DB23T 3896-2024 玉米穗腐病抗源鑒定及評價(jià)技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20CCSB16

DB23黑 龍 江 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB23/T3896—2024玉米穗腐病抗源鑒定及評價(jià)技術(shù)規(guī)程2024-12-30發(fā)布 2025-01-29實(shí)施黑龍江省市場監(jiān)督管理局 發(fā)布DB23/T3896—2024DB23/T3896—2024前 言本文件按照GB/T1請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由黑龍江省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。物科學(xué)研究所。新、胡少新、王志國。DB23/T3896—2024DB23/T3896—2024PAGEPAGE3玉米穗腐病抗源鑒定及評價(jià)技術(shù)規(guī)程范圍病情調(diào)查和抗病性評價(jià)等要求。本文件適用于玉米種質(zhì)資源對玉米鐮孢穗腐病的田間抗性鑒定和評價(jià)。規(guī)范性引用文件（所有的修改單）適用于本文件。GB4404.1糧食作物種子第1部分：禾谷類NY/T1248.8玉米抗病蟲性鑒定技術(shù)規(guī)范第8部分：鐮孢穗腐病DB23/T2154玉米機(jī)械化籽粒收獲栽培技術(shù)規(guī)程術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。玉米穗腐病抗源鑒定identificationofresistancesourcetomaizeearrot（Fusariumgraminearum）（Fverticillioides）subglutinans）、層出鐮孢（F.proliferatum）穗腐病混合菌進(jìn)行人工接種，鑒定挖掘抗穗腐病種質(zhì)資源。接種體制備鐮孢病原菌分離與致病力測定病原菌分離75%2s～31.5%的3min～53PDA25～273d菌至試管中保存。致病力測定的致病能力。鐮孢病原菌鑒定NY/T1248.8的規(guī)定執(zhí)行。病原菌的配制培養(yǎng)基的制備（12520250mL三角瓶中，121℃45min，完成高粱粒培養(yǎng)基的制備。按照NY/T1248.8提供的方法制備馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（Potatodextroseagarmedium，PDA）。禾谷鐮孢孢子懸浮液的配制將禾谷鐮孢轉(zhuǎn)移至PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，挑取3個(gè)～5個(gè)擴(kuò)繁的禾谷鐮孢的菌碟轉(zhuǎn)移到0.9%～1.5%的無菌鹽水中，每100mL三角瓶裝液量為15ml，28℃～30℃、可見光150lx～200lx（150rpm～18096h～1202×106孢子/mL，4℃96h。擬輪枝鐮孢孢子懸浮液的配制PDA7d526℃5層紗布過濾后用血球計(jì)數(shù)法調(diào)整孢子懸浮液濃度為2×106孢子/mL，4℃條件下可保存96h。亞粘團(tuán)鐮孢孢子懸浮液的配制PDA7d526℃52×106孢子℃96h層出鐮孢孢子懸浮液的配制PDA7d526℃52×106孢子/mL，4℃96h。混合孢子懸浮液配制4:2:1:0.5懸浮液混合，448h。抗病性鑒定圃設(shè)置鑒定圃設(shè)計(jì)鑒定圃應(yīng)具有良好的自然發(fā)病環(huán)境，可根據(jù)需要進(jìn)行排灌。鑒定種質(zhì)資源按照晚熟、中熟、早熟3個(gè)熟期分區(qū)種植，各熟期內(nèi)種質(zhì)資源采取隨機(jī)排列，每隔30行鑒定材料設(shè)置1組已知同熟期抗病、感病對照。對照見附錄表A.1。鑒定材料采用單行區(qū)種植，3次重復(fù)，隨機(jī)排列，小區(qū)行長5m，行距0.65m，植株密度為75000株/hm2。鑒定材料播種DB23/T2154規(guī)定執(zhí)行。鑒定材料種子不應(yīng)進(jìn)行包衣處理，播種方式采用人工點(diǎn)播，每穴點(diǎn)播種子2粒，出苗后每穴保留1株健康的植株。種子符合GB4404.1標(biāo)準(zhǔn)。田間管理田間管理及蟲草害防治與大田生產(chǎn)相同，田間管理過程中不應(yīng)使用殺菌劑。接種接種時(shí)期應(yīng)在玉米雌穗吐絲后3d～5d或花絲長度達(dá)5cm～10cm時(shí)進(jìn)行。接種部位及方法接種采用花絲通道法，每株選擇上部第1個(gè)果穗，利用可定量的連續(xù)注射器，在果穗花絲通道側(cè)邊插入至通道中空部位，每穗注射接種2mL孢子懸浮液。接種后常規(guī)田間管理，適度保持田間大氣濕度。病情調(diào)查調(diào)查時(shí)間在鑒定材料進(jìn)入完熟期時(shí)進(jìn)行調(diào)查。調(diào)查方法應(yīng)按附錄表A.2執(zhí)行。記錄每份鑒定材料的總株數(shù)和各發(fā)病級別株數(shù)?？共⌒栽u價(jià)抗病性評價(jià)方法見式1。式中：

??????????=（Σ??????）??1

…………（式1）ERSA——穗腐病平均病情級別（Earrotscoreonaverage）；ERSi——第i個(gè)接種果穗的病情級別（Earrotscore）；i——接種果穗的順序編碼；n——每份鑒定材料的接種果穗總數(shù)；計(jì)算保留1位小數(shù)，鑒定材料的抗性評價(jià)方法按附錄表A.3執(zhí)行。有效性判別當(dāng)感病對照材料抗性鑒定為“感”時(shí)，該批次鑒定結(jié)果視為有效。重復(fù)鑒定當(dāng)鑒定材料初次鑒定結(jié)果表現(xiàn)為“抗”和“高抗”，應(yīng)在第二年進(jìn)行重復(fù)鑒定?？共⌒越Y(jié)果判定按附錄表A.3的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行抗性評價(jià)，將調(diào)查和評價(jià)結(jié)果錄入附錄表A.4。鑒定檔案接種時(shí)間、調(diào)查時(shí)間、接種總株數(shù)、各病情級別發(fā)病株數(shù)和抗病性評價(jià)。DB23/T3896—2024DB23/T3896—2024附錄A（資料性）A.1不同熟期對照表A.1表A.1不同熟期對照熟期抗病對照感病對照晚熟區(qū)X178B73中熟區(qū)OH43W6199Z早熟區(qū)H3A18200HRH078A.2玉米穗腐病鑒定田間病情分級表A.2表A.2玉米穗腐病鑒定田間病情分級病情分級描 述1發(fā)病面積占果穗總面積0%～1%3發(fā)病面積占果穗總面積2%～10%5發(fā)病面積占果穗總面積11%～25%7發(fā)病面積占果穗總面積26%～50%9發(fā)病面積占果穗總面積51%～100%A3 玉米對穗腐病抗性的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)表A.3表A.3玉米對穗腐病抗性的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)平均病情級別抗性≤1.5高抗Highlyresistant（HR）1.6～3.5抗 Resistant（R）3.6～5.5中抗Moderatelyresistant（MR）5.6～7.5感 Susceptible（S）7.6～9.0高感Highlysusceptible（HS）A4 玉米抗鐮孢穗腐