食品添加劑甜菊糖苷

1GB1886.355—2022食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑甜菊糖苷本標(biāo)準(zhǔn)適用于以甜葉菊（ste℃iaRebaudiana葉為原料，經(jīng)提取、精制而得的食品添加劑甜菊糖苷。已知糖苷包括甜菊苷、瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷D、瑞鮑迪苷E、瑞鮑迪苷F、瑞鮑迪苷M、瑞鮑迪苷N、瑞鮑迪苷O、杜克苷A、甜茶苷及甜菊雙糖苷。2分子式、結(jié)構(gòu)式和相對分子質(zhì)量2.213種糖苷的結(jié)構(gòu)式配基。2GB1886.355—2022表113種糖苷的化合物名稱、化合物名稱R1位取代基R2位取代基中文英文甜菊苷Stevioside瑞鮑迪苷ARebaudiosideA瑞鮑迪苷BRebaudiosideBH瑞鮑迪苷CRebaudiosideC瑞鮑迪苷DRebaudiosideD瑞鮑迪苷ERebaudiosideE瑞鮑迪苷FRebaudiosideF瑞鮑迪苷MRebaudiosideM瑞鮑迪苷NRebaudiosideN瑞鮑迪苷ORebaudiosideO杜克苷ADulcosideA甜茶苷Rubusoside甜菊雙糖苷SteviolbiosideH注：分別代表葡萄糖、鼠李糖、木糖。2.313種糖苷的相對分子質(zhì)量甜菊苷：804.87（按2018年國際相對原子質(zhì)量）瑞鮑迪苷A:967.01（按2018年國際相對原子質(zhì)量）瑞鮑迪苷B:804.87（按2018年國際相對原子質(zhì)量）瑞鮑迪苷C:951.01（按2018年國際相對原子質(zhì)量）瑞鮑迪苷D:1129.15（按2018年國際相對原子質(zhì)量）瑞鮑迪苷E:967.01（按2018年國際相對原子質(zhì)量）3GB1886.355—2022瑞鮑迪苷F:936.99（按2018年國際相對原子質(zhì)量）杜克苷A:788.87（按2018年國際相對原子質(zhì)量）甜菊雙糖苷：642.73（按2018年國際相對3技術(shù)要求感官要求應(yīng)符合表2的規(guī)定。表2感官要求項目要求檢驗方法色澤白色至淺黃色取適量試樣置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光線下觀察其色澤和狀態(tài)狀態(tài)粉末、晶體、顆?；蚱瑺?.2理化指標(biāo)理化指標(biāo)應(yīng)符合表3的規(guī)定。表3理化指標(biāo)項目指標(biāo)檢驗方法甜菊糖苷含量（以干基計）a,∞/%0附錄A中A.3灰分，∞/%≤04干燥減量，∞/%≤60GB5009.3直接干燥法bpH4.5~7.0附錄A中A.4鉛0砷0甲醇附錄A中A.5乙醇注：商品化的甜菊糖苷產(chǎn)品應(yīng)以符合本標(biāo)準(zhǔn)的甜菊糖苷為原料，可添加用于標(biāo)準(zhǔn)化目的的淀粉等食品原料。a商品化的甜菊糖苷產(chǎn)品應(yīng)符合標(biāo)識值。b干燥溫度和時間分別為105℃±2℃和2h。4GB1886.355—2022附錄A檢驗方法A.1一般規(guī)定本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水在未注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T6682規(guī)定的三級水。試驗中所用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、雜質(zhì)測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑及制品在未注明其他要求時，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規(guī)定制備。試驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。A.2鑒別試驗A.2.1甜菊糖苷色譜試驗在甜菊糖苷含量試驗中，試樣溶液色譜圖中13種糖苷的色譜峰應(yīng)與混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液相對應(yīng)。A.3甜菊糖苷含量（以干基計）的測定磷酸鈉緩沖液(稱取磷酸二氫鈉(),溶于水中用磷酸調(diào)節(jié)至A.3.1.7瑞鮑迪苷A標(biāo)準(zhǔn)品：瑞鮑迪苷A含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，以干基計）≥99.0%。A.3.1.8瑞鮑迪苷D標(biāo)準(zhǔn)品：瑞鮑迪苷D含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，以干基計）≥95.0%。A.3.1.9其他11種糖苷標(biāo)準(zhǔn)品：甜菊苷、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷E、瑞鮑迪苷F、瑞鮑迪苷M、瑞鮑迪苷N、瑞鮑迪苷O、杜克苷A、甜茶苷和甜菊雙糖苷，或使用13種糖苷混合標(biāo)準(zhǔn)品。A.3.2儀器和設(shè)備高效液相色譜儀：配備紫外檢測器，或其他等效的檢測器。A.3.3參考色譜條件色譜柱粒徑或其他等效的色譜柱。A.3.3.2流動相梯度洗脫條件（比例可根據(jù)實際情況調(diào)節(jié)見表A.1。5GB1886.355—2022表A.1流動相梯度洗脫條件（比例可根據(jù)實際情況調(diào)節(jié)）時間/min磷酸鈉緩沖液/%乙腈/%0流動相流速檢測波長進(jìn)樣量柱溫A.3.4分析步驟A.3.4.1混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備分別稱取適量瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷D、甜菊苷、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷E、瑞鮑迪苷F、瑞鮑迪苷M、瑞鮑迪苷N、瑞鮑迪苷O、杜克苷A、甜茶苷和甜菊雙糖苷標(biāo)準(zhǔn)品（或13種糖苷混合標(biāo)準(zhǔn)品置于同一個容量瓶中，用乙腈水溶液完全溶解后定容，得到混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)品溶液用于確定13種糖苷的相對保留時間。A.3.4.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備分別稱取的瑞鮑迪苷A標(biāo)準(zhǔn)品和12.5mg的瑞鮑迪苷D標(biāo)準(zhǔn)品，精確至0.1mg,分別置于25mL的容量瓶中，用乙腈水溶液溶解后稀釋至刻度的瑞鮑迪苷A標(biāo)準(zhǔn)溶液和的瑞鮑迪苷A.3.4.3試樣溶液的制備稱取25.0mg±5.0mg試樣（干基精確至0.1mg,置于50mL的容量瓶中，用乙腈水溶液溶解后稀釋至刻度，得到試樣溶液。A.3.5.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制參考色譜條件下分別對的瑞鮑迪苷A標(biāo)準(zhǔn)溶液和100mg/L、200mg/L、400mg/L、500mg/L的瑞鮑迪苷D標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行色譜分析，記錄各濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液對應(yīng)的峰面積值。以標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖中瑞鮑迪苷A或瑞鮑迪苷D的峰面積值為Y軸，以對應(yīng)溶液濃度(mg/L)為X軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，分別得到瑞鮑迪苷A標(biāo)準(zhǔn)曲線和瑞鮑迪苷D標(biāo)準(zhǔn)曲線（強(qiáng)制過原點從標(biāo)準(zhǔn)曲線上分別獲得瑞鮑迪苷A線性函數(shù)斜率（Ka)和瑞鮑迪苷D線性函數(shù)斜率（Kd)。6GB1886.355—2022在A.3.3參考色譜條件下，分別對混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液和試樣溶液進(jìn)行色譜分析。將試樣溶液的色譜圖與混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液的色譜圖（見附錄B）相比較，以確定試樣溶液色譜圖中各組分對應(yīng)的峰。記錄試樣溶液色譜圖中瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷D、甜菊苷、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷E、瑞鮑迪苷F、瑞鮑迪苷M、瑞鮑迪苷N、瑞鮑迪苷O、杜克苷A、甜茶苷和甜菊雙糖苷的峰面積。8種糖苷含量（以干基計）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)∞i按式（A.1）計算。×%.×ci×%.×c式中：分別對應(yīng)甜菊苷、瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊雙糖苷；Ai—試樣溶液色譜圖中i組分的峰面積值；Ka—A.3.5.1中瑞鮑迪苷A線性函數(shù)斜率；5種糖苷含量（以干基計）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)∞i按式（A.2）計算。i式中：分別對應(yīng)瑞鮑迪苷D、瑞鮑迪苷E、瑞鮑迪苷M、瑞鮑迪苷N、瑞鮑迪苷O；Ai—試樣溶液色譜圖中i組分的峰面積值；Kd—A.3.5.1中瑞鮑迪苷D線性函數(shù)斜率；和∞o，取各組分含量之和即為試樣中甜菊糖苷含量。的測定酸度計。A.4.2試劑和材料試樣，溶于100A.5甲醇和乙醇的測定7GB1886.355—2022A.5.2儀器和設(shè)備氣相色譜儀：配有氫火焰離子化檢測器(FID)和頂空進(jìn)樣器。A.5.3參考色譜條件或其他等效的色譜柱。載氣氮氣純度載氣流量柱溫保持升溫至保持最后以升溫至保持進(jìn)樣口溫度檢測器溫度進(jìn)樣體積分流比A.5.4參考頂空條件頂空瓶溫度頂空瓶平衡時間A.5.5分析步驟移取2mL水，置于頂空瓶中，迅速壓緊瓶蓋，備用。A.5.5.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備稱取0.1g甲醇，精確至0.001g,用水稀釋后轉(zhuǎn)移至一個1000mL的容量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得100mg/L的甲醇標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。將該溶液配制成一系列濃度為2.5mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L和50mg/L的甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液。移取上述系列濃度溶液各2mL,分別置于頂空瓶中，迅速壓緊A.5.5.2.2乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備稱取0.1g乙醇，精確至0.001g,用水稀釋后轉(zhuǎn)移至一個100mL的容量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得1000mg/L的乙醇標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。將該溶液配制成一系列濃度為50mg/L、100mg/L、200mg/L、500mg/L和750mg/L的乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液。移取上述系列濃度溶液各2mL,分別置于頂空瓶中，迅速壓A.5.5.3試樣溶液的制備稱取1.0g試樣，精確至0.001g,用水溶解后轉(zhuǎn)移至一個10mL的容量瓶中，在室溫下超聲處理約3min,加水稀釋至刻度，搖勻。移取該溶液2mL置于頂空瓶中，迅速壓緊瓶蓋，備用。8GB1886.355—2022在參考操作條件A.5.3和A.5.4下，分別對空白溶液、標(biāo)準(zhǔn)系列溶液和試樣溶液進(jìn)行測定，記錄甲醇或乙醇的峰面積值。以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液色譜圖中甲醇或乙醇的峰面積值為Y軸，以對應(yīng)溶劑濃度（mg／L）為X軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到甲醇標(biāo)準(zhǔn)曲線或乙醇標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)試樣溶液色譜圖中甲醇或乙醇的按式（A.3）計算。式中：V—試樣溶液