2025年滬教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年滬教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷630考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、如圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖．以下相關(guān)敘述；正確的是（）

A.⑤只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異B.③侵染植物細胞后，重組Ti質(zhì)粒整合到④的染色體上C.④的染色體上若含抗蟲基因，則⑤就表現(xiàn)出抗蟲性狀D.②的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶兩種酶參與2、如圖為蛋白質(zhì)工程操作的基本思路；下列敘述不正確的是（）

A.代表蛋白質(zhì)工程操作思路的過程是④⑤B.代表中心法則內(nèi)容的是①②C.①代表轉(zhuǎn)錄，②代表翻譯，④代表分子設(shè)計，⑤代表DNA合成D.蛋白質(zhì)工程的目的是對基因的結(jié)構(gòu)進行分子設(shè)計，通過基因合成或改造實現(xiàn)。3、下面關(guān)于植物細胞工程的敘述，正確的是（）A.葉肉細胞脫分化后可形成定形狀態(tài)的薄壁細胞B.葉肉細胞經(jīng)再分化過程可形成愈傷組織C.融合植物葉肉細胞時，應(yīng)先去掉細胞膜D.葉肉細胞離體培養(yǎng)時，可以表現(xiàn)出全能性4、某生物興趣小組的同學(xué)測定藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性，準備對小鼠的肝腫瘤細胞（甲）和正常肝細胞（乙）進行培養(yǎng)。下列說法正確的是A.利用胃蛋白酶處理兩種肝組織塊后可得到肝細胞懸液B.細胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是刺激細胞的呼吸C.甲、乙細胞在持續(xù)的原代培養(yǎng)過程中，乙會出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象D.該試驗中用到的培養(yǎng)液也能用來培養(yǎng)乙肝病毒5、下列實驗?zāi)康牟荒軐崿F(xiàn)的是（）A.利用雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)是否變性B.利用PCR技術(shù)快速檢測新冠病毒感染C.利用酵母菌和醋酸菌進行果醋發(fā)酵D.利用核移植和胚胎移植繁育良種家畜6、下列關(guān)于試管嬰兒和克隆猴的敘述，正確的是（）A.都有很高的成功率B.都需進行胚胎移植C.都屬于無性生殖D.體外受精和細胞核移植過程都發(fā)生了基因重組7、有研究人員體外誘導(dǎo)小鼠的皮膚細胞，獲得誘導(dǎo)多能干細胞(iPS細胞)，并將這種iP5細胞放置在特殊的孵化器中培養(yǎng)，得到了一種類似原腸胚的結(jié)構(gòu)?，F(xiàn)在，用iPS細胞治療阿爾茨海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究也取得了新進展。下列敘述錯誤的是（）A.可用小分子化合物誘導(dǎo)形成iPS細胞B.特殊的孵化器可能模擬了子宮的特殊環(huán)境C.正常原腸胚的外胚層將發(fā)育成胎盤和胎膜D.利用自身體細胞誘導(dǎo)的iPS細胞治療，可避免免疫排斥反應(yīng)評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)8、下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖；沒有與腫瘤細胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時間后被機體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥，可抑制DNA和RNA的合成，對正常細胞也有一定毒性。下列相關(guān)說法正確的是（）

A.單克隆抗體是由雜交瘤細胞合成和分泌的B.活化阿霉素能抑制細胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程C.在治療中，應(yīng)先注射非活化的磷酸酶，再注射生物導(dǎo)彈D.單克隆抗體特異性強，能減輕阿霉素對正常細胞的傷害9、格瓦斯是一種廣泛流傳于東歐的低度酒精飲料。制作過程：①將發(fā)酵面包制成的面包液、糖化液裝入發(fā)酵罐，加入保加利亞乳酸菌、酵母菌進行發(fā)酵；②發(fā)酵液經(jīng)過嚴格的過濾；③過濾液經(jīng)5～8s迅速升溫到127℃進行高溫殺菌，冷卻后即可飲用。酵母菌產(chǎn)生酒精的能力差異較大，其產(chǎn)酒精能力與其耐受酒精的能力有關(guān)。下列說法正確的是（）A.保加利亞乳酸菌和酵母菌都能同時進行有氧呼吸和無氧呼吸B.面包液、糖化液可為微生物的生長提供碳源、氮源以及水和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)C.若想得到產(chǎn)酒精能力比較強的酵母菌，可向培養(yǎng)基中添加較高濃度的酒精進行篩選D.過程③中瞬時高溫滅菌可使微生物蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)迅速破壞，從而達到滅菌效果10、為探究原生質(zhì)體制備的最佳溶壁酶反應(yīng)時間，研究人員在高滲溶液中進行了相關(guān)實驗，結(jié)果如下圖所示。下列敘述正確的有（）

A.與雜交育種相比，原生質(zhì)體融合育種能擴大親本的選擇范圍B.可用光學(xué)顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化，檢測原生質(zhì)體的形成情況C.每隔一段時間，可取反應(yīng)液直接滴加到血細胞計數(shù)板進行計數(shù)D.據(jù)圖中數(shù)據(jù)推測，在高滲溶液中有原生質(zhì)體的裂解11、黃粉蟲可以吞食；降解塑料；利用黃粉蟲腸道微生物對白色污染進行生物降解，是一種綠色環(huán)保的處理工藝。下圖是從黃粉蟲腸道中分離、純化目的微生物的過程，相關(guān)敘述正確的是（）

A.富集培養(yǎng)基中含有酵母膏、蛋白胨、瓊脂等，蛋白胨能提供所需的碳源、氮源和維生素B.分離、純化目的微生物的選擇培養(yǎng)基中需加入PVC塑料膜作為唯一碳源C.將轉(zhuǎn)接至固體斜面培養(yǎng)基上的不同菌落置于4℃的冰箱長期保存D.與傳統(tǒng)填埋、焚燒相比，黃粉蟲腸道微生物對白色污染的降解不會造成二次污染12、傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作需要各種各樣的微生物。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵B.制作腐乳利用了微生物產(chǎn)生的蛋白酶C.制作果酒利用了酵母菌在無氧條件下產(chǎn)生酒精D.制作果醋利用了醋酸菌在無氧條件下產(chǎn)生乙酸13、關(guān)于現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用的安全性，下列說法正確的是（）A.對待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅定，即堅決禁止生物武器B.對轉(zhuǎn)基因植物的外源DNA要認真選擇，避免產(chǎn)生對人體有害或過敏的蛋白質(zhì)C.我國不反對治療性克隆，允許有限制地進行克隆人實驗D.一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題，要馬上停止實驗，并銷毀重組生物14、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計品種乙組織培養(yǎng)實驗時，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進行預(yù)實驗。為確定品種乙的II階段的最適細胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計5個濃度水平的實驗，其中細胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導(dǎo)形成愈傷組織α1b1II誘導(dǎo)形成幼芽α2b2Ⅲ誘導(dǎo)生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達的是II和Ⅲ階段B.實驗中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細胞分裂素濃度的實驗中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素15、克隆動物常用的核移植方法主要有細胞質(zhì)內(nèi)注射法和透明帶下注射法兩種。前者是用微型注射針將供體細胞的細胞核吸出注入去核卵母細胞質(zhì)內(nèi)；后者是直接將供體細胞注入去核卵母細胞透明帶內(nèi)，然后促使兩個細胞融合。世界首例體細胞克隆北極狼的供體細胞來自哈爾濱極地公園的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細胞來自一只處于發(fā)情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬。下列敘述錯誤的是（）A.克隆北極狼的性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬和比格犬的基因共同決定B.相比之下，透明帶下注射法對供體細胞核和卵母細胞的損傷更小C.供體細胞注入卵母細胞透明帶內(nèi)后，就可自行進入卵母細胞D.細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程中發(fā)生了基因重組評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)16、生化武器散布途徑：將病原體_____或者通過_____、_____等散布到敵方，會對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果。17、本課題對分解纖維素的微生物進行了初步的篩選。但是，這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，纖維素酶的發(fā)酵方法有___________和___________發(fā)酵兩種。纖維素酶的測定方法，一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的__________進行________的測定。18、獲取目的基因的方法______、______、______19、利用DNA和蛋白質(zhì)等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。20、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復(fù)后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應(yīng)的__________細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。21、蛋白質(zhì)工程在生物制藥上有廣泛的應(yīng)用。如果已經(jīng)確認某種新蛋白質(zhì)可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經(jīng)確認，如何通過蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請教或通過互聯(lián)網(wǎng)查找答案。_____22、有時還需進行______的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)______。評卷人得分四、實驗題(共2題，共14分)23、科研人員以病毒表面S蛋白作為主要的病毒抗原；利用基因工程研制疫苗用于接種預(yù)防，簡要過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

(1)新冠病毒是一種RNA病毒，一般先通過_____________________得到cDNA，再經(jīng)PCR技術(shù)獲取大量S蛋白基因，PCR的中文全稱是_____________________。

(2)PCR技術(shù)還需用到_____________________酶，該酶能夠使脫氧核苷酸從引物的_____________________端開始連接，據(jù)下圖分析，可選擇的引物是_____________________。

(3)為了驗證表達的S蛋白與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性；請設(shè)計簡單的檢測方案并預(yù)期檢測結(jié)果。

方案:_________________________________。

結(jié)果:_________________________________。24、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病?？蒲腥藛T對此病的治療進行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進行了相關(guān)研究，實驗結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實驗組將___________基因?qū)胧荏w細胞，并采用___________技術(shù)檢測導(dǎo)入基因的表達情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進行治療，檢測肝臟細胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實驗結(jié)果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。評卷人得分五、綜合題(共3題，共12分)25、人血清白蛋白（HSA）是血漿中含量最豐富的蛋白質(zhì)，具有重要的醫(yī)用價值。下圖是通過基因工程技術(shù)獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑?；卮鹣铝袉栴}：

（1）為獲取HSA基因，首先提取人血細胞中的mRNA，利用_______________法合成總cDNA。再利用_______________技術(shù)擴增HSA基因，該技術(shù)所用到的關(guān)鍵酶是_______________，擴增得到的HSA基因_______________（填“含有”或“不含有”）啟動子。

（2）HSA基因?qū)胧荏w細胞前，需要實施基因工程的核心步驟：_______________。

（3）途徑Ⅱ選用大腸桿菌作為受體細胞具有繁殖快、遺傳物質(zhì)少等優(yōu)點。但相比于途徑1，利用大腸桿菌獲得的rHSA存在無活性的缺點，試從細胞結(jié)構(gòu)的角度進行分析_______________。26、基因工程是新品種花卉培育中的一種重要技術(shù)手段。研究發(fā)現(xiàn)普通矮牽牛花因缺乏藍色色素合成所需的轉(zhuǎn)座酶而不能開藍色花，因此研究人員嘗試將從薔薇花瓣細胞中分離提取的轉(zhuǎn)座酶F35H基因轉(zhuǎn)入普通的矮牽牛中，以期獲得藍色矮牽牛新品種，該過程所用的質(zhì)粒與含轉(zhuǎn)座酶F35H基因的DNA片段上相關(guān)限制酶的酶切位點分別如圖1、圖2所示。限制性內(nèi)切核酸酶BamHI、Sau3AI、HindIII識別的堿基序列和酶切位點分別為

請回答下列問題：

(1)圖1質(zhì)粒中沒有顯示的結(jié)構(gòu)是______，啟動子的功能是______________。

(2)基因工程中除質(zhì)粒外，______也可以作為運載體。若用圖中質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座酶F35H基因構(gòu)建基因表達載體時，最好選用______兩種限制酶來切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，理由是________。

(3)將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入土壤農(nóng)桿菌，最終成功導(dǎo)入藍色素基因的農(nóng)桿菌，在含氨芐青霉素培養(yǎng)基、含四環(huán)素培養(yǎng)基、同時含氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上的生存狀況應(yīng)該是_______________。

(4)檢測轉(zhuǎn)座酶F35H基因是否成功在普通矮牽牛細胞中轉(zhuǎn)錄，常采用的檢測技術(shù)是______。

(5)通過基因工程，將轉(zhuǎn)座酶F35H基因?qū)肫胀ò珷颗Ｖ?，獲得藍色矮牽牛花新品種的育種原理是__________________。相比傳統(tǒng)的花卉育種方法，利用基因工程育種的優(yōu)點是_________（答出2點即可）。27、果膠甲酯酶具有催化水解果膠的作用；為獲得高產(chǎn)；高純度的胞外果膠甲酯酶，下圖表示某科研小組設(shè)計的黑曲霉工程菌的構(gòu)建和發(fā)酵流程圖。

回答下列問題：

(1)科研小組從基因數(shù)據(jù)庫中獲得果膠甲酯酶基因序列后，需要根據(jù)果膠甲酯酶基因設(shè)計_______________，以擴增出大量果膠甲酯酶基因片段。利用農(nóng)桿菌進行轉(zhuǎn)化，在構(gòu)建重組基因表達載體時，應(yīng)將果膠甲酯酶基因插入Ti質(zhì)粒上的______________之間，確保侵染黑曲霉菌后能成功表達。為提高構(gòu)建重組表達載體的成功率，在構(gòu)建重組表達載體過程中加入緩沖液，其目的是______________。

(2)獲得轉(zhuǎn)基因的黑曲霉后，可以通過______________獲得純培養(yǎng)物，該過程需要______________作為對照。為判斷高產(chǎn)果膠甲酯酶黑曲霉工程菌是否構(gòu)建成功，可對單位量的轉(zhuǎn)基因黑曲霉進行發(fā)酵產(chǎn)酶實驗，即通過檢測并比較轉(zhuǎn)基因黑曲霉_______________。因黑曲霉自身某種蛋白質(zhì)的物理和化學(xué)性質(zhì)與果膠甲酯酶相似，造成提取產(chǎn)物純度不高，可通過_______________；避免該蛋白產(chǎn)生，實現(xiàn)獲得高純度的果膠甲酯酶。

(3)獲得的黑曲霉工程菌需先進行活化和______________培養(yǎng)后才能接種到發(fā)酵罐中進行大型發(fā)酵，以縮短發(fā)酵時間。發(fā)酵過程需保持______________（至少寫兩點）；適宜pH、充足的氧氣等條件；保證發(fā)酵過程不受雜菌污染和菌體能正常生長。

(4)發(fā)酵結(jié)束后將發(fā)酵液進行離心處理，取______________進行果膠甲酯酶的分離和純化工作。在分離過程中使用一定濃度的硫酸銨處理發(fā)酵液后獲得有活性的果膠甲酯酶沉淀物，原因是在一定濃度的硫酸銨條件下______________。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、A【分析】【分析】

基因工程的工具酶包括限制酶和DNA連接酶。農(nóng)桿菌特點：易感染雙子葉植物和裸子植物；對大部分單子葉植物沒有感染力；Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上。目的基因?qū)胧荏w細胞后需要進行檢測和鑒定，才能確定其是否導(dǎo)入或成功表達。

【詳解】

A；⑤只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明抗蟲基因表達了；即發(fā)生了可遺傳變異，A正確；

B；③侵染植物細胞后；重組Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到植物細胞的染色體上，B錯誤；

C；若受體細胞的染色體上含抗蟲基因；并不代表該基因就一定成功表達，因此不能確定⑤是否表現(xiàn)出抗蟲性狀，C錯誤；

D；重組質(zhì)粒的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶參與；D錯誤。

故選A。2、D【分析】【分析】

1.蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求．（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）

2.蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來設(shè)計蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)；又稱為第二代的基因工程。

【詳解】

A；④過程是根據(jù)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測相應(yīng)的氨基酸序列；進而通過⑤過程推測應(yīng)有的基因序列，進而合成相關(guān)的基因，即代表蛋白質(zhì)工程操作思路的過程是④⑤，A正確；

B；圖中①代表轉(zhuǎn)錄；②代表翻譯，顯然，屬于中心法則內(nèi)容的是①②，B正確；

C；根據(jù)蛋白質(zhì)的設(shè)計思路可知；圖中①代表轉(zhuǎn)錄，②代表翻譯，④代表分子設(shè)計，⑤代表DNA合成，C正確；

D；蛋白質(zhì)工程的目的是對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進行分子設(shè)計；通過基因合成或修飾實現(xiàn)，D錯誤。

故選D。

【點睛】3、D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞具有全能性；其過程為：離體的植物組織，器官或細胞經(jīng)過脫分化過程形成愈傷組織（高度液泡化，無定形狀態(tài)薄壁細胞組成的排列疏松；無規(guī)則的組織），愈傷組織經(jīng)過再分化過程形成胚狀體，進一步發(fā)育成為植株。

【詳解】

A；葉肉細胞脫分化后可形成無定形狀態(tài)的薄壁細胞愈傷組織；A錯誤；

B；葉肉細胞經(jīng)脫分化過程可形成愈傷組織；B錯誤；

C；融合植物葉肉細胞時；應(yīng)先去掉細胞壁，C錯誤；

D；葉肉細胞wanzhe以形成一個完整的植株；表現(xiàn)出全能性，D正確。

故選D。4、C【分析】【分析】

1；動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2；細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上；稱為細胞貼壁．細胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。

【詳解】

A、處理肝組織塊獲得到肝細胞懸液用胰蛋白酶，A錯誤；

B、細胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2，CO2用于維持培養(yǎng)液的pH值，B錯誤；

C、正常細胞不具有無限增殖能力，培養(yǎng)一段時間后會停止分裂，C正確；

D；病毒只能寄生在活細胞中；不能用培養(yǎng)液直接培養(yǎng)，D錯誤。

故選C。5、A6、B【分析】【分析】

試管嬰兒是精子和卵細胞進行體外受精；然后通過胚胎早期培養(yǎng)；胚胎移植技術(shù)獲得，屬于有性生殖的范疇；而克隆猴是利用細胞核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)獲得的，屬于無性生殖的范疇，并且體現(xiàn)了細胞核的全能性。

【詳解】

A；試管嬰兒和克隆猴的成功率都比較低；A錯誤；

B；試管嬰兒和克隆猴的獲得都需要利用胚胎移植技術(shù)；B正確；

C；試管嬰兒是精子和卵子進行體外受精；然后通過早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等獲得的，屬于有性生殖的范疇，C錯誤；

D；體外受精和細胞核移植都沒有涉及基因重組；D錯誤。

故選B。7、C【分析】【詳解】

A；科學(xué)家已嘗試采用多種方法來制備iPS細胞；包括借助載體將特定基因?qū)爰毎?，直接將特定蛋白質(zhì)導(dǎo)入細胞中或者用小分子化合物等來誘導(dǎo)形成iPS細胞，A爭??；

B；根據(jù)題干“將這種iP5細胞放置在特殊的孵化器中培養(yǎng)；得到了一種類似原腸胚的結(jié)構(gòu)”，推測特殊的孵化器可能模擬了子宮的特殊環(huán)境，B正確；

C；原腸胚外胚層發(fā)育成神經(jīng)系統(tǒng)、感覺器官、表皮及其附屬結(jié)構(gòu)；囊胚滋養(yǎng)層細胞；將發(fā)育成胎膜和胎盤，C錯誤；

D；iPS細胞可以來源于病人自身的體細胞；將它移植回人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選C。二、多選題(共8題，共16分)8、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備。

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細胞。

（2）獲得雜交瘤細胞：

①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；

②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；

（4）將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；

（5）提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；單克隆抗體是由雜交瘤細胞合成和分泌的；A正確；

B；根據(jù)題意可知；“阿霉素可抑制DNA和RNA的合成”，因此活化阿霉素能抑制細胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程，B正確；

C；在治療中；應(yīng)將非活化磷酸阿霉素和生物導(dǎo)彈同時注射，C錯誤；

D；單克隆抗體特異性強；能減輕阿霉素對正常細胞的傷害，D正確。

故選ABD。9、B:C:D【分析】1；酵母菌的新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型；在利用酵母菌發(fā)酵時最好是先通入足夠的無菌空氣在有氧環(huán)境下一段時間使其繁殖，再隔絕氧氣進行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；乳酸菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型；在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑵咸烟欠纸鉃槿樗帷?/p>

【詳解】

A；乳酸菌為嚴格厭氧菌；只能進行無氧呼吸，A錯誤；

B；面包液、糖化液主要成分為糖類；也含有其他物質(zhì)，可為微生物的生長提供碳源、氮源、水和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，B正確；

C；酵母菌產(chǎn)酒精能力與其耐受酒精的能力有關(guān)；利用選擇培養(yǎng)基，向培養(yǎng)基中添加較高濃度的酒精篩選出產(chǎn)酒精能力比較強的酵母菌，C正確；

D；過程③中瞬時高溫會破壞微生物的蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)；進而將微生物殺死達到滅菌效果，D正確。

故選BCD。10、A:B:D【分析】【分析】

植物體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術(shù)形成雜種細胞；能克服遠緣雜交不親和的障礙。

【詳解】

A；與傳統(tǒng)的雜交育種相比；植物體細胞的雜交能克服遠緣雜交不親和的障礙，因此，與雜交育種相比，原生質(zhì)體融合育種能擴大親本的選擇范圍，A正確；

B；原生質(zhì)體為顯微結(jié)構(gòu)；可用光學(xué)顯微鏡來檢測原生質(zhì)體的形成情況，B正確；

C；每隔一段時間；從試管中吸出反應(yīng)液進行計數(shù)前，需將試管輕輕振蕩數(shù)次，目的是使培養(yǎng)液中的原生質(zhì)體均勻分布，減少誤差，C錯誤；

D；據(jù)圖中數(shù)據(jù)推測；隨著溶壁酶反應(yīng)時間的延長，原生質(zhì)體濃度先升高后降低，可推測在高滲溶液中有原生質(zhì)體的裂解，導(dǎo)致原生質(zhì)體的濃度降低，D正確。

故選ABD。11、B:D【分析】【分析】

1；分離菌株的思路:

(1)自然界中目的菌株的篩選:

①依據(jù)：根據(jù)它對生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。

②實例：PCR技術(shù)過程中用到的耐高溫的TaqDNA聚合酶；就是從熱泉中篩選出來的Taq細菌中提取出來的。

(2)實驗室中目的菌株的篩選:

①原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)；溫度、pH等）；同時抑制或阻止其他微生物生長。

2；統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法：

(1)稀釋涂布平板法（間接）：

①當(dāng)樣品的稀釋庋足夠高時；培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。

②通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中大約含有的活菌數(shù)。

(2)利用顯微鏡直接計數(shù)。

【詳解】

A；富集培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基；不應(yīng)含有瓊脂，A錯誤；

B；分離、純化能降解PVC塑料膜的微生物的選擇培養(yǎng)基中需加入PVC塑料膜作為唯一碳源；B正確；

C；轉(zhuǎn)接至固體斜面培養(yǎng)基上的不同菌落置于4℃的冰箱臨時保存；對于需要長期保存的菌種，可用甘油管藏的方法，C錯誤；

D；如果對白色污染進行傳統(tǒng)填埋、焚燒容易造成二次污染；黃粉蟲腸道微生物對白色污染的降解不會，D正確。

故選BD。12、A:B:C【分析】【分析】

1；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

3；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

4；泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下；乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。

【詳解】

A；在無氧條件下；乳酸菌能將葡萄糖分解成乳酸，腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵，A正確；

B；參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；制作腐乳利用了毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸，B正確；

C；酵母菌在無氧條件下；可通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，制作果酒利用了酵母菌在無氧條件下產(chǎn)生酒精，C正確；

D；醋酸菌是好氧型生物；制作果醋利用了醋酸菌在有氧條件下產(chǎn)生醋酸，D錯誤。

故選ABC。13、A:B:D【分析】【分析】

1；生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器又是生物制劑、載體和分散手段的綜合利用。生物武器自誕生以來；給人類的生存安全構(gòu)成了嚴重威脅。

2；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題包括食物安全、生物安全和環(huán)境安全。

3；“治療性克隆”將使人胚胎干細胞（簡稱ES細胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細胞移植到去核卵母細胞中構(gòu)建形成重組胚胎；體外培養(yǎng)到一定時期分離出ES細胞，獲得的ES細胞定向分化為所需的特定類型細胞（如神經(jīng)細胞、肌肉細胞和血細胞），用于治療。

【詳解】

A；對待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅定；即在任何情況下都不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，堅決禁止生物武器，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因要注意基因安全；對外源DNA要進行認真選擇，避免產(chǎn)生對人體有害的或過敏的蛋白質(zhì)，B正確；

C；中國對于克隆人的態(tài)度是不反對治療性克隆；禁止進行克隆人的實驗，C錯誤；

D；一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題；包括食品安全、生物安全和生態(tài)安全，要馬上停止試驗，并銷毀重組生物，D正確。

故選ABD。14、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長素和細胞分裂素；同時使用生長素和細胞分裂素時；兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向；先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會發(fā)生基因的選擇性表達，A錯誤；

B；實驗至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計5個濃度水平的實驗，則細胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細胞分裂素的最高濃度M應(yīng)設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯誤；

D；生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。15、A:C:D【分析】【分析】

動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核；移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成為動物個體。

【詳解】

A；克隆北極狼的供體細胞來自野生北極狼；卵母細胞來自發(fā)情期的母犬，因此性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬的基因共同決定，比格犬只是代孕母體，不提供遺傳物質(zhì)，A錯誤；

B；透明帶下注射法不抽取供體細胞的細胞核；操作簡單且對供體細胞核損傷小，同時注射的位置是卵母細胞外的透明帶，然后誘導(dǎo)兩個細胞融合，對卵母細胞的損傷小，B正確；

C；供體細胞注入卵母細胞透明帶內(nèi)后；還需要電融合法等誘導(dǎo)才能使供體細胞進入卵母細胞形成重構(gòu)胚，C錯誤；

D；細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程是有絲分裂過程；而基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過程，D錯誤。

故選ACD。三、填空題(共7題，共14分)16、略

【分析】【詳解】

生物武器種類：包括致病菌、病毒、生化毒劑，以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果?！窘馕觥竣?直接②.食物③.生活必需品17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖定量18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因文庫人工合成PCR技術(shù)19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質(zhì)20、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對被新冠病毒感染后肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應(yīng)選取甲的B細胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應(yīng)的記憶細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。

【點睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒有細胞結(jié)構(gòu)；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶21、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進行。該蛋白質(zhì)的氨基酸序列已知，因此通過蛋白質(zhì)工程，生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥的基本過程為：根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥?！窘馕觥扛鶕?jù)已知的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】個體生物學(xué)水平抗蟲性狀。四、實驗題(共2題，共14分)23、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）利用RNA得到相應(yīng)DNA的方法為逆轉(zhuǎn)錄；起作用的酶為逆轉(zhuǎn)錄酶。在體外將DNA擴增的技術(shù)是PCR，中文名稱為多聚酶鏈式反應(yīng)。

（2）PCR技術(shù)是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；該過程需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)能夠使脫氧核苷酸從引物的3'端開始連接，使子代DNA從5'向3'延伸；進行擴增時，還應(yīng)選擇一對方向相反的引物，且與模板的3'端結(jié)合，據(jù)圖可知，應(yīng)選擇Ⅱ；Ⅲ。

（3）細胞內(nèi)是否合成了由目的基因控制的蛋白質(zhì)，使用抗原-抗體雜交法檢測，為了檢驗表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用S蛋白與新冠病毒肺炎康復(fù)患者血清進行抗原-抗體雜交實驗來進行檢測，本實驗是驗證性實驗，實驗結(jié)果是唯一的，因此本實驗結(jié)果是出現(xiàn)雜交帶?！窘馕觥?1)逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈式反應(yīng)。

(2)熱穩(wěn)定DNA聚合酶##Taq酶3'II；Ⅲ

(3)用表達的S蛋白與新冠病毒肺炎康復(fù)患者血清進行抗原-抗體雜交實驗出現(xiàn)雜交帶24、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程，該過程還需要tRNA來運轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細胞內(nèi)是否成功表達可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失，因為這兩者改變會導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續(xù)。

（3）本實驗?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實驗組細胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實驗結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時保證在不同的實驗組細胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實驗組中受體細胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實驗組細胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進行檢測，即進行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細胞中表達的全長IDUA蛋白量比其他實驗組都多，說明其能有效恢復(fù)細胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實驗可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進行通讀，進而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細胞內(nèi)都沒有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異?！窘馕觥?1)替換減少。

(2)識別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復(fù)細胞中全長IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異五、綜合題(共3題，共12分)25、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：圖中Ⅰ表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛毎?；培育轉(zhuǎn)基因植物；Ⅱ表示采用感受態(tài)細胞法將目的基因?qū)胛⑸锛毎?/p>

2；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

【詳解】

（1）利用mRNA為模板合成cDNA的過程為逆（反）轉(zhuǎn)錄；獲得的cDNA一般采用PCR技術(shù)進行擴增，擴增時需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，該技術(shù)需要用到熱穩(wěn)定DNA聚合酶，以催化合成DNA子鏈。由于啟動子具有（物種及組織）特異性，所以構(gòu)建在胚乳細胞內(nèi)特異表達rHSA的載體時；需要選擇水稻胚乳細胞啟動子，而不能選擇其他物種和組織細胞的啟動子，故擴增得到的HSA基因不含有啟動子。

（2）HSA基因?qū)胧荏w細胞前；需要實施基因表達載體的構(gòu)建步驟，此步驟是基因工程的核心步驟。

（3）大腸桿菌是原核生物，具有繁殖快、單細胞、遺傳物質(zhì)少等優(yōu)點，常作為基因工程的受體細胞；但是大腸桿菌沒有生物膜系統(tǒng)，無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對rHSA進一步修飾加工，獲得的rHSA可能沒有生物活性。

【點睛】

本題的關(guān)鍵是識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟的相關(guān)細節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識和題干要求準確答題。【解析】反轉(zhuǎn)錄PCR熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）不含有基因表達載體的構(gòu)建大腸桿菌無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對rHSA進一步修飾加工26、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作程序：1；目的基因的獲?。涸嘶虿扇≈苯臃蛛x獲得、真核基因是人工合成；人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法、化學(xué)合成法、PCR技術(shù)擴