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文檔簡介
1出口果蔬中毒死蜱免疫層析電化學檢測技術本標準規(guī)定了蔬菜、水果中毒死蜱農藥的免疫層析電化學檢測技術的原理、試劑與材料、儀器與設備、試樣制備、測定、結果計算與表述、重復性和檢測限與特異性。本標準適用于蘋果、菠蘿、菠菜、馬鈴薯等果蔬中毒死蜱農藥的在線篩查和快速監(jiān)測。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和實驗方法NY/T789-2004農藥殘留分析樣本的采樣方法3原理利用免疫測定中競爭法檢測原理,通過在檢測區(qū)包被一定量的包被抗原,質控區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體,待辣根過氧化物酶標記的抗體與樣品及檢測區(qū)的物質之間競爭反應后,將檢測區(qū)與質控區(qū)切下,置于鄰苯二胺反應池中,反應液進行電化學檢測。4試劑與材料除另有規(guī)定外,所有試劑均為分析純;實驗室用水符合GB/T6682中規(guī)定的二級水。4.1辣根過氧化物酶4.2鄰苯二胺5儀器與設備實驗室常規(guī)儀器、設備、材料及下列各項。5.1免疫層析試劑:陽性參考品、陰性參考品、甲醇、樣品處理液、檢測液和檢測試紙條,檢測試紙條使用鋁箔袋密封包裝。5.2天平:百分之一電子天平5.3濾紙:雙圈定性濾紙5.4電化學工作站25.5一次性平面印刷碳電極,以Ag/AgCl為參比電極。6試樣制備稱取1.0g±0.1g大米樣品,粉碎后,加入1.0mL甲醇,靜置15min。加入5.0mL樣品處理液,充分混勻后,用濾紙過濾,用樣品處理液沖洗濾紙中的樣品,濾液和沖洗液全部轉移至10mL容量瓶,用樣品處理液定容制成提取液,最后用檢測液將提取液稀釋8倍成待測液。7測定取出檢測試紙條。將試紙條浸入待測液中,待測液在層析作用下向檢測試紙條的尾端側向流動,8min后待競爭反應完成,將質控區(qū)和檢測區(qū)切下,置于鄰苯二胺反應池中,5min后進行電化學檢測。同時對試劑盒內的陽性參考品、陰性參考品和檢測液(空白)進行同樣操作,以協(xié)助結果判斷。8結果計算與表述試樣中毒死蜱含量以質量分數X計,單位為微克每千克(μg/kg),按式(1)計算:式中:Pi:檢測溶液中毒死蜱組分的電化學信號值;Vi:試樣制備中待測液體積,單位為毫升(mL);Ci:毒死蜱陽性標準品溶液濃度,單位為納克每毫升(ng/mLVs:標準溶液的檢測體積(mL);Ps:毒死蜱標準溶液電化學信號值(系列濃度M:試樣質量,單位為克(g)。測定結果用平行測定的算術平均值表示,計算結果表示到小數點后一位。9重復性在重復實驗條件下,獲得的兩次獨立測試結果的絕對差值不大于其算術平均值的15%。10檢測限與特異性毒死蜱的檢
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