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PAGEPAGE6課時(shí)作業(yè)16生物技術(shù)實(shí)踐時(shí)間:45分鐘分值:135分非選擇題(每小題15分,共135分)1.(2024·廣西柳州質(zhì)檢)下面是果酒和果醋制作的試驗(yàn)流程和發(fā)酵裝置。依據(jù)圖示回答下列問題:(1)完成圖1中的試驗(yàn)流程醋酸發(fā)酵。(2)圖2裝置中的充氣口在酒精發(fā)酵過程中要關(guān)閉,否則可能發(fā)生使發(fā)酵液變酸的反應(yīng)C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O(寫出該反應(yīng)式),而排氣口在該過程中應(yīng)開放,排氣口要通過一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接,目的是避開空氣中其他微生物進(jìn)入發(fā)酵裝置(防止空氣中的微生物污染)。(3)葡萄酒呈現(xiàn)紅色的緣由是紅色葡萄皮中的色素溶解在發(fā)酵液中,重鉻酸鉀在酸性條件下與酒精反應(yīng)呈灰綠色。(4)果酒和果醋的制作分別利用了酵母菌和醋酸菌兩種微生物的發(fā)酵原理,后者在結(jié)構(gòu)上的主要特點(diǎn)是無(wú)以核膜為界限的細(xì)胞核。解析:在酒精發(fā)酵階段,充氣口應(yīng)關(guān)閉,否則醋酸菌會(huì)將乙醇氧化為醋酸,從而使發(fā)酵液變酸。酵母菌為真菌,屬于真核生物,醋酸菌為細(xì)菌,屬于原核生物,兩者在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)分是有無(wú)以核膜為界限的細(xì)胞核。2.回答與泡菜腌制和亞硝酸鹽測(cè)定有關(guān)的問題:(1)制作泡菜時(shí),為縮短發(fā)酵周期,腌制前可加入乳酸菌。取適量酸奶,用無(wú)菌蒸餾水稀釋后,再用接種環(huán)蘸取少量的稀釋液,在MRS乳酸菌專用培育基的平板上劃線,以獲得乳酸菌單菌落。如圖所示的劃線分別操作,正確的是B。(2)泡菜腌制過程中,會(huì)產(chǎn)生有機(jī)酸、醇類和亞硝酸鹽,其中醇類物質(zhì)是由假絲酵母進(jìn)行厭氧呼吸產(chǎn)生。亞硝酸鹽對(duì)人體有害,為測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽的含量,從泡菜中提取亞硝酸鹽,與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng),再與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合,形成玫瑰紅色染料。(3)已知乳酸菌中的亞硝酸還原酶能降解亞硝酸鹽。在肯定的腌制時(shí)間內(nèi),隨著腌制時(shí)間的延長(zhǎng),泡菜中亞硝酸鹽含量漸漸降低,是由于在厭氧和酸性環(huán)境下亞硝酸鹽被亞硝酸還原酶降解。解析:(1)制作泡菜時(shí),為縮短發(fā)酵周期,腌制前可加入乳酸菌。本題中,乳酸菌的接種方法為平板劃線法。平板劃線法中用接種環(huán)蘸取菌液進(jìn)行劃線。第一次劃三至五條平行線,然后灼燒接種環(huán),待其冷卻后,從第一區(qū)域劃線的末端起先往其次區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作,在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線,要留意不要將最終一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連,因此正確的操作是B。(2)厭氧條件下假絲酵母厭氧呼吸產(chǎn)生醇類物質(zhì)。檢測(cè)亞硝酸鹽的含量通常采納比色法,原理是亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng),再與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合,形成玫瑰紅色染料。(3)亞硝酸還原酶在厭氧和酸性環(huán)境下能夠降解亞硝酸鹽,故在肯定的腌制時(shí)間內(nèi),泡菜中亞硝酸鹽含量漸漸降低。3.(2024·黃岡二模)微博傳言手機(jī)上的細(xì)菌比馬桶多。如圖,央視和北京衛(wèi)視通過試驗(yàn)展示調(diào)查結(jié)果?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題:(1)配制培育基時(shí),除了滿意基本的養(yǎng)分條件外,還須要滿意微生物生長(zhǎng)對(duì)特別養(yǎng)分物質(zhì)、pH、O2(氧氣)的要求。(2)據(jù)圖,兩電視臺(tái)均采納稀釋涂布平板法接種,該方法須要B、C、D、E(多選)。A.接種環(huán)B.酒精燈C.移液管D.涂布器E.無(wú)菌水(3)通過視察菌落的形態(tài)、大小、隆起程度、顏色、光澤度、邊緣形態(tài)(寫出兩種),可知手機(jī)屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物。(4)按圖操作的取樣面積取樣,試驗(yàn)員測(cè)定某手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)量。將10mL菌懸液進(jìn)行濃度梯度稀釋,分別取0.1mL稀釋倍數(shù)為102的樣品液接種到三個(gè)培育基上。培育一段時(shí)間后,統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)分別為48、50、52,則該手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)為2×104個(gè)/平方厘米。該試驗(yàn)比照組應(yīng)如何設(shè)置取培育基涂布0.1_mL無(wú)菌水,放置于和試驗(yàn)組相同的條件下進(jìn)行培育;或取未接種的空白培育基,放置于和試驗(yàn)組相同的條件下進(jìn)行培育。解析:(1)配制培育基時(shí),除了滿意基本的養(yǎng)分條件外,還須要滿意微生物生長(zhǎng)對(duì)特別養(yǎng)分物質(zhì)、pH以及O2(氧氣)的要求。(2)依據(jù)培育的效果圖可以推斷:兩電視臺(tái)均采納的接種方法是稀釋涂布平板法。該方法在將菌液進(jìn)行一系列濃度梯度稀釋時(shí),需運(yùn)用E無(wú)菌水,用C移液管吸取1mL培育的菌液或稀釋液;涂布操作的流程為:將D涂布器浸在盛有酒精的燒杯中;取少量菌液(不超過0.1mL)滴加到培育基表面;將沾有少量酒精的涂布器在B酒精燈火焰上引燃;待酒精燃盡后,冷卻8~10s;用涂布器將菌液勻稱地涂布在培育基表面,涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培育皿,使菌液分布勻稱。(3)通過視察菌落的形態(tài)、大小、隆起程度、顏色、光澤度、邊緣形態(tài)等菌落特征,可知手機(jī)屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物。(4)按圖操作的取樣面積為5×5=25平方厘米。試驗(yàn)員測(cè)定某手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)量,將10mL菌懸液進(jìn)行濃度梯度稀釋,分別取0.1mL稀釋倍數(shù)為102的樣品液接種到三個(gè)培育基上,培育一段時(shí)間后,統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)分別為48、50、52,則1mL菌懸液的細(xì)菌數(shù)為(48+50+52)÷3÷0.1×102=5×104個(gè)/mL,因此該手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)為5×104個(gè)/mL×10mL÷25平方厘米=2×104個(gè)/平方厘米。為了解除無(wú)菌水或空白培育基被雜菌污染,確保平板上長(zhǎng)出的菌落來(lái)自取樣的手機(jī)和馬桶,該試驗(yàn)比照組的設(shè)置為:培育基涂布0.1mL無(wú)菌水放置于和試驗(yàn)組相同的條件下進(jìn)行培育,或取未接種的空白培育基放置于和試驗(yàn)組相同的條件下進(jìn)行培育。4.(2024·山西臨汾一中高二期末)植物芳香油具有抗菌、促進(jìn)細(xì)胞新陳代謝及細(xì)胞再生功能,而某些芳香油能調(diào)整人體的生理及心理活動(dòng)。請(qǐng)回答下列問題:(1)植物芳香油的提取可采納的方法有蒸餾法、萃取法和壓榨法。(2)玫瑰精油稱為“液體黃金”,多用于制造高級(jí)香水等化妝品。提取出的玫瑰精油不含有任何添加劑或化學(xué)原料,主要是通過水蒸氣蒸餾法提取。蒸餾時(shí)收集的蒸餾液不是純玫瑰精油,緣由是玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來(lái),所得到的是油水混合物。(3)用壓榨法提取柚皮精油,得到的糊狀液體可通過過濾除去其中的固體雜質(zhì)。(4)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí),干燥過程應(yīng)限制好溫度和時(shí)間以防止胡蘿卜素分解;萃取過程中宜采納水浴方式加熱以防止溫度過高。常用紙層析法鑒定所提取的胡蘿卜素。解析:(1)蒸餾法、萃取法、壓榨法是常用的提取植物芳香油的方法。(2)玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,可通過水蒸氣蒸餾法提?。徽麴s法提取玫瑰精油過程中由于玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來(lái),因此所收集的蒸餾液不是純玫瑰精油而是油水混合物,要得到較純的玫瑰精油還需將玫瑰精油和水分開。(3)采納壓榨法提取芳香油時(shí)獲得的糊狀液體,可先用一般布袋過濾除去固體殘?jiān)?4)胡蘿卜素不是很穩(wěn)定,溫度過高、干燥時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致其分解,所以在提取胡蘿卜素時(shí),干燥過程應(yīng)限制好溫度和時(shí)間以防止胡蘿卜素分解;萃取劑一般屬于易燃、易爆物,所以萃取過程中宜采納水浴方式加熱以防止溫度過高;常用紙層析法鑒定所提取的胡蘿卜素。5.(2024·西藏日喀則一中第一次月考)紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白,紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成的,血紅蛋白的主要功能是攜帶O2和CO2,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行試驗(yàn),來(lái)提取和分別血紅蛋白。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題:(1)血紅蛋白的提取和分別一般可分為四步:樣品處理、粗分別、純化和純度鑒定。(2)試驗(yàn)前取簇新的血液,要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,取血回來(lái),立刻進(jìn)行離心,收集血紅蛋白溶液。①加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固。②以上所述的過程即是樣品處理,它包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分別血紅蛋白溶液。(3)收集的血紅蛋白溶液要進(jìn)行粗分別,其方法是透析。(4)然后通過凝膠色譜法將樣品純化,樣品純化的目的是去除大分子雜質(zhì)蛋白。最終經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。(5)電泳利用了待分別樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子的大小、形態(tài)的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速率,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分別。解析:(1)血紅蛋白提取和分別一般分為四步:樣品處理、粗分別、純化和純度鑒定。(2)①實(shí)行血液時(shí)要在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,以防止血液凝固。②樣品處理包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分別血紅蛋白溶液。(3)將收集的血紅蛋白溶液在透析袋中透析進(jìn)行樣品的粗分別。(4)通過凝膠色譜法將樣品純化,純化的目的是去除大分子雜質(zhì)蛋白,最終經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。(5)電泳利用了待分別樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子的大小、形態(tài)的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速率,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分別。6.(2024·湖南衡陽(yáng)二模)已知青蒿素,無(wú)色針狀晶體,易溶于有機(jī)溶劑,不易揮發(fā);而玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,易揮發(fā)。依據(jù)生物相關(guān)學(xué)問,回答下列問題。(1)從黃花蒿中提取青蒿素時(shí),應(yīng)采納萃取法。理由是青蒿素為非揮發(fā)性物質(zhì),不能隨水蒸氣蒸餾出,但易溶于有機(jī)溶劑;并且通常在提取前將黃花蒿莖葉進(jìn)行粉碎和干燥,以提高效率;干燥過程應(yīng)限制好溫度和時(shí)間,以防止青蒿素分解。(2)提取過程中宜采納水浴加熱以防止燃燒、爆炸;所得液體濃縮前需進(jìn)行過濾。(3)玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,簡(jiǎn)便易行的提取方法是水蒸氣蒸餾中的水中蒸餾法,在提取過程中分別加入NaCl(目的是增加水的比重,使油水分層)、Na2SO4;要提高玫瑰精油的產(chǎn)品質(zhì)量,應(yīng)采納的措施是(嚴(yán)格限制蒸餾溫度)延長(zhǎng)蒸餾時(shí)間。解析:(1)青蒿素為非揮發(fā)性物質(zhì),不能隨水蒸氣蒸餾出,但易溶于有機(jī)溶劑,所以從黃花蒿中提取青蒿素時(shí),應(yīng)采納萃取法;為提高效率,在用萃取法提取青蒿素前,通常將黃花蒿莖葉進(jìn)行粉碎和干燥處理;干燥過程應(yīng)限制好溫度和時(shí)間,以防止青蒿素分解。(2)提取過程中所得的液體濃縮前需進(jìn)行過濾。(3)玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,常用水蒸氣蒸餾中的水中蒸餾法提??;為增加水的比重,使油水分層,可在提取過程中加入NaCl;要提高玫瑰精油的產(chǎn)品質(zhì)量,應(yīng)嚴(yán)格限制蒸餾溫度,延長(zhǎng)蒸餾時(shí)間。7.“樹橘柚者,食之則甘,嗅之則香”。橘子全部都是寶;不僅果肉的養(yǎng)分價(jià)值高,藥物價(jià)值較高,其皮、核、絡(luò)、葉都是“地道藥材”。請(qǐng)回答下列問題:(1)橘皮精油是一種廣譜性的殺蟲劑,具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,常采納壓榨法提取橘皮精油。若實(shí)行水中蒸餾法提取,橘皮精油的有效成分會(huì)發(fā)生部分水解和產(chǎn)生原料焦糊的問題。(2)如圖是提取橘皮精油的試驗(yàn)流程示意圖:圖中①過程處理的作用是破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),分解果膠,防止橘皮壓榨時(shí)滑脫,提高出油率;③過程一般加入相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4,其目的是使橘皮精油易于與水分別。(3)若想利用橘子生產(chǎn)果醋須要用到醋酸菌,醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為30~35_℃,當(dāng)氧氣和糖源都足夠時(shí),醋酸菌可將柑橘汁中的糖分解成醋酸。解析:(1)由于橘皮精油的有效成分在水中蒸餾過程中會(huì)發(fā)生部分水解,同時(shí)水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致原料焦糊問題,因此一般采納壓榨法提取橘皮精油。(2)圖中①過程是將干燥去水的橘皮用石灰水浸泡,該處理的作用是破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),分解果膠,防止橘皮壓榨時(shí)滑脫,提高出油率。③過程為壓榨,在壓榨過程中一般加入相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4并將pH調(diào)至7~8,其目的是使橘皮精油易于與水分別。(3)醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為30~35℃,當(dāng)氧氣和糖源都足夠時(shí),醋酸菌可將柑橘汁中的糖分解成醋酸。8.石油是人類重要的化工原料之一,其在給人類生產(chǎn)生活帶來(lái)便利的同時(shí)也對(duì)陸地和海洋造成污染。下面是科研工作者分別能分解石油污染物的假單孢桿菌的過程。請(qǐng)依據(jù)流程圖回答下列問題:土壤取樣→A→梯度稀釋→涂布到培育基上→篩選目的菌株(假單孢桿菌)(1)A過程為擴(kuò)大培育(或選擇培育),目的是增加假單孢桿菌的濃度,該培育基中應(yīng)當(dāng)以石油為唯一碳源。該試驗(yàn)過程中須要設(shè)置完全培育液比照組,將菌液稀釋相同的倍數(shù),比照組培育基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于(填“多于”或“少于”)選擇培育基上的菌落數(shù)目,從而說(shuō)明選擇培育基具有篩選作用。(2)試驗(yàn)中須要用無(wú)菌水對(duì)菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同濃度的菌液分別滴加到固體培育基的表面,用涂布器(填器具)涂布勻稱并進(jìn)行培育,以便獲得單個(gè)菌落。(3)若試驗(yàn)中用103倍的0.1mL的稀釋液分別涂布三個(gè)平板,培育后分別形成了98、100和102個(gè)菌落,則每毫升原樣液中含有假單孢桿菌1×106個(gè),實(shí)際值一般要比該測(cè)量值偏大的緣由是當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上視察到的只是一個(gè)菌落。解析:(1)流程圖中A過程為擴(kuò)大培育(或選擇培育),以增加假單孢桿菌的濃度;由于要分別能分解石油污染物的假單孢桿菌,所以該培育基中應(yīng)當(dāng)以石油為唯一碳源;由于完全培育液中任何微生物都可以生長(zhǎng),因此比照組培育基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培育基上的菌落數(shù)目,從而說(shuō)明選擇培育基具有篩選作用。(2)依據(jù)流程圖可知本試驗(yàn)采納稀釋涂布平板法接種,包括系列稀釋和涂布平板兩個(gè)過程,涂布平板之前須要用無(wú)菌水將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋,然后將不同濃度的菌液分別滴加到固體培育基的表面,用涂布器涂布勻稱并進(jìn)行培育。(3)依據(jù)題意可知,三個(gè)平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)C=(98+100+102)÷3=100個(gè),涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積V=0.1mL,稀釋倍數(shù)M=103倍,所以每毫升原樣液中含有假單孢桿菌數(shù)=(C÷V)×M=(100÷0.1)×103=1×106個(gè);當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上視察到的只是一個(gè)菌落,所以實(shí)際值一般要比該測(cè)量值大。9.青霉素是抗菌素的一種,是指分子中含有青霉烷、能破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁并在細(xì)菌細(xì)胞的繁殖期起殺菌作用的一類抗生素,是從青霉菌中提取的抗生素。青霉是生產(chǎn)青霉素的主要菌種,廣泛分布于土壤、空氣及腐敗的有機(jī)材料中?;卮鹣铝杏嘘P(guān)問題:牛肉膏蛋白胨培育基的養(yǎng)分構(gòu)成和含量培育基成分含量牛肉膏5g蛋白胨10gNaCl5gH2O定容至1000mL(1)上表培育基可為微生物供應(yīng)的養(yǎng)分成分有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽、維生素(缺一不行)。若要培育獲得點(diǎn)青霉的單菌落,還需在上述成分的基礎(chǔ)上加入瓊脂、青霉素。(2)除了供應(yīng)微生物生長(zhǎng)所需的各種養(yǎng)分成格外,培育基還須要滿意微生物生長(zhǎng)
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