2025年統(tǒng)編版2024選擇性必修3生物下冊階段測試試卷

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年統(tǒng)編版2024選擇性必修3生物下冊階段測試試卷899考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、某研究性學習小組以櫻桃番茄為材料進行果酒、果醋發(fā)酵。下列相關敘述正確的是（）A.酵母菌與醋酸菌相比，發(fā)酵所需的最適溫度較高B.先供氧進行果醋發(fā)酵，然后隔絕空氣進行果酒發(fā)酵C.與人工接種進行發(fā)酵相比，自然發(fā)酵獲得的產品品質更好D.適當加大接種量可以提高發(fā)酵速率，且可抑制雜菌生長繁殖2、用現(xiàn)代生物技術培育生物新品種，關于其優(yōu)越性說法不正確的是（）A.克隆技術可以快速繁殖優(yōu)良性狀的家畜B.現(xiàn)代生物技術可以迅速使新品種形成群落C.現(xiàn)代生物技術可以克服遠緣雜交不親和的障礙D.現(xiàn)代轉基因生物技術可以迅速改變生物的基因組成3、下圖為培育“試管山羊”的基本過程示意圖；下列有關敘述正確的是（）

A.甲過程中可通過給母山羊注射促性腺激素使其超數(shù)排卵B.乙過程將采集到的卵子和精子混合完成受精C.丙過程與乙過程中應采用相同成分的培養(yǎng)液D.丁過程中必須將早期胚胎移植到與供體性狀相同的代孕母羊子宮內4、下列有關PCR過程的敘述中，不正確的是（）A.變性過程中破壞的是DNA分子內堿基對之間的氫鍵B.復制過程中引物與DNA模板鏈的結合是依靠堿基互補配對原則完成C.延伸過程中需要DNA聚合酶、能量、四種核糖核苷酸D.PCR技術與細胞內DNA復制相比所需要的酶最適溫度較高5、根據(jù)T-DNA的已知序列；利用PCR技術可以擴增出被插入的基因片段。其過程是：提取某植株的DNA，用限制酶處理后，再用DNA連接酶將獲得的DNA片段連接成環(huán)（如圖），以此為模板，從圖中甲；乙、丙、丁四種單鏈DNA片段中選取作為引物進行擴增，得到的片段將用于獲取該基因的全序列信息（）

A.甲、丙B.甲、丁C.乙、丙D.乙、丁6、圖表示果酒和果醋生產過程中的物質變化情況，相關敘述正確的是（）

A.果酒發(fā)酵所需的最適溫度高于果醋B.過程①②在酵母菌細胞中發(fā)生的場所相同C.過程⑤需要氧氣而過程④不需要氧氣D.進行果酒、果醋發(fā)酵的微生物均為真核生物7、下列有關抗蟲基因表達載體的敘述，正確的是（）A.切割含抗蟲基因的DNA片段和載體必須用同一種限制酶，才能獲得相同末端B.抗蟲基因表達載體中要有啟動子和終止密碼子C.抗蟲基因表達載體必須具備標記基因，其作用是篩選含有目的基因的受體細胞D.抗蟲基因的表達啟動于復制原點8、經遺傳改造的小鼠胚胎干細胞注入囊胚，通過胚胎工程的相關技術可以獲得具有不同遺傳特性的實驗小鼠。下列說法錯誤的是（）A.用促性腺激素處理雌鼠可以獲得更多的卵子B.體外受精前要對小鼠的精子進行獲能處理C.胚胎移植前要檢查胚胎質量并在囊胚或原腸胚階段移植D.遺傳改造的小鼠胚胎干細胞可以通過轉基因等技術獲得9、以下有關蛋白質工程的敘述，錯誤的是（）A.蛋白質工程發(fā)展的基礎是基因工程B.蛋白質工程的原理是從預期的蛋白質功能出發(fā)最終找到脫氧核苷酸序列的過程C.對蛋白質的改造是通過直接改造相應的mRNA來實現(xiàn)的D.T4溶菌酶中引入二硫鍵提高了它的熱穩(wěn)定性是蛋白質工程應用的體現(xiàn)評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)10、良種試管牛的繁殖過程是用激素促進甲牛多排卵，然后把卵母細胞在體外與人工采集的乙牛的精子進行受精，在特定培養(yǎng)基上培育成胚胎，再把胚胎送入經過激素處理的丙牛的子宮內，孕育成試管牛。下列相關敘述正確的是（）A.“用激素促進甲牛多排卵”的激素是孕激素B.產生試管牛的生殖方式屬于有性生殖C.甲牛、乙牛對試管牛核基因的貢獻相同D.該技術可應用于加速優(yōu)良種畜的繁殖11、下列有關動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同B.動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C.動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質，莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株D.煙草葉片離體培養(yǎng)能產生新個體，小鼠雜交瘤細胞培養(yǎng)能得到細胞代謝產物12、小鼠胚胎干細胞經定向誘導可獲得多種功能細胞、制備流程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）

A.為獲得更多的囊胚，采用激素注射促進雄鼠產生更多的精子B.細胞a和細胞b內含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶將細胞a的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細胞D.胚胎干細胞和誘導出的各種細胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)13、我國的釀酒技術歷史悠久，古人在實際生產中積累了很多經驗。《齊民要術》記載：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲勢盡?！币馑际钱Y中酒液涼了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用盡了。下列敘述正確的是（）A.用酒曲釀酒過程中，為加快微生物代謝需不斷通入O2B.酒液溫度的變化與酒曲中微生物呼吸作用釋放熱量有關C.起泡是由微生物進行呼吸作用產生的CO2釋放形成的D.“曲勢盡”可能是甕中液體pH降低、酒精濃度過高導致14、將蘇云金桿菌的Bt基因導入棉花細胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉基因棉，其過程如圖所示(KanR為卡那霉素抗性基因)。下列相關敘述正確的是（）

A.可使用含卡那霉素的培養(yǎng)基來篩選含重組質粒的農桿菌B.過程①必須用同種限制酶切割含Bt基因的DNA和Ti質粒C.過程③將棉花細胞與農桿菌混合培養(yǎng)能使T-DNA進入棉花細胞D.過程④和過程⑤的培養(yǎng)基中添加的激素的濃度不同15、iPS細胞被稱為誘導多能干細胞，可通過轉入相關因子來制備。iPS細胞最初是由成纖維細胞轉化而來，后來發(fā)現(xiàn)已分化的T細胞、B細胞等也能被誘導成該類細胞。下列說法正確的是（）A.導入的物質可以是DN蛋白質，還可用小分子物質來誘導B.iPS細胞的體外培養(yǎng)需要在無菌的CO2培養(yǎng)箱中進行C.T細胞、B細胞能被誘導為iPS細胞，說明體內細胞的分化是可逆的D.與胚胎干細胞相比，iPS細胞的優(yōu)點是分裂能力強，分化程度低16、大腸桿菌能在基本培養(yǎng)基上生長；X射線照射后產生的代謝缺陷型大腸桿菌不能在基本培養(yǎng)基上生長，但可以在完全培養(yǎng)基上生長。利用夾層培養(yǎng)法可篩選代謝缺陷型大腸桿菌，具體的操作是：在培養(yǎng)皿底部倒一層基本培養(yǎng)基，冷凝后倒一層含經X射線處理過的菌液的基本培養(yǎng)基，冷凝后再倒一層基本培養(yǎng)基。培養(yǎng)一段時間后，對首次出現(xiàn)的菌落做好標記。然后再向皿內倒一層完全培養(yǎng)基，再培養(yǎng)一段時間后，會長出形態(tài)較小的新菌落。下列說法正確的是（）A.X射線誘發(fā)染色體變異進而導致大腸桿菌代謝缺陷B.首次出現(xiàn)的菌落做標記時應標記在皿蓋上C.夾層培養(yǎng)法可避免細菌移動或菌落被完全培養(yǎng)基沖散D.形態(tài)較小的新菌落可能是代謝缺陷型大腸桿菌評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)17、哺乳動物核移植可以分為______核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。18、酶是細胞合成的生物催化劑。隨著生物科學技術的發(fā)展；酶已經走出實驗室，走進人們的生產和生活。請回答下面有關酶的問題：

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成________，____________將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是____________。

（2）果膠酶包括_____________________________；生產中如果要固定果膠酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分離原理：需要用__________法去除相對分子質量大的雜質蛋白，以純化酶；利用_________________________法對酶進行純度鑒定。19、DNA連接酶與DNA聚合酶作用的異同:

DNA聚合酶只能將______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_____的末端，形成磷酸二酯鍵。20、基因的“剪刀”是_____，它的化學本質是_____，它只能識別一種特定的_____，并在_____上切割DNA分子；基因的“針線”是______，它能連接DNA骨架上的_____，DNA的骨架由___________構成；基因的運載體是將_____送入_____的運輸工具。目前常用的運載體有_____、________和_____。質粒存在于許多_____和______等生物中，是擬核或_____外能夠_____的很小的環(huán)狀_____。21、______——“分子縫合針”22、醋酸菌是一種____________細菌。醋酸生成反應式是_____________________。23、植物體細胞雜交的意義：_____。24、請回答有關植物細胞工程的問題：

（1）在植物中，一些分化的細胞，經過________的誘導，可以脫分化失去其__________而轉變成未分化細胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養(yǎng)。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到__________的影響而產生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。評卷人得分四、判斷題(共4題，共40分)25、胚胎發(fā)育早期，細胞的數(shù)量不斷增加，胚胎的總體積也增加。（選擇性必修3P58）()A.正確B.錯誤26、要對蛋白質的結構進行設計改造，最終必須通過改造氨基酸序列來完成。()A.正確B.錯誤27、蛋白質工程是在基因工程的基礎上，延伸出來的第二代基因工程。（選擇性必修3P93）()A.正確B.錯誤28、中國政府積極支持制定《禁止生殖性克隆人國際公約》，堅決反對克隆人，不允許進行任何生殖性克隆人實驗。（選擇性必修3P108）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共12分)29、甘蔗是華南地區(qū)一種重要的經濟作物。某研究團隊從甘蔗根際土壤中分離出了幾種固氮菌；實驗方案如下。

回答下列問題：

（1）Ashby培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分主要包括水、無機鹽_________等。實驗中第一次在Ashby培養(yǎng)基上接種的方法是________，在Ashy平板上進行多次接種的目的是_________________________

（2）固氮菌能產生固氮酶。為評估固氮酶的活性，可以檢測____________．

（3）研究發(fā)現(xiàn)，上述固氮菌還能產生IAA。取一定體積的固氮菌菌液離心，獲得上清液，現(xiàn)欲測定上清液中IAA的含量，請利用以下試劑，寫出實驗思路。_______

供選試劑：標準的1g/L的IAA母液，蒸餾水，S試劑(與IAA反應顯紅色，且顏色深淺與IAA濃度成正相關）30、GDNF是一種多肽類的神經營養(yǎng)因子；對損傷的神經細胞有營養(yǎng)和保護作用，可用于運動神經細胞損傷的治療。

（1）培養(yǎng)運動神經細胞：接種前需對培養(yǎng)液進行滅菌處理，培養(yǎng)過程中通常還需添加一定量的______，以防止污染；當培養(yǎng)的運動神經細胞達到一定數(shù)量時，使用______處理；進行傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細胞，用于實驗研究。

（2）研究GDNF對運動神經細胞生長的影響：將（1）得到的細胞；平均分成4組進行處理，得到實驗結果如下表所示．

GDNF對運動神經細胞生長的影響。

。分組處理細胞突起的平均數(shù)量（個）細胞突起的平均長度（μm）AGDNF0ng/mL176120．12BGDNF50ng/mL217141．60CGDNF100ng/mL241160．39DGDNF200ng/mL198147．68①該實驗的對照組是_______。

②由表格中的數(shù)據(jù)可知_______。

③基于上述研究和所學的生物學知識，你能為治療運動神經細胞損傷提供的方法有______。31、酵母菌與人們的日常生活密切相關；也是現(xiàn)代生物技術研究常用的生物。

(1)利用酵母菌發(fā)酵產生酒精的過程中，要先充氣后閉氣，原因是_____。

(2)利用玉米秸稈生產酒精時，水解秸稈所用的纖維素酶可來自微生物，分離產生該酶的微生物時，所需要的培養(yǎng)基為_____（按功能分），培養(yǎng)基中的碳源為_____。

(3)雖然不同的生物對營養(yǎng)物質的需求不同，但是培養(yǎng)這些微生物的培養(yǎng)基，一般都含有四大營養(yǎng)成分，即_____、_____、_____和碳源。培養(yǎng)基滅菌的常用方法為_____。

(4)接種微生物常用的兩種方法是_____、_____。實驗室接種微生物時，常在酒精燈火焰旁進行，這樣操作的目的是_____。32、科學家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來了無限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號（加數(shù)滴質量分數(shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過PCR技術擴增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進行菌株的種屬鑒定。PCR技術中起關鍵作用的酶是_____________。該技術能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產物一般可通過_________________鑒定。

(3)科學家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉錄病毒轉入小鼠成纖維細胞中。2~3周后，這些細胞顯示出ES細胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細胞。在這個實驗過程中，逆轉錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細胞的產生不是由于培養(yǎng)基的作用？請寫出實驗設計思路______________評卷人得分六、綜合題(共3題，共24分)33、在基因工程的操作過程中；有多種方法可檢測目的基因是否導入受體菌，回答下列問題。

（1）熒光蛋白基因篩選法：某種熒光蛋白（GFP）在紫外線照射下會發(fā)出綠色熒光。將目的基因和GFP基因拼接成融合基因，并與_________________重組后導入受體菌；經培養(yǎng)篩選能發(fā)出綠色熒光的菌落。

（2）環(huán)絲氨酸輔助篩選法：四環(huán)素能使細菌停止生長但不致死；環(huán)絲氨酸能使正常生長的細菌致死，而對停止生長的細菌不致死。某質粒如圖所示（Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因），Tetr中插入目的基因后失活。用此質粒構建表達載體；轉化細菌后，結果有3種：未轉化的細菌；含質粒的細菌、含重組質粒的細菌。

①用含有___________和___________的培養(yǎng)基對上述3種細菌進行篩選，只有含質粒的細菌被淘汰，理由是_________________________________________________________。

②在上述篩選的基礎上，若要篩選出含重組質粒的細菌，還需使用含有的____________培養(yǎng)基。

（3）熒光定量PCR技術：熒光定量PCR技術可實現(xiàn)對轉基因細菌中目的基因的定量檢測。在PCR反應體系中；加入的熒光探針與模板DNA（目的基因）的某條鏈互補結合，當合成的子鏈延伸至探針處，探針被酶切降解，熒光監(jiān)測系統(tǒng)就會接收到熒光信號，具體原理如下圖所示。

①可通過檢測_______________判定待測細菌中是否含有模板DNA，且熒光達到某一特定強度所需的循環(huán)次數(shù)越_______；模板DNA含量越高。

②通過上述技術定量檢測目的基因，需從設計的多對引物和多種探針中選擇特異性最好的組合，為此需進行多組實驗，每個實驗組需向反應體系中加入___________。（填字母）

a．轉基因細菌的DNA模板b．非轉基因細菌DNA模板c．定量的待測引物d．定量的待測熒光探針e．熱穩(wěn)定DNA聚合酶f．解旋酶g．足量的脫氧核苷酸（dNTP）34、高產奶牛產仔量不高；有人利用一種高產奶牛（A），采用動物細胞核移植技術，培育出許多高產奶牛（D）。其培育方案見下圖。

(1)上述奶牛（D）的核基因型應該與哪頭牛的基因型一樣_______？奶牛（D）的體細胞中含有哪幾頭牛的基因_______？這個培育過程說明奶牛的哪些性狀是受細胞核控制的？為什么？_______

(2)在培育奶牛（D）的過程中是否需要采用動物細胞培養(yǎng)技術_______？如果需要，在哪個步驟采用_______？動物細胞培養(yǎng)可能有哪些應用？_______35、現(xiàn)代人追求高效率；高品質的健康生活；因此市場上果汁飲料、果酒、果醋越來越受到人們的青睞。請回答：

(1)在果酒釀造過程中，發(fā)酵罐先____________，促進酵母菌大量繁殖，然后密閉，有利于獲得更多的酒精產物。若產物中生成了酒精，使用酸性重鉻酸鉀試劑檢驗呈現(xiàn)____________色。

(2)在果酒釀造過程中，如果果汁滅菌不嚴格，含有醋酸菌，在酒精發(fā)酵旺盛時，醋酸菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為酸并說明理由？_____________________。

(3)當缺少糖源時仍可進行醋酸發(fā)酵，其反應式為_______________。

(4)為了進一步提高果酒的品質，我們在利用發(fā)酵工程生產果酒時要向發(fā)酵罐內接種優(yōu)良品種的酵母菌，某生物興趣小組在用平板劃線法分離優(yōu)良品種的酵母菌時，進行了如圖操作：其中較明顯的一處錯誤是不要____________，在第二次劃線前灼燒接種環(huán)，目的是_________。

參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、D【分析】【分析】

1．酵母菌在有氧和無氧的條件下都能生活。在有氧時；酵母菌大量繁殖，但是起不到發(fā)酵效果；在無氧時，繁殖速度減慢，但是此時可以進行發(fā)酵。在利用酵母菌發(fā)酵時最好是先通入足夠的無菌空氣，在有氧環(huán)境下一段時間使其繁殖，再隔絕氧氣進行發(fā)酵。20℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃~25℃，pH最好是弱酸性。

2．醋酸菌是好氧性細菌；當氧氣；糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長溫度是30℃~35℃。

【詳解】

A；果酒發(fā)酵的最適溫度是18-25℃；果醋發(fā)酵的最適溫度是30-35℃，因此果酒發(fā)酵所需最適溫度低于果醋發(fā)酵，A錯誤；

B；先制酒再制醋；故先隔絕空氣進行果酒發(fā)酵，再供氧進行果醋發(fā)酵，B錯誤；

C；自然發(fā)酵中；可能帶有的雜菌較多，產品品質不一定更好，C錯誤；

D；加大接種量；所需菌種數(shù)量較多，發(fā)酵速率快，也可抑制雜菌生長，D正確。

故選D。2、B【分析】【分析】

現(xiàn)代轉基因生物技術可以迅速改變生物的基因組成；基因工程和細胞工程等現(xiàn)代生物技術培育農作物新品種克服了遠緣雜交不親和障礙，在培育作物新品種方面所取得的重大突破。

【詳解】

A；克隆技術可以在短時間內大量繁殖；故可快速繁殖優(yōu)良性狀的家畜，A正確；

B；現(xiàn)代生物技術可以迅速使新品種形成一個種群；群落包括該區(qū)域的所有生物，B錯誤；

C；現(xiàn)代生物技術中通過體細胞雜交可以克服遠源雜交不親和的障礙；C正確；

D；現(xiàn)代轉基因生物技術可以迅速改變生物的基因組成；D正確。

故選B。

【點睛】3、A【分析】【分析】

分析題圖：甲表示卵母細胞的采集和培養(yǎng)過程；該過程可通過給母山羊注射促性腺激素使其超數(shù)排卵；乙表示體外受精過程，需在獲能培養(yǎng)液或受精培養(yǎng)液中進行；丙是早期胚胎發(fā)育過程，需要在發(fā)育培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；丁是胚胎移植過程。

【詳解】

A；甲過程表示卵母細胞的采集；可通過給母山羊注射有關激素（促性腺激素）使其超數(shù)排卵，A正確；

B；乙過程表示體外受精；需將獲能的精子和成熟的卵子在適當?shù)呐囵B(yǎng)液中共同培養(yǎng)一段時間完成受精，B錯誤；

C；獲能的精子和成熟的卵子在適當?shù)呐囵B(yǎng)液中共同培養(yǎng)一段時間完成受精；而受精卵要移入發(fā)育培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，C錯誤；

D；丁過程中早期胚胎須移植到與供體生理狀態(tài)相同的代孕母羊子宮內；D錯誤。

故選A。4、C【分析】【分析】

PCR技術：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。

2；原理：DNA復制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；變性是將DNA雙鏈解開；該過程中破壞的是DNA分子內堿基對之間的氫鍵，A正確；

B；復性過程中引物與DNA模板鏈的結合是依靠堿基互補配對原則完成；B正確；

C；延伸過程中需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶、ATP、四種脫氧核糖核苷酸、引物；C錯誤；

D；細胞內DNA復制是生物體內完成的；因此最適溫度就是生物體的體溫，而PCR技術是在較高溫度條件下進行的，總體來說PCR與細胞內DNA復制相比所需要酶的最適溫度較高，D正確。

故選C。5、D【分析】【分析】

因為要擴增的是被插入基因片段；所以應提取突變體植株的DNA。將DNA片段連接起來的酶是DNA連接酶。圖示中表示出了DNA合成方向是：引物A是順時針方向，那么，乙；丙就是逆時針方向，A、C是順時針方向。利用甲、丙這對引物擴增的將是T-DNA片段，而利用乙、丁這對引物擴增的才是被插入的基因片段。

【詳解】

因為DNA兩條鏈反向平行；由圖示環(huán)狀DNA外側鏈DNA合成方向可判斷，DNA擴增過程所選的引物應為乙B；丁，這樣可確保被插入的基因片段得到復制。要注意DNA兩條單鏈反向平行，乙、丁作為引物可保證插入的基因片段優(yōu)先復制，D正確，ABC錯誤。

故選D。

【點睛】6、B【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型；參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果酒需要的溫度在18-25℃，果醋制備的溫度是30-35℃。

據(jù)圖分析；過程①是細胞呼吸的第一階段，過程②是無氧呼吸的第二階段，過程③是有氧呼吸的第二；三階段。醋酸菌好氧性細菌，過程④當缺少糖源時和有氧條件下，可將酒精氧化成醋酸；過程⑤當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。

【詳解】

A；由分析可知；果酒發(fā)酵所需的最適溫度低于果醋，A錯誤;

B；過程①②在酵母菌細胞中發(fā)生的場所相同；都是細胞質基質，B正確;

C；過程⑤和過程④都需要氧氣；C錯誤;

D；參與果酒制作的微生物是酵母菌；為真核生物，進行果醋發(fā)酵的微生物是醋酸菌，為原核生物，D錯誤。

故選B。7、C【分析】基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；不同的限制酶切割DNA也可以獲得相同的黏性末端；A錯誤；

B；抗蟲基因表達載體中要有啟動子和終止子和標記基因；B錯誤；

C；抗蟲基因表達載體中要有啟動子和終止子和標記基因；標記基因的作用是篩選含有目的基因的受體細胞，C正確；

D；抗蟲基因的表達啟動于啟動子；D錯誤。

故選C。8、C【分析】【分析】

胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術；包括體外受精；胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細胞培養(yǎng)等技術。胚胎工程的許多技術，實際是在體外條件下，對動物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進行的模擬操作。

【詳解】

A；用促性腺激素處理；可使雌鼠超數(shù)排卵，可以獲得更多的卵子，A正確；

B；在體外受精前；要對小鼠的精子進行獲能處理，B正確；

C；胚胎移植前要檢查胚胎質量；不同動物胚胎移植的時間不同，例如，牛、羊一般要培養(yǎng)到囊胚或桑椹胚階段才進行移植，小鼠和家兔等實驗動物可在更早的階段移植，C錯誤；

D；通過轉基因技術可以對小鼠胚胎干細胞進行遺傳改造；D正確。

故選C。9、C【分析】【分析】

蛋白質工程指以蛋白質的結構規(guī)律及其與生物功能的關系作為基礎；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質進行基因改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產和生活的需要．蛋白質工程是在基因工程的基礎上，延伸出來的第二代基因工程．蛋白質工程的過程：預期蛋白質功能→設計預期的蛋白質結構→推測應有氨基酸序列→找到對應的脫氧核苷酸序列（基因）。

【詳解】

A；蛋白質工程是在基因工程的基礎上；延伸出來的第二代基因工程，A正確；

B；蛋白質工程的原理是從預期的蛋白質功能出發(fā)最終找到脫氧核苷酸序列的過程；B正確；

C；對蛋白質的改造是通過直接改造相應的基因來實現(xiàn)的；C錯誤；

D、蛋白質工程可以通過改造酶的結構，有目的地提高酶的熱穩(wěn)定性，如在T4溶菌酶中引入二硫鍵提高了它的熱穩(wěn)定性；D正確。

故選C。

【點睛】二、多選題(共7題，共14分)10、B:C:D【分析】【分析】

良種試管牛的繁殖過程：對供體和受體的選擇和處理（同期發(fā)情處理；超數(shù)排卵處理）；配種或進行人工授精、對胚胎的收集檢查培養(yǎng)或保存、進行胚胎移植。

【詳解】

A；處理供體甲牛的激素可能是促性腺激素；使其超數(shù)排卵，A錯誤；

B；產生試管牛的過程中經過了兩性生殖細胞的融合過程；因此試管牛產生的生殖方式屬于有性生殖，B正確；

C；母本甲牛提供卵細胞、父本乙牛提供精子；試管牛細胞核中基因一半來源于父方，一半來源于母方，C正確；

D；體外受精和早期胚胎發(fā)育、胚胎移植等技術可以縮短繁殖周期；增加一生繁殖的后代數(shù)量，即該技術可充分發(fā)揮優(yōu)良雌性個體的繁殖潛力，D正確。

故選BCD。

【點睛】11、A:C:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較。比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理細胞的全能性細胞增殖培養(yǎng)基性質固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分營養(yǎng)物質（蔗糖）、植物激素等營養(yǎng)物質（葡萄糖）、動物血清等培養(yǎng)結果植物體細胞株、細胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無毒苗等獲得細胞或細胞產物分散處理無有脫分化有無

【詳解】

A；動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同；如動物細胞培養(yǎng)需要加血清，植物細胞培養(yǎng)不需要添加血清，A正確；

B；植物組織培養(yǎng)不需要胰蛋白酶；B錯誤；

C；動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質；莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株，C正確；

D；煙草葉片離體培養(yǎng)能產生新個體；小鼠雜交瘤細胞培養(yǎng)能得到細胞代謝產物，D正確。

故選ACD。12、A:B:C【分析】【分析】

1；胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞；來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團）。

2；ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中；能夠維持不分化的狀態(tài)．在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞向不同類型的組織細胞分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段。

【詳解】

A；為了獲得更多的囊胚；可以采用激素促進成熟雌性個體超數(shù)排卵，然后將卵細胞從母體內取出，在試管內與人工采集的精子進行體外受精，培育成胚胎，A錯誤；

B、細胞a和細胞b是由同一個受精卵經過有絲分裂形成的；故核基因相同，B錯誤；

C；運用細胞培養(yǎng)技術可以從哺乳動物的早期胚胎中獲得胚胎干細胞；首先必須用胰蛋白酶處理內細胞團，分解細胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個細胞，C錯誤；

D、動物細胞培養(yǎng)時需要在5%CO2的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；以維持培養(yǎng)液的pH，D正確。

故選ABC。13、B:C:D【分析】【分析】

用酒曲釀酒菌種是酵母菌；代謝類型是兼性厭氧型真菌，屬于真核細胞，條件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧。

【詳解】

A、用酒曲釀酒是利用了微生物細胞呼吸的原理，進行的是酵母菌的無氧發(fā)酵，不能一直通入O2；A錯誤；

B；由于呼吸作用會產熱；故會導致酒液溫度產生變化，B正確；

C、起泡是由微生物進行呼吸作用產生的CO2釋放到發(fā)酵液中形成的；C正確；

D；“曲勢盡”可能是隨著發(fā)酵的進行甕中液體pH降低、酒精濃度過高導致酵母菌大量死亡；D正確。

故選BCD。14、A:C:D【分析】【分析】

據(jù)圖分析，過程①表示基因表達載體的構建過程，需用DNA連接酶將目的基因和運載體（質粒）連接形成重組Ti質粒。過程②表示將目的基因導入微生物細胞（農桿菌），需要用Ca2+處理；使其成為感受態(tài)細胞，使其易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。農桿菌侵染棉花后，將自身的Ti質粒上的T-DNA整合到棉花細胞的DNA上，然后利用棉花細胞進行植物組織培養(yǎng)，獲得抗蟲棉。

【詳解】

A、KanR為卡那霉素抗性基因；成功導入質粒的農桿菌具有卡那霉素抗性而普通農桿菌沒有，因此可使用含卡那霉素的培養(yǎng)基來篩選含重組質粒的農桿菌，A正確；

B；為使目的基因DNA片段和質粒DNA片段在切口處的黏性末端匹配；需要選擇能切出相同黏性末端的限制酶來進行切割，可以是同種限制酶，也可以是不同限制酶，但是必須要能產生相同黏性末端，B錯誤；

C；棉花細胞與農桿菌混合后；農桿菌在侵染棉花細胞時，可將自身的Ti質粒上的T-DNA整合到棉花細胞的DNA上，C正確；

D；植物組織培養(yǎng)時；培養(yǎng)基中生長素濃度高于細胞分裂素，可以誘導根的分化；若是細胞分裂素高于生長素濃度，則誘導芽的分化，從圖上可知，④過程分化出芽，⑤過程分化形成根，繼而形成試管苗，因此④和⑤中的培養(yǎng)基用到的激素的濃度不同，D正確。

故選ACD。15、A:B【分析】【分析】

iPS細胞被稱為誘導多能干細胞；具有分裂和分化的能力。

【詳解】

A；目前已采用多種方法來制備iPS細胞；包括借助載體將特定的基因導入細胞中，直接將特定的蛋白導入細胞中或者用小分子化合物等來誘導形成iPS細胞，A正確；

B、iPS細胞的體外培養(yǎng)是利用動物細胞培養(yǎng)技術，需要在無菌的CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；B正確；

C；T細胞、B細胞能被誘導為iPS細胞；說明離體的已分化的細胞經過誘導可轉化為能分化的狀態(tài)，C錯誤；

D；胚胎干細胞和iPS細胞均具有分裂能力強；分化程度低的特點，D錯誤。

故選AB。16、C:D【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)基表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；大腸桿菌是原核生物；沒有染色體，A錯誤；

B；首次出現(xiàn)的菌落做標記時應標記在皿底上；B錯誤；

C；夾層培養(yǎng)法不需要對大腸桿菌進行再次接種；可避免細菌移動或菌落被完全培養(yǎng)基沖散，C正確；

D；由于代謝缺陷型大腸桿菌不能在基本培養(yǎng)基上生長；所以形態(tài)較小的新菌落可能是代謝缺陷型大腸桿菌，D正確。

故選CD。三、填空題(共8題，共16分)17、略

【解析】①.胚胎細胞②.體細胞18、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作過程中多種微生物參與了發(fā)酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質轉化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉化成甘油和脂肪酸。

2；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

【詳解】

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

（2）果膠酶并不特指某一種酶；而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠分解酶和果膠酯酶；在果汁生產過程中如果要固定果膠酶，最好采用化學結合和物理吸附法固定化，這是因為酶分子小，體積小的酶容易從包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分離原理：需要用凝膠色譜法去除相對分子質量大的雜質蛋白；以純化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法對酶進行純度鑒定。

【點睛】

本題考查腐乳制作和酶提取等知識，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗步驟、實驗采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時的學習過程中注意積累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶堿性蛋白酶和堿性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶化學結合法和物理吸附凝膠色譜（分配色譜）聚丙烯酰胺凝膠電泳19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】單個核苷酸兩個DNA片段20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制酶蛋白質核苷酸序列特定的切點DNA連接酶缺口磷酸-脫氧核糖外源基因受體細胞質粒噬菌體動植物病毒細菌酵母菌細胞核自主復制DNA分子21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA連接酶22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】好氧C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O23、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】克服了遠緣雜交不親和的障礙。24、略

【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細胞，經過激素的誘導，可以脫分化失去其特有的結構和功能而轉變成未分化細胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中；由于培養(yǎng)細胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。

【點睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)的相關知識，要求考生識記植物組織培養(yǎng)的過程、原理及條件，掌握植物組織培養(yǎng)技術的相關應用，能結合所學的知識準確分析，屬于考綱識記和理解層次的考查?！窘馕觥竣?激素②.特有的結構和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽四、判斷題(共4題，共40分)25、B【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育早期；細胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯誤。26、B【分析】【詳解】

要對蛋白質的結構進行設計改造；最終必須通過改造基因中的堿基序列來完成，因為基因能指導蛋白質的生物合成。

故錯誤。27、A【分析】【詳解】

蛋白質工程是在分子水平上通過基因修飾或基因合成來完成的，是在基因工程的基礎上延伸出來的第二代基因工程。故該說法正確。28、A【分析】【詳解】

中國政府對于“克隆人”的態(tài)度是禁止生殖性克隆人，積極支持制定《禁止生殖性克隆人國際公約》，堅決反對克隆人，不允許進行任何生殖性克隆人實驗。故該說法正確。五、實驗題(共4題，共12分)29、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質，培養(yǎng)基中一般含有水；碳源、氮源和無機鹽。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質的基礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物種和氧氣的要求。固氮微生物可利用空氣中的氮氣，故培養(yǎng)基無需再加入氮源。純化微生物時常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

【詳解】

（1）固氮菌可利用空氣中的氮氣作為氮源，所以Ashby培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分主要包括水；無機鹽、碳源等；不需要額外加入氮源。將土壤稀釋液進行梯度稀釋后再接種的方法為稀釋涂布平板法，在Ashy平板上進行多次接種的目的是提高固氮菌的純度。

（2）固氮酶的活性越大；單位時間內的固氮量越大，所以為評估固氮酶的活性，可以檢測單位時間內的固氮量。

（3）S試劑可與IAA反應顯紅色；且顏色深淺與IAA濃度成正相關，所以可用蒸餾水對IAA母液進行梯度稀釋，加入S試劑制成標準顯色液，往上清液中加入S試劑，與標準顯示液進行比色，與上清液顏色相近的標準顯示液中IAA的濃度計為上清液中IAA的濃度。

【點睛】

本題考查固氮菌的培養(yǎng)和篩選，意在考查考生對所學知識的靈活應用能力?！窘馕觥刻荚聪♂屚坎计桨宸ㄌ岣吖痰募兌葐挝粫r間內的固氮量用蒸餾水對IAA母液進行梯度稀釋，加入S試劑制成標準顯色液，往上清液中加入S試劑，與標準顯示液進行比色，與上清液顏色相近的標準顯示液中IAA的濃度計為上清液中IAA的濃度30、略

【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)的具體過程：取胚胎或幼齡動物的器官或組織--剪碎組織--用胰蛋白酶處理分散成單個細胞--制成細胞懸液--轉入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)--貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞；制成細胞懸液--轉入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．

（1）

動物細胞培養(yǎng)過程中；接種前需對培養(yǎng)液進行滅菌處理，培養(yǎng)過程中通常還需添加一定量的抗生素，以防止污染；當培養(yǎng)的運動神經細胞達到一定數(shù)量時，使用胰蛋白酶處理，進行傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細胞，用于實驗研究。

（2）

①分析表格可知；A組的GDNF濃度為0，作為實驗的對照組。

②由表格中的數(shù)據(jù)可知；與對照組比較可知，實驗組中的細胞突起的平均數(shù)量和平均長度都更大，在一定范圍內，且隨GDNF濃度增加，細胞突起的平均數(shù)量和平均長度都在增加，因此由表格中的數(shù)據(jù)可知，GDNF對運動神經細胞生長有促進作用；在一定范圍內，隨GDNF濃度增加，促進作用增強，超過最適濃度，促進作用減弱；GDNF濃度在100ng/ml時促進作用最明顯。

③從實驗可知；GDNF對運動神經細胞生長有一定的促進作用，因此在治療運動神經細胞損傷時，可以通過藥物/注射治療；基因治療、動物細胞融合制備單抗等方法治療運動神經細胞損傷。

【點睛】

本題考查了動物細胞工程的有關知識，要求考生能夠識記動物細胞培養(yǎng)過程，能夠利用對照實驗的觀點分析表格數(shù)據(jù)，難度適中?！窘馕觥浚?）抗生素胰蛋白酶（膠原蛋白酶）

（2）A組GDNF對運動神經細胞生長有促進作用；在一定范圍內，隨GDNF濃度增加，促進作用增強，超過最適濃度，促進作用減弱；GDNF濃度在100ng/ml時促進作用最明顯藥物/注射治療、基因治療、動物細胞融合制備單抗等31、略

【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基的種類及用途：（1）按物理性質可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基應用于工業(yè)或生活生產；固體培養(yǎng)基應用于微生物的分離和鑒定，半固體培養(yǎng)基則常用于觀察微生物的運動及菌種保藏等。（2）按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。

2；滅菌（1）滅菌是指使用強烈的理化方法殺死物體內外所有的微生物；包括芽孢和孢子。（2）滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌。①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱；③培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。

【詳解】

（1）利用酵母菌發(fā)酵產生酒精的過程中；要先充氣后閉氣，原因是酵母菌是兼性厭氧菌，因此果酒發(fā)酵時先通氣使酵母菌大量繁殖，后閉氣使酵母菌進行酒精發(fā)酵。

（2）利用玉米秸稈生產酒精時，水解秸稈所用的纖維素酶可來自微生物，由于該培養(yǎng)基以秸稈（纖維素）為唯一碳源，原則上，只有能分解纖維素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生存，因此按功能分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（3）雖然不同的生物對營養(yǎng)物質的需求不同；但是培養(yǎng)這些微生物的培養(yǎng)基，一般都含有水；無機鹽、碳源、氮源（基本成分）和生長因子等。培養(yǎng)基滅菌的常用方法為高壓蒸汽滅菌法。

（4）分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結構的菌落。采用平板劃線法和稀釋涂布平板法能將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。實驗室接種微生物時，常在酒精燈火焰旁進行，這樣操作的目的是酒精燈火焰旁存在無菌區(qū)域，可以避免周圍環(huán)境中的微生物的污染。【解析】(1)先充氣有利于酵母菌進行有氧呼吸大量繁殖；當酵母菌繁殖到一定數(shù)量后，需要閉氣造成無氧環(huán)境，讓酵母菌進行無氧呼吸產生酒；

(2)選擇培養(yǎng)基纖維素。

(3)水無機鹽氮源高壓蒸汽滅菌法。

(4)平板劃線法稀釋涂布平板法避免周圍環(huán)境中的微生物的污染32、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術是一項通過體外控制溫度擴增DNA的技術，該技術中由于溫度較高，起關鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設計合成的；PCR產物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定：凝膠中的DNA分子通過染色；可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。

（3）分析題意，科學家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉錄病毒轉入小鼠成纖維細胞中，該過程中逆轉錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞；分析題意，實驗目的是iPS細胞的產生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實驗的自變量是外源基因的有無，因變量是IPS細胞的產生情況，實驗設計應遵循對照與單一變量原則，故可設計實驗如下：將轉入外源基因的細胞和沒有轉入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉入外源基因的細胞轉化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產生不是由于培養(yǎng)基的作用?！窘馕觥?1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設計合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞。將轉入外源基因的細胞和沒有轉入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉入外源基因的細胞轉化成了iPS細胞，則可以證明iPS細胞的產生不是由于培養(yǎng)基的作用六、綜合題(共3題，共24分)33、略

【分析】【分析】

基因工程育種原理：DNA重組技術（屬于基因重組范疇）方法：按照人們的意愿；把一種生物的個別基因復制出來，加以修飾改造，放到另一種生物的細胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。操作步驟包括：提取目的基因；目的基因與運載體結合、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與表達等。舉例：能分泌人類胰島素的大腸桿菌菌株的獲得，抗蟲棉，轉基因動物等。

【詳解】

（1）熒光蛋白基因篩選法：某種熒光蛋白（GFP）在紫外線照射下