自發(fā)性強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴解剖病理學(xué)檢查規(guī)程編制說明

1《自發(fā)性強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴解剖病理學(xué)檢查規(guī)程》編制說明一、工作簡(jiǎn)況（一）任務(wù)來源強(qiáng)直性脊柱炎（AnkylosingSpondylitis，AS）作為一種全身性自身免疫性疾病，其病因、發(fā)病機(jī)制以及治療方法等方面的研究備受關(guān)注。自發(fā)性AS食蟹猴模型在血液學(xué)指標(biāo)、影像學(xué)以及組織病理學(xué)特征等方面的異常改變均與人類AS患者具有高度相似性，是進(jìn)行AS疾病研究較為的理想實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型之一。由于解剖病理學(xué)檢查能夠捕捉反映疾病本質(zhì)特征的病理學(xué)變化。因此，對(duì)AS食蟹猴模型進(jìn)行深入的病理學(xué)研究，能夠?yàn)锳S提供更全面、更詳細(xì)的疾病信息，有助于更深入地理解AS的病變特點(diǎn)、發(fā)病機(jī)制和病理過程。這些信息對(duì)于推動(dòng)AS的科學(xué)研究、提高診斷的精確性，以及開發(fā)更有效的治療方法都具有至關(guān)重要的意義。然而，由于AS疾病的復(fù)雜性和多樣性，對(duì)AS食蟹猴的解剖病理學(xué)檢查面臨著挑戰(zhàn)。目前，這一領(lǐng)域的研究缺乏統(tǒng)一的2標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范，這不僅影響了研究結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，還可能遺漏重要的病理信息?？紤]到食蟹猴標(biāo)本的珍貴性，制定詳細(xì)且統(tǒng)一的解剖病理學(xué)檢查標(biāo)準(zhǔn)顯得尤為重要。為此，我們基于廣東省生物技術(shù)研究院（原廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)測(cè)所）主持的國(guó)家自然基金項(xiàng)目“自發(fā)強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴模型的建立及其骨代謝調(diào)控機(jī)理研究”（編號(hào)：81941010）、號(hào)：2021YFF0702600）、國(guó)家自然基金項(xiàng)目“CD74+單核細(xì)胞促進(jìn)CXCR4+CD8+T細(xì)胞骨髓駐留在AS食蟹猴骨髓炎癥中的作用機(jī)制研究”（編號(hào)：32470567）、“自發(fā)性強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴模型的研究及應(yīng)用平臺(tái)”（編號(hào)：2017A070701003）、“非人靈長(zhǎng)類自發(fā)性疾病動(dòng)物篩選與評(píng)價(jià)技術(shù)平臺(tái)建設(shè)”（編號(hào)：2017A070701003），開展AS食蟹猴模型研究的基礎(chǔ)上，結(jié)合模型解剖病理學(xué)檢查的實(shí)踐，文獻(xiàn)報(bào)道及參考相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)研究，編制了該《自發(fā)性強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴解剖病理學(xué)檢查技術(shù)規(guī)程》。（二）協(xié)作單位本技術(shù)規(guī)范牽頭單位為廣東省生物技術(shù)研究院（原廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)測(cè)所協(xié)作單位廣東春盛生物科技發(fā)展有限公司、中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院、廣東省人民醫(yī)院、廣東藥科大學(xué)、南方醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院。（三）主要工作過程31.起草階段（1）組建起草小組在2023年11月，本標(biāo)準(zhǔn)由廣東省生物技術(shù)研究院（原廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)測(cè)所）提出，并聯(lián)合廣東春盛生物科技發(fā)展有限公司、中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院、廣東省人民醫(yī)院、廣東藥科大學(xué)、南方醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院等單位的專家共同組成起草小組。起草小組涵蓋了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)、病理學(xué)、風(fēng)濕病學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域的專家。經(jīng)起草小組討論，明確了標(biāo)準(zhǔn)的制定目的、范圍和內(nèi)容框架。（2）資料收集與調(diào)研在起草階段，起草小組在研究團(tuán)隊(duì)開展的AS食蟹猴模型的系列相關(guān)研究的基礎(chǔ)上,進(jìn)行了國(guó)內(nèi)外關(guān)于強(qiáng)直性脊柱炎的文獻(xiàn)資料的查閱，了解了強(qiáng)直性脊柱炎的發(fā)病機(jī)制、病理表現(xiàn)以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立和應(yīng)用情況。同時(shí)，還調(diào)研了國(guó)內(nèi)外相關(guān)的解剖病理學(xué)檢查標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范，為制定本標(biāo)準(zhǔn)提供了科學(xué)依據(jù)和參考。（3）專家咨詢與論證為了確保標(biāo)準(zhǔn)的先進(jìn)性和科學(xué)性，起草小組于2024年5月邀請(qǐng)了多位國(guó)內(nèi)外知名專家進(jìn)行咨詢和論證。專家們對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的制定過程、內(nèi)容框架、關(guān)鍵指標(biāo)等方面進(jìn)行了深入討論和指導(dǎo)，提出了寶貴的意見和建議。起草小組根據(jù)專家的意見，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了多次修改和完善。4（4）標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容制定在充分調(diào)研和專家咨詢的基礎(chǔ)上，起草小組開始制定標(biāo)準(zhǔn)的具體內(nèi)容，并于2024年11月形成了標(biāo)準(zhǔn)初稿。標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容涵蓋了自發(fā)性強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴解剖病理學(xué)檢查的各個(gè)方面，包括檢查程序、解剖病理學(xué)檢查的具體步驟和內(nèi)容、檢查報(bào)告的撰寫要求等。在制定過程中，起草小組特別注重標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)用性和可操作性，確保標(biāo)準(zhǔn)能夠在實(shí)際應(yīng)用中發(fā)揮指導(dǎo)作用。（5）內(nèi)部審核與修改在標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容制定完成后，起草小組于2025年1月進(jìn)行了內(nèi)部審核和修改工作。通過多次討論和修改，力求標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)性、實(shí)用性和可操作性。同時(shí)，還考慮了標(biāo)準(zhǔn)的可讀性和易懂性，最終形成了《自發(fā)性強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴解剖病理學(xué)檢查技術(shù)規(guī)程》的正式稿。2.征求意見階段2025年2月學(xué)會(huì)標(biāo)委會(huì)秘書處將標(biāo)準(zhǔn)編制說明和征求意見稿通過全國(guó)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)平臺(tái)發(fā)布公示，面向相關(guān)行業(yè)的單位和經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)起草工作組討論，采納？條，不采納？條。3.審查及報(bào)批階段標(biāo)準(zhǔn)起草工作組將收集到的意見進(jìn)行認(rèn)真分析和處理，并據(jù)此對(duì)征求意見稿做出最終修訂，以形成標(biāo)準(zhǔn)送審稿。隨后，該送審稿由學(xué)會(huì)標(biāo)委會(huì)秘書處負(fù)責(zé)安排技術(shù)審查。標(biāo)準(zhǔn)起草工5作組根據(jù)審查意見修改整理后，最終形成標(biāo)準(zhǔn)草案報(bào)批稿，提交給廣東省精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)學(xué)會(huì)進(jìn)行審批。（四）起草組成員及其工作主要起草人：高洪彬、李文德、萬(wàn)紅平、蘇喬、賈歡歡、羅挺、凌雪熒。主要起草成員皆參與了本標(biāo)準(zhǔn)的研究、討論和不同章節(jié)的二、標(biāo)準(zhǔn)編制原則和確定標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容（一）標(biāo)準(zhǔn)編制原則1.合規(guī)性原則標(biāo)準(zhǔn)制定嚴(yán)格遵循國(guó)家和地方的相關(guān)法律、法規(guī)、方針及政策，并在廣東省精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)學(xué)會(huì)章程所規(guī)定的業(yè)務(wù)范疇內(nèi)展開。該標(biāo)準(zhǔn)符合精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)相關(guān)的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)制定要求，且已被納入學(xué)會(huì)的發(fā)展規(guī)劃之中。2.公正性原則標(biāo)準(zhǔn)制定遵循開放、透明、公平、公正的原則，同時(shí)，本著需要滿足標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)規(guī)范需要滿足相似性、重復(fù)性、可靠性、醫(yī)療機(jī)構(gòu)以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究機(jī)構(gòu)的代表共同參與團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)的制定工作。63.先進(jìn)性原則按照有利于科學(xué)合理利用資源，有利于提高經(jīng)濟(jì)效益、社會(huì)效益、生態(tài)效益的原則，做到技術(shù)上先進(jìn)、經(jīng)濟(jì)上合理，有利于精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)行業(yè)發(fā)展。4.正確性原則標(biāo)準(zhǔn)的編寫嚴(yán)格依據(jù)國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)領(lǐng)域的研究結(jié)果，對(duì)技術(shù)方法、評(píng)價(jià)內(nèi)容等進(jìn)行了核驗(yàn)，保證其正確性。通過使用精準(zhǔn)的詞匯與嚴(yán)密的語(yǔ)句結(jié)構(gòu)，力求使標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容清晰表達(dá)，以讓不同知識(shí)背景和專業(yè)水平的人員全面理解。5.簡(jiǎn)明性原則在編寫標(biāo)準(zhǔn)時(shí)注重內(nèi)容的簡(jiǎn)潔明了，力求讓標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容通俗易懂。通過使用大眾化的語(yǔ)言，確保使用者在參照本標(biāo)準(zhǔn)時(shí)能夠正確理解并有效執(zhí)行。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了自發(fā)性強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴解剖病理學(xué)檢本標(biāo)準(zhǔn)適用于強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴的解剖病理學(xué)檢查。（二）標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容本標(biāo)準(zhǔn)由范圍、規(guī)范性引用文件、術(shù)語(yǔ)和定義、縮略語(yǔ)、檢查程序、解剖病理學(xué)檢查和檢查報(bào)告共7部分組成。三、主要試驗(yàn)（或驗(yàn)證）的分析、綜述報(bào)告，技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證，預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效果國(guó)內(nèi)目前沒有強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴解剖病理學(xué)技術(shù)規(guī)范7相關(guān)的國(guó)家法規(guī)，也沒有相應(yīng)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或地方標(biāo)準(zhǔn)等。本標(biāo)準(zhǔn)編制的相關(guān)單位在國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目國(guó)家自然基金項(xiàng)目“自發(fā)強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴模型的建立及其骨代謝調(diào)控機(jī)理研究”（編號(hào)：81941010）、“十四五”項(xiàng)目“特色動(dòng)物代謝性疾病模型的創(chuàng)建及開發(fā)”（編號(hào)：2021YFF0702600）、國(guó)家自然基金項(xiàng)目“CD74+單核細(xì)胞促進(jìn)CXCR4+CD8+T細(xì)胞骨髓駐留在AS發(fā)性強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴模型的研究及應(yīng)用平臺(tái)”（編號(hào)：2017A070701003）、“非人靈長(zhǎng)類自發(fā)性疾病動(dòng)物篩選與評(píng)價(jià)技術(shù)平臺(tái)建設(shè)”（編號(hào)：2017A070701003）等項(xiàng)目開展期間，完成了多次AS食蟹猴的解剖病理學(xué)檢查實(shí)踐，結(jié)合國(guó)內(nèi)外強(qiáng)直性脊柱炎的最新研究動(dòng)態(tài)，建立了《自發(fā)性強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴解剖病理學(xué)檢查技術(shù)規(guī)程》標(biāo)準(zhǔn)草案。本標(biāo)準(zhǔn)的編制，經(jīng)過專家咨詢與論證，確保了其科學(xué)性與先進(jìn)性。通過統(tǒng)一和規(guī)范自發(fā)性強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴的解剖病理學(xué)檢查標(biāo)準(zhǔn)，能夠減少因缺乏統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)而導(dǎo)致的重復(fù)實(shí)驗(yàn)和資源浪費(fèi)，降低科研成本。同時(shí)，該標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施有望促進(jìn)強(qiáng)直性脊柱炎發(fā)病機(jī)制和治療方法的研究進(jìn)展，為新藥研發(fā)和治療手段的創(chuàng)新提供有力支持，從而帶來顯著的社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益。預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效果包括提升科研成果的轉(zhuǎn)化效率，加速新藥上市進(jìn)程，以及為患者提供更有效的治療方案，減輕社會(huì)醫(yī)療負(fù)擔(dān)。為確保標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)性和實(shí)用性，我們進(jìn)行了多項(xiàng)試驗(yàn)和驗(yàn)8證。以下為項(xiàng)目開展過程中，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)內(nèi)容AS食蟹猴外觀檢查實(shí)施例根據(jù)《自發(fā)性強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴解剖病理學(xué)檢查規(guī)程》操作人員之間進(jìn)行外觀檢查，得到了一致的觀察結(jié)果。外觀檢查情況如下：（1）毛發(fā)和皮膚局部毛發(fā)脫落，特別是在脊柱兩側(cè)區(qū)域（圖2，三角號(hào)）。其余2只AS食蟹猴毛發(fā)均未見明顯異常。皮膚：觀察到毛發(fā)有異常改變的AS食蟹猴，脫毛部位的皮膚表面光滑，未見潰爛或皮膚病變等。但在背部和腰部皮膚上可見輕微的擦傷痕跡，可能由于動(dòng)物活動(dòng)受限所致。體表溫度正常，無(wú)全身性或局部發(fā)熱現(xiàn)象。其余2只AS食蟹猴皮膚均未見明顯異常。（2）脊柱：3只AS食蟹猴脊柱均呈現(xiàn)明顯的畸形變化，背部彎曲較為明顯，出現(xiàn)明顯的“后彎”（圖2，箭頭），表明脊柱的強(qiáng)直性變形。脊柱部位觸摸時(shí)表現(xiàn)出僵硬感。（3）尾部：3只AS食蟹猴尾部均表現(xiàn)為不同部分之間明顯分段和硬化，尾部椎體之間出現(xiàn)竹節(jié)樣改變（圖2），觸摸時(shí)表現(xiàn)出僵硬感。9尤其是靠近腰部和脊柱連接的區(qū)域。四肢的肌肉群及其他部位肌肉群均未見明顯萎縮。（5）其它骨關(guān)節(jié)：3只AS食蟹猴髖部關(guān)節(jié)、四肢外周關(guān)節(jié)等其它骨關(guān)節(jié)均未見隆起、膨脹或畸形等異常改變。（6）眼球：3只AS食蟹猴眼球均無(wú)明顯的充血或水腫，角膜透明，虹膜顏色正常，鞏膜未見水腫等異常改變。圖2.AS食蟹猴外觀檢查。AS食蟹猴整體毛發(fā)較為AS食蟹猴大體剖檢實(shí)施例根據(jù)《自發(fā)性強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴解剖病理學(xué)檢查規(guī)程》操作人員之間進(jìn)行大體剖檢，得到了一致的剖檢結(jié)果。大體剖檢情況如下：（1）脊柱脊柱形態(tài)：脊柱呈現(xiàn)出明顯的后凸（駝背）畸形，尤其是在胸椎和腰椎部分。在腰椎和胸椎部分觀察到明顯的骨質(zhì)增生，椎體表面出現(xiàn)了不規(guī)則的骨質(zhì)增生性突起，骨間隙明顯變窄，部分椎體已呈現(xiàn)融合現(xiàn)象。椎間盤高度降低，部分椎間隙幾乎消失，提示病變可能已經(jīng)導(dǎo)致骨性融合。脊柱活動(dòng)度評(píng)估：在嘗試對(duì)脊柱進(jìn)行輕微的彎曲和旋轉(zhuǎn)時(shí)，脊柱的活動(dòng)度嚴(yán)重受限，腰部、背部難以進(jìn)行屈伸、側(cè)屈、旋轉(zhuǎn)等運(yùn)動(dòng)。脊柱周圍軟組織：脊柱周圍肌肉顯示出明顯的纖維化和萎有的位置質(zhì)地變軟。韌帶增厚、硬化，部分韌帶區(qū)域有鈣化現(xiàn)象。脂肪墊未見明顯異常。（2）骶髂關(guān)節(jié)未觀察到骶髂關(guān)節(jié)明確的骨質(zhì)增生或侵蝕等形態(tài)學(xué)改變，其周圍軟組織未觀察到粘連、增厚或萎縮現(xiàn)象。（3）外周關(guān)節(jié)、眼球、腸道、心臟、腎臟、肺臟、肝臟、胸腺、淋巴結(jié)大體剖檢未見明顯病理性改變。AS食蟹猴組織病理學(xué)檢查實(shí)施例根據(jù)《自發(fā)性強(qiáng)直性脊柱炎食蟹猴解剖病理學(xué)檢查規(guī)脊柱、骶髂關(guān)節(jié)進(jìn)行制片，并在不同的病理專業(yè)人員之間進(jìn)行閱片和診斷，得到了一致的組織病理學(xué)觀察結(jié)果。組織病理學(xué)檢查結(jié)果如下：附著點(diǎn)：觀察到脊柱韌帶與骨骼連接部位的局部炎癥，病灶部位可見較大量的以淋巴細(xì)胞為主的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、聚集，其間可見較大量新生血管，伴隨輕微水腫。韌帶：脊柱韌帶出現(xiàn)了變性、壞死、新生血管形成以及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和聚集，在壞死及炎癥病灶中可觀察到鈣化以及異位骨化（圖3）。此外，部分韌帶可觀察到纖維化，從而表現(xiàn)為韌帶增厚。椎體：椎體邊緣可見新生骨質(zhì)形成，從而導(dǎo)致椎體邊緣骨質(zhì)的增厚，并與發(fā)生骨化的椎間盤連接形成骨橋。表現(xiàn)出典型的骨質(zhì)融合現(xiàn)象。椎體內(nèi)部骨小梁變細(xì)，數(shù)量減少，骨髓腔內(nèi)可見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、聚集，免疫組化及原位雜交染色顯示了CD8+T淋巴細(xì)胞的陽(yáng)性表達(dá)（圖4）。椎體骨髓腔內(nèi)脂肪細(xì)胞的數(shù)量增加并沿著異位骨化灶聚集分布。椎間盤：椎間盤出現(xiàn)了明顯的退變，纖維環(huán)變性、斷裂和纖維化。纖維化區(qū)域可見較大量的新生血管以及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，纖維組織內(nèi)可見新生血管，其周圍可見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)（圖5）。在纖維組織中可見異位骨化的發(fā)生，異位骨化的組織分化成熟，具有典型的骨小梁與骨髓腔結(jié)構(gòu)（圖6）。在后期，椎間盤異位骨化的骨組織與周圍椎體內(nèi)的骨組織具有相同的組織形態(tài)學(xué)特征，從而導(dǎo)致了上下相鄰兩個(gè)椎體的融合及骨橋的形成。脊柱旁肌肉：脊柱旁肌肉表現(xiàn)出明顯的萎縮，局部有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，部分肌纖維壞死并可見脂肪浸潤(rùn)和纖維化改變。脊柱旁脂肪墊：脂肪墊區(qū)域有脂肪壞死現(xiàn)象，部分區(qū)域可見新生血管形成，周圍組織有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。（2）骶髂關(guān)節(jié)韌帶：骶髂關(guān)節(jié)周圍的韌帶表現(xiàn)出明顯的炎癥，且部分韌帶區(qū)域出現(xiàn)鈣化和骨化現(xiàn)象。韌帶附著的骶骨和髂骨：骨髓腔內(nèi)觀察到炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、聚集以及病灶內(nèi)的血管新生等現(xiàn)象。關(guān)節(jié)間隙：可觀察到關(guān)節(jié)間隙變窄或增寬。以上試驗(yàn)結(jié)果表明，所制定的檢查程序和檢查方法科學(xué)合理，在不同操作人員之間的適用性好，能夠準(zhǔn)確反映自發(fā)性AS食蟹猴的病理變化。圖3.AS食蟹猴脊柱韌帶異位骨化。AS食蟹猴脊上韌帶內(nèi)圖6.AS食蟹猴脊柱椎間盤異位骨化。在AS食蟹猴脊柱椎間盤纖維環(huán)位四、標(biāo)準(zhǔn)涉及的相關(guān)知識(shí)產(chǎn)權(quán)說明1.沒有違反相關(guān)法律法規(guī)及強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)，目前暫無(wú)相關(guān)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或地方標(biāo)準(zhǔn)等。2.參考的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，與制定的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)不沖突。T/CALAS108-2021《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物骨與關(guān)節(jié)疾病食蟹猴模型評(píng)價(jià)規(guī)范》DB53/T293.1-2009《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病理學(xué)檢測(cè)第1部分：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死方法》T/CALAS109-2021《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物2型糖尿病食蟹猴模型評(píng)價(jià)規(guī)DB