2025年新科版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年新科版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、如圖表示果酒和果醋生產(chǎn)過程中的物質(zhì)變化情況；有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.需要O2參與的是過程③④⑤B.導(dǎo)致過程④⑤差異的原因主要是糖源是否充足C.④的發(fā)酵溫度要小于②的發(fā)酵溫度D.過程①②在酵母菌細(xì)胞中的場(chǎng)所相同2、2015年2月3日；英國(guó)議會(huì)下院通過一項(xiàng)歷史性法案，允許以醫(yī)學(xué)手段培育“三親嬰兒”。三親嬰兒的培育過程可選用如下技術(shù)路線。據(jù)圖分析，下列敘述正確的是（）

A.三親嬰兒的性別一定是女孩B.捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因有可能遺傳給三親嬰兒C.三親嬰兒的染色體全部來自母親提供的細(xì)胞核D.該技術(shù)可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代3、米酒、酸奶、泡菜等都屬于傳統(tǒng)發(fā)酵制品，相關(guān)敘述正確的是（）A.制作米酒時(shí)添加“酵頭”的目的是接種釀酒酵母B.米酒發(fā)酵液中冒出的“氣泡”都來源于酵母菌無氧呼吸C.酸奶和泡菜制作中均需要及時(shí)通氧，保證乳酸菌的有氧呼吸D.為降低雜菌污染，發(fā)酵前需要對(duì)器具、原料等進(jìn)行滅菌4、下列關(guān)于cDNA文庫和基因組文庫的說法中，正確的是（）A.同一物種的cDNA文庫只有1種B.某真核生物的cDNA文庫中的某基因一定比基因組文庫中的該基因短C.可以利用反轉(zhuǎn)錄法獲取cDNA文庫和基因組文庫D.只有cDNA文庫的基因可實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流5、發(fā)酵技術(shù)是指人們利用微生物的發(fā)酵作用，運(yùn)用一些技術(shù)手段控制發(fā)酵過程，從而進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)發(fā)酵產(chǎn)品的技術(shù)。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.制作泡菜時(shí)加鹽過多會(huì)導(dǎo)致泡菜咸而不酸B.可通過檢測(cè)發(fā)酵前后發(fā)酵液pH的變化來鑒定果醋制作是否成功C.可采用過濾、沉淀等方法分離提純酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)的單細(xì)胞蛋白D.傳統(tǒng)發(fā)酵的發(fā)酵產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身6、類病毒，又稱感染性RNA，是一類裸露的共價(jià)環(huán)狀的單鏈RNA分子，在天然狀態(tài)下，類病毒RNA以高度堿基配對(duì)的棒狀結(jié)構(gòu)形式存在。某些類病毒能進(jìn)行自我剪切。下列有關(guān)類病毒的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.合成類病毒蛋白質(zhì)外殼的原料來自宿主細(xì)胞B.類病毒RNA的結(jié)構(gòu)中存在氫鍵以維系其空間結(jié)構(gòu)C.類病毒RNA可能具有催化作用，可降低化學(xué)反應(yīng)所需的活化能D.類病毒自我剪切過程中會(huì)破壞特定部位相鄰核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)7、下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖；沒有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時(shí)間后被機(jī)體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥，可抑制DNA和RNA的合成，對(duì)正常細(xì)胞也有一定毒性。下列相關(guān)說法正確的是（）

A.單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的B.活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程C.在治療中，應(yīng)先注射非活化的磷酸酶，再注射生物導(dǎo)彈D.單克隆抗體特異性強(qiáng)，能減輕阿霉素對(duì)正常細(xì)胞的傷害8、關(guān)于我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針，敘述正確的是（）A.我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是隨著國(guó)家的政治、經(jīng)濟(jì)、科學(xué)發(fā)展水平的提升不斷變化的B.研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新C.推廣上要慎重，做到確保安全D.管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管9、多種實(shí)驗(yàn)材料都可以用于DNA的粗提取與鑒定，用香蕉也可以取得較好的實(shí)驗(yàn)效果。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.將粗提取的DNA加入到2mol/L的NaCl溶液的目的是為了溶解DNAB.冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精可以溶解某些蛋白質(zhì)，得到粗提取的DNAC.向剪碎的香蕉果肉組織中加入蒸餾水并研磨，以釋放核DNAD.將DNA溶于NaCl溶液后加入現(xiàn)配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻后會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色10、擴(kuò)展青霉常見于腐爛蘋果中，其分泌的展青霉素（Pat）是一種具有致突變作用的毒素。為研究腐爛蘋果中Pat的分布，進(jìn)行了如圖實(shí)驗(yàn)，其中“病健交界處”為病斑與正常部位的交界處，依據(jù)與病斑的距離不同將蘋果劃分為①~⑤號(hào)部位，其中⑤為剩余部分。測(cè)定病斑直徑為1、2、3cm的蘋果中①~⑤號(hào)部位的Pat含量，結(jié)果如下。下列說法正確的是（）

A.該實(shí)驗(yàn)自變量是腐爛蘋果中的病斑大小和離病斑距離大小B.可向擴(kuò)展青霉培養(yǎng)液中加入青霉素以防止雜菌污染C.病斑越大，靠近腐爛部位的果肉中Pat含量越高D.由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，蘋果去除腐爛部位后可放心食用11、科學(xué)家在蛙的核移植實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，腸上皮核移植實(shí)驗(yàn)中有1％～2％能形成蝌蚪，囊胚核移植實(shí)驗(yàn)中有50％能形成蝌蚪或成蛙。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.核移植得到的重組細(xì)胞須立即移植到蛙體內(nèi)B.由于科技的進(jìn)步，用猴進(jìn)行體細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)的成功率與用蛙的相當(dāng)C.該實(shí)驗(yàn)說明胚胎細(xì)胞分化程度較低，全能性的表達(dá)更容易D.核移植得到的克隆蛙的遺傳性狀與供核蛙的完全相同12、如圖為煙草植物組織培養(yǎng)過程的流程圖。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.對(duì)過程①獲取的根組織塊應(yīng)做較徹底的滅菌處理B.過程②應(yīng)根據(jù)要求使用適宜的培養(yǎng)基，在避光的環(huán)境中進(jìn)行C.過程③發(fā)生脫分化，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)D.定向誘導(dǎo)X細(xì)胞可得到有利的突變體13、DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團(tuán)呈離子狀態(tài)，不同相對(duì)分子質(zhì)量DNA進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳時(shí)可分開成不同條帶，相同分子量的為一條帶。用某種限制性核酸內(nèi)切酶完全酶切質(zhì)粒后，電泳后出現(xiàn)3條帶。下列敘述正確的是（）A.該質(zhì)粒上只有3個(gè)酶切位點(diǎn)B.瓊脂糖凝膠電泳可以用來分離DNAC.外加電場(chǎng)時(shí)，DNA向正極泳動(dòng)D.瓊脂糖帶負(fù)電荷，有利于DNA的泳動(dòng)評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)14、動(dòng)物細(xì)胞融合的意義：克服了______，成為研究_____、_____、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。15、基因的“剪刀”是_____，它的化學(xué)本質(zhì)是_____，它只能識(shí)別一種特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“針線”是______，它能連接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________構(gòu)成；基因的運(yùn)載體是將_____送入_____的運(yùn)輸工具。目前常用的運(yùn)載體有_____、________和_____。質(zhì)粒存在于許多_____和______等生物中，是擬核或_____外能夠_____的很小的環(huán)狀_____。16、常用的轉(zhuǎn)化方法：

將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是_______，其次還有______和______等。

將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是_______。此方法的受體細(xì)胞多是_______。

將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是_______，最常用的原核細(xì)胞是_____，其轉(zhuǎn)化方法是：先用______處理細(xì)胞，使其成為______，再將______溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。17、第三步：將目的基因?qū)隷_____18、植物基因工程：______。19、DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)中，如果實(shí)驗(yàn)材料是非哺乳動(dòng)物如雞血細(xì)胞，需要在雞血細(xì)胞中加入一定量的____________，如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先使用_______________溶解細(xì)胞膜。20、95%的______________以使DNA析出，用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起的絲狀物的顏色是____________。獲取的絲狀物后加入到質(zhì)量濃度為______________mol/L濃度的NaCL溶液的試管中，使絲狀物重新溶解。21、植物體細(xì)胞雜交的意義：_____。22、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識(shí)提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共8分)23、雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯(cuò)誤24、蛋白質(zhì)工程是一項(xiàng)難度很大的工程，主要是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級(jí)結(jié)構(gòu)，而這種高級(jí)結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜。（選擇性必修3P95）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共28分)25、尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥；但尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收，只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某課題小組從土壤中分離能夠分解尿素的細(xì)菌并進(jìn)行計(jì)數(shù)的過程如圖1所示，圖2是乙中的培養(yǎng)基配方。請(qǐng)回答下列問題：

（1）為了獲得尿素分解菌；可在__________取樣；經(jīng)系列處理后如圖2所示培養(yǎng)基，為微生物的生長(zhǎng)提供碳源和氮源的分別是___________；__________。

（2）甲中培養(yǎng)基與乙中培養(yǎng)基的成分相比；唯一的區(qū)別是___________。

（3）在涂平板前需要對(duì)甲中的菌液進(jìn)行稀釋；稀釋涂布后能得到菌落數(shù)目在___________________的平板，則說明稀釋操作比較成功。

（4）對(duì)分離得到的尿素分解菌作進(jìn)一步鑒定時(shí)；可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑變紅的原因是尿素分解菌_____________________，再結(jié)合菌落的特征等進(jìn)行確定。

（5）統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目_________，除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外，______________也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。26、【生物技術(shù)實(shí)踐】

科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白；這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力，受到研究者重視。

（1）分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的______________、大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的________不同而實(shí)現(xiàn)分離。

（2）可用金黃色葡萄球菌來檢驗(yàn)該蛋白的抗菌特性?？咕鷮?shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長(zhǎng)提供_________和_______________。

（3）分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時(shí)間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的_____________；確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。

（4）細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有_______和___________。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行_____________處理。27、研究者改造與腸道共生的大腸桿菌；口服該工程菌后激活機(jī)體特異性免疫，實(shí)現(xiàn)腫瘤的預(yù)防和治療。

(1)部分腸道細(xì)菌能夠分泌外膜囊泡（OMV）；如圖1．OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內(nèi)豐富的免疫細(xì)胞。細(xì)菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白。

研究者利用含圖2所示元件的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌制備工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表達(dá)產(chǎn)物能夠與樹突狀細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合，提高樹突狀細(xì)胞_____OMV的能力。

(2)為研究上述工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)的效果，研究者用健康小鼠進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：。組別第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小時(shí)后，飲用含阿拉伯糖的水結(jié)果檢測(cè)第1組空載體+第12天，每組隨機(jī)取5只小鼠等量的脾臟細(xì)胞與黑色素瘤細(xì)胞共培養(yǎng)，檢測(cè)殺傷率，結(jié)果如圖3．第2組ClyA-Fc+第3組ClyA-OVA+第4組第5組

注：“+”；“-”代表是否飲用；

口服工程菌12小時(shí)后其在腸道內(nèi)存在數(shù)量較多。

①第4、5組的操作是_____。圖3結(jié)果說明工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)，理由是_____。

②為進(jìn)一步驗(yàn)證上述結(jié)論，研究者進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：先加入_____（填選項(xiàng)前字母）保溫后漂洗，再加入_____（填選項(xiàng)前字母）保溫后漂洗，檢測(cè)熒光細(xì)胞的數(shù)目，若第5組_____為最大值；則上述結(jié)論成立。

A．帶有紅色熒光標(biāo)記的OVA抗原肽復(fù)合物。

B．帶有綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞毒性T細(xì)胞特異性抗體。

C．第1-5組小鼠脾臟細(xì)胞。

③腫瘤患者術(shù)后極易復(fù)發(fā)，研究者重復(fù)上表實(shí)驗(yàn)，并在第3次口服工程菌后第50天給小鼠注射黑色素瘤細(xì)胞。目的是_____。

(3)該工程菌的研發(fā)為不同腫瘤的精準(zhǔn)治療和預(yù)防提供了可能。依據(jù)本研究，設(shè)計(jì)針對(duì)肺癌治療的工程菌表達(dá)載體元件：_____。28、微生物因具有體積??；易培養(yǎng)，繁殖快，且自身遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，經(jīng)人工處理或自然突變可獲得新性狀等特點(diǎn)，在發(fā)酵工程中應(yīng)用廣泛?；卮鹣铝袉栴}：

(1)大腸桿菌是發(fā)酵工程中應(yīng)用較為廣泛的菌種之一。培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至____性，再利用_________________法滅菌后進(jìn)行接種。

(2)在發(fā)酵工程中，常常需要對(duì)菌種數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。相對(duì)真菌來說，細(xì)菌的體積較小，因此對(duì)細(xì)菌數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)時(shí)，適合使用_________________（填“細(xì)菌計(jì)數(shù)板”或“血細(xì)胞計(jì)數(shù)板”）進(jìn)行計(jì)數(shù)，且統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)目往往比實(shí)際活菌數(shù)目_________________（填“多”或“少”）。

(3)人工處理或自然突變往往會(huì)使菌種成為營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株；現(xiàn)欲設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后，可獲得組氨酸缺陷型突變菌株，請(qǐng)簡(jiǎn)單描述實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

實(shí)驗(yàn)思路：_____________________________；

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：_____________________________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題，共15分)29、研究發(fā)現(xiàn)從錐形蝸牛體內(nèi)提取出的毒液有望幫助人類開發(fā)出超級(jí)速效的胰島素。研究表明錐形蝸牛毒蛋白（Con-InsG1）能加速受體細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)換；比人類胰島素能更加快速地發(fā)揮作用。因此制造這類“速效胰島素”以及利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)實(shí)現(xiàn)批量生產(chǎn)成為Ⅰ型糖尿病治療的新思路?；卮鹣铝袉栴}：

（1）利用基因工程制造Con-InsG1的過程中，構(gòu)建的基因表達(dá)載體一般包括目的基因、______、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)，其中標(biāo)記基因的作用是______?；蚬こ讨行枰狣NA連接酶，根據(jù)酶的來源不同分為兩類，其中______既可以“縫合”雙鏈DNA片段互補(bǔ)的粘性末端；又可以“縫合”雙鏈DNA片段的平末端。

（2）為了獲得目的基因，可以通過提取分析Con-InsG1中______的序列推知毒蛋白基因的______。獲得的目的基因可通過______技術(shù)進(jìn)行大量擴(kuò)增。

（3）將目的基因?qū)氪竽c桿菌體內(nèi)，一般先用Ca2+處理大腸桿菌使之成為______細(xì)胞。

（4）經(jīng)過目的基因的檢測(cè)和表達(dá)獲得的Con-InsG1活性未能達(dá)到期待的“速效胰島素”的生物活性，導(dǎo)致這種差異的原因可能是______。30、下圖是制備單克隆抗體A的流程圖?；卮鹣铝袉栴}：

（1）圖中制備抗體A的過程中，用到的生物技術(shù)主要有______________________（答出兩點(diǎn)）。

（2）圖中，細(xì)胞I的名稱為_________；第一次、第二次篩選的目的分別是________、________。

（3）單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)在于它的___________。利用___________標(biāo)記的單克隆抗體；在特定組織中成像的技術(shù)，可定位診斷腫瘤；心血管畸形等疾病。

（4）臨床使用的小鼠免疫后制備的鼠源性單抗存在一些弊端，其中之一是會(huì)引起人體抗鼠源性抗體反應(yīng)。某病人連續(xù)隔周注射某種鼠源性單抗治療一種病毒感染性疾病，初期病毒數(shù)量明顯減少，一段時(shí)間后，這種病毒的數(shù)量又開始，上升，排除病毒變異的因素，病毒數(shù)量上升的原因還可能是人體產(chǎn)生了___________，使鼠源性抗體不能發(fā)揮抗病毒的作用。研究人員可應(yīng)用__________工程，改造鼠源性抗體分子的結(jié)構(gòu)，降低鼠源性抗體的人體免疫反應(yīng)。31、綠色熒光蛋白在紫外線的照射下能發(fā)出綠色熒光；最初是在一種海蜇中被發(fā)現(xiàn)的。轉(zhuǎn)綠色熒光基因（Gfp）的幼鼠在紫外光下能發(fā)出綠色熒光。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，綠色熒光蛋白可以幫助了解細(xì)胞工作的機(jī)制，通過尋找熒光便可知道基因何時(shí)以及為什么“開啟”，這項(xiàng)成就被稱為“21世紀(jì)的顯微鏡”。下圖表示轉(zhuǎn)基因綠色熒光小鼠的培育過程，圖中Neo基因編碼的產(chǎn)物能分解G418，G418是一類對(duì)原核細(xì)胞和真核細(xì)胞都有毒性的抗生素。回答下列有關(guān)問題：

(1)將綠色熒光蛋白基因與目的基因連接組成的融合基因轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)，表達(dá)出的蛋白質(zhì)就會(huì)帶有經(jīng)色熒光，觀察綠色熒光就可以追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)，直觀地揭示微觀世界的運(yùn)動(dòng)規(guī)律。這項(xiàng)技術(shù)中需要_______等工具酶。

(2)從______中可以提取胚胎干細(xì)胞；步驟②和⑤都需要用_______法；分別實(shí)現(xiàn)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞；將轉(zhuǎn)基因細(xì)胞導(dǎo)入囊胚。

(3)步驟⑤應(yīng)把轉(zhuǎn)基因胚胎干細(xì)胞導(dǎo)入囊胚的_______，讓轉(zhuǎn)基因干細(xì)胞與這些細(xì)胞一起發(fā)育成胎兒；若幼鼠_________；則說明Gfp基因在幼鼠體內(nèi)成功表達(dá)。

(4)據(jù)圖分析，Neo基因在轉(zhuǎn)基因綠色熒光小鼠的培育過程中發(fā)揮作用的機(jī)理是_________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、C【分析】【分析】

分析題圖：圖示是果酒和果醋生產(chǎn)過程中的物質(zhì)變化情況；其中①是細(xì)胞呼吸的第一階段，發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中；②是無氧呼吸的第二階段，為酒精發(fā)酵，發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中；③為有氧呼吸的第二；三階段，發(fā)生在線粒體中；④⑤均為醋酸發(fā)酵，發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中。

【詳解】

A；過程③為有氧呼吸的第二、三階段；發(fā)生在線粒體中，需要氧氣的參與；過程④⑤都是醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生醋酸的過程，也需要氧氣的參與，A正確；

B；過程④是醋酸菌在缺少糖源時(shí)；將酒精變成乙醛，再將乙醛變成醋酸，過程⑤是醋酸菌在氧氣、糖源充足時(shí)，將葡萄糖轉(zhuǎn)變成醋酸，B正確；

C；④醋酸發(fā)酵的溫度（30-35℃）高于②酒精發(fā)酵溫度（18-25℃）；C錯(cuò)誤；

D；過程①為細(xì)胞呼吸的第一階段；發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，過程②為無氧呼吸的第二階段，發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，D正確。

故選C。2、D【分析】【分析】

題圖分析：圖示表示三親嬰兒的培育過程；由圖可知，三親嬰兒的培育采用了核移植技術(shù)；體外受精技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等。

【詳解】

A；圖示過程涉及精卵結(jié)合；三體嬰兒的性染色體一條來自母親，一條來自于捐獻(xiàn)者，而無法確定捐獻(xiàn)者提供的性染色體是X還是Y，故該嬰兒的性別不確定，A錯(cuò)誤；

B；捐獻(xiàn)者只是提供了卵母細(xì)胞的質(zhì)基因；若其攜帶紅綠色盲基因一定不會(huì)遺傳給三親嬰兒，B錯(cuò)誤；

C；三親嬰兒的染色體來自兩個(gè)親本；C錯(cuò)誤；

D；該技術(shù)中；母親只提供了細(xì)胞核，因此可以避免遺傳母親的線粒體遺傳病，D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】3、A【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：(1)在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖；(2)在無氧條件下，酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳。

2；泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下；乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。

【詳解】

A；利用酵母菌的無氧呼吸可制作米酒；制作米酒時(shí)添加“酵頭”的目的是接種釀酒酵母，A正確；

B；米酒發(fā)酵液中冒出的“氣泡”既來源于酵母菌無氧呼吸；也來源于酵母菌的有氧呼吸，B錯(cuò)誤；

C；酸奶和泡菜的制作利用的微生物是乳酸菌；而乳酸菌是厭氧菌，因此酸奶和泡菜制作中不需要通氧，要保證乳酸菌的無氧呼吸，C錯(cuò)誤；

D；發(fā)酵前不能對(duì)原料進(jìn)行滅菌；否則把原料中的發(fā)酵菌種都?xì)⑺懒?，D錯(cuò)誤。

故選A。4、B【分析】【詳解】

A；由于cDNA文庫中只含有某種生物的部分基因；因此該種基因文庫可能有多種，A錯(cuò)誤；

B；mRNA是由基因中的外顯子轉(zhuǎn)錄形成的；因此cDNA文庫中的基因不包含啟動(dòng)子和內(nèi)含子等結(jié)構(gòu)，與該生物的基因組文庫中的基因結(jié)構(gòu)不同，B正確；

C；可以利用反轉(zhuǎn)錄法獲取cDNA文庫；C錯(cuò)誤；

D；cDNA文庫可以進(jìn)行物種間的基因交流；基因組文庫中部分基因可以，D錯(cuò)誤。

故選B。5、D【分析】【分析】

發(fā)酵是指利用微生物；在適宜的條件下，將原料通過微生物的代謝轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。

【詳解】

A；制作泡菜時(shí)加鹽過多；會(huì)抑制乳酸菌的生命活動(dòng)，導(dǎo)致乳酸含量低，所以加鹽過多會(huì)導(dǎo)致泡菜咸而不酸，A正確；

B；制作果醋是利用醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生醋酸；可通過檢測(cè)發(fā)酵前后發(fā)酵液pH的變化來鑒定果醋制作是否成功，B正確；

C；分離、提純酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)的單細(xì)胞蛋白；指的就是單細(xì)胞菌體,可采用過濾、沉淀等方法從培養(yǎng)液中分離，C正確；

D；發(fā)酵工程的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身；D錯(cuò)誤。

故選D。6、A【分析】【分析】

病毒是一種個(gè)體微??；結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，只含一種核酸（DNA或RNA），必須在活細(xì)胞內(nèi)寄生并以復(fù)制方式增殖的非細(xì)胞型生物。病毒是一種非細(xì)胞生命形態(tài)，它由一個(gè)核酸長(zhǎng)鏈和蛋白質(zhì)外殼構(gòu)成，病毒沒有自己的代謝機(jī)構(gòu)，沒有酶系統(tǒng)。因此病毒離開了宿主細(xì)胞，就成了沒有任何生命活動(dòng)；也不能獨(dú)立自我繁殖的化學(xué)物質(zhì)。一旦進(jìn)入宿主細(xì)胞后，它就可以利用細(xì)胞中的物質(zhì)和能量以及復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯的能力，按照它自己的核酸所包含的遺傳信息產(chǎn)生和它一樣的新一代病毒。

【詳解】

A；類病毒是一類裸露的共價(jià)環(huán)狀的單鏈RNA分子；沒有蛋白質(zhì)外殼，A錯(cuò)誤；

B；由“在天然狀態(tài)下；類病毒RNA以高度堿基配對(duì)的棒狀結(jié)構(gòu)形式存在”可知類病毒RNA具有一定的空間結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)中存在氫鍵，B正確；

C；某些類病毒能進(jìn)行自我剪切；說明類病毒RNA可能具有催化功能，可降低化學(xué)反應(yīng)所需的活化能，C正確；

D；類病毒RNA是由核糖核苷酸連激活接形成的；核苷酸之間為磷酸二酯鍵，因此自我剪切過程中會(huì)破壞磷酸二酯鍵，D正確。

故選A。二、多選題(共7題，共14分)7、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備。

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：

①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；

②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的；A正確；

B；根據(jù)題意可知；“阿霉素可抑制DNA和RNA的合成”，因此活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程，B正確；

C；在治療中；應(yīng)將非活化磷酸阿霉素和生物導(dǎo)彈同時(shí)注射，C錯(cuò)誤；

D；單克隆抗體特異性強(qiáng)；能減輕阿霉素對(duì)正常細(xì)胞的傷害，D正確。

故選ABD。8、B:C:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）．對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊；正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。

【詳解】

我國(guó)對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的方針是一貫的；明確的；不會(huì)隨著國(guó)家的政治、經(jīng)濟(jì)、科學(xué)發(fā)展水平的提升不斷變化的，就是研究上要大膽，堅(jiān)持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴(yán)格，堅(jiān)持依法監(jiān)管，A錯(cuò)誤，BCD正確。

故選BCD。9、C【分析】【分析】

根據(jù)DNA的溶解性提取DNA；1；DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaC中的溶解度不同。2、DNA不溶于酒精，但是某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。3、DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。

【詳解】

A；將粗提取的DNA加入到2mol/L的NaCl溶液的目的是為了溶解DNA；A正確；

B；DNA不溶于酒精；而某些蛋白質(zhì)溶解于酒精，可用體積分?jǐn)?shù)為95%冷酒精溶解某些蛋白質(zhì)，析出DNA，獲得粗提取的DNA，B正確；

C；香蕉果肉組織細(xì)胞有細(xì)胞壁保護(hù)；因此加蒸餾水不會(huì)破壞細(xì)胞，不能將DNA釋放岀來，C錯(cuò)誤；

D；將DNA再次溶于NaCl溶液；加入現(xiàn)配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻出現(xiàn)藍(lán)色，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】10、A:B:C【分析】【分析】

1；據(jù)圖分析可知；①號(hào)部位為病斑區(qū)域，即腐爛部位，①與②交界處為“病鍵交界處”，是腐爛部位與未腐爛部位交界的地方，②③④⑤均為未腐爛部位，且距離腐爛部位依次變遠(yuǎn)。

2；在曲線圖中；病班部位的Pat含量最高，而距離病班部位越來越遠(yuǎn)，Pat含量就會(huì)越來越少。

【詳解】

A；由曲線圖可知；該實(shí)驗(yàn)自變量是腐爛蘋果中的病斑大小和離病斑距離大小，A正確；

B；青霉素可以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)；可向擴(kuò)展青霉培養(yǎng)液中加入青霉素以防止雜菌污染，B正確；

C；病斑越大；說明病斑中擴(kuò)展青霉素的密度就越大，產(chǎn)生的Pat就越多，C正確；

D；如果只去除腐爛部位；那么未腐爛部位中的Pat仍然會(huì)對(duì)人體造成傷害，存在健康風(fēng)險(xiǎn)，故窩爛蘋果去除腐爛部位后不能食用，D錯(cuò)誤。

故選ABC。11、A:B:D【分析】【分析】

1.細(xì)胞核移植技術(shù)；是指將一個(gè)動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核移植至去核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。

2.高度分化的植物細(xì)胞具有全能性；已分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。

【詳解】

A；蛙是體外受精；生殖發(fā)育過程都是在體外完成的，所以實(shí)驗(yàn)中用到核移植技術(shù)得到的重組細(xì)胞，不用移植到蛙體內(nèi)，A錯(cuò)誤；

B；蛙是體外受精；生殖發(fā)育過程都是在體外完成的，猴子是體內(nèi)受精、體內(nèi)發(fā)育的，用猴進(jìn)行體細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)的成功率與用蛙無可比性，B錯(cuò)誤；

C；題意顯示；腸上皮核移植實(shí)驗(yàn)中有1%～2%能形成蝌蚪，囊胚核移植實(shí)驗(yàn)中有50%能形成蝌蚪或成蛙，該實(shí)驗(yàn)說明胚胎細(xì)胞分化程度較低，全能性的表達(dá)更容易，C正確；

D；蛙的性狀有些是核基因控制；有些是質(zhì)基因控制，核移植得到的克隆蛙的遺傳性狀與供核蛙的不完全相同，D錯(cuò)誤。

故選ABD。12、A:C:D【分析】分析題圖：圖示表示煙草植物組織培養(yǎng)過程的流程圖；其中①表示獲取外植體，②表示脫分化，③表示再分化，④表示從愈傷組織中獲取細(xì)胞X，⑤表示進(jìn)一步發(fā)育形成幼苗。

【詳解】

A；對(duì)過程①獲取的根組織塊應(yīng)進(jìn)行消毒處理；如果采用滅菌技術(shù)，會(huì)使根組織塊失去活力，無法進(jìn)行組織培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；

B；過程②是脫分化形成愈傷組織的過程；需要在避光的環(huán)境中進(jìn)行，B正確；

C；過程③發(fā)生再分化；其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，C錯(cuò)誤；

D；可以通過誘導(dǎo)使細(xì)胞產(chǎn)生突變；但突變是不定向的，D錯(cuò)誤。

故選ACD。13、B:C:D【分析】【分析】

分析題干：質(zhì)粒上的DNA分子為環(huán)狀；某種限制性內(nèi)切酶完全酶切環(huán)狀質(zhì)粒后，出現(xiàn)3條帶（相同分子量的為一條帶），即3種不同分子量DNA（至少被切割成3條DNA片段），因此環(huán)狀質(zhì)粒上至少有3個(gè)酶切位點(diǎn)。

【詳解】

A；由分析可知；該質(zhì)粒上至少含有3個(gè)酶切位點(diǎn)，A錯(cuò)誤；

B；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團(tuán)呈離子狀態(tài)；帶負(fù)電，DNA在一定的電場(chǎng)力作用下，在凝膠中向正極泳動(dòng)，DNA分子越大，泳動(dòng)越慢，因此瓊脂糖凝膠電泳可以用來分離DNA，B正確；

C；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團(tuán)呈離子狀態(tài)；帶負(fù)電，因此外加電場(chǎng)時(shí)，DNA向正極泳動(dòng)，C正確；

D；DNA分子的糖-磷酸骨架中磷酸基團(tuán)呈離子狀態(tài)；帶負(fù)電，若瓊脂糖帶負(fù)電荷，使得電場(chǎng)力增強(qiáng)，有利于DNA向正極泳動(dòng)，D正確。

故選BCD。三、填空題(共9題，共18分)14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】遠(yuǎn)緣雜交的不親和性細(xì)胞遺傳細(xì)胞免疫、15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制酶蛋白質(zhì)核苷酸序列特定的切點(diǎn)DNA連接酶缺口磷酸-脫氧核糖外源基因受體細(xì)胞質(zhì)粒噬菌體動(dòng)植物病毒細(xì)菌酵母菌細(xì)胞核自主復(fù)制DNA分子16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法顯微注射技術(shù)受精卵繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少大腸桿菌Ca2+感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載體DNA分子17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】受體細(xì)胞18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蒸餾水洗滌劑和食鹽20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】冷酒精白色221、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。22、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共2題，共8分)23、A【分析】【詳解】

雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力，精子獲能的過程不是獲得能量的過程，是獲得受精能力的過程，可在獲能液或受精液中完成，故正確。24、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是一項(xiàng)難度很大的工程，主要是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級(jí)結(jié)構(gòu)，而這種高級(jí)結(jié)構(gòu)往往十分復(fù)雜，并且蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)具有多樣性，這也在一定程度上增加了蛋白質(zhì)工程的難度，故說法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共28分)25、略

【分析】【分析】

自然界中目的菌株的篩選要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找，要分離尿素細(xì)菌應(yīng)該使用只含有尿素為唯一氮源培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)基其他細(xì)菌不能生存，存活下來的細(xì)菌則是可以分解尿素。

【詳解】

（1）自然界中目的菌株的篩選要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找，要獲得分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)到含尿素較多的土壤中去取樣，圖2中培養(yǎng)基為微生物提供碳源的是葡萄糖，提供氮源的是尿素；

（2）甲為液體培養(yǎng)基；乙為固體培養(yǎng)基，唯一的區(qū)別在于甲培養(yǎng)基內(nèi)無瓊脂；

（3）為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性；一般應(yīng)選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，在30-300范圍內(nèi)的菌落數(shù)說明稀釋比較成功；

（4）酚紅遇堿變紅；合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)；

（5）該小組采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)土壤溶液中活菌的數(shù)目時(shí)；統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目低，是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌落連在一起時(shí)，只能統(tǒng)計(jì)一個(gè)菌落，細(xì)菌還可以使用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。

【點(diǎn)睛】

熟記并理解微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、微生物的分離與計(jì)數(shù)等相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)、形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)，在此基礎(chǔ)上從題意中提取信息并進(jìn)行作答?！窘馕觥亢蛩剌^多的土壤中葡萄糖尿素甲中培養(yǎng)基無瓊脂30~300的平板（則說明稀釋操作比較成功）合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)低顯微鏡直接計(jì)數(shù)26、略

【分析】【詳解】

（1）電泳法分離蛋白質(zhì)；是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的電荷；大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)分離。

（2）牛肉膏和蛋白胨中蛋白質(zhì)較多；可作為碳源和氮源。

（3）加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中；金黃色葡萄球菌應(yīng)該不能生長(zhǎng)或生長(zhǎng)很少，未加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中金黃色葡萄球菌應(yīng)該能生長(zhǎng)，菌落較多。

（4）平板劃線法、稀釋涂布平板法都能使接種的菌種在固體培養(yǎng)上充分分散，對(duì)使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行滅菌處理，是為了防止細(xì)菌擴(kuò)散污染?！窘馕觥竣?電荷（帶電情況）②.遷移速度③.碳源④.氮源⑤.數(shù)量⑥.平板劃線法⑦.稀釋涂布平板法（稀釋混合平板法）⑧.滅菌27、略

【分析】【分析】

樹突狀細(xì)胞為抗原呈遞細(xì)胞；可識(shí)別；攝取和傳遞抗原信息。

【詳解】

（1）細(xì)菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白；而OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內(nèi)豐富的免疫細(xì)胞。所以，ClyA基因的作用為表達(dá)出細(xì)菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，進(jìn)而融合基因可以被免疫細(xì)胞識(shí)別。Fc表達(dá)產(chǎn)物能夠與樹突狀細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合，進(jìn)而提高樹突狀細(xì)胞識(shí)別；攝取和傳遞抗原信息的能力。

（2）①根據(jù)表格和柱狀圖可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐漸增加部件，且第4組和第5組工程菌都是完整的，即第4組:ClyA-OVA-Fc第5組:ClyA-OVA-Fc，但是第4組飲用含阿拉伯糖的水，進(jìn)而激活融合基因的表達(dá)；第5組不飲用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表達(dá)。所以，第3；5組含有OVA，在人為控制口服阿拉伯糖后產(chǎn)生OMV，激活特異性免疫，對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷率較高；1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導(dǎo)，殺傷率均低。

②小鼠脾臟細(xì)胞具有免疫細(xì)胞；可在抗原刺激下引起特異性免疫。帶有紅色熒光標(biāo)記的OVA抗原肽復(fù)合物可引起小鼠脾臟細(xì)胞發(fā)生特異性免疫，故先加入第1-5組小鼠脾臟細(xì)胞和帶有紅色熒光標(biāo)記的OVA抗原肽復(fù)合物進(jìn)行保溫，判斷特異性免疫的強(qiáng)度；

故選AC。

再加入帶有綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞毒性T細(xì)胞特異性抗體；目的是檢測(cè)OVA抗原肽復(fù)合物是否能夠產(chǎn)生特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞。

故選B。

若第5組同時(shí)被紅色和綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞數(shù)目占比越多；說明工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)，結(jié)論成立。

③腫瘤患者術(shù)后極易復(fù)發(fā)；說明特異性免疫功能減弱。所以，可多次注射黑色素瘤細(xì)胞，進(jìn)而研究該口服工程菌是否能夠誘發(fā)長(zhǎng)期免疫記憶，從而抑制腫瘤復(fù)發(fā)。

（3）本實(shí)驗(yàn)中融合基因里面有OVA（黑色素瘤細(xì)胞特異性抗原），所以只需將OVA替換為肺癌細(xì)胞特異性抗原即可。即將元件中的OVA替換為肺癌細(xì)胞特異性表達(dá)的抗原基因?！窘馕觥?1)表達(dá)ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面識(shí)別；攝取。

(2)第4組:ClyA-OVA-Fc和-第5組:ClyA-OVA-Fc和+第3；5組含有OVA；在人為控制口服阿拉伯糖后產(chǎn)生OMV，激活特異性免疫，對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷率較高;1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導(dǎo)，殺傷率均低ACB同時(shí)被紅色和綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞數(shù)目占比研究該口服工程菌是否能夠誘發(fā)長(zhǎng)期免疫記憶，從而抑制腫瘤復(fù)發(fā)。

(3)將元件中的OVA替換為肺癌細(xì)胞特異性表達(dá)的抗原基因28、略

【分析】【分析】

1；利用顯微鏡進(jìn)行直接計(jì)數(shù)；也是一種常用的、快速直觀的測(cè)定微生物數(shù)量的方法。該方法利用特定的細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下觀察、計(jì)數(shù)，然后再計(jì)算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量，統(tǒng)計(jì)的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和。細(xì)菌計(jì)數(shù)板和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)原理相同。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板比細(xì)菌計(jì)數(shù)板厚，常用于相對(duì)較大的酵母菌細(xì)胞、霉菌孢子等的計(jì)數(shù)。用細(xì)菌計(jì)數(shù)板可對(duì)細(xì)菌等較小的細(xì)胞進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)。

2；滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物；包括芽孢和孢子。濕熱滅菌：高壓蒸汽滅菌（壓力為100kPa、溫度為121℃、15~30min）；干熱滅菌：160~170℃熱空氣維持2~3h。耐高溫的和需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金屬用具等；灼燒滅菌：接種工具。接種過程中，試管口、瓶口等容易被污染的部位。

【詳解】

（1）大腸桿菌是細(xì)菌；培養(yǎng)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性，對(duì)培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。

（2）細(xì)菌計(jì)數(shù)板和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)原理相同。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板比細(xì)菌計(jì)數(shù)板厚；常用于相對(duì)較大的酵母菌細(xì)胞；霉菌孢子等的計(jì)數(shù)。用細(xì)菌計(jì)數(shù)板可對(duì)細(xì)菌等較小的細(xì)胞進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)。該方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和，所以統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)目往往比實(shí)際活菌數(shù)目多。

（3）本實(shí)驗(yàn)為了證明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后；可獲得組氨酸缺陷型突變菌株，可將野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察大腸桿菌是否生長(zhǎng)，如果在培養(yǎng)基上無大腸桿菌生長(zhǎng)，說明野生型大腸桿菌經(jīng)紫外線照射后，獲得了組氨酸缺陷型突變菌株。具體實(shí)驗(yàn)思路及結(jié)果如下：

實(shí)驗(yàn)思路：使用稀釋涂布平板法將紫外線照射后的大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上；標(biāo)記為甲組；使用稀釋涂布平板法將等量的野生型大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標(biāo)記為乙組；將未接種的不含組氨酸的完全培養(yǎng)基標(biāo)記為丙組；將甲；乙、丙組培養(yǎng)基放于相同且適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察并統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：乙組培養(yǎng)基出現(xiàn)較多菌落；甲組培養(yǎng)基沒有出現(xiàn)菌落或出現(xiàn)菌落、但菌落數(shù)少于乙組；丙組培養(yǎng)基無菌落?！窘馕觥?1)中性或弱堿高壓蒸汽滅菌（或濕熱滅菌）

(2)細(xì)菌計(jì)數(shù)板多。

(3)使用稀釋涂布平板法將紫外線照射后的大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標(biāo)記為甲組；使用稀釋涂布平板法將等量的野生型大腸桿菌接種于不含組氨酸的完全培養(yǎng)基上，標(biāo)記為乙組；將未接種的不含組氨酸的完全培養(yǎng)基標(biāo)記為丙組；將甲、乙、丙組培養(yǎng)基放于相同且適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察并統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)乙組培養(yǎng)基出現(xiàn)較多菌落；甲組培養(yǎng)基沒有出現(xiàn)菌落或出現(xiàn)菌落、但菌落數(shù)少于乙組；丙組培養(yǎng)基無菌落六、綜合題(共3題，共15分)29、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)，個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）構(gòu)建的基因表達(dá)載體含有目的基因（速效胰島素基因）、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子及終止子等，標(biāo)記基因的作用是鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞?；蚬こ讨行枰狣NA連接酶（將目的基因與運(yùn)載體連接），根據(jù)酶的來源不同分為E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶兩類，其中T4DNA連接酶既可以“縫合”雙鏈DNA片段互補(bǔ)的粘性末端；又可以“縫合”雙鏈DNA片段的平末端。E?coliDNA連接酶只能“縫合”雙鏈DNA片段互補(bǔ)的粘性末端。

（2）目的基因的獲取可采用的方法有：原核基因采取直接分離獲得；真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。為了獲得目的基因可以通過提取分析Con-InsGl毒蛋白中的氨基酸序列推知毒蛋白基因的（脫氧）核苷酸序列，再用DNA合成儀直接大量合成。獲得的目的基因可通過PCR（或聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)進(jìn)行大量擴(kuò)增。

（3）將人工合成的目的基因?qū)氪竽c桿菌體內(nèi)，一般先用Ca2+處理大腸桿菌使之成為感受態(tài)細(xì)胞。再將重組DNA溶于緩沖液中與該類細(xì)胞融合；在一定溫度下促進(jìn)細(xì)胞吸收重組DNA分子完成轉(zhuǎn)化過程。

（4）經(jīng)過目的基因的檢測(cè)和表達(dá)；獲得的Con-InsGl毒蛋白活性未能達(dá)到期待的“速效胰島素”的生物活性，導(dǎo)致這種差異的原因可能是大腸桿菌屬于原核生物，其細(xì)胞中不含內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，基因表達(dá)獲得的蛋白質(zhì)未加工。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，對(duì)生物學(xué)問題作出準(zhǔn)確的判斷．【解析】啟動(dòng)子、終止子鑒別和篩選目的基因的細(xì)胞T4DNA連接酶氨基酸（脫氧）核苷酸序列PCR（或聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）感受態(tài)大腸桿菌中基因表達(dá)獲得的蛋白質(zhì)未加工30、略

【分析】【分析】

1；單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備；

2；第一次篩選：在特定的選擇培養(yǎng)基上；未融合的親