2025年蘇教版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年蘇教版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、下列有關(guān)果酒和果醋制作的敘述，正確的是（）A.在果酒的制作過(guò)程中，應(yīng)先去除葡葡的枝梗，再?zèng)_洗干凈B.醋酸發(fā)酵時(shí)，需要通氣的原因是促進(jìn)醋酸菌通過(guò)有氧呼吸產(chǎn)生醋酸C.為防止發(fā)酵液被污染，榨汁機(jī)和發(fā)酵瓶使用前都必須滅菌D.制作果酒時(shí)，發(fā)酵瓶裝入葡萄汁后，應(yīng)封閉充氣口2、利用卷心菜發(fā)酵制作泡菜過(guò)程中；乳酸菌酵母菌細(xì)胞數(shù)量和pH的變化如圖所示。下列敘述不正確的是。

A.酵母菌和乳酸菌均有核膜包被的細(xì)胞核B.發(fā)酵初期乳酸菌建立了明顯的菌種優(yōu)勢(shì)C.前6天pH下降主要由乳酸菌代謝引起D.發(fā)酵中期酵母菌通過(guò)無(wú)氧呼吸進(jìn)行增殖3、標(biāo)準(zhǔn)的PCR過(guò)程一般分為變性、復(fù)性、延伸三大步，這三大步需要的溫度依次是（）A.95℃、55℃、72℃B.72℃、55℃、92℃C.55℃、92℃、72℃D.80℃、55℃、72℃4、維生素對(duì)視力、骨骼生長(zhǎng)、免疫功能都有重要的調(diào)節(jié)作用。但是，人體不能合成維生素A，需要從食物中攝取。β-胡蘿卜素是維生素A的前體，在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)化為維生素A，科學(xué)家將兩個(gè)參與β-胡蘿卜素合成的酶基因psy和crI轉(zhuǎn)入秈稻中，使水稻的胚乳含有中富含β-胡蘿卜素，由此生產(chǎn)出“黃金大米”。以下說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.“黃金大米”的培育過(guò)程要利用植株組織培養(yǎng)技術(shù)B.食用“黃金大米”可以緩解維生素A缺乏癥的病情C.培育“黃金大米”過(guò)程中，轉(zhuǎn)入秈稻細(xì)胞中的目的基因有兩個(gè)D.Psy或crI基因序列中含有構(gòu)建重組質(zhì)粒所用限制酶的識(shí)別序列5、限制酶a和b的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖所示．下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.a酶與b酶切斷的化學(xué)鍵相同B.能被b酶識(shí)別并切割的序列也能被a切割C.在相同的DNA分子中a酶的識(shí)別位點(diǎn)一般明顯要比b酶多D.將大量a酶和b酶切割后的片段混合，重新連接后的DNA片段不一定全都能被a切割6、隨著生命科學(xué)的發(fā)展，生物工程技術(shù)已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和環(huán)境保護(hù)等多個(gè)領(lǐng)域，影響著我們的生產(chǎn)和生活。下列有關(guān)生物工程技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用，敘述正確的是（）A.利用發(fā)酵工程從微生物細(xì)胞中提取單細(xì)胞蛋白，生產(chǎn)微生物飼料B.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育脫毒苗，獲得具有抗病毒的新品種C.利用胚胎移植能充分發(fā)揮雄性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力，發(fā)展畜牧業(yè)D.利用蛋白質(zhì)工程能生產(chǎn)出自然界不存在的蛋白質(zhì)，滿足實(shí)際需求評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)7、利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑的流程如圖所示；下列敘述正確的是（）

A.過(guò)程①需使用逆轉(zhuǎn)錄酶B.過(guò)程②需使用解旋酶和PCR獲取目的基因C.過(guò)程③使用的感受態(tài)細(xì)胞可用NaCl溶液制備D.過(guò)程④可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞8、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)基一般為固體培養(yǎng)基B.培養(yǎng)結(jié)果只能獲得大量細(xì)胞及生物制品，而不能獲得生物體C.需要氧氣來(lái)滿足細(xì)胞代謝的需要，不需要二氧化碳D.通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)可以檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某物質(zhì)的毒性9、我國(guó)研究人員創(chuàng)造出一種新型干細(xì)胞——異種雜合二倍體胚胎干細(xì)胞；具體研究過(guò)程如下圖所示，下列敘述正確的是（）

A.單倍體囊胚1最可能是由卵子發(fā)育預(yù)帶的，單倍體ES應(yīng)取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)B.培養(yǎng)液中除了需要加入血清等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還需要加入抗生素等消滅病毒C.體外培養(yǎng)條件下ES細(xì)胞可以增殖而不發(fā)生分化D.ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為體積大、細(xì)胞核小、核仁明顯10、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因；其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似（如圖所示）。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。下列敘述正確的是（）

A.用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)不必知道基因的全部序列B.設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間形成堿基互補(bǔ)配對(duì)而造成引物自連C.退火溫度過(guò)高可能導(dǎo)致PCR得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物D.每一循環(huán)都消耗引物和原料，需要在操作中及時(shí)補(bǔ)充11、研究人員從土壤中篩選得到酵母菌纖維素酶高產(chǎn)菌株；并對(duì)其降解纖維素的條件進(jìn)行了研究。據(jù)圖分析正確的是（）

A.篩選該高產(chǎn)菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)B.探究最適溫度時(shí)應(yīng)盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右C.該酵母菌高產(chǎn)菌株產(chǎn)生纖維素酶的最適溫度是35℃D.利用該高產(chǎn)菌株降解纖維素時(shí)需嚴(yán)格保持厭氧環(huán)境12、將單克隆抗體與前體藥物的專一性活化酶藕聯(lián)（簡(jiǎn)稱抗體導(dǎo)向酶偶聯(lián)）是特異性治療腫瘤并減少對(duì)正常細(xì)胞傷害的最新研究方向。堿性磷酸酶是抗腫瘤藥物多柔比星前體的專一性活化酶，醫(yī)學(xué)研究中利用抗體導(dǎo)向酶偶聯(lián)機(jī)理將堿性磷酸酶與單克隆抗體制成“生物導(dǎo)彈”，通過(guò)活化多柔比星使其對(duì)DNA造成損傷，進(jìn)而抑制以DNA為模板進(jìn)行的生理活動(dòng)，達(dá)到治療腫瘤的目的。下列說(shuō)法正確的是（）A.為獲得單克隆抗體應(yīng)首先給小白鼠注射腫瘤細(xì)胞表面抗原，得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞B.制備單克隆抗體的過(guò)程中至少要經(jīng)過(guò)兩次原理和目的均不同的篩選過(guò)程C.生物導(dǎo)彈綜合利用了堿性磷酸酶的定向制導(dǎo)作用和單克隆抗體的特異性殺傷能力D.多柔比星只作用于有增殖能力的細(xì)胞13、下列關(guān)于基因工程中幾種工具的敘述，正確的是（）A.限制酶可水解DNA上相鄰核苷酸間的磷酸二酯鍵B.DNA連接酶可將末端堿基互補(bǔ)的兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)C.DNA聚合酶能夠從核苷酸片段末端延伸DNA或RNAD.作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對(duì)重組DNA進(jìn)行鑒定和選擇的標(biāo)記基因14、白地霉侵染是導(dǎo)致柑橘酸腐病的主要原因，實(shí)驗(yàn)證明桔梅奇酵母通過(guò)分泌普切明酸對(duì)白地霉具有生物防治能力。已知鐵是真菌生長(zhǎng)的必需元素，是胞內(nèi)重要酶活性中心的組成部分。普切明酸是桔梅奇酵母產(chǎn)生的一種水溶性鐵螯合劑，能快速在培養(yǎng)基中擴(kuò)散并與其中的Fe3+形成穩(wěn)定紅色復(fù)合物。研究配制的含有不同濃度FeCl3的培養(yǎng)基如下表所示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為隨FeCl3濃度增大，抑菌圈紅色加深但變窄，如下圖所示。相關(guān)敘述正確的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水瓊脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素，瓊脂不是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.白地霉采用了平板劃線法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.結(jié)果表明，F(xiàn)eCl3濃度增大，普切明酸與Fe3+結(jié)合的數(shù)量減少D.結(jié)果表明，F(xiàn)eCl3能降低桔梅奇酵母對(duì)白地霉的防治效果15、某實(shí)驗(yàn)小組利用下圖所示質(zhì)粒和目的基因來(lái)構(gòu)建基因表達(dá)載體，將目的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞并表達(dá)。下列敘述正確的是（）

A.圖中的質(zhì)粒用酶A切割后，會(huì)產(chǎn)生4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B.在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用酶A和酶C切割質(zhì)粒和目的基因C.成功導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)D.若用酶B和酶C切割，可以避免質(zhì)粒的自身環(huán)化評(píng)卷人得分三、填空題(共6題，共12分)16、在篩選纖維素分解菌的過(guò)程中，人們發(fā)明了___________，這種方法能夠通過(guò)顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選。剛果紅(CongoRed，簡(jiǎn)稱__________)是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成____________，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅一纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的______________。這樣，我們就可以通過(guò)是否產(chǎn)生________________來(lái)篩選纖維素分解菌。17、本課題對(duì)能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對(duì)分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定，還需要借助生物化學(xué)的方法。在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會(huì)使培養(yǎng)基的________________，pH______________。因此，我們可以通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基______________來(lái)判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。18、載體具備的條件：①_____。②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。③______。19、概念：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的______，將它分散成______，然后放在適宜的______中，讓這些細(xì)胞______。20、請(qǐng)回答有關(guān)植物細(xì)胞工程的問(wèn)題：

（1）在植物中，一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)________的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其__________而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到__________的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。21、首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了______，方法是采用______。評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共6分)22、研究表明生物制劑W對(duì)不同種類動(dòng)物細(xì)胞的分裂均有促進(jìn)作用。有同學(xué)設(shè)計(jì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證這個(gè)觀點(diǎn)。請(qǐng)根據(jù)以下提供的實(shí)驗(yàn)材料；完善該實(shí)驗(yàn)步驟，并預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)材料：培養(yǎng)液；正常肝組織、肝癌組織、W、胰蛋白酶。

（要求與說(shuō)明：答題時(shí)不考慮加入W后的體積變化等誤差。提供的細(xì)胞均具有分裂能力；只進(jìn)行原代培養(yǎng)且培養(yǎng)條件適宜）

（1）實(shí)驗(yàn)步驟：

①用_________分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細(xì)胞。將兩種分散的細(xì)胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細(xì)胞懸液。培養(yǎng)液需要中加入__________等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和__________用以滅菌。

②在顯微鏡下用_____________直接計(jì)數(shù)兩種細(xì)胞懸液中細(xì)胞的數(shù)量；并進(jìn)行記錄。

③取滅菌后的培養(yǎng)瓶若干個(gè)均分為A、B兩組，A組加入正常肝細(xì)胞懸液；B組加入_________。從A、B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組，分別加入_________。放入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時(shí)間后，每組取部分樣品，加入_____________后搖勻；在顯微鏡下計(jì)數(shù)并記錄細(xì)胞數(shù)量。

⑤重復(fù)④若干次。

⑥統(tǒng)計(jì)并分析所得數(shù)據(jù)。

（2）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（用坐標(biāo)系和曲線示意圖表示）_____________23、β-苯乙醇是具有令人愉悅的玫瑰香味的高級(jí)芳香醇；廣泛用于食品和日化用品等生產(chǎn)領(lǐng)域?；瘜W(xué)合成β-苯乙醇會(huì)產(chǎn)生多種雜質(zhì)，而植物萃取則周期長(zhǎng)；成本高，因此采用微生物合成天然β-苯乙醇是工業(yè)化新趨勢(shì)。研究小組從玉米胚芽粕和玉米皮等淀粉加工下腳料及其肥料堆放的土壤中篩選可耐受高濃度β-苯乙醇的酵母菌株（YDF-1），實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖所示。回答下列問(wèn)題：

(1)該實(shí)驗(yàn)需制作多種培養(yǎng)基，這些培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、無(wú)機(jī)鹽、__________等物質(zhì)，培養(yǎng)基制作后需使用__________法進(jìn)行滅菌，滅菌后的培養(yǎng)基再添加相應(yīng)濃度的β-苯乙醇。由實(shí)驗(yàn)?zāi)康目芍?，初篩、復(fù)篩及再次復(fù)篩的培養(yǎng)基中，添加的β-苯乙醇的濃度應(yīng)__________（填“保持不變”或“逐漸增大”或“逐漸降低”），理由是__________。

(2)若取稀釋倍數(shù)為104的0．1mL稀釋液涂布到含2g/L的YEPD培養(yǎng)基后培養(yǎng)至菌落穩(wěn)定，計(jì)算得出每毫升菌懸液中含4．5×106個(gè)菌體，則在該稀釋倍數(shù)下平板上的平均菌落數(shù)是__________個(gè)。將初篩獲得的菌株進(jìn)行液體培養(yǎng)，其目的是________。

(3)若選用葡萄糖作為碳源，為確定YDF-1增殖的最佳濃度，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)較為簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行探究，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路是__________。24、番茄果實(shí)在成熟的過(guò)程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成顯著增加，以降解果膠使細(xì)胞壁破損，從而使果實(shí)變紅變軟，但不利于保鮮?？茖W(xué)家利用基因工程得到轉(zhuǎn)基因番茄，大大延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。操作流程如下，回答下列問(wèn)題：

（1）利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)制備PG基因，最好從番茄的_____細(xì)胞中提取mRNA，此技術(shù)所需要的酶主要有_____。

（2）據(jù)圖可知，轉(zhuǎn)基因番茄主要通過(guò)抑制PG基因的_____過(guò)程；使PG合成量減少，從而延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。

（3）圖中的農(nóng)桿菌。能夠在含_____的培養(yǎng)基中生存，而在含_____的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌。

（4）圖中將反向連接PC基因?qū)敕鸭?xì)胞的方法稱為_(kāi)____。要檢測(cè)感染農(nóng)桿菌后的番茄細(xì)胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用標(biāo)記的PG基因的單鏈作為探針進(jìn)行檢測(cè)，理由是_____。

（5）在將轉(zhuǎn)化的番茄細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過(guò)程中，培養(yǎng)基_____（填“要”或“不要”）添加有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，原因是_____。評(píng)卷人得分五、綜合題(共4題，共32分)25、某校同學(xué)在實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展生物技術(shù)實(shí)踐活動(dòng)．請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：

（1）A組同學(xué)制作泡菜。在泡菜腌制的過(guò)程中，最后要向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，這目的是____________。

（2）B組同學(xué)制作腐乳。在制作腐乳過(guò)程中，在腐乳表面往往會(huì)有一層致密的皮，這層皮實(shí)際上是微生物的________；對(duì)人體無(wú)害。

（3）C組同學(xué)在藍(lán)莓果汁中直接加入某品牌活性酵母，之后先向發(fā)酵罐中通入一段時(shí)間的無(wú)菌空氣，通入無(wú)菌空氣的目的是______________。

（4）如果將制作好的果酒用于果醋的制作，主要是利用醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為_(kāi)______，然后再轉(zhuǎn)化為_(kāi)_______。26、類胡蘿卜素具有抗癌；降血脂等多種生物學(xué)功能。P蛋白是催化類胡蘿卜素形成的關(guān)鍵酶；研究者從裙帶菜中克隆了P基因，按下圖所示流程進(jìn)行基因工程操作。

(1).研究者從裙帶菜中提取了總RNA，利用逆轉(zhuǎn)錄方法獲得_________（作為模板），設(shè)計(jì)特異性_________，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增得到P基因。將P基因與質(zhì)粒載體重組時(shí)，需要使用的酶包括_________________________。流程圖中①_______菌，②________________技術(shù)。

(2).隨機(jī)選取9株轉(zhuǎn)基因苗，利用PCR、電泳檢測(cè)的結(jié)果如圖2，分析結(jié)果說(shuō)明沒(méi)有成功轉(zhuǎn)入P基因的植株是_________。檢測(cè)P基因的mRNA相對(duì)含量，結(jié)果如圖3，研究者選擇轉(zhuǎn)基因煙草植株2進(jìn)行后續(xù)研究，請(qǐng)說(shuō)明理由________________________________________。

27、甘藍(lán)型油菜中；抑制PEP基因的表達(dá)可提高油菜籽的含油量。通過(guò)基因工程將PEP基因反向連接在啟動(dòng)子后，構(gòu)建轉(zhuǎn)反義PEP基因油菜是提高油菜籽含油量的常用技術(shù)路徑。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)為將PEP基因反向連接在啟動(dòng)子后，構(gòu)建反義PEP基因，需要將限制酶酶切位點(diǎn)設(shè)計(jì)在引物上，PEP基因的上游引物和下游引物中應(yīng)分別引入________酶切位點(diǎn)。

(2)用激光照射油菜愈傷組織時(shí)，可在細(xì)胞膜上打出一個(gè)穿孔，轉(zhuǎn)反義PEP基因表達(dá)載體由此小孔進(jìn)入油菜細(xì)胞，幾秒鐘后小孔封閉，該過(guò)程體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有____________。目的基因表達(dá)載體進(jìn)入細(xì)胞后；Ti質(zhì)粒上的T－DNA區(qū)段可轉(zhuǎn)移到油菜細(xì)胞的基因組中。

(3)篩選時(shí)，需在油菜愈傷組織培養(yǎng)基中加入__________進(jìn)行初步選擇。在激光照射下，存活的細(xì)胞一般會(huì)發(fā)出______________。為檢測(cè)反義PEP基因是否整合到染色體上，研究者通常檢測(cè)細(xì)胞中是否存在ntp基因，而不檢測(cè)PEP基因。不直接檢測(cè)PEP基因的原因是________________。28、如圖是某種動(dòng)物蛋白質(zhì)工程的示意圖；請(qǐng)分析回答：

（1）目前蛋白質(zhì)工程中難度最大的是圖中編號(hào)__________所示的過(guò)程，實(shí)現(xiàn)③過(guò)程的依據(jù)有___________________________________________________________________________________。

（2）若相關(guān)蛋白質(zhì)的核酸片段是從細(xì)胞質(zhì)獲取的，則④過(guò)程需要________酶。

（3）⑤過(guò)程中對(duì)核苷酸序列有嚴(yán)格要求的工具酶是________，進(jìn)行⑤過(guò)程的目的是___________________________________________________________________________________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、D【分析】【分析】

1.在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)；最好是先通入足夠的無(wú)菌空氣，在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖，再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2.醋酸菌是好氧型細(xì)菌；當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長(zhǎng)的最佳溫度是在30℃～35℃。

【詳解】

A；在果酒的制作過(guò)程中；應(yīng)先沖洗干凈，再去除葡葡的枝梗，以免雜菌污染，A錯(cuò)誤；

B；醋酸發(fā)酵階段需要通氣的原因是醋酸菌對(duì)氧氣的含量特別敏感；當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也會(huì)引起醋酸菌死亡，B錯(cuò)誤；

C；榨汁機(jī)要清洗干凈；并晾干；發(fā)酵瓶要清洗干凈，用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，C錯(cuò)誤；

D；酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵時(shí)需要無(wú)氧環(huán)境；因此裝入葡萄汁后，應(yīng)封閉發(fā)酵裝置的充氣口，D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】2、A【分析】【詳解】

乳酸菌是原核生物，細(xì)胞內(nèi)沒(méi)有核膜包圍的細(xì)胞核，A錯(cuò)誤；根據(jù)曲線圖中乳酸菌和酵母菌的數(shù)量變化曲線對(duì)比分析可知，發(fā)酵初期乳酸菌遠(yuǎn)多于酵母菌，所以乳酸菌成為了明顯的優(yōu)勢(shì)菌種，B正確；結(jié)合曲線圖分析，前6天，由于乳酸菌遠(yuǎn)多于酵母菌，其產(chǎn)生的乳酸會(huì)降低培養(yǎng)液的pH，所以C正確；由于整個(gè)發(fā)酵過(guò)程都是在無(wú)氧環(huán)境條件下進(jìn)行的，在發(fā)酵中期（22-26天），酵母菌明顯增多，酵母菌增多只能是通過(guò)無(wú)氧呼吸增殖，D正確。3、A【分析】【分析】

PCR技術(shù)：①概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；②原理：DNA復(fù)制；③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指數(shù)的方式擴(kuò)增，即約2n；⑤過(guò)程：高溫變性；低溫復(fù)性、中溫延伸。

【詳解】

標(biāo)準(zhǔn)的PCR過(guò)程一般分為變性；復(fù)性、延伸三大步；其中變性需要高溫使DNA解螺旋，故為95℃；而復(fù)性是在較低溫度下，兩種引物和DNA單鏈想結(jié)合，故溫度為55℃；延伸為在DNA聚合酶的作用下，合成新的DNA鏈，溫度為72℃。A正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】4、D【分析】【分析】

基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建；一個(gè)基因表達(dá)載體需要含有目的基因；啟動(dòng)子、終止子及標(biāo)記基因等，其中標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)；在構(gòu)建時(shí)，需要用相同的限制酶分別切割目的基因和載體，以獲得相同末端，然后用DNA連接酶將二者連接，為保證基因表達(dá)載體能有效發(fā)揮作用，在限制酶切割時(shí)不能破壞目的基因、標(biāo)記基因等必需結(jié)構(gòu)。

【詳解】

A；“黃金大米”的培育過(guò)程要利用植株組織培養(yǎng)技術(shù)將含有目的基因的秈稻細(xì)胞培育成完整植株；最終獲得胚乳中富含β-胡蘿卜素的大米，A正確；

B；“黃金大米”的胚乳含有中富含β-胡蘿卜素；β-胡蘿卜素可以緩解維生素A缺乏癥的病情，B正確；

C、培育“黃金大米”過(guò)程中，轉(zhuǎn)入秈稻細(xì)胞中的目的基因包括兩個(gè)參與β-胡蘿卜素合成的酶基因psy和crtⅠ；C正確；

D、Psy和crtⅠ基因?yàn)槟康幕?；其基因序列中若含有用到的限制酶的識(shí)別序列，則基因結(jié)構(gòu)會(huì)被破壞，因此這兩個(gè)基因內(nèi)均不能含有限制酶的識(shí)別位點(diǎn)，D錯(cuò)誤。

故選D。5、D【分析】【分析】

分析題圖：限制酶a和限制酶b的識(shí)別序列不同；但兩者切割產(chǎn)生的黏性末端相同，因此經(jīng)過(guò)兩種酶切后的黏性末端可在DNA連接酶的作用下連接形成重組DNA分子。

【詳解】

A、a酶與b酶切斷的化學(xué)鍵相同；都是磷酸二酯鍵，A正確；

B、據(jù)圖分析，酶a的識(shí)別序列是-GATC-，酶b識(shí)別序列是-GGATCC-，酶b的識(shí)別序列包含酶a的序列，故能被b酶識(shí)別并切割的序列也能被a切割；B正確；

C、a酶的識(shí)別序列比b酶短，識(shí)別序列越短，含有的識(shí)別位點(diǎn)就越多，因此在相同的DNA分子中b酶的識(shí)別位點(diǎn)明顯少于a酶；C正確；

D、將大量a酶和b酶切割后的片段混合，重新連接后的DNA片段全都能被a切割，但只有部分能被b酶切割；D錯(cuò)誤。

故選D。6、D【分析】【分析】

1；發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品有兩類：一類是代謝產(chǎn)物；另一類是菌體本身。

2；蛋白質(zhì)工程的過(guò)程：根據(jù)中心法則逆推以確定目的基因的堿基序列：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）；最終還是回到基因工程上來(lái)解決蛋白質(zhì)的合成。

【詳解】

A；單細(xì)胞蛋白是以淀粉或纖維素的水解液；制糖工業(yè)的廢液等為原料，通過(guò)發(fā)酵獲得的大量微生物菌體，并不是從微生物細(xì)胞中提取得到的，A錯(cuò)誤；

B；因?yàn)榉稚M織的病毒極少；甚至沒(méi)有病毒，所以將分生組織（如根尖、莖尖）進(jìn)行離體培養(yǎng)能獲得脫毒植株，但不能獲得抗病毒植株，B錯(cuò)誤;

C；胚胎移植技術(shù)的優(yōu)勢(shì)是可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力；C錯(cuò)誤；

D蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。因此，蛋白質(zhì)工程需通過(guò)基因修飾或基因合成來(lái)改造原有蛋白質(zhì)，生產(chǎn)出自然界中不存在的新型蛋白質(zhì)分子，D正確.

故選D。二、多選題(共9題，共18分)7、A:D【分析】【分析】

過(guò)程①是以mRNA為模板合成DNA的過(guò)程；即逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程；過(guò)程②表示利用PCR擴(kuò)增目的基因；過(guò)程③表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌；過(guò)程④培養(yǎng)并篩選轉(zhuǎn)基因大腸桿菌，級(jí)工程菌。

【詳解】

A；過(guò)程①是以mRNA為模板合成DNA的過(guò)程；即逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化，故A正確；

B；過(guò)程②表示利用PCR擴(kuò)增目的基因；在PCR過(guò)程中，不需要解旋酶，是通過(guò)控制溫度來(lái)達(dá)到解旋的目的，故B錯(cuò)；

C；利用氯化鈣處理大腸桿菌；使之成為感受態(tài)細(xì)胞，故C錯(cuò)；

D；檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的染色體DNA中；可以采用DNA分子雜交技術(shù)，故D正確。

故選AD。

【點(diǎn)睛】8、A:C【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境；②營(yíng)養(yǎng)；③溫度和pH；④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞一般用液體培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)；需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境、基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、適宜的溫度和pH、一定量的氧氣和二氧化碳等，A錯(cuò)誤；

B；由于動(dòng)物細(xì)胞分化程度高；雖然細(xì)胞核內(nèi)具有該物種的全套遺傳物質(zhì)，但單個(gè)細(xì)胞不能形成完整生物體，所以目前還不能通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲得生物體，B正確；

C；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中；需要氧氣滿足細(xì)胞代謝，需要二氧化碳維持培養(yǎng)液的pH，C錯(cuò)誤；

D；通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可以生產(chǎn)生物制品；可以培養(yǎng)皮膚移植的材料，還可以檢測(cè)有毒物質(zhì)等，D正確。

故選AC。9、A:C【分析】【分析】

分析題圖：小鼠的卵細(xì)胞體外培養(yǎng)到囊胚時(shí)期；取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞培養(yǎng)成孤雌單倍體ES細(xì)胞，取大鼠的精子體外培養(yǎng)到囊胚時(shí)期，取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞培養(yǎng)成孤雄單倍體ES細(xì)胞，兩種ES細(xì)胞融合成異種雜合二倍體胚胎干細(xì)胞，據(jù)此答題。

【詳解】

A；圖中的單倍體囊胚1最可能是由小鼠的卵子（卵細(xì)胞）發(fā)育而來(lái)；所采用的技術(shù)應(yīng)為早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)，圖中的單倍體ES應(yīng)取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，該部位的細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，A正確；

B；培養(yǎng)過(guò)程中使用的培養(yǎng)液除含有一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外；還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分以及血清等物質(zhì)，為避免雜菌污染，需要加入抗生素，B錯(cuò)誤；

CD；ES在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯；且在體外培養(yǎng)時(shí)可以維持只增殖不分化的狀態(tài)，C正確、D錯(cuò)誤。

故選AC。10、A:B:C【分析】【分析】

PCR技術(shù)：①概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，所利用的原理為DNA分子的復(fù)制，因此PCR技術(shù)一般用于基因擴(kuò)增；②原理：DNA復(fù)制；③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指數(shù)的方式擴(kuò)增，即約2n；⑤過(guò)程：高溫變性；低溫復(fù)性、中溫延伸。

【詳解】

A；用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)；只要知道目的基因前后的序列用以設(shè)計(jì)引物就可以了，因此不必知道基因的全部序列，A正確；

B；PCR過(guò)程中需要兩種引物分子；不同引物能靠堿基互補(bǔ)配對(duì)而形成（部分）雙鏈的話會(huì)造成引物不能同模板DNA結(jié)合，也就不能發(fā)生進(jìn)一步的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，這一點(diǎn)需要避免，B正確；

C；若退火溫度過(guò)高；則引物與模板DNA無(wú)法形成部分雙鏈，PCR也就不能發(fā)生，C正確；

D；PCR技術(shù)中的引物和原料是一次性添加的；不需要補(bǔ)充，D錯(cuò)誤。

故選ABC。

【點(diǎn)睛】11、A:B【分析】【分析】

分解纖維素微生物的分離實(shí)驗(yàn)原理：

（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)。

（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅；可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；篩選該高產(chǎn)菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；A正確；

B；由pH與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當(dāng)pH為9時(shí)，纖維素酶的活性最高，故在探究最適溫度時(shí)應(yīng)盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右，B正確；

C；由溫度與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當(dāng)溫度為35℃時(shí)纖維素酶的活性最大，但是由于缺少35℃之后的溫度實(shí)驗(yàn)組，故無(wú)法判斷該酵母菌高產(chǎn)菌株產(chǎn)生纖維素酶的最適溫度是35℃，C錯(cuò)誤；

D；酵母菌是兼性厭氧微生物；在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，故在降解初期需要給酵母菌提高有氧環(huán)境，以保證酵母菌的數(shù)量，D錯(cuò)誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】12、A:B【分析】【分析】

單克隆抗體的制備。

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞。①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合。②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；單克隆抗體制備過(guò)程中；需要給小白鼠注射腫瘤細(xì)胞表面抗原，刺激小鼠產(chǎn)生體液免疫，才能得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞，A正確；

B；制備單克隆抗體的過(guò)程中至少要經(jīng)過(guò)兩次原理和目的均不同的篩選過(guò)程；第一次篩選雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；

C；生物導(dǎo)彈綜合利用了單克隆抗體的定向制導(dǎo)作用和堿性磷酸酶的特異性殺傷能力；C錯(cuò)誤；

D；根據(jù)題干信息“通過(guò)活化多柔比星使其對(duì)DNA造成損傷；進(jìn)而抑制以DNA為模板進(jìn)行的生理活動(dòng)”，說(shuō)明多柔比星還可以抑制細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄過(guò)程，而不增殖的細(xì)胞也具有轉(zhuǎn)錄過(guò)程，D錯(cuò)誤。

故選AB。13、A:B:D【分析】【分析】

基因工程中的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒；噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。

【詳解】

A；限制酶可識(shí)別并在特定位置水解DNA上相鄰核苷酸間的磷酸二酯鍵；A正確；

B；DNA連接酶可以連接黏性末端相同；即末端堿基互補(bǔ)的兩個(gè)DNA片段之間的磷酸二酯鍵，B正確；

C；DNA聚合酶只能從核苷酸片段末端延伸DNA；而不能延伸RNA，C錯(cuò)誤；

D；標(biāo)記基因可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)；故作為載體的質(zhì)粒DNA分子上應(yīng)有對(duì)重組DNA進(jìn)行鑒定和選擇的標(biāo)記基因，D正確。

故選ABD。14、A:D【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。

2；微生物常見(jiàn)的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素；瓊脂是凝固劑的一種，并不是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在培養(yǎng)液中加入瓊脂可以使液體培養(yǎng)基成為瓊脂固體培養(yǎng)基，A正確；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接種都采用了涂布平板法；B錯(cuò)誤；

C、隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，普切明酸與Fe3+的結(jié)合增強(qiáng)；抑菌圈的紅色加深，C錯(cuò)誤；

D、普切明酸與Fe3+形成紅色復(fù)合物，但隨培養(yǎng)基中FeCl3濃度的增加，抑菌圈變窄，說(shuō)明FeCl3能降低桔梅奇酵母對(duì)白地霉的防治效果；D正確。

故選AD。15、A:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中質(zhì)粒和外源DNA都含有限制酶A；B、C的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)；若用酶A切割會(huì)同時(shí)破壞質(zhì)粒上的兩個(gè)抗性基因。

【詳解】

A；質(zhì)粒中含有2個(gè)酶A的酶切位點(diǎn)；所以切割后會(huì)產(chǎn)生4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，A正確；

B；如果用酶A和酶C同時(shí)切割質(zhì)粒；會(huì)破壞質(zhì)粒的標(biāo)記基因，B錯(cuò)誤；

C；根據(jù)B項(xiàng)分析；需要用酶B和酶C切割質(zhì)粒和目的基因，導(dǎo)致四環(huán)素抗性基因被破壞，所以不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，C錯(cuò)誤；

D；若用酶B和酶C切割；產(chǎn)生不同的黏性末端，可避免質(zhì)粒自身環(huán)化，D正確。

故選AD。三、填空題(共6題，共12分)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】剛果紅染色法CR紅色復(fù)合物透明圈透明圈17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強(qiáng)升高pH的變化酚紅指示劑紅18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】組織單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)和繁殖20、略

【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時(shí)的光照、pH和無(wú)菌環(huán)境等）；②一定的營(yíng)養(yǎng)（無(wú)機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)激素的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中；由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。

【點(diǎn)睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過(guò)程、原理及條件，掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確分析，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。【解析】①.激素②.特有的結(jié)構(gòu)和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因DNA分子雜交技術(shù)。四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共6分)22、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：

（1）無(wú)菌；無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液；以清除代謝廢物；

（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖；氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等；還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；

（3）適宜的溫度和pH；

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

2；實(shí)驗(yàn)操作步驟的安排一般如下：第一步：取材隨機(jī)均分為幾組；編號(hào)；第二步：不同組自變量的處理；第三步：把上述各組放在無(wú)關(guān)變量相同且適宜等條件下處理一段時(shí)間；第四步：觀察并記錄比較相應(yīng)的因變量。根據(jù)題意可知，本實(shí)驗(yàn)的目的是驗(yàn)證生物制劑W對(duì)動(dòng)物不同細(xì)胞的分裂具有促進(jìn)作用，則該實(shí)驗(yàn)的自變量是細(xì)胞的種類及是否加入生物制劑W，因變量是細(xì)胞懸液中細(xì)胞的數(shù)目，對(duì)細(xì)胞直接計(jì)數(shù)可以采用血球板計(jì)數(shù)法。

【詳解】

（1）①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細(xì)胞。將兩種分散的細(xì)胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細(xì)胞懸液。動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)液中需要加入葡萄糖；氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清；為了保證無(wú)菌的條件，一般在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素。

②在顯微鏡下可以采用血球計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)兩種細(xì)胞懸液中細(xì)胞的數(shù)量；并進(jìn)行記錄。

③本實(shí)驗(yàn)的目的是驗(yàn)證生物制劑W對(duì)動(dòng)物不同細(xì)胞的分裂具有促進(jìn)作用；根據(jù)題干所給實(shí)驗(yàn)材料可知，不同細(xì)胞是指正常肝細(xì)胞和癌細(xì)胞，因此該實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置四組，變量為細(xì)胞的種類及是否加入生物制劑W，具體如下：

A組：培養(yǎng)液中加入正常肝細(xì)胞懸液；B組：培養(yǎng)液中加入與之等量癌細(xì)胞懸液；從A；B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組；C、D兩組：培養(yǎng)液中加入等量的生物制劑W。放入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④該實(shí)驗(yàn)的因變量是計(jì)數(shù)細(xì)胞懸液中細(xì)胞的數(shù)量；因此各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時(shí)間后，每組取部分樣品，加入胰蛋白酶或膠原蛋白酶搖勻，將細(xì)胞分散成單個(gè)，然后在顯微鏡下計(jì)數(shù)。

（2）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果；若較長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)，因?yàn)檎＜?xì)胞的增殖次數(shù)有限，故A組中細(xì)胞數(shù)量最少，由于W促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用，因此C組細(xì)胞數(shù)量多于A組；而癌細(xì)胞可以無(wú)限增殖，且由于其細(xì)胞膜上的糖蛋白減少，易于擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移，同時(shí)失去接觸抑制，可大量培養(yǎng)增殖，故B；D兩組中細(xì)胞數(shù)量明顯更多，且由于W的促進(jìn)作用，D組多于B組；由于此實(shí)驗(yàn)是驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，所以實(shí)驗(yàn)結(jié)果是加入生物制劑W的實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組細(xì)胞數(shù)多，同時(shí)癌細(xì)胞分裂能力比正常細(xì)胞高，故繪制坐標(biāo)曲線具體如下:

【點(diǎn)睛】

本題考查驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，要求學(xué)生明確實(shí)驗(yàn)的目的，正確區(qū)分實(shí)驗(yàn)的變量，能夠根據(jù)題意判斷自變量和因變量，然后根據(jù)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的單一變量和等量原則，同時(shí)結(jié)合題干所給的實(shí)驗(yàn)材料完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，并能預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和繪制相關(guān)曲線圖表示實(shí)驗(yàn)的結(jié)果?！窘馕觥恳鹊鞍酌福z原蛋白酶）葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清抗生素血球計(jì)數(shù)板等量肝癌細(xì)胞懸液等量生物制劑W胰蛋白酶（膠原蛋白酶）23、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基是指供給微生物；植物或動(dòng)物（或組織）生長(zhǎng)繁殖的；由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多，根據(jù)配制原料的來(lái)源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基；根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基；根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等；根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基等。

【詳解】

（1）培養(yǎng)基一般都含有水；無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源等物質(zhì)；以滿足生物生長(zhǎng)的需求；培養(yǎng)基制作后需使用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌；由于本實(shí)驗(yàn)的目的是獲得可耐受高濃度β-苯乙醇的酵母菌株，因此實(shí)驗(yàn)初篩、復(fù)篩和再次復(fù)篩時(shí)培養(yǎng)基中添加的β-苯乙醇濃度要逐漸升高。

（2）根據(jù)計(jì)算公式：（平均菌落數(shù)）÷涂布體積×稀釋倍數(shù)=每毫升菌液中的菌體數(shù)，可知：（平均菌落數(shù)）÷0．1mL×104=4．5×106個(gè)；所以平板上的平均菌落數(shù)是45個(gè)；液體培養(yǎng)是指將微生物直接接種于液體培養(yǎng)基中，并不斷振蕩或攪拌，可以迅速得到大量繁殖體。

（3）由實(shí)驗(yàn)?zāi)康目芍搶?shí)驗(yàn)的自變量是葡萄糖溶液的濃度，因變量是YDF-1的增殖情況，可通過(guò)顯微鏡直接計(jì)數(shù)這一簡(jiǎn)便的方法來(lái)確定其增殖情況，因此實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路是設(shè)置一系列濃度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分別接種等量的YDF-1，每天定時(shí)用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板統(tǒng)計(jì)溶液中的菌體數(shù)量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即為YDF-1增殖的最佳濃度?！窘馕觥?1)碳源；氮源高壓蒸汽滅菌逐漸增大只有將培養(yǎng)基中β-苯乙醇的濃度逐漸增大；才能篩選得到可耐受高濃度β-苯乙醇的酵母菌株。

(2)45增加目的菌株濃度。

(3)設(shè)置一系列濃度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分別接種等量的YDF-1，每天定時(shí)用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板統(tǒng)計(jì)溶液中的菌體數(shù)量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即為YDF-1增殖的最佳濃度24、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA??分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)制備PG基因；由于多聚半乳糖醛酸酶（PG）可降解果膠使細(xì)胞壁破損，從而使果實(shí)變紅變軟，說(shuō)明PG基因在果肉中表達(dá)量較高，所以最好從番茄的果肉細(xì)胞中提取mRNA，此技術(shù)所需要的酶主要有逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）；

（2）據(jù)圖可知；轉(zhuǎn)基因番茄PG基因與反向連接PG基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA1和mRNA2相結(jié)合形成雙鏈，從而抑制PG基因的翻譯過(guò)程，使PG合成量減少，從而延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期；

（3）分析表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程圖可知；目的基因插入到圖中農(nóng)桿菌的四環(huán)素抗性基因上，導(dǎo)致農(nóng)桿菌失去了四環(huán)素的抗性，所以圖中農(nóng)桿菌能夠在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生存，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌；

（4）圖中是利用農(nóng)桿菌將反向連接PC基因?qū)敕鸭?xì)胞的；此方法稱為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。不能用標(biāo)記的PG基因的單鏈作為探針進(jìn)行檢測(cè)番茄細(xì)胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，理由是番茄細(xì)胞內(nèi)原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會(huì)與該探針形成雜交帶；

（5）將轉(zhuǎn)化的番茄細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過(guò)程中；需要在培養(yǎng)基中添加有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，原因是該培養(yǎng)過(guò)程中植物細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用（或光合作用很弱）。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟；識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過(guò)程及應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題?！窘馕觥抗饽孓D(zhuǎn)錄酶和Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）翻譯卡那霉素四環(huán)素農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法不能番茄細(xì)胞內(nèi)原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會(huì)與該探針形成雜交帶要該培養(yǎng)過(guò)程中植物細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用（或光合作用很弱）五、綜合題(共4題，共32分)25、略

【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理：

（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：

（2）在無(wú)氧條件下，反應(yīng)式如下：

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型．果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸．當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型．腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基。

4；泡菜制作的原理是乳酸發(fā)酵；乳酸菌是嚴(yán)格厭氧菌，因此發(fā)酵過(guò)程中要保證無(wú)氧環(huán)境；泡菜制作過(guò)程中，腌制的時(shí)間、溫度、鹽的用量等都會(huì)影響泡菜的品質(zhì)。

【詳解】

（1）泡菜制作過(guò)程中；向壇蓋邊沿的水槽中注水的目的保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無(wú)氧環(huán)境。

（2）在制作腐乳過(guò)程中；毛霉的菌絲在豆腐塊的表面形成一層皮，使腐乳成型，所以腐乳表面的皮是毛霉的菌絲。

（3）酵母菌是兼性厭氧型微生物；利用酵母菌釀酒時(shí)，先通入氧氣的目的是：在有氧條件下使酵母菌迅速繁殖，數(shù)量增加，快速形成優(yōu)勢(shì)種群。

（4）利用果酒制作過(guò)程；原理是在缺少糖源時(shí)醋酸菌可以將乙醇變?yōu)橐胰缓髮⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋的制作、泡菜的制作、腐乳的制作等知識(shí)，對(duì)于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累．【解析】保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無(wú)氧環(huán)境菌絲在有氧條件下使酵母菌迅速繁殖，數(shù)量增加，快速形成優(yōu)勢(shì)種群乙醛醋酸26、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基