥：長(zhǎng)方形；苯巴比妥：球形→花瓣?duì)罘磻?yīng)產(chǎn)物的晶形巴比妥＋銅吡啶試液→十字形紫色結(jié)晶苯巴比妥＋銅吡啶試液→細(xì)小不規(guī)則或似菱形的淺紫色結(jié)晶6、薄層色譜行為特征對(duì)照品對(duì)照鑒別（1）與銀鹽的反應(yīng)、（二）銅鹽反應(yīng)二、鑒別試驗(yàn)（一）、丙二酰脲類反應(yīng)（二）熔點(diǎn)測(cè)定巴比妥類的鈉鹽＋酸→游離巴比妥類藥物↓→過(guò)濾→洗滌→干燥→測(cè)熔點(diǎn)苯巴比妥鈉的鑒別取本品約0.5g，加水5ml溶解后，加稍過(guò)量稀鹽酸，即析出白色結(jié)晶性沉淀，濾過(guò)；沉淀用水洗凈，在105℃干燥后，依法測(cè)定，熔點(diǎn)為174-178℃。

司可巴比妥可使溴試液或碘試液褪色不飽和烴取代基的反應(yīng)①與溴試液或碘試液的反應(yīng)②與KMnO4的反應(yīng)可還原紫色的KMnO4為棕色的MnO2（三）、特殊取代基及元素的反應(yīng)②與NaNO2—H2SO4反應(yīng)

苯巴比妥與甲醛—H2SO4反應(yīng)生成玫瑰紅色

苯巴比妥與NaNO2—H2SO4反應(yīng)生成橙黃色→橙紅色③與甲醛—H2SO4反應(yīng)①硝化反應(yīng)芳香取代基的反應(yīng)硫元素的反應(yīng)

（四）、鈉鹽的鑒別反應(yīng)1.焰色反應(yīng)取鉑絲，用鹽酸濕潤(rùn)后，蘸取供試品，在無(wú)色火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色

2.與醋酸氧鈾鋅反應(yīng)取供試品的中性溶液，加醋酸氧鈾鋅試液，即生成黃色↓（五）、紅外分光光度法第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查一、苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查

酸度乙醇溶液的澄清度中性或堿性物質(zhì)二、司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查

溶液的澄清度中性或堿性物質(zhì)

終點(diǎn)指示：電位法指示（Ag電極為指示電極，飽和甘汞電極為參比電極）自身指示

一、銀量法1.原理：反應(yīng)摩爾比（1∶1）溶劑系統(tǒng)：甲醇+3%無(wú)水碳酸鈉第四節(jié)含量測(cè)定

苯巴比妥：

取本品約0.2g，精密稱定，加甲醇40ml使溶解，再加新制的3％無(wú)水碳酸鈉溶液15m1，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml硝酸銀滴定液（0.1mo1/L）相當(dāng)于23.22mg的C12H12N2O3。

2.測(cè)定方法與計(jì)算原料藥：直接滴定法

3.注意事項(xiàng)（1）無(wú)水碳酸鈉應(yīng)新鮮配制（2）AgNO3滴定液應(yīng)新鮮配制（3）銀電極使用前應(yīng)進(jìn)行處理

凡取代基中含有雙鍵的巴比妥類藥物，其不飽和鍵可與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)，故可采用溴量法進(jìn)行測(cè)定。如司可巴比妥鈉及其膠囊的測(cè)定二、溴量法1.原理

I2＋2Na2S2O3＝2NaI＋Na2S4O6KBrO3＋5KBr＋6HCl＝3Br2＋6KCl＋3H2O

Br2＋2KI＝2KBr＋I(xiàn)2司可巴比妥鈉：取本品約0.1g，精密稱定，置250ml碘瓶中，加水10m1，振搖使溶解，精密加溴滴定液（0.1mol/L）25ml，再加鹽酸5m1，立即密塞并振搖1min，在暗處?kù)o置15min后，注意微開(kāi)瓶塞，加碘化鉀試液10m1，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml溴滴定液（0.05mo1/L）相當(dāng)于13.01mg的C12H17N2NaO3。2.測(cè)定方法與計(jì)算原料藥：剩余滴定法

3.注意事項(xiàng)（1）操作中要防止溴和碘的逸失（2）平行條件進(jìn)行空白試驗(yàn)可減少溴和碘逸失帶來(lái)的誤差。1.在水—醇混合溶劑中的滴定法弱酸性pKa7.3～8.4異戊水—醇溶解麝香草酚酞NaOH淡藍(lán)色（三）、酸堿滴定法此法終點(diǎn)判斷較困難

取本品約0.5g，精密稱定，加乙醇20m1溶解后，加麝香草酚酞指示液6滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）滴定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，即得。每lml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于22.63mg的C11H18N2O3。

異戊巴比妥的含量測(cè)定

溶劑：二甲基甲酰胺滴定劑：甲醇鈉（鉀）指示劑：麝香草酚藍(lán)

3、非水溶液滴定法2、在膠束水溶液中進(jìn)行的滴定法

溶劑：表面活性劑-溴化十六烷基三甲基芐胺水溶液滴定劑：氫氧化鈉滴定液指示劑：麝香草酚肽

四、紫外分光光度法（一）直接紫外分光光度法

本法是將樣品溶解后，根據(jù)溶液的pH值選用其相應(yīng)的

max處進(jìn)行直接測(cè)定。單組分定量方法：1.吸收系數(shù)法2.標(biāo)準(zhǔn)曲線法

3.對(duì)照法

取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混合均勻，精密稱取適量（約相當(dāng)于硫噴妥鈉0.25g），置500ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，量取此溶液用0.4%NaOH溶液定量稀釋制成每1ml中約含5g的溶液；另取硫噴妥對(duì)照品，精密稱定，加0.4%NaOH溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含5g的溶液。照分光光度法，在304nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定A，根據(jù)每支的平均裝量計(jì)算。每1mg硫噴妥相當(dāng)于1.091mg的C11H17N2NaO2S。如注射用硫噴妥鈉的含量測(cè)定（2）經(jīng)提取分離后的紫外分光光度法根據(jù)巴比妥類藥物具有弱酸性，在氯仿等有機(jī)溶劑中易溶，而其鈉鹽在水中易溶的特點(diǎn)，本法可消除干擾物質(zhì)對(duì)巴比妥類藥物測(cè)定的影響。取鈉鹽加水溶解，加酸酸化，用氯仿提取后再加堿反提。排除輔料或雜質(zhì)的干擾。

1、測(cè)定方法-取兩份相等的供試溶液，分別制成兩種不同的化學(xué)環(huán)境（如在其一中加酸、堿或緩沖液改變?nèi)芤旱膒H，或在其一中加能與供試品發(fā)生某種化學(xué)反應(yīng)的試劑），然后將兩者分別稀釋至同樣濃度，一份置樣品池中，另一份置參比池中，于適當(dāng)波長(zhǎng)處，測(cè)其吸收度的差值（

A值）。（3）多組分混合物不經(jīng)分離的定量方法

——計(jì)算分光光度法差示分光光度法（

A法）2.必要條件

（1）供試品在不同的化學(xué)環(huán)境中以不同的分子形式存在，它們的吸收光譜有顯著的差異。（2）干擾物的吸收不受測(cè)定時(shí)化學(xué)環(huán)境的影響，光譜行為不變。

供試品在兩種不同的化學(xué)環(huán)境中分別以x、y表示，干擾物用z表示3.定量依據(jù)即，吸收度差值（

A）僅與待測(cè)組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無(wú)關(guān)，即干擾組分的干擾被消除。

可用對(duì)照法或標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量

保留了通常的分光光度法簡(jiǎn)易快速、直接讀數(shù)的優(yōu)點(diǎn)，又無(wú)需事先分離，并能消除干擾。4.特點(diǎn)5.應(yīng)用（1）于波長(zhǎng)240nm處，測(cè)定pH10和pH2兩種溶液的吸收度之差（2）于波長(zhǎng)260nm處，測(cè)定pH10和強(qiáng)堿溶液的吸收度之差（五）、高效液相色譜HPLC法同時(shí)測(cè)定人血清中苯巴比妥、苯妥英和卡馬西平的濃度色譜條件：色譜柱AgilentZORBAXSB-C18柱(250×4.6mm,5μm),流動(dòng)相為甲醇∶水∶乙腈(45∶45∶10）流速1.0ml/min,柱溫30℃,檢測(cè)波長(zhǎng)254nm。血樣處理：取內(nèi)標(biāo)溶液100μL，60℃水浴氮?dú)獯蹈?，?00μL待測(cè)血清,加提取液（氯仿：乙酸乙醋=50：50）2ml,旋渦混合5min,以4000轉(zhuǎn)/分離心10min,用吸管吸取上層水層,棄去。用移液管移取有機(jī)相置帶蓋尖底塑料離心管中,于60℃水浴中氮?dú)獯蹈?用流動(dòng)相200μL溶解,取20μL進(jìn)樣測(cè)定方法驗(yàn)證：標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性、精密度（RSD<3%)、方法回收率、提取回收率（大于87%）、穩(wěn)定性等均符合中國(guó)藥典的要求（六）電泳法-體內(nèi)苯巴比妥、巴比妥測(cè)定（七）氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用體液中七種巴比妥類藥物的同時(shí)測(cè)定，前處理方法為固相微萃取1、字體安裝與設(shè)置如果您對(duì)PPT模板中的字體風(fēng)格不滿意，可進(jìn)行批量替換，一次性更改各頁(yè)面字體。在“開(kāi)始”選項(xiàng)卡中，點(diǎn)擊“替換”按鈕右側(cè)箭頭，選擇“替換字體”。（如下圖）在圖“替換”下拉列