如何提高病原菌的·陽性率課件

如何提高病原菌的陽性率

臨床微生物實驗室的任務(wù)就是對臨床送檢的感染性標本進行病原菌的定性或定量分析，為患者的治療提供幫助。只有分離到病原菌，才有可能進行藥物敏感性試驗，臨床醫(yī)生才能夠根據(jù)藥敏結(jié)果進行針對性治療（或依據(jù)文獻資料進行經(jīng)驗性治療）。

正確的微生物學(xué)檢驗始自正確的標本的采取。臨床醫(yī)師、護師及檢驗技師都必須通曉其要領(lǐng)。----引自著名的臨床微生物檢驗專著ManualofclincalMicrbiology主編patrickmurray的話

7、盛標本容器經(jīng)滅菌處理，但不得使用消毒劑。8、送檢標本應(yīng)注明標本來源和送檢目的。標本的采集即使選擇再好，如果采集不當(dāng)也不能分離到病原菌，結(jié)果甚至?xí)晃廴揪蓴_標本最佳采集時機1、在感染發(fā)生的早期或急性期采樣；懷疑沙門菌感染時，一般在病后2w左右采集尿液培養(yǎng)；懷疑鉤端螺旋體感染時，一般感染后2w左右采集尿液培養(yǎng)，此時采集尿標本培養(yǎng)陽性率高。2、最好在用抗菌藥治療之前進行采集。3、如果已經(jīng)使用抗菌藥物，應(yīng)停藥1—2次再進行采集，若病情不允許停藥應(yīng)在下次給藥之前進行采集（此時藥物濃度最低）。4、尿標本的采集應(yīng)要求患者憋尿6h以上。5、痰標本查結(jié)核桿菌，以晨痰為佳（濃縮）。血培養(yǎng)注意事項1.從靜脈取血；2.不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置口取血；3.若導(dǎo)管設(shè)施取血*，必需同時靜脈取血，以求對比和解釋；*不要棄去初段血，不用抗凝劑沖洗4.不推薦靜脈血直接入瓶；5.不主張換針頭入瓶；6.有血的培養(yǎng)瓶不可放入冰箱和凍箱保存；7.穿刺點消毒：以醇類、洗必泰為好。

標本最少采集量

（1）固體標本不應(yīng)少于2g；（2）一般液體標本不應(yīng)少于2ml；（3）SCF不應(yīng)少于1ml；（4）查真菌和結(jié)核菌的液體標本不應(yīng)少于10ml；（5）用拭子采集標本時，應(yīng)同時取兩份，分別用于培養(yǎng)和涂片。（6）血液標本，成年人采血量為10ml，新生兒與嬰幼兒為1~2ml，兒童采集3～5ml。培養(yǎng)基與血液之比以5~10∶1為宜，以稀釋血液中的抗生素、抗體等殺菌物質(zhì)。有資料顯示，每增加1ml血量平均提高陽性率3.2%。藥物與添加劑的影響1、麻醉藥和某些抗凝劑對一些病原體有抑制作用。2、0.025~0.05%聚茴香腦磺酸鈉(sodiumpolyanetholsulfonate,SPS)。具有抗凝、抗吞噬、抗補體及拮抗某些抗生素的作用。聚茴香腦磺酸鈉對厭氧消化鏈球菌、淋球菌、腦膜炎球菌等有毒性作用。肝素對某些厭氧菌有抑制作用。3、用拭子取材時，應(yīng)選用合成纖維（藻酸鈣）制作的“綿”拭子及簽桿（或金屬制），最好不要用天然棉纖維和木制簽桿制作的棉簽，因為在天然材料的加工過程中會殘留抑菌物質(zhì)（棉花中的脂肪酸或樹脂及木棒中的甲醛等）在其中。防污染措施

(1）自然咳痰法：留取前刷牙，用清水漱口3次（或硼酸漱口），以除去口腔內(nèi)大部分雜菌，之后用力咳出呼吸道深部的痰液吐至無菌、防滲漏、帶螺旋帽的廣口瓶內(nèi)，蓋好蓋子。附：判斷痰標本取材合格標準白細胞柱狀上皮細胞判斷或處理>25<10合格標本<25<25可接受>2510—25可接受>25(10-25)>25重送標本<10>25重送標本（2）清潔中段尿采集法：①女性：采樣前應(yīng)先用肥皂和水清洗外陰部及尿道口，用滅菌紗布擦拭，用手指將陰唇分開排尿，棄去前段尿，留取中段尿于滅菌試管內(nèi)，蓋好蓋子立即送檢。②男性：用肥皂和水翻轉(zhuǎn)包皮清洗陰莖頭，滅菌紗布擦干后，棄去前段尿，留取中段尿于滅菌試管內(nèi)，蓋好蓋子立即送檢。（3）燒傷、褥瘡和傷口：應(yīng)該用無菌鹽水擦拭表面后，采集損傷底部。

（4）皮膚消毒程序嚴格執(zhí)行以下三步法：①70%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上；②1%～2%碘酊作用30s或10%碘伏作用90s以上，從穿刺點向外畫圈消毒，至消毒區(qū)域直徑3cm以上；③70%酒精脫碘。對碘過敏的患者,用70%酒精消毒60s,待酒精揮發(fā)干燥后采血。對酒精過敏的患者可用1%新潔而滅菌消毒皮膚。（建議先用70-80%異丙醇去脂，再用葡萄糖酸氯乙定消毒）

（5）培養(yǎng)瓶消毒程序：70%異丙基乙醇（70%酒精也可）擦拭血培養(yǎng)瓶，橡皮塞,作用60s；用無菌紗布或無菌棉簽清除橡皮塞子表面殘余酒精。（6）傷口及粘膜部位標本，取材前不應(yīng)該使用任何消毒劑進行消毒。以血培養(yǎng)為例血培養(yǎng)是目前診斷血流感染的最好方式，而要想得到準確的血培養(yǎng)結(jié)果來指導(dǎo)臨床治療，其中有幾個關(guān)鍵步驟需要格外注意。根據(jù)美國CLSI標準，采血次數(shù)、采血量、采血時間以及培養(yǎng)瓶被稱為是確保血培養(yǎng)最佳檢出率的4把“密匙”。正確的采血次數(shù)、充足的采血量、適當(dāng)?shù)牟裳獣r間和含樹脂的培養(yǎng)瓶對于血培養(yǎng)檢測結(jié)果都至關(guān)重要。第一是最佳采血時機的掌握。為盡量獲得陽性血培養(yǎng)結(jié)果，應(yīng)在病人寒戰(zhàn)或者體溫剛剛開始升高時采血。一旦體溫達到高峰，往往大部分細菌在血中已被清除了，會使培養(yǎng)陽性率降低。應(yīng)盡可能在抗菌藥物使用前采血；對已經(jīng)使用抗菌藥物的病人，最好在下次用藥前采集。

血培養(yǎng)的采集最好在同一時間，在患者的不同解剖部位采集兩份或兩份以上標本。血培養(yǎng)檢測規(guī)范化操作對特殊的全身性和局部感染患者采集血培養(yǎng)作出了以下建議：1．懷疑急性原發(fā)性菌血癥、真菌菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎或肺炎的患者：應(yīng)立即采集2或3份血培養(yǎng)瓶，快速進行血培養(yǎng)。2．不明病源的發(fā)熱，如隱性膿腫，傷寒熱和波浪熱：發(fā)熱開始采集2或3份血培養(yǎng)。24h至36h后，估計溫度升高之前（通常在下午）立即采集2份以上血培養(yǎng)。3．懷疑菌血癥或真菌菌血癥，血培養(yǎng)結(jié)果持續(xù)陰性，應(yīng)改變血培養(yǎng)方法，以便獲得罕見的或苛養(yǎng)的微生物。4．感染性心內(nèi)膜炎，對急性心內(nèi)膜炎患者1h（2h內(nèi)）采集3份血培養(yǎng)，如果所有結(jié)果24h后陰性，再采集3份血培養(yǎng)瓶。入院前兩周內(nèi)接受抗生素治療的患者，連續(xù)三天采集血培養(yǎng)，每天2份。第四如果患者在就診之前已經(jīng)使用了抗菌藥，則應(yīng)選擇含樹脂培養(yǎng)瓶進行操作，借以中和、吸附抗菌藥物，提高病原菌的陽性檢出率。最后除了以上幾個要點以外還要注意標本采集時的無菌操作及采血后應(yīng)立即送檢。目前有些醫(yī)生因為考慮到血培養(yǎng)耗時長而放棄檢查。事實上，隨著檢驗技術(shù)的提高，大部分病原菌可以在三天內(nèi)檢測出來。我科可以根據(jù)涂片染色先進行電話報告。我院臨床醫(yī)生可以跟我科微生物檢驗人員積極溝通，提高血培養(yǎng)標本的送檢質(zhì)量，最大限度改善患者的預(yù)后。標本的轉(zhuǎn)運

1.所有標本必須立刻送交實驗室，最好在2h以內(nèi)小量標本應(yīng)于采集后15~30min內(nèi)轉(zhuǎn)運。對環(huán)境敏感的微生物要求在床邊接種，包括厭氧菌、淋球菌、腦膜炎奈瑟菌、嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、志賀氏菌、弗朗西斯氏菌屬、莢膜組織胞漿菌、皮炎芽生菌、新型隱球菌等。2.所有標本必須放入有分隔空間的防漏塑料袋內(nèi)轉(zhuǎn)運。要嚴格按照生物安全要求進行操作。3.如果標本的運送有所延遲，應(yīng)將標本放入運送培養(yǎng)基中送檢。標本的儲存1.如果標本的處理有所延遲，應(yīng)將標本放入轉(zhuǎn)運培養(yǎng)基中在適當(dāng)條件下進行短期儲存2.淺表或開放性標本可選用需氧轉(zhuǎn)運培養(yǎng)基，封閉或深部標本應(yīng)選用厭氧轉(zhuǎn)運培養(yǎng)基3.懷疑由對溫度敏感的病原菌感染的標本應(yīng)在室溫下保存，其他標本均可放在4℃下進行保存標本處理對病原菌分離率的影響1、正確的采集和處理標本是診斷感染性疾病的關(guān)鍵。不合格標本的結(jié)果報告可能會提供能導(dǎo)致誤診的錯誤信息和不恰當(dāng)?shù)闹委煛?、當(dāng)標本送達實驗室時，要檢查標本和申請單（以確保符合標本接受的要求），并在申請單上記錄送檢時間和日期。3、應(yīng)當(dāng)制定合格標本的最低要求和拒收不合格標本的指南，實驗室必須嚴格執(zhí)行標本接受和拒收的制度和標準。標本的拒收12項原則1.不正確的轉(zhuǎn)運溫度；2.不正確的轉(zhuǎn)運工具；3.延長轉(zhuǎn)運時間；4.未貼標簽或錯貼標簽的標本；5.標