高中生物第二章細胞工程23動物細胞工程導省公開課一等獎新課獲獎課件

第三節(jié)

動物細胞工程選修三第二章細胞工程1/322/323/32

馴鹿,又名角鹿，主要分布于北半球歐亞大陸和北美洲北部及一些大型島嶼。而在我國，馴鹿僅分布在大興安嶺東北部林區(qū)，它善于穿越森林和沼澤地，曾經(jīng)是鄂溫克獵人主要生產(chǎn)和交通運輸工具，有“林海之舟”美譽。在我國，馴鹿是半家養(yǎng)物種。因為長久近親繁殖，遺傳衰退嚴重，加之疾病、天敵為害，馴鹿數(shù)量呈下降趨勢。1996年，馴鹿被列入《中國瀕危動物紅皮書》，為國家二類保護動物。我們除了在恢復馴鹿棲息地、改進其生存條件等方面做出一些主動努力之外，是否能夠借助當代生物技術力量，來增加馴鹿數(shù)量呢？

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動物細胞與組織培養(yǎng)細胞核移植與動物體細胞克隆動物細胞融合和單克隆抗體制備動物細胞工程慣用技術動物細胞培養(yǎng)技術

是動物細胞工程其它技術基礎。5/32一、動物細胞與組織培養(yǎng)指在體外模擬動物體內環(huán)境，將動物細胞或組織在無菌、溫度適宜和營養(yǎng)充分條件下培養(yǎng)，使其繼續(xù)生長、增殖并維持原有結構和功效技術。1、什么是動物細胞與組織培養(yǎng)?2、為何要進行動物細胞培養(yǎng)?疫苗生產(chǎn)，藥品研制（測試），腫瘤防治，等等。指在體外模擬動物體內環(huán)境，將動物細胞或組織在無菌、溫度適宜和營養(yǎng)充分條件下培養(yǎng)，使其繼續(xù)生長、增殖并維持原有結構和功效技術。6/323、怎樣進行動物細胞與組織培養(yǎng)?（1）用于體外培養(yǎng)動物細胞或組織大多從何而來？（2）依據(jù)人或動物細胞體內生活環(huán)境來推測，體外進行動物細胞培養(yǎng)需要哪些條件？（3）結合教材P53圖2-10，描述動物細胞培養(yǎng)過程詳細操作步驟，指出動物細胞培養(yǎng)與動物組織培養(yǎng)主要區(qū)分。7/32動物組織塊細胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)用胰蛋白酶等處理，形成份散單個懸浮細胞（取自動物胚胎或出生很快幼齡動物器官或組織）接種到培養(yǎng)液中用胰蛋白酶等處理貼壁細胞，形成份散懸浮細胞適宜條件128/321．為何大多項選擇取動物胚胎或出生很快幼齡動物器官或組織細胞進行培養(yǎng)？【關鍵點思辯】2．動物細胞培養(yǎng)需一定氣體環(huán)境（95%空氣+5%CO2），所加入O2和CO2作用分別是什么？為何還需在合成培養(yǎng)基中加入動物血清？3．動物細胞培養(yǎng)過程中，獲取懸浮細胞目標是什么？能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶，為何？9/324．什么是原代培養(yǎng)？細胞不停分裂后，在容器底部為何形成是一層細胞？【關鍵點思辯】5．什么是傳代培養(yǎng)？為何要進行傳代培養(yǎng)？10/32

1、某研究小組為測定藥品對體外培養(yǎng)細胞毒性，準備對某種動物肝腫瘤細胞(甲)和正常肝細胞(乙)進行動物細胞培養(yǎng)。以下相關說法正確是()A．在利用兩種肝組織塊制備肝細胞懸液時，也可用胃蛋白酶處理B．細胞培養(yǎng)容器中所含CO2作用是刺激細胞呼吸C．甲、乙細胞在連續(xù)原代培養(yǎng)過程中，乙會出現(xiàn)停頓增殖現(xiàn)象D．僅用該培養(yǎng)液也能用來培養(yǎng)乙肝病毒【即時反饋】11/322.（多項選擇）動物細胞體外培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度一些物質。下列圖是血清對正常細胞和癌細胞培養(yǎng)影響試驗結果。從該圖提供信息可得出結論有（）A.有沒有血清對正常細胞培養(yǎng)影響不一樣B.正常細胞與癌細胞增殖速率相同C.培養(yǎng)基中補充血清有利于正常細胞培養(yǎng)D.培養(yǎng)基中是否補充血清對癌細胞培養(yǎng)影響不大12/32第二章細胞工程二、細胞核移植與動物體細胞克隆1、什么是克??？什么是體細胞克??？克?。褐高z傳上完全相同分子、細胞或來自同一祖先生物個體無性繁殖群體；體細胞克?。菏菍⒐w體細胞細胞核與受體去核卵細胞細胞質進行人工組合，借助于卵細胞發(fā)育能力，經(jīng)過培養(yǎng)發(fā)育成胚胎進而形成個體技術。2、體細胞核移植過程怎樣？克?。褐高z傳上完全相同分子、細胞或來自同一祖先生物個體無性繁殖群體；體細胞克?。菏菍⒐w體細胞細胞核與受體去核卵細胞細胞質進行人工組合，借助于卵細胞發(fā)育能力，經(jīng)過培養(yǎng)發(fā)育成胚胎進而形成個體技術。13/32卵細胞蘇格蘭黑面母羊芬蘭白面母羊乳腺細胞細胞質細胞核細胞核移植早期胚胎另一頭母綿羊子宮胚胎移植“多利”羊重組細胞3、克隆羊“多利”產(chǎn)生過程動物細胞培養(yǎng)14/321．在動物體細胞核移植過程中，為何選取卵細胞作為核移植受體細胞？

【關鍵點思辯】3．細胞核移植技術形成重組細胞發(fā)育成為一個新個體，這是否證實了動物細胞具全能性？

2．從生殖角度來看，克隆技術產(chǎn)生新個體方式屬什么類型？克隆動物體細胞中遺傳物質是否來自一個親本，它能實現(xiàn)對供體動物100%復制嗎?為何？

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1．在克隆羊培育過程中，將雄羊體細胞核移入雌羊卵細胞中。產(chǎn)生該克隆羊方式及該克隆羊發(fā)育成熟后所分泌性激素依次是(

)A．無性生殖、雄性激素

B．無性生殖、雌性激素

C．有性生殖、雄性激素

D．有性生殖、雌性激素【即時反饋】16/32

2.如圖為某哺乳動物生殖過程圖，正確敘述是(

)A．產(chǎn)生兩動物個體生殖類型均為有性生殖B．個體2遺傳性狀與提供b細胞母羊完全不一樣C．個體2為克隆動物，c為高度分化體細胞D．e細胞為完成減數(shù)分裂卵細胞【即時反饋】17/32第二章細胞工程三、細胞融合和單克隆抗體1、什么是動物細胞融合？該技術所依據(jù)原理是什么？2、誘導動物細胞融合方法主要有哪些？3、在人體特異性免疫中，抗體是由什么細胞產(chǎn)生，主要分布在哪里？它作用有何特點？18/32第二章細胞工程4．取得抗體傳統(tǒng)方法是什么？有何缺點？單克隆抗體含有哪些優(yōu)點？5．在體外培養(yǎng)條件下，經(jīng)免疫B淋巴細胞、骨髓瘤細胞各有什么特點？6．分析教材P58圖2-14，說出單克隆抗體制備用到了哪些當代生物技術？你認為在該過程中哪些操作是關鍵？

19/3220/32單克隆抗體篩選融合細胞雜交瘤細胞體外或體內細胞培養(yǎng)篩選骨髓瘤細胞誘導細胞融合特異性雜交瘤細胞雜交瘤細胞系提取經(jīng)過免疫B淋巴細胞動物細胞融合技術動物細胞培養(yǎng)技術單克隆抗體制備過程特點：既能產(chǎn)生專一抗體又能大量繁殖特點：特異性強靈敏度高可大量制備注射抗原免疫21/323．在單克隆抗體制備過程中，進行兩次篩選目標分別是什么？【關鍵點思辯】1．從小鼠體內取出B淋巴細胞前應對小鼠作何種處理？為何要這么處理？2．為何選取小鼠骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合?假如只考慮細胞兩兩融合，可能產(chǎn)生哪些類型融合細胞？其中，雜交細胞（雜交瘤細胞）含有什么特點？22/32

1．以H1N1病毒核衣殼蛋白為抗原，采取細胞工程制備單克隆抗體，以下敘述正確是(

)A．用純化核衣殼蛋白重復注射到小鼠體內，產(chǎn)生血清為單克隆抗體B．體外培養(yǎng)單個漿細胞能夠取得大量針對H1N1病毒單克隆抗體C．將等量漿細胞和骨髓瘤細胞混合，經(jīng)誘導融合后細胞均為雜交瘤細胞D．利用該單克隆抗體與H1N1病毒核衣殼蛋白特異性結合方法能夠診療該病毒感染體【即時反饋】23/322．如圖為單克隆抗體生產(chǎn)過程示意圖，以下敘述正確是(

)A．B淋巴細胞是從小白鼠胸腺中分離出來B．雜交瘤細胞能無限增殖和產(chǎn)生特定抗體C．圖中②過程能夠用適量滅活仙臺病毒作誘導劑D．將融合雜交瘤細胞直接在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內增殖24/321.關于當代生物技術應用敘述，錯誤是（)A.蛋白質工程可合成自然界中不存在蛋白質B.體細胞雜交技術可用于克隆動物和制備單克隆抗體C.植物組織培養(yǎng)技術可用于植物莖尖脫毒D.動物細胞培養(yǎng)技術可用于轉基因動物培養(yǎng)【鞏固訓練】25/322．以下相關生物工程敘述正確是（）

A．在篩選雜交瘤細胞過程中需要使用特定選擇培養(yǎng)基

B．應用基因診療技術，可檢測受體細胞中目標基因是否表示

C．莖尖細胞含有很強分裂能力，離體培養(yǎng)時不需要脫分化即可培養(yǎng)成完整植株

D．將牛體細胞核移植到去核卵母細胞中，取得克隆牛是一個培育新物種方式26/323.下列圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。⑴

技術是單克隆抗體技術基礎。⑵依據(jù)培養(yǎng)基用途分類，圖中HAT培養(yǎng)基屬于

培養(yǎng)基。⑶單克隆抗體與常規(guī)血清抗體相比，最大優(yōu)越性是

。⑷動物細胞融合除了采取植物細胞原生質體融合慣用誘導劑外，還能夠采取

。27/323.下列圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。⑸選出雜交瘤細胞既具備骨髓瘤細胞

特點，又具備淋巴細胞

特點。⑹淋巴細胞是由動物體骨髓中

細胞分化、發(fā)育而來。⑺雜交瘤細胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸主要方式是

。

28/32【歸納總結】

植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質培養(yǎng)基特有成份培養(yǎng)結果培養(yǎng)目標29/32【歸納總結】

植物組