2025年新科版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年新科版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、下圖表示果酒和果醋制作過程中的物質(zhì)變化過程，下列敘述正確的是()A.過程①和②都只能發(fā)生在無氧條件下B.過程①和③都發(fā)生在酵母細(xì)胞的線粒體中C.過程③和④都需要氧氣的參與D.過程①～④所需的最適溫度基本相同2、關(guān)于蛋白質(zhì)工程的基本流程；下列敘述正確的是（）

①設(shè)計(jì)預(yù)期蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)②推測(cè)氨基酸序列③預(yù)期蛋白質(zhì)功能④找出相應(yīng)脫氧核苷酸序列A.③→①→②→④B.④→②→①→③C.①→②→③→④D.③→④→①→②3、下表Ⅰ；Ⅱ、Ⅲ是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長(zhǎng)繁殖；甲能在Ⅰ中正常生長(zhǎng)繁殖；而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長(zhǎng)繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是（）

。粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40．5g蔗糖10g（NH4）2SO40．4gH2O100mLMgSO49．25gCaCl20．5gⅠ+++++++Ⅱ+++++++Ⅲ++++++++A.甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物B.甲、乙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物C.甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物D.甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物4、從紅豆杉屬植物中提取分離出的紫杉醇是一種有效的抗癌藥物；自然狀態(tài)下紅豆杉生長(zhǎng)慢，紫杉醇含量低，通過植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)可獲得大量紫杉醇。植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是指將游離的單細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)按照一定的細(xì)胞密度懸浮在液體培養(yǎng)基中，用搖床或轉(zhuǎn)床進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)的方法。通過不斷的繼代培養(yǎng)篩選出疏松性均勻一致；分散性良好、大小大致相同的細(xì)胞和細(xì)胞團(tuán)，建立懸浮培養(yǎng)細(xì)胞系。據(jù)圖敘述正確的是（）

A.離體的紅豆杉組織細(xì)胞通過果膠酶分散處理后直接進(jìn)行懸浮培養(yǎng)B.懸浮培養(yǎng)液中大多數(shù)細(xì)胞在形態(tài)上呈等徑形，核-質(zhì)比率大，胞質(zhì)濃厚，液泡化程度高C.植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)培養(yǎng)液中一般細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素含量比值大于1D.植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中細(xì)胞生長(zhǎng)沒有接觸抑制，因此只要空間足夠大，就可以擴(kuò)大培養(yǎng)5、利用人胰島B細(xì)胞構(gòu)建cDNA文庫；然后通過核酸分子雜交技術(shù)從中篩選目的基因，篩選過程如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（）

A.該文庫保存的人類基因沒有完整的基因結(jié)構(gòu)B.探針通常用熒光或者放射性同位素進(jìn)行標(biāo)記C.不能用PCR技術(shù)從該文庫篩選出目的基因D.該基因文庫還可能存在呼吸酶的相關(guān)基因6、我國(guó)利用不同微生物的發(fā)酵作用制作食品，歷史悠久，在多種文獻(xiàn)中均有記載。下列說法錯(cuò)誤的是（）

①《齊民要術(shù)》中記載：“作鹽水；令極咸，于鹽水中洗菜，即內(nèi)雍中?！?/p>

②《北山酒經(jīng)》中記載：“每壇加蠟三錢；竹葉五片，隔水煮開，乘熱灌封壇口?！?/p>

③《齊民要術(shù)》中記載了二十三種利用谷物釀制食醋的工藝。其經(jīng)歷的三個(gè)主要發(fā)酵過程為：糖化→酒化→醋化。

④《本草綱目拾遺》中記述：“豆腐又名菽乳，豆腐腌過酒糟或醬制者，味咸甘心?！盇.①介紹的是泡菜制作，配制鹽水要煮沸冷卻后使用，且鹽度不宜過大B.②中每壇加蠟隔水煮開，乘熱灌封壇口有助于陳酒的儲(chǔ)藏C.③中從酒化到醋化的過程需要移至溫度較低的環(huán)境中進(jìn)行D.④中發(fā)酵產(chǎn)腐乳用的豆腐坯屬固體培養(yǎng)基，不需對(duì)其進(jìn)行嚴(yán)格滅菌7、鐵皮石斛富含某些糖類和生物堿，可以用來提取藥物，科學(xué)家采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)來培育它，取得顯著成果。下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述不正確的是（）A.為提高植株品質(zhì)，可切取一定大小的莖尖進(jìn)行培養(yǎng)，獲得脫毒苗B.培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷增殖的狀態(tài)，更容易受影響而產(chǎn)生突變C.為增加生物堿提取產(chǎn)量，可向鐵皮石斛試管苗培養(yǎng)基中滴加蔗糖D.若想獲取鐵皮石斛原生質(zhì)體，可用蝸牛消化道提取液來處理石斛細(xì)胞8、某興趣小組為研究“使用公筷對(duì)餐后菜品細(xì)菌數(shù)量的影響”，將每道菜分為3盤，一盤取樣冷藏，一盤使用公筷，一盤不用公筷，實(shí)驗(yàn)過程如下圖。下列相關(guān)操作或敘述錯(cuò)誤的是（）

A.配制培養(yǎng)基X需采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌B.計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選擇菌落數(shù)在30~300之間的平板C.在固體培養(yǎng)基X上用涂布器接種細(xì)菌D.固體培養(yǎng)基X對(duì)菜品中的細(xì)菌有選擇性9、下列有關(guān)基因工程的基本工具敘述正確的是（）A.限制酶只存在于原核生物中，只能識(shí)別DNA分子的特定核苷酸序列B.只有同種限制酶切割的末端才能連接，不同限制酶切割的末端不能連接C.基因工程中，只能利用天然質(zhì)粒，質(zhì)粒上的標(biāo)記基因用于重組DNA的篩選D.T4DNA連接酶既可以連接粘性末端，也可以連接平末端，但連接平末端的效率相對(duì)較低評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)10、科學(xué)家運(yùn)用基因工程技術(shù)，將人凝血因子基因?qū)肷窖虻氖芫阎?，培育出山羊乳腺生物反?yīng)器，使山羊乳汁中含有人凝血因子。以下有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.可用顯微注射技術(shù)將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入山羊的受精卵B.在該轉(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子存在于乳腺細(xì)胞，而不存在于其他細(xì)胞C.人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后，DNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNAD.科學(xué)家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因重組在一起，從而使人凝血因子基因只在乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)11、下圖為利用PCR技術(shù)擴(kuò)增特定DNA片段的部分示意圖；圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。下列有關(guān)描述錯(cuò)誤的是（）

A.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)不需要解旋酶而需要耐高溫的DNA聚合酶B.引物是子鏈合成延伸基礎(chǔ)，子鏈沿著模板鏈的3’→5’方向延伸C.從理論上推測(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中只含有引物A的DNA片段所占的比例為15/16D.在第三輪循環(huán)產(chǎn)物中才開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段且占1/212、谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵過程中會(huì)生成大量的谷氨酸，經(jīng)加工后可制成味精。在其發(fā)酵過程中，發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4：1時(shí)，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3：1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選，也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得B.分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，有利于獲得更多的優(yōu)質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)品C.由題干信息可推知發(fā)酵過程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營(yíng)養(yǎng)成分的比例D.在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵無需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件13、某些細(xì)菌能產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶水解抗生素；給抗感染治療帶來很大困難。利用檢測(cè)試條可檢測(cè)細(xì)菌是否產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，試條左右兩側(cè)對(duì)稱含有一定濃度梯度的抗生素，并在一側(cè)添加克拉維酸（一種β-內(nèi)酰胺酶抑制劑）。將兩個(gè)含不同抗生素的檢測(cè)試條放置在涂布有待檢菌株的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)候后結(jié)果如下圖所示。下列說法正確的是（）

A.抗生素的大量使用會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶細(xì)菌的出現(xiàn)B.由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，越靠近試條兩端的抗生素濃度越大C.該菌能產(chǎn)生β-酰胺酶，試條1中克拉維酸添加在試條右側(cè)D.使用試條2中所含抗生素治療該菌感染的效果更好14、研究人員從土壤中篩選得到酵母菌纖維素酶高產(chǎn)菌株；并對(duì)其降解纖維素的條件進(jìn)行了研究。據(jù)圖分析正確的是（）

A.篩選該高產(chǎn)菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)B.探究最適溫度時(shí)應(yīng)盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右C.該酵母菌高產(chǎn)菌株產(chǎn)生纖維素酶的最適溫度是35℃D.利用該高產(chǎn)菌株降解纖維素時(shí)需嚴(yán)格保持厭氧環(huán)境15、下圖為某個(gè)基因的部分片段，關(guān)于該結(jié)構(gòu)的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.①所圈定的部位是腺嘌呤B.DNA連接酶作用于②處C.限制酶作用于③處D.解旋酶作用于④處16、我國(guó)科研人員在實(shí)驗(yàn)室中通過構(gòu)建多種酶催化體系的方法，首次實(shí)現(xiàn)了在細(xì)胞外從二氧化碳固定到合成淀粉的過程。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.可從不同物種的基因中擴(kuò)增得到多酶催化體系中的目標(biāo)酶基因B.在多酶催化體系中，可能會(huì)因?yàn)槊傅淖钸m反應(yīng)條件不同而使反應(yīng)中斷C.該方法可在分子水平上直接改變氨基酸的序列，實(shí)現(xiàn)對(duì)酶特性的改造和優(yōu)化D.若該科研成果成熟后推廣應(yīng)用有助于擺脫耕地和自然環(huán)境限制，解決糧食危機(jī)評(píng)卷人得分三、填空題(共6題，共12分)17、動(dòng)物細(xì)胞融合的意義：克服了______，成為研究_____、_____、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。18、本課題對(duì)能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對(duì)分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定，還需要借助生物化學(xué)的方法。在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會(huì)使培養(yǎng)基的________________，pH______________。因此，我們可以通過檢測(cè)培養(yǎng)基______________來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。19、酵母菌是______________微生物。酵母菌進(jìn)行有氧呼吸的反應(yīng)式如下：______________________；酵母菌進(jìn)行無氧呼吸的反應(yīng)式如下：_________________。20、將DNA粗提取液在____________℃的恒溫水浴箱中保溫10—15分鐘。21、通過____________的方式，來控制NaCL溶液的濃度，使DNA在鹽溶液中溶解或析出。22、在我國(guó)市場(chǎng)上究竟有多少種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品呢？一位同學(xué)帶著這樣的問題，進(jìn)行了調(diào)查并將結(jié)果歸納成下圖?

對(duì)該同學(xué)的調(diào)查和歸納結(jié)果，有人表示認(rèn)同，有人提出質(zhì)疑?質(zhì)疑者認(rèn)為：目前我國(guó)市場(chǎng)上根本沒有大豆?玉米或甜菜的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?我們的觀點(diǎn)是什么_____？評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共6分)23、雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯(cuò)誤24、蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共21分)25、為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶；研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656個(gè)堿基對(duì)），利用基因工程大量制備琢α-淀粉酶，實(shí)驗(yàn)流程見下圖。請(qǐng)回答下列問題：

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增α-淀粉酶基因前；需先獲得細(xì)菌的_________。

（2）為了便于擴(kuò)增的DNA片段與表達(dá)載體連接；需在引物的____端加上限制性酶切位點(diǎn)，且常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)，主要目的是________________。

（3）進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)；反應(yīng)的溫度和時(shí)間需根據(jù)具體情況進(jìn)行設(shè)定，下列選項(xiàng)中_______的設(shè)定與引物有關(guān)，________的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度有關(guān)。（填序號(hào)）

①變性溫度②退火溫度③延伸溫度④變性時(shí)間⑤退火時(shí)間⑥延伸時(shí)間。

（4）下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼α-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列：

圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含___個(gè)密碼子；如虛線框后的序列未知，預(yù)測(cè)虛線框后的第一個(gè)密碼子最多有__種。

（5）獲得工程菌表達(dá)的α-淀粉酶后；為探究影響酶活性的因素，以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測(cè)定酶活性，結(jié)果如下：

。緩沖液。

50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4

50mmol/LTris-HCl

50mmol/LGly-NaOH

pH

6．0

6．5

7．0

7．5

7．5

8．0

8．5

9．0

9．0

9．5

10．0

10．5

酶相對(duì)活性%

25．4

40．2

49．8

63．2

70．1

95．5

99．5

85．3

68．1

63．7

41．5

20．8

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，初步判斷該α-淀粉酶活性最高的條件為______。26、鼠傷寒沙門氏菌的野生型菌株（his+）可在基本培養(yǎng)基（含微量組氨酸）上生長(zhǎng)形成菌落，而突變型的組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株（his-）不能合成組氨酸；無法在基本培養(yǎng)基上形成菌落。利用his菌株可檢測(cè)環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑（誘發(fā)his-菌株突變）?；卮鹣铝袉栴}：

(1).基本培養(yǎng)基的成分主要包括_____。制備基本固體培養(yǎng)基的操作：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。倒平板時(shí)應(yīng)注意：_____。

(2).檢測(cè)是否存在化學(xué)致癌劑時(shí)，用_____法將his-菌株接種于基本培養(yǎng)基上，使其密集均勻分布在平板上，將浸泡過待測(cè)化合物的濾紙片貼于平板中央。若培養(yǎng)基滅菌合格，則可能影響該檢測(cè)結(jié)果的兩個(gè)重要因素是_____。若圖A為對(duì)照組，B為實(shí)驗(yàn)組，則A組濾紙片的處理方法是_____。經(jīng)正確檢驗(yàn)后，結(jié)果如B所示，則實(shí)驗(yàn)結(jié)果和結(jié)論為_____。

(3).使用過的培養(yǎng)基在丟棄之前應(yīng)做的處理及目的是_____。27、黃粉蟲可以吞食；降解塑料；利用黃粉蟲腸道微生物對(duì)白色污染進(jìn)行生物降解，是一種綠色環(huán)保的處理工藝。下圖是從黃粉蟲腸道中分離、純化微生物的過程，回答下列問題：

(1)富集培養(yǎng)基按物理性質(zhì)屬于___________培養(yǎng)基，不含有_____________，但含有酵母膏、蛋白豚。酵母膏能提供所需的__________________。

(2)選擇培養(yǎng)基中需加入_______________作為唯一碳源，稀釋涂布后最后一組可能形成菌落。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法有_______________和利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。

(3)如果對(duì)白色污染進(jìn)行傳統(tǒng)填埋、焚燒容易造成二次污染，黃粉蟲腸道微生物對(duì)白色污染的降解______（填“會(huì)”或“不會(huì)”）造成二次污染。評(píng)卷人得分六、綜合題(共2題，共14分)28、中科院動(dòng)物研究所小組已培自出中國(guó)首例轉(zhuǎn)基因獼猴。這研究成果標(biāo)志著中國(guó)科學(xué)家在靈長(zhǎng)類轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究方面達(dá)到世界領(lǐng)先水平。圖是轉(zhuǎn)基因獼猴培育過程示意圖；據(jù)圖回答。

（1）過程①需要使用的酶是________。過程②中常用__________技術(shù)將目的基因?qū)胧芫选?/p>

（2）如果⑤過程在體外進(jìn)行，那么卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到__________，精子需要獲能。該過程中防止多精入卵受精的第二道屏障是__________________。

（3）在體外培養(yǎng)受精卵時(shí)，要維持無菌、無毒的環(huán)境，提供營(yíng)養(yǎng)和適宜溫度、pH值，同時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有________________。

（4）圖中⑦過程稱為___________，為使代孕雌猴與供體雄猴生殖器官的生理變化相同，此前需對(duì)代孕雌猴做__________處理。

（5）若要同時(shí)獲得多只與此轉(zhuǎn)基因獼猴相同的小猴，可采用胚胎分割技術(shù)，在對(duì)囊胚階段的胚胎分制時(shí)，要注意_______________________________29、生物武器的作用途徑有哪些？_____參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、C2、A【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。

【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本流程是：從③預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→①設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→②推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→④找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列；A正確；

故選A。3、C【分析】【分析】

1；據(jù)表分析：Ⅰ培養(yǎng)基的特點(diǎn)是缺氮；能在這樣的培養(yǎng)基上存活的只能是固氮微生物；Ⅱ培養(yǎng)基的特點(diǎn)是沒有有機(jī)碳源，是培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基；Ⅲ培養(yǎng)基是適宜異養(yǎng)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。

2；甲能在Ⅰ中正常生長(zhǎng)繁殖；而乙和丙都不能，而Ⅰ培養(yǎng)基缺氮，說明甲能夠自身固氮，屬于固氮微生物；乙能在Ⅱ中正常生長(zhǎng)繁殖，而甲和丙都不能，Ⅱ培養(yǎng)基中沒有有機(jī)碳源，說明乙能夠合成有機(jī)物，屬于自養(yǎng)微生物；而丙不能在Ⅰ培養(yǎng)基，說明不能固氮；又不能在Ⅱ培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，說明不能合成有機(jī)物，只能在Ⅲ培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，說明屬于異養(yǎng)微生物。

【詳解】

A；由分析可知；乙屬于自養(yǎng)微生物，A錯(cuò)誤；

B；由分析可知；甲不是自養(yǎng)微生物，B錯(cuò)誤；

C；甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物；C正確；

D；甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物；D錯(cuò)誤。

故選C。4、B【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性；其過程是：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育植株（新植體）。

【詳解】

A；離體的紅豆杉組織細(xì)胞通過纖維素酶和果膠酶分散處理后直接進(jìn)行懸浮培養(yǎng)；A錯(cuò)誤；

B；懸浮培養(yǎng)液中細(xì)胞脫分化形成愈傷組織；大多數(shù)細(xì)胞在形態(tài)上大小相差不大，細(xì)胞的核-質(zhì)比率大，胞質(zhì)濃厚，液泡化程度高，B正確；

C；脫分化過程一般細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素含量比值小于1；C錯(cuò)誤；

D；植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中植物細(xì)胞生長(zhǎng)沒有接觸抑制；但是受營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的影響，不可能無限擴(kuò)大培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。

故選B。5、C【分析】【分析】

基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因；而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，如cDNA文庫（以mRNA為模板，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA，與適當(dāng)?shù)妮d體連接后轉(zhuǎn)入受體菌，則每個(gè)細(xì)菌含有一段cDNA，并能繁殖擴(kuò)增，這樣包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細(xì)胞的cDNA文庫）。

【詳解】

A；由于cDNA文庫是以mRNA為模板；經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA，所以形成的cDNA中只包含基因結(jié)構(gòu)中編碼區(qū)的部分序列，所以該文庫保存的人類基因沒有完整的基因結(jié)構(gòu)，A正確；

B；探針是可以與被檢測(cè)的目的基因序列進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的帶標(biāo)記的單鏈DNA片段；其中的標(biāo)記可以是熒光或者放射性同位素標(biāo)記，B正確；

C；凡是在胰島B細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的基因；都可以用PCR技術(shù)從該文庫篩選出目的基因，C錯(cuò)誤；

D；由于呼吸酶基因在胰島B細(xì)胞內(nèi)能夠表達(dá)；所以該基因文庫還可能存在呼吸酶的相關(guān)基因，D正確。

故選C。6、C【分析】【分析】

1；用谷物釀制食醋經(jīng)歷的三個(gè)主要發(fā)酵過程為：糖化→酒化→醋化。分別是淀粉在微生物的作用下水解成葡萄糖；葡萄糖在微生物的作用下分解成乙醇和二氧化碳（在無氧的條件下），乙醇被微生物在有氧的環(huán)境下氧化成乙酸。

2；在制作泡菜時(shí)所配制的泡菜鹽水要煮沸；以殺滅鹽水中的微生物，防止雜菌污染。泡菜制作過程中，溫度過高、食鹽用量過低、腌制時(shí)間過短、容易造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。

3；采用較低溫度（一般在60～82℃）；在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)，對(duì)食品進(jìn)行加熱處理，達(dá)到殺死微生物營(yíng)養(yǎng)體的目的，是一種既能達(dá)到消毒目的又不損害食品品質(zhì)的方法。由法國(guó)微生物學(xué)家巴斯德發(fā)明而得名。巴氏殺菌熱處理程度比較低，一般在低于水沸點(diǎn)溫度下進(jìn)行加熱，加熱的介質(zhì)為熱水?！侗鄙骄平?jīng)》中記載：“每壇加蠟三錢，竹葉五片，隔水煮開，乘熱灌封壇口?！边@種用加熱殺菌保存酒液的原理和方法，與釀酒中普遍使用的巴氏殺菌法基本相同。

4；腐乳發(fā)酵過程中；豆腐就是毛霉的固體培養(yǎng)基；現(xiàn)代腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格無菌條件下將優(yōu)良的毛霉菌種接種在豆腐上；味咸是因?yàn)榧恿他}，加鹽的目的除了調(diào)味外，還有抑制微生物的生長(zhǎng)，避免腐敗變質(zhì)以及具有析出豆腐中的水分、使豆腐變硬的作用，酒的含量一般控制在12%左右，目的是抑制微生物生長(zhǎng)，同時(shí)使腐乳具有獨(dú)特的香味。

【詳解】

A；根據(jù)以上分析可知；①介紹的是泡菜制作技術(shù)，配制的鹽水要煮沸冷卻后使用，以殺滅鹽水中的微生物，防止雜菌污染，同時(shí)鹽水的鹽度不宜過大，避免使發(fā)酵過程中的乳酸菌大量失水而死亡，A正確；

B；蠟封壇口可以創(chuàng)造無氧環(huán)境；有助于陳酒的儲(chǔ)藏；另外隔水煮開即加熱可以殺菌，B正確；

C；酵母菌發(fā)酵的適宜溫度為18~25℃；而醋酸菌發(fā)酵的適宜溫度為30~35℃，所以③中從酒化到醋化的過程需要移至溫度較高的環(huán)境中進(jìn)行，同時(shí)需要通氧，C錯(cuò)誤；

D；從微生物培養(yǎng)的角度看；豆腐是固體培養(yǎng)基，腐乳制作時(shí)主要利用的是空氣中的毛霉，接種時(shí)不需要對(duì)其進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，D正確。

故選C。7、C【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的過程為：離體的植物組織；器官或細(xì)胞經(jīng)過脫分化（避光）形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過再分化（需光）過程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育形成植株。

【詳解】

A；由于植物頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少；甚至無病毒，因此，切取一定大小的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病，從而獲得脫毒苗，A正確；

B；在植物的組織培養(yǎng)過程中；由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷增殖的狀態(tài)，因此它們?nèi)菀资艿脚囵B(yǎng)條件和誘變因素(如射線、化學(xué)物質(zhì)等)的影響而產(chǎn)生突變，B正確；

C；植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中蔗糖除供能之外；還具有調(diào)節(jié)培養(yǎng)基內(nèi)的滲透壓等作用，向鐵皮石斛試管苗培養(yǎng)基中滴加蔗糖有可能導(dǎo)致培養(yǎng)基滲透壓過高，不利于組織培養(yǎng)，不能增加生物堿提取產(chǎn)量，C錯(cuò)誤；

D；植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠；根據(jù)酶的專一性原理，要分解植物細(xì)胞壁應(yīng)該用纖維素酶和果膠酶，蝸牛消化道提取液含有纖維素酶和果膠酶，因此用蝸牛消化道提取液來處理石斛細(xì)胞，可以去除鐵皮石斛的細(xì)胞壁，從而形成原生質(zhì)體，D正確。

故選C。8、D【分析】【分析】

培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水；碳源、氮源和無機(jī)鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因?yàn)樗鼈儊碓从趧?dòng)物原料，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。

【詳解】

A；對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌；通常使用高壓蒸汽滅菌法，A正確；

B；稀釋的目的是獲得菌落數(shù)在30-300之間、適于計(jì)數(shù)的平板；B正確；

C；能夠用于菌落計(jì)數(shù)的接種方法是稀釋涂布平板法；則圖示中所用接種工具應(yīng)為涂布器，C正確；

D；研究“使用公筷對(duì)餐后菜品細(xì)菌數(shù)量的影響”；需要統(tǒng)計(jì)所有的細(xì)菌，所以固體培養(yǎng)基X對(duì)菜品中的細(xì)菌酶沒選擇性，D錯(cuò)誤。

故選D。9、D【分析】【分析】

基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒；噬菌體、動(dòng)植物病毒。

【詳解】

A；限制酶大多來自原核生物；只能識(shí)別DNA分子的特定核苷酸序列，A錯(cuò)誤；

B；不同限制酶切割后；若黏性末端相同也能連接，B錯(cuò)誤；

C；基因工程中用到的質(zhì)粒多是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過人工改造的；C錯(cuò)誤；

D、T4DNA連接酶是從T4噬菌體中分離得到的；既可以連接粘性末端，也可以連接平末端，但連接平末端的效率相對(duì)較低，D正確。

故選D。二、多選題(共7題，共14分)10、B:C:D【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物：

(1)基因來源：藥用蛋白基因+乳腺組織特異性表達(dá)的啟動(dòng)子(原理：基因的選擇性表達(dá))。

(2)成果：乳腺生物反應(yīng)器。

(3)過程：將藥物蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起；導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中，最終培育的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)入泌乳期后，可以通過分泌的乳汁生產(chǎn)所需要的藥物。(只有在產(chǎn)下雌性動(dòng)物個(gè)體中，轉(zhuǎn)入的基因才能表達(dá))。

【詳解】

A；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；因此可用顯微注射技術(shù)將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入羊的受精卵，A正確；

B；在該轉(zhuǎn)基因羊中；人凝血因子存在于所有細(xì)胞中，但只在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，B錯(cuò)誤；

C；人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后；RNA聚合酶以DNA分子一條鏈為模板合成mRNA，C錯(cuò)誤；

D；科學(xué)家將人凝血因子基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起；從而使人凝血因子基因只在乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)，D錯(cuò)誤。

故選BCD。11、C:D【分析】【分析】

聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段：

1.PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2.PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸。

【詳解】

A；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)不需要解旋酶；該過程中氫鍵的斷裂是通過高溫完成的，而子鏈延伸過程需要耐高溫的DNA聚合酶，A正確；

B；引物是子鏈合成延伸基礎(chǔ)；即DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，也可以說子鏈沿著模板鏈的3’→5’方向延伸，B正確；

C、從理論上推測(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物共有24=16個(gè)DNA分子；其中有2個(gè)是模板鏈，只含有引物A的DNA片段即為與其中的一個(gè)模板鏈形成的1個(gè)DNA分子，因此，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中只含有引物A的DNA片段所占的比例為1/16，C錯(cuò)誤；

D、DNA復(fù)制為半保留復(fù)制，DNA復(fù)制n次，共形成2n個(gè)DNA，其中兩個(gè)DNA含有母鏈和子鏈（引物A或引物B），（2n-2）個(gè)DNA都含有子鏈（含有引物A和引物B）。第三輪循環(huán)即DNA復(fù)制3次；共形成8個(gè)DNA，其中2個(gè)DNA含有引物A或引物B，6個(gè)DNA含有引物A和引物B，其中只有2個(gè)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段，含量為1/4，D錯(cuò)誤。

故選CD。

【點(diǎn)睛】12、A:C【分析】【分析】

微生物發(fā)酵指的是利用微生物；在適宜的條件下，將原料經(jīng)過特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。谷氨酸棒狀桿菌為原核生物，為異養(yǎng)需氧型。

【詳解】

A；用于發(fā)酵的谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選；也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得，A正確；

B；發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵過程；B錯(cuò)誤；

C；由題意可知“在其發(fā)酵過程中；發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4∶1時(shí)，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3∶1時(shí)，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增”，說明在發(fā)酵過程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營(yíng)養(yǎng)成分的比例以保證先獲得大量谷氨酸棒狀桿菌，在獲得大量發(fā)酵產(chǎn)物的目的，C正確；

D；谷氨酸棒狀桿菌為需氧菌；其發(fā)酵過程需要適宜的溫度和pH，所以在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件，D錯(cuò)誤。

故選AC。13、B:C:D【分析】【分析】

題干分析；某些細(xì)菌能產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶水解抗生素，從而產(chǎn)生抗藥性。試條兩側(cè)含有抗生素，并在試條一側(cè)添加β-內(nèi)酰胺酶抑制劑（能抑制β-內(nèi)酰胺酶的活性，從而不能水解抗生素），將其放在不含有抗生素的待測(cè)菌株上培養(yǎng)，一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn)，試條1右側(cè)和試條2的左右兩側(cè)都出現(xiàn)了抑菌圈，說明該部位的菌株能產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶。

【詳解】

A；基因突變具有不定向性；抗生素使用之前，產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的細(xì)菌已經(jīng)出現(xiàn)，抗生素只是起到選擇作用，A錯(cuò)誤；

B；由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知；越靠近試條兩端的抑菌圈較大，說明抗生素濃度較大，B正確；

C；該菌能產(chǎn)生β-酰胺酶；使用克拉維酸能抑制該菌產(chǎn)生的β-酰胺酶的活性，進(jìn)而不能抵抗抗生素，試條1右側(cè)出現(xiàn)抑菌圈，左側(cè)沒有出現(xiàn)抑菌圈，說明試條1中克拉維酸添加在試條右側(cè)，C正確；

D；試條2左右兩側(cè)的抑菌圈菌大于試條1；說明使用試條2中所含抗生素治療該菌感染的效果更好，D正確。

故選BCD。

【點(diǎn)睛】14、A:B【分析】【分析】

分解纖維素微生物的分離實(shí)驗(yàn)原理：

（1）土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)。

（2）在培養(yǎng)基中加入剛果紅；可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；篩選該高產(chǎn)菌株需要在纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；A正確；

B；由pH與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當(dāng)pH為9時(shí)，纖維素酶的活性最高，故在探究最適溫度時(shí)應(yīng)盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右，B正確；

C；由溫度與纖維素酶活性的曲線圖分析可知；當(dāng)溫度為35℃時(shí)纖維素酶的活性最大，但是由于缺少35℃之后的溫度實(shí)驗(yàn)組，故無法判斷該酵母菌高產(chǎn)菌株產(chǎn)生纖維素酶的最適溫度是35℃，C錯(cuò)誤；

D；酵母菌是兼性厭氧微生物；在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，故在降解初期需要給酵母菌提高有氧環(huán)境，以保證酵母菌的數(shù)量，D錯(cuò)誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】15、A:C:D【分析】【分析】

題圖分析：該圖為某個(gè)基因的部分片段；①不但包括腺嘌呤．還包括側(cè)鏈上的磷酸的脫氧核糖，為腺嘌呤脫氧核苷酸；②是磷酸和脫氧核糖之間的磷酸二酯鍵；③是堿基之間的氫鍵；④是含氮堿基和脫氧核糖之間的化學(xué)鍵。

【詳解】

A；圖示為DNA結(jié)構(gòu)模式圖；圖中①所圈定的部位是腺嘌呤脫氧核苷酸，A錯(cuò)誤；

B；DNA連接酶能使兩個(gè)脫氧核苷酸之間的化學(xué)鍵②磷酸二酯鍵形成；B正確；

C；刪去；圖中沒有⑤，限制酶作用于磷酸二酯鍵。

D；解旋酶作用于堿基對(duì)之間的氫鍵③處；使氫鍵斷開，D錯(cuò)誤。

故選ACD。

【點(diǎn)睛】16、A:B:D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程：是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及與其生理功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。

【詳解】

A；從不同物種的基因中擴(kuò)增得到多酶催化體系中的目標(biāo)酶基因后；可對(duì)獲得的目的基因利用PCR技術(shù)在體外反應(yīng)體系中擴(kuò)增，A正確；

B；酶的作用條件較溫和；不同的酶其適宜的溫度和pH不同，在多酶催化體系中，可能會(huì)因?yàn)槊傅淖钸m反應(yīng)條件不同而使反應(yīng)中斷，B正確；

C；該方法在分子水平上；通過改變基因的堿基序列，間接改變氨基酸的序列，從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)對(duì)酶特性的改造和優(yōu)化，C錯(cuò)誤；

D；該科研實(shí)現(xiàn)了在細(xì)胞外從二氧化碳固定到合成淀粉的過程；若成熟后推廣應(yīng)用有助于擺脫耕地和自然環(huán)境限制，解決糧食危機(jī)，D正確。

故選ABD。三、填空題(共6題，共12分)17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】遠(yuǎn)緣雜交的不親和性細(xì)胞遺傳細(xì)胞免疫、18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強(qiáng)升高pH的變化酚紅指示劑紅19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO220、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】60—7521、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】滴加蒸餾水逐漸稀釋2mol/L濃度的NaCL溶液22、略

【分析】【詳解】

目前我國(guó)市場(chǎng)上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來源看，進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜，故我國(guó)市場(chǎng)上有大豆等的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?！窘馕觥磕壳拔覈?guó)市場(chǎng)上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來源看，進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜。四、判斷題(共2題，共6分)23、A【分析】【詳解】

雄性動(dòng)物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力，精子獲能的過程不是獲得能量的過程，是獲得受精能力的過程，可在獲能液或受精液中完成，故正確。24、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。

故正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共21分)25、略

【分析】【分析】據(jù)圖分析；圖示為利用基因工程大量制備α-淀粉酶的過程，目的基因是α-淀粉酶基因，與體構(gòu)建基因表達(dá)載體，然后將目的基因?qū)氪竽c桿菌，接著對(duì)目的基因進(jìn)行檢測(cè)與鑒定，最后利用工程菌培養(yǎng)獲得大量的α-淀粉酶產(chǎn)品。

【詳解】（1）α-淀粉酶基因來自于海洋細(xì)菌；因此為了利用PCR技術(shù)擴(kuò)增α-淀粉酶基因，必須先獲得細(xì)菌的基因組DNA。

（2）目的基因與運(yùn)載體結(jié)合前需要用限制酶對(duì)兩者進(jìn)行切割；延伸是在引物的3’端延伸，為了保證目的基因的完整性，因此需在引物的5’端加上限制性酶切位點(diǎn)，且為了使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)。

（3）進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)；退火溫度的設(shè)定與引物有關(guān)，延伸時(shí)間的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度有關(guān)。

（4）根據(jù)題意分析；虛線框內(nèi)mRNA片段內(nèi)含有24個(gè)堿基，每3個(gè)堿基構(gòu)成一個(gè)密碼子，因此包含24÷3=8個(gè)密碼子；構(gòu)成mRNA的堿基有4種，若虛線框后的序列未知，預(yù)測(cè)虛線框后的第一個(gè)密碼子最多有4×4-3=13種。

（5）根據(jù)表格數(shù)據(jù)分析可知，在pH為8.5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl的條件下；α-淀粉酶相對(duì)活性為99.5%，活性最高。

【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是基因工程的四個(gè)基本步驟以及PCR技術(shù)的過程、條件，回憶相關(guān)知識(shí)點(diǎn)和注意事項(xiàng)，結(jié)合提示分析答題?！窘馕觥炕蚪MDNA5’使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連②⑥813pH為8．5，緩沖液為50mmol/LTris-HCl26、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基的制作流程一般為：計(jì)算→稱量→溶化（包括瓊脂）→調(diào)節(jié)pH→分裝→滅菌→倒平板→（冷卻后）倒置平板。微生物接種是微生物學(xué)研究中最常用的基本操作；主要用于微生物的分離純化。具體來說，就是在無菌條件下，用接種環(huán)或接種針等專用工具，從一個(gè)培養(yǎng)皿（上面可能存在各種雜菌落）挑取所需的微生物，轉(zhuǎn)接到另一個(gè)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的方法。【小問1】

培養(yǎng)基的組成成分包括碳源；氮源、水、無機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等。倒平板時(shí)；應(yīng)待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右倒平板，平板冷凝后要將平板倒置，倒平板過程中應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以防止雜菌污染?！拘?】

題干中表明菌體密集均勻分布在平板上；所以是稀釋涂布平板法接種。培養(yǎng)基滅菌合格，影響因素應(yīng)為除培養(yǎng)基滅菌以外可能的影響因素，因此，可能操作過程中是否無菌操作，以及使用的濾紙條是否滅菌合格等。A為對(duì)照組，應(yīng)除自變量以外，其他條件都相同，因此，處理方法為浸泡在無菌水中處理后貼于平板中央；實(shí)驗(yàn)中能觀察到出現(xiàn)野生型菌株菌落，說明環(huán)境中存在化學(xué)致癌劑導(dǎo)致突變型菌株突變成野生型菌株。【小問3】

使用過的培養(yǎng)基應(yīng)滅菌后再丟棄；以防止培養(yǎng)基中的有害物質(zhì)污染環(huán)境或感染實(shí)驗(yàn)操作者。

【點(diǎn)睛】

本題考查培養(yǎng)基的成分、制備過程以及微生物的接種方法等相關(guān)知識(shí)，意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的識(shí)記和理解能力?！窘馕觥俊拘☆}1】①.碳源；氮源、水和無機(jī)鹽②.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)；在酒精燈火焰旁附近倒平板。