26DNA的粗提取和鑒定-高考生物一輪實(shí)驗(yàn)專題復(fù)習(xí)(含答案)_第1頁
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文檔簡介

DNA的粗提取和鑒定—高考生物一輪實(shí)驗(yàn)專題復(fù)習(xí)一、選擇題1.洋蔥是理想的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)材料,也常用于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中。下列關(guān)于該實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是()A.某些動(dòng)物細(xì)胞也是提取DNA的理想材料,如豬的成熟紅細(xì)胞B.過濾后的洋蔥研磨液放置在4℃冰箱中可以防止DNA降解C.為析出更多的DNA,可以用玻璃棒沿不同方向快速進(jìn)行攪拌D.鑒定DNA時(shí),將二苯胺試劑加入含DNA的溶液中即出現(xiàn)藍(lán)色2.下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是()A.可選用菜花、香蕉、菠菜和豬血等DNA含量豐富的材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn),但提取DNA的方法可能稍有不同B.向含DNA的濾液中加入預(yù)冷的體積分?jǐn)?shù)70%的酒精溶液中,有利于獲得較純凈的DNAC.DNA析出過程中應(yīng)用玻璃棒沿同一方向進(jìn)行輕緩攪拌,以免DNA斷裂D.將提取的絲狀物溶解在2mol/LNaCl溶液中,將二苯胺試劑加入就能出現(xiàn)藍(lán)色3.“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的基本過程是:裂解細(xì)胞→分離DNA→沉淀DNA→鑒定。下列敘述不正確的是()A.裂解:利用研磨等方法使細(xì)胞破裂釋放出DNA等物質(zhì)B.分離:離心后留取上清液可去除不溶于研磨液的物質(zhì)C.沉淀:加入95%冷的酒精溶液沉淀得到粗提DNAD.鑒定:加入二苯胺沸水浴后可見溶液由藍(lán)變?yōu)榇u紅色4.下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,錯(cuò)誤的是()A.實(shí)驗(yàn)用到的研磨液中往往需要加入DNA酶抑制劑B.洋蔥研磨液需用濾紙過濾,以保證提取的DNA量C.將二苯胺試劑加入溶有絲狀物的NaCl溶液中,沸水浴呈藍(lán)色D.若提取的絲狀物為黃色,說明其可能含有蛋白質(zhì)等雜質(zhì)成分5.關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn),下列說法錯(cuò)誤的是()A.DNA溶于酒精,蛋白質(zhì)不溶于酒精,利用這一原理初步分離DNA與蛋白質(zhì)B.將研磨液過濾到燒杯中,在冰箱放置一段時(shí)間后,上清液中含DNA和蛋白質(zhì)C.將析出的絲狀物溶于2mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺試劑在沸水浴下鑒定DNAD.實(shí)驗(yàn)結(jié)果變色不明顯,可能是研磨不充分導(dǎo)致DNA不能從細(xì)胞核中充分釋放6.下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”、“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,錯(cuò)誤的是()A.將預(yù)冷酒精加入上清液后,出現(xiàn)的白色絲狀物為粗提取的DNAB.鑒定DNA時(shí)應(yīng)將絲狀物直接加到二苯胺試劑中進(jìn)行水浴加熱C.將擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物與凝膠載樣緩沖液(內(nèi)含指示劑)混合,注入加樣孔D.在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小、構(gòu)象等有關(guān)7.“DNA的粗提取”實(shí)驗(yàn)流程如下圖,a、b代表有關(guān)實(shí)驗(yàn)操作,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.本實(shí)驗(yàn)也可以采用雞血細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料B.圖中a操作為研磨、過濾、離心C.圖中的A溶液為二苯胺溶液,使用時(shí)需要沸水浴加熱D.提取到的白色絲狀物中仍含有雜質(zhì)8.“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的基本過程如下圖。下列選項(xiàng)是某同學(xué)的總結(jié),其中敘述錯(cuò)誤的是()A.①過程為裂解:使細(xì)胞破裂釋放出DNA等物質(zhì),其研磨液中的EDTA可抑制DNA酶降解DNAB.②過程為分離:可完全去除混合物中的多糖、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)C.③過程為沉淀:反復(fù)多次可提高DNA的純度D.④過程為鑒定:在沸水條件下,DNA遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色9.DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的相關(guān)操作如圖所示,將步驟①充分?jǐn)嚢韬螳@得的黏稠不溶物進(jìn)行步驟②的操作。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.步驟①可去除混合物中不溶于酒精的蛋白質(zhì)等物質(zhì)B.步驟②目的是使DNA溶解在2molC.步驟①和步驟②所用的NaCl溶液濃度可能相同D.步驟②黏稠物溶解后可用二苯胺試劑鑒定,但需要加熱10.研究人員通過實(shí)驗(yàn)探究不同儲(chǔ)藏條件對棉花葉片DNA純度及提取率(提取率越高,獲得的DNA越多)的影響,結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.DNA能溶于酒精,故可用酒精處理棉花葉片提取DNAB.通過粗提取獲得的DNA中可能仍然含有核蛋白、多糖等雜質(zhì)C.用二苯胺進(jìn)行鑒定時(shí),相同體積下可通過比較試管藍(lán)色深淺判斷DNA含量D.進(jìn)行DNA粗提取實(shí)驗(yàn)前最佳的處理方式為將棉花葉片冷凍處理3天11.“DNA粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)步驟是:研磨→去雜質(zhì)→析出→鑒定。某研究小組欲探究不同的去雜質(zhì)方法對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。下列說法錯(cuò)誤的是()去雜質(zhì)方式沉淀質(zhì)量(g)DNA濃度(ng/μL)OD260/OD280二苯胺鑒定離心0.16881.51.53藍(lán)色4℃冰箱靜置0.1028336.41.41(注:OD260/OD280的比值可檢查DNA純度。純DNA的OD260/OD280為1.8,當(dāng)存在蛋白質(zhì)等物質(zhì)污染時(shí),這一比值會(huì)明顯降低)A.相比于4℃冰箱靜置,離心法能獲得純度更高的DNAB.對研磨液進(jìn)行離心可以加速DNA的沉淀提高純度C.可利用體積分?jǐn)?shù)95%預(yù)冷的酒精析出DNAD.二苯胺試劑鑒定粗提取DNA時(shí)需要加熱12.如圖是“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中的兩個(gè)操作步驟示意圖,相關(guān)敘述正確的是()A.圖1中溶液a是NaCl溶液,玻璃棒應(yīng)沿不同方向進(jìn)行攪拌B.圖1中絲狀物為粗提取的DNA,其與蛋白質(zhì)均可溶于酒精C.若圖2試管中溶液的液面高于燒杯中的液面,可能導(dǎo)致加熱不充分D.圖2試管2起對照作用,溶液b是溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液13.下圖是“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)中幾個(gè)重要操作的示意圖,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.實(shí)驗(yàn)的操作順序是③②①④B.圖①的原理是DNA不溶于酒精,而某些蛋白質(zhì)可溶于酒精C.圖①需要用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪拌,便于DNA的析出D.圖④操作后加入二苯胺試劑充分振蕩,可觀察到顏色變藍(lán)14.乳酸菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后,其擬核DNA會(huì)纏繞在細(xì)胞壁碎片上,靜置一段時(shí)間后,質(zhì)粒將分布在上清液中,我們由此初步獲得質(zhì)粒DNA.下圖為用限制酶處理所提取的產(chǎn)物并進(jìn)行電泳分析的結(jié)果。有關(guān)DNA的粗提取與鑒定,下列分析正確的是()A.以洋蔥為材料提取DNA時(shí)可加入預(yù)冷的酒精溶液(體積分?jǐn)?shù)為95%),以使蛋白質(zhì)等物質(zhì)析出B.可將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液中,加入二苯胺試劑并沸水浴5min進(jìn)行鑒定C.圖中用限制酶Ⅰ和Ⅱ分別處理提取的產(chǎn)物所得到的電泳結(jié)果,說明未提取到質(zhì)粒D.溶菌酶能破壞乳酸菌的細(xì)胞壁,但不會(huì)破壞藍(lán)細(xì)菌的細(xì)胞壁15.DNA在生活中有多方面的應(yīng)用。下列關(guān)于DNA粗提取、擴(kuò)增和電泳鑒定敘述正確的是()A.利用DNA在酒精中溶解度較大的原理來提取DNAB.PCR體系中加入dNTP可為DNA擴(kuò)增提供原料和能量C.DNA電泳鑒定時(shí),可加入二苯胺使DNA顯色再觀察條帶D.DNA的片段大小與在瓊脂糖凝膠電泳中的遷移距離呈正相關(guān)二、非選擇題16.下圖是DNA在不同NaCl溶液中溶解度,有實(shí)驗(yàn)小組利用以下數(shù)據(jù)展開了DNA粗提取和鑒定的實(shí)驗(yàn)。(1)【實(shí)驗(yàn)原理】:DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同,在mol/L下,DNA的溶解度最??;同時(shí)DNA不溶于,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解其中?!緦?shí)驗(yàn)材料】:新鮮洋蔥。(2)【實(shí)驗(yàn)步驟】:①研磨:稱取30g洋蔥,放入研缽,倒入10mL,充分研磨,然后收集濾液。②離心:將濾液放入離心機(jī)中離心,取(填“上清液”或“沉淀”)置于燒杯中。③DNA的析出:往燒杯中加入與濾液體積相等的、預(yù)冷的酒精溶液(體積分?jǐn)?shù)為),靜置2~3min。④DNA的鑒定:用mol/L的NaCl溶解DNA;在條件下,DNA與試劑反應(yīng)呈現(xiàn)。17.某小組開展了DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn),選擇了不同溫度(20℃、-20℃)條件下保存的花菜、辣椒和蒜黃作為實(shí)驗(yàn)材料,部分實(shí)驗(yàn)步驟如圖1所示。回答下列問題:(1)選擇花菜等植物材料時(shí),為了使研磨的效果更好,可以在處理材料的過程中加入適量的(填酶的名稱)。(2)圖1中,將獲取的研磨液直接倒入塑料離心管中,然后進(jìn)行離心處理,再取(填“上清液”或“沉淀物”)放入燒杯中。加入體積分?jǐn)?shù)為95%的預(yù)冷酒精溶液來初步提取DNA,這樣做的原理是。(3)將DNA粗提取物溶于2mol·L-1的NaCl溶液中,加入試劑,在條件下進(jìn)行鑒定。(4)DNA鑒定結(jié)果如圖2所示。據(jù)圖2分析,相同溫度條件下,的DNA粗提取含量最高。同種實(shí)驗(yàn)材料在℃條件下DNA粗提取含量更高,其原因可能是(從酶的角度作答)。18.下面是某位同學(xué)以洋蔥為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行DNA提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)步驟:a.稱取30克已切碎的洋蔥,放入研缽中,加入少量石英砂,倒入10mL0.14mol/L的氯化鈉溶液,充分研磨.b.研磨后,用漏斗和紗布過濾,得到濾液.c.沿?zé)诰従徬驗(yàn)V液中加入95%的酒精溶液20mL,并用玻璃棒快速攪拌,待纖維狀粘稠物析出,用玻璃棒可將其輕輕卷起.d.取兩支試管,編為1、2號(hào),各加入2mol/L的氯化鈉溶液2mL,向1號(hào)試管中加入一些纖維狀粘稠物,振蕩使其溶解,然后向兩支試管中各加入2mL二苯胺試劑,觀察顏色變化.請分析回答:(1)指出以上實(shí)驗(yàn)步驟中的三個(gè)錯(cuò)誤:、.(2)在a步驟中,加入少量石英砂是為了,有時(shí)人們還在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑,原因是洗滌劑能,有利于DNA的釋放.(3)c步驟中用玻璃棒輕輕卷起的纖維狀粘稠物是色的.(4)在所有操作均正確的情況下,d步驟中1號(hào)、2號(hào)試管內(nèi)溶液顏色變化分別為.(5)DNA提取實(shí)驗(yàn)不宜用豬血作為實(shí)驗(yàn)材料,原因是.

答案解析部分1.【答案】B2.【答案】C3.【答案】D4.【答案】B5.【答案】A6.【答案】B7.【答案】C8.【答案】B9.【答案】A10.【答案】A11.【答案】B12.【答案】C13.【答案】D14.【答案】B15.【答案】B16.【答案】0.14;酒精;研磨液;上清液;95%;2;沸水?。欢桨?;藍(lán)色17.【答案】(1)纖維素酶(和果膠酶)(2)上清液;DNA不溶于酒精,某些蛋白質(zhì)溶于酒精(3)二苯胺;沸水?。?)蒜黃;-20;與20℃相比,-20℃的低溫抑制了酶的活性,DNA的降解速率更慢18.【答案】(1)a步驟中“倒入的氯化鈉溶液濃度為0.14mol/L”(意思正確即可);b步驟中“用玻璃棒快速攪拌、d步驟中沒有沸水浴加熱(2)研磨充分;溶解細(xì)胞膜(3)白(4)變藍(lán)、不變藍(lán)(5)豬的成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核(或無DNA)【解析】【解答】解:(1)以上實(shí)驗(yàn)步驟中的三個(gè)錯(cuò)誤為:a步驟中“倒入的氯化鈉溶液濃度為0.14mol/L”;b步驟中“用玻璃棒快速攪拌;d步驟中沒有沸水浴加熱.(2)洗滌劑能溶解細(xì)胞膜,有利于DNA的釋放.(3)c步驟中用玻璃棒輕輕卷起的纖維狀粘稠物是白色的.(4)1號(hào)試管中含有DNA,加入二苯胺后沸水浴加熱顏色變藍(lán);2號(hào)試管中不含DNA,加入二苯胺后沸水浴加熱顏色不變藍(lán).(5)DNA提取實(shí)驗(yàn)不宜用豬血作為實(shí)驗(yàn)材料,原因是豬的成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核(或無DNA).故答案為:(1)a步驟中“倒入的氯化鈉溶液濃度為0.14mol/Lb步驟中“用玻璃棒快速攪拌”d步驟中沒有沸水浴加熱(意思正確即可)(2)研磨充分溶解細(xì)胞膜(3)白(4)變藍(lán)、不變藍(lán)(5)豬的成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核(或無DNA)【分析】1、DNA粗提取和鑒定的原理:(1)DNA的溶解性:DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精;DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性.(2)DNA的鑒定:在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色.2、DNA粗提取和鑒定的過程:(1)實(shí)驗(yàn)材料的選?。悍彩呛蠨NA的生物材料都可以考慮,但是使用DNA含量相對較高的生物組織,成功的可能性更大.(2)破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液:動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易,以雞血細(xì)胞為例,在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水,同時(shí)用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可.如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞,需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜.例如,提取洋蔥的DNA時(shí),在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽,進(jìn)行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液.(3)去除濾液中的雜質(zhì):方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì),不分解DNA;方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同.方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開;

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