2025年湘教新版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年湘教新版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、甘草酸是中藥甘草中的主要活性成分。為了快速檢測甘草酸；科研人員利用細胞工程技術制備了抗甘草酸的單克隆抗體，其基本操作過程如圖。相關敘述正確的是。

A.過程①注射相應抗原后應立即從小鼠脾臟中提取細胞甲B.過程②誘導細胞融合，利用了細胞膜的選擇透過性C.過程③、④的篩選方法相同，細胞丙、丁遺傳物質(zhì)相同D.過程⑤無論在體內(nèi)還是體外進行，細胞丁都可大量增殖2、甲乙兩種遠緣植物體細胞融合會導致一方的染色體被排出；若甲細胞的染色體在融合前斷裂，形成的染色體片段在細胞融合后可能不會被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個細胞的染色體上而留存在雜種細胞中。依據(jù)該原理，將抗黑脛病的黑芥與不抗黑脛病的甘型油菜進行體細胞雜交獲得了抗黑脛病的甘型油菜新品種，過程如下圖所示。下列說法錯誤的是（）

A.④過程用到了植物組織培養(yǎng)技術B.抗黑脛病的甘型油菜染色體上整合了黑芥的染色體片段C.②紫外線照射劑量不同會導致黑芥染色體斷裂程度不同D.可利用聚乙二醇或滅活的病毒誘導兩種植物原生質(zhì)體融合3、生物技術安全性和倫理問題是社會關注的熱點，下列敘述錯誤的是（）A.要靠確鑿的證據(jù)和嚴謹?shù)倪壿媮硭伎嫁D基因技術的影響B(tài).設計試管嬰兒實質(zhì)是選擇性移植體外受精形成的胚胎，應予以禁止C.基因篩檢可能幫助人類及早預防某些遺傳性疾病，但也會引發(fā)基因歧視問題D.利用轉基因技術制造的新型致病菌可能讓大批受感染者突然發(fā)病而又無藥可醫(yī)4、基因工程產(chǎn)物可能存在著一些安全性問題，但不必擔心的是（）A.四倍體轉基因鯉魚與正常鯉魚的雜交，導致自然種群被淘汰B.載體的標記基因（如抗生素抗性基因）可能指導合成有利于抗性進化的產(chǎn)物C.目的基因（如殺蟲基因）本身編碼的產(chǎn)物可能會對人體產(chǎn)生毒性D.目的基因通過花粉的散布轉移到其他植物體內(nèi)，從而可能打破生態(tài)平衡5、血清白蛋白是血液的重要組成成分，具有運輸物質(zhì)、抗凝血等生理功能。臨床上人血清白蛋白主要作為血漿容量擴充劑廣泛應用于出血性休克、燒傷、癌癥和白蛋白過少癥的治療。研究人員利用農(nóng)桿菌轉化法將人血清白蛋白基因?qū)胨九呷榧毎?，成功培育出能產(chǎn)生人血清白蛋白的轉基因水稻。下列分析錯誤的是（）A.在構建基因表達載體時，常用同種限制酶對含人血清白蛋白基因的DNA片段和Ti質(zhì)粒進行酶切B.人血清白蛋白基因應插在啟動子和終止子之間C.利用PCR技術擴增人血清白蛋白基因時，將溫度調(diào)整到90℃以上的目的是使DNA變性D.水稻胚乳細胞中能檢測到人血清白蛋白基因及相應的RNA，說明轉基因水稻培育成功6、某同學選用新鮮成熟的葡萄制作果酒和果醋，下列相關敘述正確的是（）A.果酒發(fā)酵時，每日放氣需迅速，避免空氣回流入發(fā)酵容器B.果酒發(fā)酵時，用斐林試劑檢測葡萄汁中還原糖含量變化，磚紅色沉淀逐日增多C.果醋發(fā)酵時，發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量明顯少于果酒發(fā)酵時D.果醋發(fā)酵時，用重鉻酸鉀測定醋酸含量變化時，溶液灰綠色逐日加深7、下列關于果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的敘述，正確的是（）A.制作泡菜的微生物是一種需氧型細菌B.制作果醋的乳酸菌，屬于嚴格的厭氧型微生物C.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵D.利用酵母菌釀酒時，發(fā)酵時間越長，酵母菌產(chǎn)生酒精的速率就越快8、細胞中的DNA分子復制過程中，新合成的鏈始終沿著5'端向3端延伸，因此一條鏈的合成是連續(xù)的，另一條鏈是不連續(xù)的（如下圖）。下列敘述錯誤的是（）

A.圖中DNA分子是邊解旋邊進行復制的B.圖中不連續(xù)片段需通過磷酸二酯鍵連接C.新合成的兩條子鏈（A+T）/（G+C）相同D.PCR過程中有一條鏈的合成也是不連續(xù)的9、下列哪種生物技術能有效地打破物種的界限，定向改造生物，培育新的農(nóng)作物優(yōu)良品種（）A.基因工程育種B.誘變育種C.雜交育種D.單倍體育種評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)10、根據(jù)某基因上游和下游的堿基序列；設計合成了用于該基因PCR的兩段引物（單鏈DNA）。引物與該基因變性DNA（單鏈DNA）結合為雙鏈DNA的過程稱為復性。下圖是兩引物的Tm（引物熔解溫度，即50%的引物與其互補序列形成雙鏈DNA分子時的溫度）測定結果，以下分析正確的是（）

A.兩引物分別與DNA的兩條互補單鏈結合，是子鏈延伸的起點B.PCR過程中，復性溫度應低于引物的Tm值以提高PCR效率C.若兩引物的脫氧核苷酸數(shù)相同，推測引物2的（G＋C）含量較高D.適當減少引物2的脫氧核苷酸數(shù)，可使其Tm值接近引物111、下列有關哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，錯誤的是（）A.克隆羊、試管羊、轉基因羊的繁殖方式都是有性生殖B.胚胎干細胞在飼養(yǎng)層細胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài)C.受精時防止多精入卵的兩屏障是頂體反應和卵細胞膜反應D.滋養(yǎng)層細胞在囊胚期發(fā)育成胎膜和胎盤并可用于性別鑒定12、某種病毒的主要表面抗原為S蛋白，用S蛋白制備的單克隆抗體可用于該種病毒的檢測。下列說法正確的是（）

A.B淋巴細胞分離自經(jīng)S蛋白免疫過的小鼠B.稀釋培養(yǎng)后多孔玻璃板中的雜交瘤細胞數(shù)目可能不到細胞總數(shù)的一半C.集落①的細胞既能無限增殖又能產(chǎn)生單克隆抗體D.集落②～④的細胞可用于擴大化培養(yǎng)生產(chǎn)單克隆抗體13、杜泊羊因其生長速度快、肉質(zhì)好等優(yōu)點，成為受廣大消費者喜歡的綿羊品種。下圖是科研工作者通過胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程。下列說法正確的是（）

A.杜泊羊的快速繁殖過程涉及動物細胞培養(yǎng)技術B.精子入卵后，被激活的卵母細胞完成減數(shù)分裂，進而排出第二極體C.受精作用結束后，受精卵即可進行有絲分裂和減數(shù)分裂D.在胚胎發(fā)育過程中，內(nèi)細胞團細胞發(fā)育成各種組織14、生活垃圾分類就是通過回收有用物質(zhì)減少生活垃圾的處置量，提高可回收物質(zhì)的純度增加其資源化利用價值，減少對環(huán)境的污染。目前，各地陸續(xù)頒布實施《生活垃圾管理條例》，生活垃圾分類已成為市民的日常生活方式。處理垃圾的有效方法之一是用微生物對其進行降解。下圖表示篩選高效降解淀粉菌種的過程。下列敘述正確的是（）

A.剩余飯菜、玻璃碎片、果皮果殼屬于濕垃圾B.菌落①②透明圈大小不同是兩個菌群對碘液分解能力不同C.若垃圾分類不當混入過期的抗生素或電池等會抑制微生物生長D.圖中將菌液接種到培養(yǎng)基的方法是釋涂布平板法15、下列有關微生物的分離與培養(yǎng)實驗的敘述，正確的是（）A.倒平板前，為了防止雜菌污染，需要將錐形瓶口通過酒精燈火焰B.倒平板時，應將培養(yǎng)皿打開一條略大于瓶口的縫隙，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌后應立即挑取菌落D.用移液器吸取相應的菌液前，需要將樣液充分搖勻16、熒光原位雜交可用熒光標記的特異DNA片段為探針；與染色體上對應的DNA片段結合，從而將特定的基因在染色體上定位。下列說法正確的是（）

A.由圖1可知，DNA探針的本質(zhì)是熒光標記的DNA片段，其基本單位是脫氧核苷酸B.由圖2可知，高溫可以使雙鏈DNA分子中的氫鍵斷裂形成DNA單鏈C.圖2中兩條姐妹染色單體中最多可有2條熒光標記的DNA片段D.若C分別代表不同來源的一個染色體組，已知AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標記。若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則F1有絲分裂中期的細胞中可觀察到6個熒光點評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)17、纖維素酶是一種__________，一般認為它至少包括三種組分，即__________、___________和_______________，前兩種酶使纖維素分解成___________，第三種酶將纖維二糖分解成_____________。正是在這三種酶的協(xié)同作用下，纖維素最終被__________成葡萄糖，為微生物的生長提供營養(yǎng)，同樣，也可以為人類所利用。18、DNA連接酶與DNA聚合酶作用的異同:

DNA聚合酶只能將______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_____的末端，形成磷酸二酯鍵。19、最常用的載體是______，它是一種裸露的、結構簡單的、獨立于細菌染色體之外，并具有______能力的_____。20、動物細胞培養(yǎng)的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉入培養(yǎng)瓶中進行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。21、動物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，誘導動物細胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似，常用的誘導因素有______等。22、請寫出基因工程的概念：_________________。請寫出胚胎移植的概念：_____________________。請分別寫出植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的原理_________。評卷人得分四、判斷題(共4題，共28分)23、目前，種植的轉基因作物中以水稻和小麥最多，其次是轉基因棉花和油菜（______）A.正確B.錯誤24、我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗。（選擇性必修3P108）()A.正確B.錯誤25、我國對轉基因技術的方針是研究上要大膽，堅持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴格，堅持依法監(jiān)管。（選擇性必修3P104）()A.正確B.錯誤26、蛋白質(zhì)工程是一項難度很大的工程，主要是因為蛋白質(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級結構，而這種高級結構往往十分復雜。（選擇性必修3P95）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共24分)27、甘蔗是華南地區(qū)一種重要的經(jīng)濟作物。某研究團隊從甘蔗根際土壤中分離出了幾種固氮菌；實驗方案如下。

回答下列問題：

（1）Ashby培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分主要包括水、無機鹽_________等。實驗中第一次在Ashby培養(yǎng)基上接種的方法是________，在Ashy平板上進行多次接種的目的是_________________________

（2）固氮菌能產(chǎn)生固氮酶。為評估固氮酶的活性，可以檢測____________．

（3）研究發(fā)現(xiàn)，上述固氮菌還能產(chǎn)生IAA。取一定體積的固氮菌菌液離心，獲得上清液，現(xiàn)欲測定上清液中IAA的含量，請利用以下試劑，寫出實驗思路。_______

供選試劑：標準的1g/L的IAA母液，蒸餾水，S試劑(與IAA反應顯紅色，且顏色深淺與IAA濃度成正相關）28、赤霉素與其受體GID結合后；可以促進植物莖稈伸長。藍光能夠激活藍光受體CRY，抑制赤霉素的作用，為探究該機理，研究者分別構建了含有His-CRY和GST-GID融合基因的表達載體，表達出相應的融合蛋白。His和GST均為短肽，它們與其他蛋白形成的融合蛋白能與His或GST抗體結合，且不影響其他蛋白的結構和功能。

(1)構建含上述融合基因的表達載體。

①結合圖1分析，欲使His短肽連在CRY的氨基酸序列前面(氨基端)，則應在____________(填“F引物”或“R引物”)的___________(“5’”或“3’”)端加上His短肽的編碼序列，理由是________________。

②為使融合基因能與載體相連接，還需在F引物和R引物上添加相應的酶切位點序列，該序列應該位于His短肽編碼序列的_____________(填“5’”或“3’”)端。

③用同樣的方法擴增GST-GID融合基因；并構建相關表達載體。

(2)將兩個表達載體同時導人擬南芥細胞，一段時間后裂解細胞，將含有His抗體的磁珠加人裂解液中，充分孵育后收集磁珠，將磁珠上的蛋白(磁珠蛋白)分離下來，進行抗原-抗體雜交，結果如圖2。

①對細胞裂解液蛋白進行抗原-抗體雜交的目的是_______________。對磁珠蛋白進行His抗體檢測的目的是_________。

②圖示結果說明，藍光的作用機理是__________。29、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通過污染飼料引起畜禽中毒反應。CYP3A是豬體內(nèi)降解T-2毒素的關鍵酶，T-2毒素可誘導CYP3A基因表達水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（選填“初級”或“次級”）代謝產(chǎn)物，主要以_____方式進入豬細胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動子上游的兩個調(diào)控序列，為研究T-2毒素誘導CYP3A基因表達的機理，研究者首先將不同調(diào)控序列分別和CYP3A基因啟動子及熒光素酶基因（LUC基因）連接構建表達載體，再分別導入豬肝細胞，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入_____，適宜條件下進行培養(yǎng)；24h后檢測LUC酶活性，計算啟動子活性相對值，結果如圖1所示。據(jù)圖可知，B1和B2調(diào)控序列是CYP3A基因響應T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對CYP3A的誘導；B2是Spl的結合位點。研究者推測，NF-Y通過與B1結合，與Sp1共同調(diào)控CYP3A基因的表達。

①為證明Bl是NF-Y的結合位點，研究者依據(jù)B1序列制備了野生型和突變型探針，分別與豬肝細胞核蛋白提取物混合，實驗分組及結果如圖2．據(jù)實驗結果推測，第4組出現(xiàn)阻滯帶的原因是_____，進而推測第5組結果產(chǎn)生的原因是_____。

②研究者設計實驗進一步證明了NF-Y和Spl通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，實驗設計思路是：增大或縮小B1和B2兩者之間的距離，檢測CYP3A基因的啟動子活性。據(jù)此分析，實驗假設是_____。評卷人得分六、綜合題(共2題，共10分)30、已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)（P），該蛋白質(zhì)是一種轉運蛋白，由305個氨基酸組成。如果將P分子中第158位的絲氨酸變成亮氨酸，第240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸，改變后的蛋白質(zhì)（P1）不但保留P的功能；而且具有了酶的催化活性。回答下列問題。

（1）從上述資料可知，若要改變蛋白質(zhì)的功能，可以考慮對蛋白質(zhì)的___________進行改造。

（2）以P基因序列為基礎，獲得P1基因的途徑有修飾____基因或合成____基因。所獲得的基因在表達時是遵循中心法則的，中心法則的全部內(nèi)容包括（以圖表示）____________。

（3）蛋白質(zhì)工程也被稱為第二代基因工程，其基本途徑是從預期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，通過___，進而確定相對應的脫氧核苷酸序列，據(jù)此獲得目的基因，再經(jīng)表達、純化獲得目標蛋白質(zhì)，之后還需要對該蛋白質(zhì)的生物_____進行鑒定。31、α1一抗胰蛋白酶（α1-AT）是下呼吸道中最主要的蛋白酶抑制劑，其在血清中含量越低，肺氣腫越易發(fā)生。α1-AT補充治療不僅是先天性α1-AT缺乏癥的主要治療方法，而且也為其他炎癥性肺疾病的治療開辟了新的途徑。我國科研人員通過基因工程的方法生產(chǎn)α1-AT并用于臨床，下圖是科研人員選用的載體（圖中bp表示堿基對，α1-AT基因為1182bp）?；卮鹣铝袉栴}。

注：質(zhì)粒除圖示部位外以及目的基因內(nèi)部和外部均無XbaI；SacI、HindIII三種限制酶的識別位點。

(1)基因表達載體的作用是____________（答出2點即可）。質(zhì)粒中與該作用相關的結構除圖中所示外，還有_____。

(2)科研人員在構建基因表達載體時選用的限制酶是XbaI和HindIII，操作成功后的基因表達載體長_____bp。沒有選擇限制酶XbaI和SacI的理由是_____。

(3)從人體獲得α1-AT基因后，通過PCR技術快速擴增。PCR反應需在一定的緩沖溶液中才能進行，理由是_____。在引物設計上，科研人員在兩種引物上分別添加了限制XbaI、HindIII的序列，理由是_____，添加位置應位于引物的_____（填“5'”或“3'”）端。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、D【分析】【詳解】

A.過程①注射相應抗原后應經(jīng)過一段時間；使小鼠產(chǎn)生漿細胞，再從小鼠脾臟中提取細胞甲，A項錯誤；

B.過程②誘導細胞融合；利用了細胞膜的流動性，B項錯誤；

C.過程③篩選雜交瘤細胞；過程④篩選能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，二者方法不同，C項錯誤；

D.過程⑤無論在體內(nèi)還是體外進行；細胞丁都可大量增殖，D項正確；

因此，本題答案選D。2、D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官；組織或細胞脫分化形成愈傷組織；然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。

題圖分析：①表示去壁過程；常用酶解法，該過程用到的酶是纖維素酶和果膠酶；②表示用紫外線照射使黑芥的染色體斷裂；③表示形成雜種細胞，④表示經(jīng)過組織培養(yǎng)獲得雜種植株的過程。

【詳解】

A；④過程用到了植物組織培養(yǎng)技術；該技術的原理是植物細胞的全能性，A正確；

B；題意顯示；“若其中一個細胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段在細胞融合后可能不會被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個細胞的染色體上而留存在雜種細胞中”，依據(jù)該原理，可推測抗黑脛病的甘型油菜染色體上整合了黑芥的染色體片段，因此獲得了抗黑脛病的性狀，B正確；

C；②表示用紫外線照射使黑芥的染色體斷裂；使用劑量不同可能會導致黑芥染色體斷裂程度不同，C正確；

D；過程③中常用物理法或化學法處理（聚乙二醇）誘導原生質(zhì)體融合；而滅活的病毒只能誘導動物細胞融合，D錯誤。

故選D。

【點睛】3、B【分析】設計試管嬰兒∶是指體外受精形成的胚胎在植入母體孕育前；根據(jù)人們的需要，將胚胎的一個細胞取出，進行某些基因檢測。當檢測結果符合人們需要是，再把胚胎植入母體孕育.否定的理由∶把試管嬰兒當作人體零配件工廠，是對生命的不尊重;早期生命也有活下去的權利，拋棄或殺死多余胚胎，無異于"謀殺"?？隙ǖ睦碛伞媒鉀Q了不育問題，提供骨髓中造血干細胞救治患者最好；最快捷的方法，提供骨髓造血干細胞并不會對試管嬰兒造成損傷。

【詳解】

A；人類對轉基因生物安全性的爭議集中在食物安全、生物安全和環(huán)境安全方面；生物技術的安全性要有確鑿的證據(jù)和嚴謹?shù)倪壿媮硭伎迹薪∪姆煞ㄒ?guī)做約束，要有科學的輿論導向，A正確；

B；試管嬰兒實質(zhì)是選擇性移植體外受精形成的胚胎；應禁止設計試管嬰兒，生殖性克隆，允許治療性生殖，B錯誤；

C；基因篩檢可能幫助人類及早預防某些遺傳性疾病；做到早發(fā)現(xiàn)法治療，如隱私泄露，也會引發(fā)基因歧視問題，C正確；

D；利用轉基因技術制造的新型致病菌；有一些人類從來沒有接觸過的致病菌，可能讓大批受感染者突然發(fā)病而又無藥可醫(yī)，這樣，施放者便可以在敵方公眾中造成極度恐慌，達到不戰(zhàn)而勝的目的，D正確。

故選B。

【點睛】

4、A【分析】【分析】

三倍體轉基因鯉魚在減數(shù)分裂形成配子時；同源染色體聯(lián)會發(fā)生紊亂，不能形成正常后代，不必擔心與正常鯉魚的雜交，所以不會導致自然種群被淘汰；

運載體的標記基因（如質(zhì)粒上抗生素抗性基因）以及目的基因（如殺蟲基因）本身編碼的產(chǎn)物；均可轉錄；翻譯指導抗性產(chǎn)物形成或形成毒性蛋白；

轉基因生物釋放到環(huán)境中（如抗蟲和抗病類轉基因植物）；除對害蟲和病菌致毒外，對環(huán)境中的許多有益生物也將產(chǎn)生直接或間接的不利影響，甚至會導致一些有益生物死亡。

【詳解】

A；四倍體轉基因鯉魚與正常鯉魚（二倍體）雜交；后代個體的體細胞中含三個染色體組，在減數(shù)分裂過程中聯(lián)會發(fā)生紊亂，不能產(chǎn)生正常生殖細胞，因此不能產(chǎn)生后代，不會導致自然種群被淘汰，A正確；

B；標記基因（如抗生素抗性基因）可能指導合成具有抗性的蛋白質(zhì)產(chǎn)物；B錯誤；

C；目的基因如殺蟲基因指導合成的產(chǎn)物具有殺蟲效果；除對害蟲和病菌致毒外，對環(huán)境中的許多有益生物也將產(chǎn)生直接或間接的不利影響，甚至會導致一些有益生物死亡，C錯誤；

D；目的基因可能有抗性基因和毒性基因；有可能存在一定的安全性問題，目的基因通過花粉散布到其他植物體內(nèi)，也有可能改變其特性導致生態(tài)環(huán)境的平衡遭到破壞，D錯誤。

故選A。5、D【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：1；目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。2、基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。3、將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。4、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術。（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；限制酶可以識別特定的DNA序列；并在特定的位點將DNA片段切開，形成黏性末端，因此用同種限制酶對含人血清白蛋白基因的DNA片段（目的基因）和Ti質(zhì)粒進行酶切，目的是形成相同的黏性末端，以便進行連接，A正確；

B；為了使目的基因在受體細胞表達；需要將人血清白蛋白基因應插在啟動子和終止子之間，B正確；

C；PCR過程中；當溫度升高到90℃以上，使DNA變性，即雙鏈解開，C正確；

D；為了確定轉基因水稻是否培育成功；還需要從個體水平鑒定水稻植株是否含有人的血清白蛋白，D錯誤。

故選D。6、C【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當氧氣；糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；酒精發(fā)酵是利用酵母菌的無氧呼吸；隨著果酒發(fā)酵的進行，裝置內(nèi)會產(chǎn)生氣體（二氧化碳），容器內(nèi)壓強大于外界，所以空氣不會回流，A錯誤；

B；果酒發(fā)酵時；發(fā)酵液中的葡萄糖不斷被消耗，因此用斐林試劑檢測葡萄汁中還原糖含量變化，磚紅色沉淀逐日減少，B錯誤；

C；以酒精為底物進行醋酸發(fā)酵；酒精與氧氣發(fā)生反應產(chǎn)生醋酸和水，幾乎沒有氣泡產(chǎn)生，發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量明顯少于果酒發(fā)酵時，C正確；

D；重鉻酸鉀用于檢測酒精；不能用于測定醋酸含量，D錯誤。

故選C。7、C【分析】【分析】

1；乳酸菌是厭氧細菌；在無氧的情況下能將葡萄糖分解成乳酸，可用于乳制品的發(fā)酵、泡菜的腌制等。乳酸菌種類很多，在自然界中分布廣泛，空氣、土壤、植物體表、人或動物的腸道內(nèi)都有乳酸菌分布。常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。

2、醋酸菌是好氧細菌，當O2；糖源都充足時能通過復雜的化學反應將糖分解成乙酸；當缺少糖源時則直接將乙醇轉化為乙醛；再將乙醛變?yōu)橐宜?。醋酸菌可用于制作各種風味的醋。多數(shù)醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃。

【詳解】

A；制作泡菜的微生物是乳酸菌是厭氧細菌；在無氧的情況下能將葡萄糖分解成乳酸，可用于乳制品的發(fā)酵、泡菜的腌制等，A錯誤；

B、制作果醋的微生物是醋酸菌，醋酸菌是好氧細菌，當O2；糖源都充足時能通過復雜的化學反應將糖分解成乙酸；當缺少糖源時則直接將乙醇轉化為乙醛；再將乙醛變?yōu)橐宜?，B錯誤；

C；家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵；以混合菌種的固體發(fā)酵及半固體發(fā)酵為主，C正確；

D；利用酵母菌釀酒時；發(fā)酵時間越長，剩余的營養(yǎng)物質(zhì)越少，酵母菌的代謝越弱，產(chǎn)生酒精的速率就越慢，D錯誤。

故選C。8、D【分析】【分析】

1；DNA復制的過程：

（1）解旋；

（2）以母鏈為模板進行堿基配對合成子鏈；

（3）子代DNA分子的形成兩條母鏈分別與各自決定的子鏈組成兩個完全相同的DNA分子。

2；復制的特點：

（1）邊解旋邊復制。

（2）復制方式：半保留復制。

3；復制的條件：模板（代DNA分子的兩條鏈）、原料（4種游離的脫氧核苷酸）、能量（ATP）、酶（解旋酶、DNA聚合酶）。

【詳解】

A；據(jù)圖分析；左側DNA雙鏈已經(jīng)打開并開始復制，而右側雙鏈沒有打開，說明改DNA分子是邊解旋邊進行復制的，A正確；

B；DNA每條鏈上相鄰兩個核苷酸之間是通過磷酸二酯鍵連接的；因此圖中不連續(xù)片段需通過磷酸二酯鍵連接，B正確；

C；在雙鏈DNA分子中；由于堿基互補配對原則中A只能與T配對、G只能與C配對，則（A+T）/（G+C）的比值在單雙鏈中是相等的，因此新合成的兩條子鏈（A+T）/（G+C）相同，C正確；

D；PCR過程中的鏈的合成都是連續(xù)的；D錯誤。

故選D。9、A【分析】【分析】

基因工程是指按照人們的意愿；進行嚴格的設計，并通過體外DNA重組和轉基因等技術，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品．生物工程育種中，基因工程和植物體細胞雜交兩種育種方式能有效地打破物種的界限，制造出新品種。

【詳解】

A；基因工程能定向地改造生物的遺傳性狀；并能打破物種之間的生殖隔離，培育新的農(nóng)作物優(yōu)良品種，A正確；

B；誘變育種的原理為基因突變；基因突變具有不定向性，B錯誤；

C；雜交育種的原理為基因重組；基因重組具有不定向性，并且不能改造生物的遺傳性狀，C錯誤；

D；單倍體育種能縮短育種年限；但不能打破物種的界限，D錯誤。

故選A。

【點睛】二、多選題(共7題，共14分)10、A:B:C:D【分析】【分析】

分析曲線圖：引物2的Tm高于引物1；說明引物2的熱穩(wěn)定性較高。

【詳解】

A；PCR過程是目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈；引物與單鏈互補結合，合成的子鏈在Taq聚合酶的作用下進行延伸，所以兩引物分別與DNA的兩條互補單鏈結合，是子鏈延伸的起點，A正確；

B；PCR過程中；復性溫度應低于引物的Tm值以提高PCR效率，B正確；

C；DNA含有的氫鍵數(shù)越多；其熱穩(wěn)定性越高，而A和T堿基對間有兩個氫鍵，C和G堿基對間有三個氫鍵，曲線圖顯示：引物2的Tm高于引物1，說明引物2的熱穩(wěn)定性較高，因此若兩引物的脫氧核苷酸數(shù)相同，推測引物2的（G＋C）含量較高，C正確；

D；適當減少引物2的脫氧核苷酸數(shù)；會降低引物2的熱穩(wěn)定性，可使其Tm值接近引物1，D正確。

故選ABCD。11、A:C:D【分析】【分析】

哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞；是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞。ES細胞具有胚胎細胞的特性，在形態(tài)上，表現(xiàn)為體積??；細胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞。另外，在體外培養(yǎng)條件下，ES可以增殖而不發(fā)生分化。ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上，或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中能夠維持不分化狀態(tài)。

【詳解】

A；試管羊、轉基因羊的繁殖方式都是有性生殖；克隆羊的繁殖方式屬于無性生殖，A錯誤；

B；胚胎干細胞在飼養(yǎng)層細胞上培養(yǎng)可維持只增殖不分化狀態(tài)；B正確；

C；受精時防止多精入卵的兩屏障是透明帶反應和卵細胞膜反應；C錯誤；

D；囊胚期的滋養(yǎng)層細胞可用于性別鑒定；將來可以發(fā)育成胎膜和胎盤，D錯誤。

故選ACD。12、A:B:C【分析】【分析】

13、A:B:D【分析】【分析】

14、C:D【分析】【分析】

1；根據(jù)《上海市生活垃圾管理條例》第四條本市生活垃圾按照以下標準分類規(guī)定：濕垃圾；即易腐垃圾，是指食材廢料、剩菜剩飯、過期食品、瓜皮果核、花卉綠植、中藥藥渣等易腐的生物質(zhì)生活廢棄物；干垃圾，即其它垃圾，是指除可回收物、有害垃圾、濕垃圾以外的其它生活廢棄物。

2；由題圖信息分析可知；該實驗的目的是為了篩選獲得高效降解淀粉的菌種，在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，屬于選擇培養(yǎng)基，接種方法是稀釋涂布平板法。

【詳解】

A；剩余飯菜、果皮果殼屬于濕垃圾；玻璃碎片屬于干垃圾，A錯誤；

B；菌落①②透明圈大小不同是兩個菌群對淀粉的分解能力不同；透明圈大的分解能力強，B錯誤；

C；抗生素或電池等會抑制微生物生長；不利于微生物的分解，C正確；

D；圖中出現(xiàn)透明圈；因此將菌液接種到培養(yǎng)基的方法是釋涂布平板法，D正確。

故選CD。15、A:D【分析】【分析】

平板劃線的操作的基本步驟是：(1)右手持接種環(huán)；經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口過火焰，將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口過火焰并塞上棉塞。(2)左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應劃破培養(yǎng)基表面。(3)燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線，重復以上操作，在第三四五區(qū)內(nèi)劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。(4)將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

【詳解】

A；倒平板前；需要將錐形瓶口通過酒精燈火焰，通過灼燒滅菌防止雜菌污染，A正確；

B；倒平板時；應將培養(yǎng)皿打開一條略大于瓶口的縫隙，以免雜菌進入，而不是為了防濺，B錯誤；

C；接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌后應等到冷卻后再挑取菌落；否則高溫會使菌落死亡，C錯誤；

D；用移液器吸取相應的菌液前；需要將樣液充分搖勻，保證菌液中微生物均勻分布，提高實驗的準確性，D正確。

故選AD。16、A:B:D【分析】【分析】

1；基因探針是用放射性同位素、熒光分子等標記的DNA分子作為探針；原理是DNA分子雜交。

2；DNA分子是一個獨特的雙螺旋結構；是由兩條平行的脫氧核苷酸長鏈盤旋而成，外側由脫氧核糖和磷酸交替連接構成基本骨架，內(nèi)側是堿基對（A-T；C-G）通過氫鍵連接。

3；目的基因的檢測與鑒定：

分子水平上的檢測：

①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；

②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；

③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術。

個體水平上的鑒定：

抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；由圖1可知；DNA探針是用熒光分子標記的DNA分子，DNA的基本組成單位是脫氧核苷酸，因此熒光標記的DNA探針的基本單位是脫氧核糖核苷酸，A正確；

B；由圖2可知；高溫（煮沸）可以使雙鏈DNA分子中的氫鍵斷裂形成DNA單鏈，B正確；

C；圖中兩條姐妹染色單體中含有2個DNA分子共有4條鏈；所以最多可有4條熒光標記的DNA片段，C錯誤；

D、由于AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標記，若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則其F1（AABC）含有3個熒光點；經(jīng)間期復制加倍，有絲分裂中期的細胞中可觀察到6個熒光點，D正確。

故選ABD。三、填空題(共6題，共12分)17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】復合酶C1酶CX酶葡萄糖苷酶纖維二糖葡萄糖水解18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】單個核苷酸兩個DNA片段19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】質(zhì)粒自我復制雙鏈環(huán)狀DNA分子20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細胞細胞懸液原代傳代21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激22、略

【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織；將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織；器官或細胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術。

【詳解】

1；基因工程又稱基因拼接技術和DNA重組技術；是以分子遺傳學為理論基礎，以分子生物學和微生物學的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預先設計的藍圖，在體外構建雜種DNA分子，然后導入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術。

2；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術。

3；動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織；將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖，其原理是細胞增殖。

4；植物組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)；指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質(zhì)及植物激素的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術。植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞具有全能性。

【點睛】

本題考查基因工程概念、胚胎移植、動植物細胞培養(yǎng)等相關知識，意在考察考生對知識點的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技術或DNA重組技術②.又稱受精卵移植，是指將雌性動物體內(nèi)的的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀況相同的其他雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術③.植物細胞全能性、細胞增殖四、判斷題(共4題，共28分)23、B【分析】【詳解】

目前，種植的轉基因作物中以大豆和玉米最多，其次是轉基因棉花和油菜，所以錯誤。24、A【分析】【詳解】

生殖性克隆存在倫理道德等方面的問題，我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗。本說法正確。25、A【分析】【詳解】

轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；對待轉基因技術的利弊，正確的做法應該是趨利避害，不能因噎廢食。我國對轉基因技術的方針是一貫的、明確的，就是研究上要大膽，堅持自主創(chuàng)新；推廣上要慎重，做到確保安全；管理上要嚴格，堅持依法監(jiān)管。

該說法正確。26、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是一項難度很大的工程，主要是因為蛋白質(zhì)發(fā)揮功能必須依賴于正確的高級結構，而這種高級結構往往十分復雜，并且蛋白質(zhì)的結構具有多樣性，這也在一定程度上增加了蛋白質(zhì)工程的難度，故說法正確。五、實驗題(共3題，共24分)27、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，培養(yǎng)基中一般含有水；碳源、氮源和無機鹽。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物種和氧氣的要求。固氮微生物可利用空氣中的氮氣，故培養(yǎng)基無需再加入氮源。純化微生物時常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

【詳解】

（1）固氮菌可利用空氣中的氮氣作為氮源，所以Ashby培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分主要包括水；無機鹽、碳源等；不需要額外加入氮源。將土壤稀釋液進行梯度稀釋后再接種的方法為稀釋涂布平板法，在Ashy平板上進行多次接種的目的是提高固氮菌的純度。

（2）固氮酶的活性越大；單位時間內(nèi)的固氮量越大，所以為評估固氮酶的活性，可以檢測單位時間內(nèi)的固氮量。

（3）S試劑可與IAA反應顯紅色；且顏色深淺與IAA濃度成正相關，所以可用蒸餾水對IAA母液進行梯度稀釋，加入S試劑制成標準顯色液，往上清液中加入S試劑，與標準顯示液進行比色，與上清液顏色相近的標準顯示液中IAA的濃度計為上清液中IAA的濃度。

【點睛】

本題考查固氮菌的培養(yǎng)和篩選，意在考查考生對所學知識的靈活應用能力。【解析】碳源稀釋涂布平板法提高固氮菌的純度單位時間內(nèi)的固氮量用蒸餾水對IAA母液進行梯度稀釋，加入S試劑制成標準顯色液，往上清液中加入S試劑，與標準顯示液進行比色，與上清液顏色相近的標準顯示液中IAA的濃度計為上清液中IAA的濃度28、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作步驟包括目的基因的獲??；基因表達載體的構建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定?；蚬こ讨辽傩枰N工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體。

【詳解】

（1）①由圖1可知，欲使His短肽連在CRY的氨基酸序列前面(氨基端)，即獲得“3’—His短肽—CRY基因—5’”的基因表達載體；由圖可知CRY基因的3’端對應的為F引物，即要將His短肽加在CRY的氨基端，應在CRY基因模板鏈的3’端上加His短肽編碼序列，對應的是F引物；而且加上的His序列不與CRY轉錄模板配對，所以只能加在F引物5’端，才能保證引物與模板配對后可以正常延伸。

②為使融合基因能與載體相連接；酶切位點序列應該位于F引物的3’端，His短肽編碼序列的5’端。

（2）①為確定His-CRY和GST-GID這兩個融合基因在擬南芥細胞中已正常表達；應對細胞裂解液蛋白進行抗原-抗體雜交，并且為了確定磁珠上的His抗體可以結合His短肽，對磁珠蛋白進行His抗體檢測。

②由題意可知，藍光可以激活藍光受體CRY，抑制赤霉素的作用，分析圖2，對細胞裂解液蛋白進行抗原-抗體雜交，無論黑暗或藍光條件下，均具有條帶，但含有His抗體的磁珠蛋白組，黑暗條件下沒有檢測到GST條帶，但藍光組出現(xiàn)了GST條帶，說明藍光激活CRY后，CRY與赤霉素受體GID結合，使赤霉素無法發(fā)揮作用，從而抑制赤霉素的作用?！窘馕觥?1)F引物5’要將His短肽加在CRY的氨基端；則應在CRY基因模板鏈的3’端上加His短肽編碼序列，對應的是F引物；而且加上的His序列不與CRY轉錄模板配對，所以只能加在F引物5’端，才能保證引物與模板配對后可以正常延伸5’

(2)確定His-CRY和GST-GID這兩個融合基因在擬南芥細胞中已正常表達確定磁珠上的His抗體可以結合His短肽光激活CRY后，CRY與赤霉素受體GID結合，使赤霉素無法發(fā)揮作用，從而抑制赤霉素的作用29、略

【分析】【分析】

圖1可知：T-2毒素是一種常見的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的關鍵酶，T-2毒素可誘導其表達水平升高，當用兩種調(diào)控序列同時連接啟動子，啟動子的活性最高。

圖2可知：野生型探針能與NF-Y結合；突變型探針不能與NF-Y結合，NF-Y抗體一定能與NF-Y結合。

【詳解】

（1）初級代謝產(chǎn)物一般是霉菌生命活動所必需的，大多存在于細胞內(nèi)。次級代謝產(chǎn)物不是霉菌生命活動必需的，并且分泌到體外，故T-2毒素是霉菌的次級代謝產(chǎn)物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由擴散的方式進入細胞。

（2）實驗的自變量是有無調(diào)控序列；根據(jù)單一變量原則，對照組的目的是為了排除無光變量的影響，除了沒有調(diào)控序列，其他處理和實驗組相同，所以對照組和實驗組豬肝細胞均導入含CYP3A基因啟動子及LUC基因的表達載體，然后向各組豬肝細胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素，適宜條件下進行培養(yǎng)。從圖中信息可知，缺失兩個調(diào)控序列和對照組活性一致，缺失一個比對照組活性略強，兩個都存在活性最高，說明這兩個調(diào)控序列是CYP3A基因響應T-2毒素的核心元件。故缺失兩個調(diào)控序列或其中任一個，T-2毒素都不能誘導啟動子活性明顯增強。

（3）①實驗的目的是要驗證NF-Y能與B1結合；根據(jù)第2組和第3組結果，依據(jù)B1序列制備的NF-Y結合位點野生型探針能與NF-Y結合，根據(jù)第4組結果，突變型探針不能與NF-Y結合。第5組加入了NF-Y抗體，一定能與NF-Y結合。故可以解釋為：結合位點突變的探針不能結合核蛋白中的NF