試劑標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）-APOE

文件號(hào)：AA第1版頁(yè)數(shù)PAGE3共4頁(yè)試劑標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程項(xiàng)目載脂蛋白E（APOE）方法免疫比濁法儀器H7600系列編寫人日期審核人日期批準(zhǔn)人日期文件分發(fā)部門和/或個(gè)人本規(guī)程自年月日起實(shí)施 目錄檢測(cè)原理標(biāo)本采集與處理2.1受檢者的準(zhǔn)備2.2靜脈采血2.3抗凝劑2.4標(biāo)本處理3.試劑3.1試劑3.2校準(zhǔn)血清3.3試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性4.儀器5.操作6.計(jì)算7.操作性能7.1精密度7.2準(zhǔn)確度7.3靈敏度7.4可報(bào)告范圍7.5特異性7.6干擾8.參考值9.臨床意義附錄A:參數(shù)1.檢測(cè)原理血清（漿）中的載脂蛋白E與羊抗人載脂蛋白E抗體引起抗原抗體反應(yīng)，產(chǎn)生混濁。根據(jù)對(duì)濁度的測(cè)定，求出載脂蛋白E的濃度。載脂蛋白E+羊抗人載脂蛋白E抗體抗原抗體沉淀物2．標(biāo)本采集與處理2.1受檢者的準(zhǔn)備：病人空腹12h，不飲酒24h后采集血樣。體檢對(duì)象抽血前應(yīng)有兩周的的正常狀況記錄。妊娠后期各項(xiàng)血脂都會(huì)增高，應(yīng)在產(chǎn)后或中哺乳后3個(gè)月檢驗(yàn)才能反應(yīng)其基本血脂水平。注意有無(wú)應(yīng)用影響血脂的藥物，如降血脂藥、避孕藥等。此外，對(duì)于體檢者，采血的季節(jié)都應(yīng)做相關(guān)記錄，因?yàn)檠接屑竟?jié)性變動(dòng)，為了前后比較應(yīng)在每年同一季節(jié)檢驗(yàn)，應(yīng)囑體檢對(duì)象在抽血前24小時(shí)內(nèi)不做劇烈運(yùn)動(dòng)。2.2靜脈采血：除非是臥床的病人，一般在采血時(shí)取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，會(huì)影響測(cè)試項(xiàng)目的濃度。在采血前至少應(yīng)靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時(shí)間不超過1分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶。2.3抗凝劑：血漿使用肝素作為抗凝劑。2.4標(biāo)本處理：血標(biāo)本室溫放置30min～45min后離心分離血清，置潔凈試管加蓋低溫保存。3．試劑3.1試劑：本科使用上海華臣生物試劑有限公司APOE試劑盒，為液體雙試劑，各組分如下：品牌：華臣生物試劑包裝規(guī)格見試劑說明書。各組份在測(cè)定反應(yīng)中的含量試劑1緩沖液：丙二醇緩沖液（pH8.5）100mmol/L聚乙二醇試劑2膠乳液：羊抗人載脂蛋白E抗體10U/mL3.2：校準(zhǔn)血清使用上海華臣生物試劑有限公司提供的APOE標(biāo)準(zhǔn)液。校準(zhǔn)頻次：全點(diǎn)定標(biāo)：試劑換批號(hào)使用時(shí)或質(zhì)控結(jié)果超過規(guī)定的2SD范圍，需要全點(diǎn)定標(biāo)。3.3試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性：原包裝試劑儲(chǔ)存在2-8℃至標(biāo)簽所示失效日期。試劑開瓶后，在儀器中至少可保存20天。試劑儲(chǔ)存在18-22℃穩(wěn)定15天，試劑應(yīng)避免污染。試劑R1顏色為無(wú)色，試劑R2顏色為無(wú)色至淺黃色，當(dāng)試劑變色，按照試劑失效處理。APOE標(biāo)準(zhǔn)液在2-8℃儲(chǔ)存至標(biāo)簽所示失效日期，復(fù)溶后-20℃保存，可穩(wěn)定一個(gè)月，2-8℃儲(chǔ)存可穩(wěn)定一周，參見校準(zhǔn)血清說明書。4．儀器H7600系列型號(hào)儀器。5．操作樣品為血清。本法為終點(diǎn)法。參數(shù)見后附，附錄A。試劑參數(shù)設(shè)置、定標(biāo)操作以及樣本檢測(cè)常規(guī)操作，見儀器操作規(guī)程。6．計(jì)算定標(biāo)：采用多點(diǎn)定標(biāo)方式，用各濃度水平標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值與對(duì)應(yīng)的濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線。計(jì)算：對(duì)于自動(dòng)生化儀，曲線擬合方式選擇SPLINE或log-logit4P法。樣本含量由樣本吸光度值△A在標(biāo)準(zhǔn)曲線上對(duì)應(yīng)計(jì)算得到。7．操作性能7.1精密度：批內(nèi)CV<7%，批間CV<9%7.2準(zhǔn)確度：測(cè)量結(jié)果在質(zhì)控血清靶值±2SD范圍內(nèi)。不同方法學(xué)試劑的質(zhì)控結(jié)果之間會(huì)存在差異，使用時(shí)請(qǐng)確保質(zhì)控選擇與試劑的方法學(xué)保持一致。7.3靈敏度：載脂蛋白E濃度為：100mg/L時(shí)，濁度吸光度A340nm約0.151~0.256。7.4可報(bào)告范圍：血清與試劑用量之比為6:210:70時(shí)，測(cè)定上限為120mg/L。7.5特異性：測(cè)量值在給定值的90%-110％范圍內(nèi)。7.6干擾：內(nèi)源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸300mg/ml對(duì)測(cè)試結(jié)果無(wú)明顯影響。8．參考值27-45mg/L