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PAGEPAGE11課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計(jì)數(shù)題型一選擇培育基的作用及配制方法1.從混雜的微生物群體中選擇優(yōu)良的單一純種的方法不包括()A.依據(jù)微生物對(duì)碳源需求的差別,運(yùn)用含不同碳源的培育基B.依據(jù)微生物對(duì)特別養(yǎng)分物質(zhì)的需求,在培育基中增減不同的特別養(yǎng)分物質(zhì)C.依據(jù)微生物對(duì)抗生素敏感性的差異,在培育基中加入不同的抗生素D.依據(jù)微生物耐熱性的不同,利用高溫、高壓殲滅不須要的雜菌答案D解析利用高溫、高壓殲滅不須要的雜菌的同時(shí)也會(huì)將須要篩選的微生物殺死,因此不能通過(guò)該方法得到目的微生物,D錯(cuò)誤。2.某混合樣品中微生物R含量極少,要得到大量的R,比較志向的方法是采納()A.自然培育基B.稀釋涂布平板法C.利用適合R生長(zhǎng)但同時(shí)抑制或阻擋其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的選擇培育基D.用顯微鏡干脆視察、找尋,再培育答案C解析在培育過(guò)程中可以通過(guò)選擇該微生物能生長(zhǎng)繁殖而抑制其他微生物生長(zhǎng)繁殖的培育基,使微生物R能在該培育基上成為優(yōu)勢(shì)菌種而大量繁殖,C正確。3.可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌的方法是()A.在以尿素為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑B.在以尿素為唯一氮源的培育基中加入二苯胺試劑C.在以尿素為唯一氮源的培育基中加入蘇丹Ⅲ試劑D.在以尿素為唯一氮源的培育基中加入雙縮脲試劑答案A解析分解尿素的細(xì)菌與其他細(xì)菌的重要區(qū)分是分解尿素的細(xì)菌能以尿素為氮源,該細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成了氨,氨會(huì)使培育基的堿性增加,pH上升。在以尿素為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑,培育某種細(xì)菌后,假如pH上升,指示劑將變紅,我們可以精確地鑒定出該種細(xì)菌能夠分解尿素。題型二菌落數(shù)目的統(tǒng)計(jì)方法4.下列不屬于菌種計(jì)數(shù)方法的是()A.平板劃線法 B.稀釋涂布平板法C.鏡檢法 D.濾膜法答案A解析平板劃線法可用于菌種的純化和分別,不能用于計(jì)數(shù),A錯(cuò)誤;稀釋涂布平板法常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目,鏡檢法也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法,B、C正確;濾膜法常用于檢測(cè)水樣中大腸桿菌數(shù)目,通常是將已知體積的水樣過(guò)濾后,將濾膜放到伊紅美藍(lán)培育基上培育,依據(jù)培育基上黑色菌落的數(shù)目,計(jì)算出水樣中大腸桿菌數(shù)量,D正確。5.下列關(guān)于統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法的敘述,不正確的是()A.采納平板計(jì)數(shù)法獲得的菌落數(shù)往往少于實(shí)際的活菌數(shù)B.當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),一個(gè)活菌會(huì)形成一個(gè)菌落C.為了保證結(jié)果精確,一般采納密度較大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)D.在某一濃度下涂布三個(gè)平板,若三個(gè)平板統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)在30~300間且差別不大,則應(yīng)以它們的平均值作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果答案C解析當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上視察到的只是一個(gè)菌落,因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低,A正確;當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),一個(gè)活菌會(huì)形成一個(gè)菌落,B正確;一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),密度過(guò)大會(huì)不好計(jì)數(shù),影響結(jié)果的精確性,C錯(cuò)誤;涂布三個(gè)平板,作為重復(fù)組,若三個(gè)平板統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)在30~300間且相差不大,取其平均值作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果能增加試驗(yàn)的勸服力與精確性,D正確。題型三細(xì)菌分別與計(jì)數(shù)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)6.下列關(guān)于測(cè)定土壤中微生物的數(shù)量,正確的敘述是()A.一般選用103~107倍的稀釋液分別涂布B.測(cè)定放線菌的數(shù)量,一般選用103、104和105倍稀釋C.測(cè)定真菌的數(shù)量,一般選用103、104和105倍稀釋D.當(dāng)?shù)谝淮螠y(cè)量某種細(xì)菌的數(shù)量,可以將101~107倍的稀釋液分別涂布到平板上培育答案B解析由于土壤中各類(lèi)微生物的數(shù)量不同,在進(jìn)行分別與計(jì)數(shù)時(shí),就須要依據(jù)不同的稀釋度分別進(jìn)行涂布,A錯(cuò)誤;測(cè)定放線菌的數(shù)量,一般選用103、104、105倍的稀釋液進(jìn)行平板培育,B正確;測(cè)定真菌的數(shù)量,一般選用102、103、104倍稀釋?zhuān)珻錯(cuò)誤;當(dāng)?shù)谝淮螠y(cè)量某種細(xì)菌的數(shù)量,可將稀釋的范圍放寬點(diǎn),將103~107倍的稀釋液分別涂布到平板上培育,D錯(cuò)誤。7.在做土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計(jì)數(shù)試驗(yàn)時(shí),甲組試驗(yàn)用氮源只含尿素的培育基,乙組試驗(yàn)用氮源除含尿素外還含硝酸鹽的培育基,其他成分都相同,在相同條件下操作、培育與視察,則乙組試驗(yàn)屬于()A.空白比照B.自身比照C.相互比照D.條件比照答案D解析本試驗(yàn)甲組為試驗(yàn)組,乙組為比照組,給試驗(yàn)組某種處理,給比照組另一條件的處理,為條件比照。8.關(guān)于土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計(jì)數(shù)試驗(yàn)中,下列操作須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行的一組是()①土壤取樣②稱取土壤③稀釋土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培育A.①②③④⑤ B.②③④⑤C.③④⑤ D.②③④答案D解析土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計(jì)數(shù)試驗(yàn)需進(jìn)行無(wú)菌操作,其中①土壤取樣是在室外進(jìn)行,⑤微生物的培育是在恒溫箱中進(jìn)行,其余過(guò)程都須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,D正確。9.在“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計(jì)數(shù)”課題中,以土壤中的細(xì)菌為探討對(duì)象,要達(dá)到的目的是()①?gòu)耐寥乐蟹謩e出能夠分解尿素的細(xì)菌②從土壤中分別出能夠分解氨的細(xì)菌③統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中原委含有多少分解尿素的細(xì)菌④統(tǒng)計(jì)所取土壤樣品中原委含有多少分解尿素的細(xì)菌A.①③B.②④C.①②D.③④答案A解析從土壤中分別分解尿素的細(xì)菌并對(duì)其計(jì)數(shù),統(tǒng)計(jì)的是每克土壤樣品中含多少分解尿素的細(xì)菌,用公式“每克樣品中菌株數(shù)=(C/V)×M”進(jìn)行推想,其中,C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù),V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL),M代表稀釋倍數(shù),①③正確。10.下列屬于菌落特征的是()①菌落的形態(tài)②菌落的大?、劬涞亩嗌佗苈∑鸪潭娶蓊伾抻袩o(wú)莢膜A.①②③④B.①②④⑤C.②③④⑥D(zhuǎn).①②③④⑤⑥答案B解析菌落特征包括菌落的形態(tài)、大小、隆起程度和顏色等,有無(wú)莢膜是單個(gè)細(xì)菌細(xì)胞的特征,不是菌落的特征。11.在做“分別能分解尿素的細(xì)菌”的試驗(yàn)時(shí),A同學(xué)從對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106倍的培育基中篩選出大約150個(gè)菌落,而其他同學(xué)在同樣的稀釋倍數(shù)下的培育基中只篩選出大約50個(gè)菌落。A同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生的緣由可能有()①土樣不同②培育基被污染③操作失誤④沒(méi)有設(shè)置比照A.①②③B.②③④C.①③④D.①②④答案A解析A同學(xué)比其他同學(xué)所得的試驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)大很多,可能是由于選取的土樣不同、培育基滅菌不徹底或操作過(guò)程中培育基被污染,也可能是操作失誤造成的,如所配制的培育基中混入其他含氮物質(zhì)、稀釋度不夠精確等。12.欲從土壤中分別出能分解尿素的細(xì)菌,下列試驗(yàn)操作中不正確的是()A.將土壤用無(wú)菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋B.同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個(gè)平板C.可將未接種的培育基在相同條件下培育作為比照D.用加入剛果紅指示劑的培育基可篩選出分解尿素的細(xì)菌答案D解析將土壤用無(wú)菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)员阌诮y(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目,A正確;為避開(kāi)偶然誤差對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響,同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個(gè)平板,B正確;生物試驗(yàn)要遵循比照原則,故要將未接種的培育基在相同條件下培育作為比照,解除非測(cè)試因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響,可使結(jié)論更有勸服力,C正確;在以尿素為唯一氮源的選擇培育基中加入酚紅指示劑可篩選出分解尿素的細(xì)菌,D錯(cuò)誤。13.圖表所示配方的培育基可篩選某種細(xì)菌,該細(xì)菌可以在該培育基上生長(zhǎng)、形成菌落。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容至1000mL(1)該培育基可篩選的細(xì)菌是____________,理由是____________________。(2)假如從土壤中獲得的樣本含該細(xì)菌的數(shù)量較少,則須要對(duì)樣本中的細(xì)菌進(jìn)行擴(kuò)大培育,____________(填“能”或“不能”)用表格中的培育基,因?yàn)開(kāi)___________________________________________________。(3)假如對(duì)該細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù),則將得到的細(xì)菌用____________法接種,為了確定該細(xì)菌的確屬于所要分別的細(xì)菌,須要在培育基中加入____________(試劑)。(4)另一種接種細(xì)菌的方法是____________,該方法操作時(shí),每一次劃線前都要進(jìn)行灼燒,目的是__________________________。答案(1)尿素分解菌培育基中尿素是唯一的氮源(2)不能擴(kuò)大培育應(yīng)當(dāng)用液體培育基,表格配方中含瓊脂,是固體培育基(3)稀釋涂布平板酚紅指示劑(4)平板劃線法殺死殘留在接種環(huán)上的細(xì)菌解析(1)依據(jù)表格分析,培育基中尿素是唯一的氮源,說(shuō)明該培育基篩選的細(xì)菌是尿素分解菌。(2)圖表所示培育基中含有瓊脂,說(shuō)明是固體培育基,不能用于菌種的擴(kuò)大培育,擴(kuò)大培育應(yīng)當(dāng)用液體培育基。(3)微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法,其中后者可以用于菌種的計(jì)數(shù);以尿素為唯一氮源且含酚紅指示劑的培育基可以選擇和鑒別尿素分解菌。(4)利用平板劃線法接種時(shí),每一次劃線前都要進(jìn)行灼燒,目的是殺死殘留在接種環(huán)上的細(xì)菌。14.下圖是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程。(1)圖中選擇培育基應(yīng)以________為唯一氮源;鑒別培育基還需添加________作指示劑,產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培育基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后,其菌落四周的指示劑將變成________色。(2)在5個(gè)細(xì)菌培育基平板上,均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1mL,培育一段時(shí)間后,平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過(guò)程實(shí)行的接種方法是______________________,每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為_(kāi)_______×108個(gè);與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板相比,此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)目較________。(3)在試驗(yàn)中,下列材料或用具須要滅菌的是________,須要消毒的是________。(填序號(hào))①培育細(xì)菌用的培育基與培育皿②玻棒、試管、錐形瓶和吸管③試驗(yàn)操作者的雙手(4)試驗(yàn)結(jié)束后,運(yùn)用過(guò)的培育基應(yīng)當(dāng)進(jìn)行________處理后,才能倒掉。答案(1)尿素酚紅紅(2)稀釋涂布平板法1.75少(3)①②③(4)滅菌解析(1)脲酶能夠催化尿素分解為氨,故圖中選擇培育基應(yīng)以尿素為唯一氮源,鑒別培育基還需添加酚紅作指示劑。由于尿素被脲酶分解成氨,氨會(huì)使培育基的堿性增加,pH上升,從而使酚紅指示劑變紅。(2)用于統(tǒng)計(jì)細(xì)菌菌落數(shù)的常用方法是稀釋涂布平板法,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)應(yīng)介于30~300之間,故選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計(jì)數(shù)。每克該土壤樣品中的菌落數(shù)對(duì)應(yīng)的應(yīng)當(dāng)是每毫升菌液中的細(xì)菌數(shù)目,所以每克該土壤樣品中的菌落數(shù)為(156+178+191)÷3÷0.1×105=1.75×108(個(gè))。由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連接在一起時(shí),往往統(tǒng)計(jì)的是一個(gè)菌落,此外,稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的是活菌數(shù),而血細(xì)胞計(jì)數(shù)板統(tǒng)計(jì)的是細(xì)菌總數(shù),所以用此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較少。(3)在試驗(yàn)中,①培育細(xì)菌用的培育基與培育皿和②玻棒、試管、錐形瓶、吸管須要滅菌,③試驗(yàn)操作者的雙手須要消毒。(4)為了防止污染環(huán)境,試驗(yàn)結(jié)束后,運(yùn)用過(guò)的培育基應(yīng)當(dāng)進(jìn)行滅菌處理后才能倒掉。1.對(duì)表層土壤中自生固氮菌的分別實(shí)行的原理(方法)是()A.依據(jù)自生固氮菌的生長(zhǎng)繁殖不須要氮源B.依據(jù)不同微生物生長(zhǎng)繁殖所需pH不同C.依據(jù)不同微生物生長(zhǎng)繁殖所需溫度條件不同D.依據(jù)不同微生物代謝類(lèi)型不同答案A解析在無(wú)氮培育基上只有固氮菌能正常生長(zhǎng)繁殖,可依據(jù)此特點(diǎn)來(lái)分別自生固氮菌,A正確。2.在光亮處用同一種培育液分別培育單細(xì)胞綠藻和單細(xì)胞酵母菌,其結(jié)果如圖所示(甲為綠藻,乙為酵母菌)。造成這種現(xiàn)象的緣由是()A.培育液中缺少無(wú)機(jī)鹽B.培育液中氧氣含量太高C.培育液中有機(jī)成分少D.培育液中不含二氧化碳答案C解析酵母菌為異養(yǎng)型生物,需干脆攝取有機(jī)物,而綠藻是植物,可以進(jìn)行光合作用合成有機(jī)物,所以在培育液中酵母菌最終被淘汰說(shuō)明培育液中有機(jī)成分少,C正確。3.如圖是探討人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細(xì)菌的過(guò)程示意圖,有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.在配制步驟②、③所用的培育基時(shí),應(yīng)先調(diào)pH后高壓蒸汽滅菌B.步驟③純化分解尿素細(xì)菌的原理是將聚集的細(xì)菌分散,可以獲得單細(xì)胞菌落C.步驟③采納稀釋涂布平板法接種,并需向牛肉膏蛋白胨培育基中加入尿素D.步驟④挑取③中不同種的菌落分別接種,比較細(xì)菌分解尿素的實(shí)力答案C解析在配制步驟②、③的培育基時(shí),應(yīng)先調(diào)pH值后再高壓蒸汽滅菌,A正確;步驟③純化分解尿素細(xì)菌的原理是將聚集的細(xì)菌分散,可以獲得單細(xì)胞菌落,B正確;要篩選出能高效分解尿素細(xì)菌,所用的培育基要以尿素為唯一氮源,但牛肉膏和蛋白胨中都含有含氮有機(jī)物,因此步驟③所用的培育基中不能含有牛肉膏和蛋白胨,C錯(cuò)誤;步驟④挑?、壑胁煌N的菌落分別接種,比較細(xì)菌分解尿素的實(shí)力,D正確。4.用稀釋涂布平板法測(cè)定某一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù),在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培育基中,得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果,正確的是()A.涂布了1個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230B.涂布了2個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是215和260,取平均值238C.涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、212和256,取平均值163D.涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是212、240和250,取平均值234答案D解析在設(shè)計(jì)試驗(yàn)時(shí),確定要涂布至少3個(gè)平板作為重復(fù)組,才能增加試驗(yàn)的勸服力與精確性,A、B錯(cuò)誤;C項(xiàng)雖然涂布了3個(gè)平板,但是,其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與其他的相差太遠(yuǎn),說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤,此時(shí),不能簡(jiǎn)潔地用3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值來(lái)求平均值,C錯(cuò)誤。5.為了推斷培育基是否被雜菌污染和選擇培育基是否起到了選擇作用,須要設(shè)置的比照組的培育基分別是()A.未接種的選擇培育基,未接種的牛肉膏蛋白胨培育基B.未接種的培育基,接種了的牛肉膏蛋白胨培育基C.接種了的選擇培育基,接種了的牛肉膏蛋白胨培育基D.接種了的培育基,未接種的牛肉膏蛋白胨培育基答案B解析若要推斷培育基是否被雜菌污染,可將未接種的培育基放在恒溫箱中培育,一段時(shí)間后若有菌落產(chǎn)生,說(shuō)明培育基被污染,若無(wú)菌落產(chǎn)生,說(shuō)明培育基沒(méi)有被污染。要推斷選擇培育基是否起到了選擇作用,接種了的選擇培育基是試驗(yàn)組,將等量的稀釋相同倍數(shù)的菌液接種到牛肉膏蛋白胨培育基上,作為比照組,在相同的條件下進(jìn)行培育,視察比較比照組和試驗(yàn)組中的菌落數(shù),在牛肉膏蛋白胨培育基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培育基上的菌落數(shù)目,綜上所述,B正確,A、C、D錯(cuò)誤。6.下列有關(guān)微生物分別、培育和計(jì)數(shù)的敘述,正確的是()A.分別土壤中微生物時(shí),須要先對(duì)土壤滅菌,再進(jìn)行培育B.測(cè)定土壤中細(xì)菌數(shù)量時(shí),一般選用103~107倍的稀釋液C.測(cè)定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目,常用稀釋涂布平板法或平板劃線法進(jìn)行計(jì)數(shù)D.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí),當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),一個(gè)活菌會(huì)形成一個(gè)菌落答案D解析分別土壤中微生物時(shí),須要對(duì)培育基滅菌,但不能對(duì)土壤樣品進(jìn)行滅菌,A錯(cuò)誤;由于土壤中各類(lèi)微生物的數(shù)量不同,在進(jìn)行分別和計(jì)數(shù)時(shí),就須要依據(jù)不同的稀釋度分別進(jìn)行涂布,測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量一般選擇104、105、106倍的稀釋液,B錯(cuò)誤;測(cè)定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目常用稀釋涂布平板法,平板劃線法不能用于計(jì)數(shù),C錯(cuò)誤;統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí),當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),一個(gè)活菌會(huì)形成一個(gè)菌落,D正確。7.下圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別和計(jì)數(shù)”試驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是()A.3號(hào)試管的稀釋倍數(shù)為103倍B.4號(hào)試管中稀釋液進(jìn)行平板培育得到的菌落平均數(shù)恰為5號(hào)試管的10倍C.5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×109個(gè)D.該試驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要高答案C解析3號(hào)試管中的菌落稀釋倍數(shù)為104倍,A錯(cuò)誤;4號(hào)試管中稀釋液進(jìn)行平板培育,稀釋倍數(shù)比5號(hào)試管的低10倍,假如稀釋倍數(shù)適當(dāng),得到的菌落平均數(shù)可能是5號(hào)試管的10倍,B錯(cuò)誤;5號(hào)試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為(168+175+167)÷3÷0.1×106=1.7×109個(gè),C正確;稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞長(zhǎng)成一個(gè)菌落,使該試驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要低,D錯(cuò)誤。8.下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”試驗(yàn)操作的敘述,其中錯(cuò)誤的是()A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B.取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1mL,分別涂布于各組平板上C.將試驗(yàn)組和比照組平板倒置,37℃恒溫培育24~48小時(shí)D.確定比照組無(wú)菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的試驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)答案D解析用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基時(shí),須要先滅菌再倒平板,A正確;測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量,一般選用104、105、106倍的稀釋液進(jìn)行平板培育,體積為0.1mL,為了保證明驗(yàn)的精確性,需進(jìn)行比照,同時(shí)保證無(wú)關(guān)變量相同且相宜,因此需取等體積的無(wú)菌水,分別涂布于各組平板上,B正確;試驗(yàn)組和比照組須要在37℃恒溫箱培育一段時(shí)間,再視察計(jì)數(shù),C正確;比照組無(wú)菌說(shuō)明培育基滅菌勝利且操作過(guò)程中沒(méi)有雜菌污染,那么在菌落計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選擇菌落數(shù)在30~300間的試驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù),D錯(cuò)誤。9.人和哺乳動(dòng)物的尿液中含有尿素,大量尿素的存在會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。土壤中有些細(xì)菌含有脲酶,可降解尿素。下圖是某同學(xué)從土壤中篩選出降解尿素菌株的試驗(yàn)流程。請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題:eq\x(配制土壤溶液)→eq\x(系列稀釋)→eq\x(涂布平板與培育)→eq\x(菌落計(jì)數(shù))(1)用以________為唯一氮源的培育基篩選能分泌脲酶的細(xì)菌。從功能上講,該培育基屬于________培育基。分別培育細(xì)菌時(shí)必需進(jìn)行________操作。(2)采納________________法時(shí)須要將樣液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓蠼臃N培育、菌落計(jì)數(shù)。在稀釋土壤溶液的過(guò)程中每一步都要在__________________旁進(jìn)行操作。稀釋處理的目的是________________________________________,接種后的培育皿倒置于相宜溫度的恒溫箱中培育,平板倒置培育的目的主要是____________________________。(3)在培育基中加入酚紅指示劑,若培育基中存在分泌脲酶的細(xì)菌,其菌落四周會(huì)出現(xiàn)________,這是由于尿素被分解產(chǎn)生________,遇培育基中所加酚紅指示劑產(chǎn)生的顏色改變所致。變色區(qū)域越大,表明該菌株降解尿素的實(shí)力________。(4)分別細(xì)菌時(shí)運(yùn)用固體平面培育基的緣由是_________________________。答案(1)尿素選擇無(wú)菌(2)稀釋涂布平板酒精燈火焰得到單菌落,避開(kāi)土壤溶液中菌體濃度過(guò)高防止皿蓋上的冷凝水落入培育基,造成污染(3)紅色環(huán)帶氨(或NH3)越強(qiáng)(4)固體培育基上細(xì)菌分裂產(chǎn)生的子代個(gè)體不易分散,從而形成菌落解析(1)欲篩選出能降解尿素的菌株,培育基中應(yīng)以尿素為唯一氮源,不能降解尿素的細(xì)菌在此培育基上不能生存,這類(lèi)培育基屬于選擇培育基。分別培育細(xì)菌時(shí)必需進(jìn)行無(wú)菌操作。(2)常用稀釋涂布平板法接種培育、菌落計(jì)數(shù),稀釋菌液的過(guò)程中每一步都要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,以避開(kāi)四周微生物的污染。為了得到單菌落,需將土壤溶液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)瑥亩咕奂谝黄鸬奈⑸锓稚⒊蓡蝹€(gè)細(xì)胞,進(jìn)而能在培育基表面形成單個(gè)菌落,便于純化分別菌種。平板倒置培育的目的主要是防止培育過(guò)程中皿蓋上的冷凝水滴落在培育基表面,造成雜菌污染。(3)細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨,遇酚紅指示劑變紅。降解尿素實(shí)力越強(qiáng)的菌株,菌落四周形成的紅色環(huán)帶越大。(4)液體培育基中難以得到成形的菌落,而固體培育基上可以形成肉眼可見(jiàn)的菌落。10.在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)覺(jué)一種廣泛運(yùn)用的除草劑(含氮有機(jī)化合物)在土壤中不易降解,長(zhǎng)期運(yùn)用可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤,可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌(已知該除草劑在水中溶解度低,含確定量該除草劑的培育基不透亮)。(1)制備土壤浸出液時(shí),為避開(kāi)菌體濃度過(guò)高,需將浸出液進(jìn)行________處理。(2)要從長(zhǎng)期運(yùn)用該除草劑的土壤中分別目的菌,從物理性質(zhì)、用途方面來(lái)看,上述培育皿中培育基的特點(diǎn)是______________________________________。(3)在劃線培育時(shí),只有很少菌落出現(xiàn),大部分細(xì)菌在此培育基上不能生長(zhǎng)的主要緣由是____________________________或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長(zhǎng)。(4)在固體培育基上形成的菌落中,無(wú)透亮帶菌落利用的氮源主要是________,有透亮帶菌落利用的氮源主要是________,據(jù)此可篩選出目的菌。(5)科研人員用放射線處理該細(xì)菌獲得兩個(gè)突變株A和B,然后對(duì)突變株A和B進(jìn)行試驗(yàn),結(jié)果如下表所示:接種的菌種一般培養(yǎng)基試驗(yàn)處理及結(jié)果A不生長(zhǎng)添加養(yǎng)分物質(zhì)甲,能生長(zhǎng)B不生長(zhǎng)添加養(yǎng)分物質(zhì)乙,能生長(zhǎng)A+B能生長(zhǎng)不添加養(yǎng)分物質(zhì)甲、乙就能生長(zhǎng)突變株A不能在一般培育基上生長(zhǎng)的緣由是________________________。突變株A和B混合在一起接種于一般培育基中能生長(zhǎng)的最可能緣由是_______________________________________________________________________________。答案(1)稀釋(2)以該除草劑為唯一氮源的固體培育基(3)培育基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源(4)氮?dú)庠摮輨?5)突變株A缺乏合成養(yǎng)分物質(zhì)甲所須要的酶突變株A生長(zhǎng)須要養(yǎng)分物質(zhì)甲,突變株B可以供應(yīng);突
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