T-ACCEM 445-2024 粗品肝素鈉標(biāo)準(zhǔn)

ICS11.120.10CCSC27ACCEM2024-12-17發(fā)布IT/ACCEM445—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由南通廣恒生物科技有限公司提出。本文件由中國商業(yè)企業(yè)管理協(xié)會歸口。本文件起草單位：南通廣恒生物科技有限公司、南通天龍畜產(chǎn)品有限公司、南通天瑞生物科技有限公司。本文件主要起草人：韓國棟、陳廣英、許悟赟。1T/ACCEM445—2024粗品肝素鈉本文件規(guī)定了粗品肝素鈉（以下簡稱“產(chǎn)品”）的術(shù)語和定義、技術(shù)要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸、貯存和保質(zhì)期。本文件適用于以豬小腸粘膜、羊粘膜等動物內(nèi)臟為原材料，經(jīng)刮腸、鹽解、樹脂吸附、樹脂清洗、洗脫、除雜、沉淀、脫水、干燥等工序制成的粗品肝素鈉。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T191包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T601化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備GB/T602化學(xué)試劑雜質(zhì)測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備GB/T603化學(xué)試劑試驗(yàn)方法中所用制劑及制品的制備GB/T5048防潮包裝GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB15346化學(xué)試劑包裝及標(biāo)志JJF1070定量包裝商品凈含量計量檢驗(yàn)規(guī)則國家市場監(jiān)督管理總局令第70號《定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法》《中華人民共和國藥典》（2020年版）3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1肝素heparin一種多聚粘多糖，體內(nèi)合成并貯存于哺乳動物多種組織，特別是肝臟、肺和黏膜的肥大細(xì)胞中。3.2肝素鈉heparinsodium鈉鹽形式的肝素，可供更穩(wěn)定的保存。易溶于水，生理鹽以及緩沖液。4技術(shù)要求4.1感官指標(biāo)應(yīng)符合表1的規(guī)定。2T/ACCEM445—2024表1感官指標(biāo)4.2理化指標(biāo)應(yīng)符合表2的規(guī)定。表2理化指標(biāo)4.3微生物限量應(yīng)符合表3的規(guī)定。表3微生物限量4.4凈含量應(yīng)符合國家市場監(jiān)督管理總局令第70號《定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法》的規(guī)定。5試驗(yàn)方法5.1一般規(guī)定除另有規(guī)定外，本章所用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑及制品，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規(guī)定制備，試驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T6682中三級水規(guī)格的規(guī)定，樣品稱重應(yīng)精確至0.01g。5.2感官指標(biāo)自然光線或日光燈照射下，目測、鼻嗅檢驗(yàn)。5.3理化指標(biāo)5.3.1干燥失重3T/ACCEM445—2024按《中華人民共和國藥典》（2020年版）中通則0831“干燥失重測定法”進(jìn)行測定。5.3.2pH稱取0.1g樣品，溶于10mL三級水中，按《中華人民共和國藥典》（2020年版）中通則0631“pH值測定法”進(jìn)行測定。5.3.3蛋白質(zhì)取適量樣品，加水溶解并定量稀釋制成濃度為30mg/mL溶液，以牛血清蛋白對照，按《中華人民共和國藥典》（2020年版）中通則0731“蛋白質(zhì)含量測定法第二法”進(jìn)行測定。5.3.4效價5.3.4.1原理通過觀測、對比樣品與標(biāo)準(zhǔn)品對綿羊血漿的抗凝性能，測算出樣品的效價。5.3.4.2儀器、用具與試劑恒溫水浴鍋、試管架、10mL具塞試管、100μL或250μL微量進(jìn)樣器、10mL刻度吸管、2mL刻度吸管、1mL可調(diào)式加液器、20mL帶塞樣瓶、0.9%氯化鈉溶液、0.25%氯化鈣溶液、經(jīng)過標(biāo)定的綿羊血漿、8.0U/mL肝素鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液、計時器。5.3.4.3試劑配制5.3.4.3.10.9%氯化鈉溶液：精密稱定9g分析純無水氯化鈉，用蒸餾水定量溶解于1000mL容量瓶中，充分搖勻備用。5.3.4.3.20.25%氯化鈣溶液：精密稱定2.5g分析純無水氯化鈣，用0.9%氯化鈉溶液定量溶解于1000mL容量瓶中，充分搖勻備用。5.3.4.4操作步驟5.3.4.4.1取樣根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)情況，一般酶解液、洗滌液、沉淀廢液取樣量為8mL±2mL，吸附廢液取樣量為20mL±2mL。特殊情況可適量多取，取樣應(yīng)均勻、有代表性。5.3.4.4.2樣品檢測按以下步驟進(jìn)行樣品檢測：a)將試管擺放在試管架上；b)用100μL微量進(jìn)樣器取8.0U/mL肝素鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，加標(biāo)準(zhǔn)品之前，用標(biāo)準(zhǔn)液沖洗進(jìn)樣器兩次，根據(jù)標(biāo)定的血漿靈敏度n，分別按（n-20）μL、（n-10）μL、nμL、（n+10）μL、（n+20）μL的量加入一排5支10mL具塞試管中，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度梯度；c)酶解液、洗滌液、沉淀廢液進(jìn)樣：用同一個進(jìn)樣器取供試液，取之前先用供試液將進(jìn)樣器沖洗三次，然后再按（n-20）μL、（n-10）μL、nμL、（n+10）μL、（n另一排5支10mL具塞試管中，作為供試液濃度梯度；d)吸附廢液進(jìn)樣：用2mL刻度吸管取供試液，取之前先用供試液將刻度吸管沖洗三次，然后再按600μL、800μL、1000μL、1200μL、1400μL進(jìn)樣量加入另一排5支10mL具塞試管中，作為供試液濃度梯度；注：加樣時應(yīng)精確，不得有氣泡產(chǎn)生。e)在上述各試管中，用10mL刻度吸管依次加入處理好的綿羊血漿，加入前用血漿在吸管內(nèi)來回沖洗三遍，以保證加入的血漿濃度的均一性，加入順序?yàn)閺牧慷嗟搅可俚姆较蜻M(jìn)行；f)用1mL可調(diào)式加液器依次加入0.8mL的0.25（w/v）氯化鈣溶液，加入的順序?yàn)閺臉悠妨慷嗟搅可俚姆较?。加完后蓋緊瓶蓋立即搖勻，搖時從樣品量少到量多的方向進(jìn)行；逐一搖動時不得有氣泡產(chǎn)生，同時讓試管內(nèi)壁全部潤濕；4T/ACCEM445—2024g)將試管架放入37℃±0.5℃水浴鍋中，開始計時；在保溫過程中，30min左右拿出觀察，若5支試管全凝表示效價估高（在n+20或1400的后面補(bǔ)），如果5支試管一管都沒有凝表示效價估低（在n-20或600前面補(bǔ)），這時應(yīng)補(bǔ)做試驗(yàn)，一般情況下補(bǔ)做5管；h)試管在37℃±1℃水浴鍋中保溫60min±1min后取出，觀察各試管中血漿凝固情況，若一組試驗(yàn)樣品同時有0和1的狀態(tài)，則試驗(yàn)成功。然后根據(jù)血漿凝固情況判斷結(jié)果；i)供試品的凝固狀態(tài)見表4；表4供試品的凝固狀態(tài)10j)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的凝固點(diǎn)確定供試品1-0的凝固范圍，再將其分成5個點(diǎn)：1、3/4、1/2、1/4、0，觀察凝固狀態(tài)在哪一個點(diǎn)上，當(dāng)其凝固在3/4點(diǎn)上，就在該點(diǎn)的樣品體積上加（進(jìn)樣間隔/4）便是該供試品的凝固點(diǎn)；若其凝固點(diǎn)在1/2點(diǎn)上，該點(diǎn)的樣品體積就是供試品的凝固點(diǎn)；若其凝固在1/4點(diǎn)上，就在該點(diǎn)的樣品體積上減（進(jìn)樣間隔/4）便是該供試品的凝固點(diǎn)。5.3.4.5結(jié)果計算待測樣品實(shí)際效價（U/mg）=（標(biāo)準(zhǔn)品的凝固點(diǎn)/供試品的凝固點(diǎn)）×85.3.5比旋度配置40mg/mL水溶液，按《中華人民共和國藥典》（2020年版）中通則0621“旋光測定法”進(jìn)行測定。5.3.6吸光度稱取40mg試樣溶于10mL三級水中，配制成0.4%的溶液，按《中華人民共和國藥典》（2020年版）中通則0401“紫外-可見分光光度法”進(jìn)行測定。在260nm波長處進(jìn)行測定，260nm波長處吸光度不大于0.150為合格。5.3.7水溶液澄清度與顏色將0.5g樣品溶于10mL純水中，溶液應(yīng)澄清無色。如顯渾濁，按《中華人民共和國藥典》（2020年版）中通則0401“紫外-可見分光光度法”在640nm波長下測量，溶液吸光度應(yīng)小于0.018。如顯色，與《中華人民共和國藥典》（2020年版）通則0901第一法中的黃色1號標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，顏色不得更深。5.3.8總氮量按《中華人民共和國藥典》（2020年版）中通則0704“氮測定第二法”進(jìn)行測定。5.3.9鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)按《中華人民共和國藥典》（2020年版）中通則0406“原子吸收分光光度法”在330.3nm波長下進(jìn)行測定。5.3.10重金屬含量按《中華人民共和國藥典》（2020年版）中通則0821“重金屬檢查第二法”進(jìn)行測定。5.3.11熾灼殘渣5T/ACCEM445—2024稱取2.0g樣品，精確至0.2mg，按《中華人民共和國藥典》（2020年版）中通則0814“熾灼殘渣檢查法”進(jìn)行測定。5.4微生物限量按《中華人民共和國藥典》（2020年版）中通則1100“生物檢查法”進(jìn)行測定，檢測菌落總數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)量。5.5凈含量按JJF1070的規(guī)定進(jìn)行。6檢驗(yàn)規(guī)則6.1檢驗(yàn)分類產(chǎn)品檢驗(yàn)分為出廠檢驗(yàn)和型式檢驗(yàn)。6.2組批和抽樣經(jīng)粉碎、混合所得的均勻一致包裝的產(chǎn)品為一批。每批產(chǎn)品隨機(jī)抽樣，最低不應(yīng)少于4g。6.3出廠檢驗(yàn)6.3.1產(chǎn)品出廠前，應(yīng)由生產(chǎn)企業(yè)的檢驗(yàn)部門按本文件規(guī)定進(jìn)行逐批檢驗(yàn)，檢驗(yàn)合格并附質(zhì)量合格證明后方可出廠。6.3.2出廠檢驗(yàn)項(xiàng)目包括本文件中的感官指標(biāo)、效價和凈含量。6.4型式檢驗(yàn)6.4.1一般情況下，型式檢驗(yàn)每半年進(jìn)行一次。有下列情況之一時，也應(yīng)進(jìn)行型式檢驗(yàn)：a)產(chǎn)品定型投產(chǎn)時；b)主要原輔料、工藝、設(shè)備發(fā)生變化，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量時；c)停產(chǎn)3個月以上，重新恢復(fù)生產(chǎn)時；d)出廠檢驗(yàn)結(jié)果與上次型式檢驗(yàn)有較大差異；e)國家質(zhì)量監(jiān)督機(jī)構(gòu)提出要求時。6.5判定規(guī)則檢驗(yàn)項(xiàng)目全部符合本文件要求時，該批次判為合格。若有一項(xiàng)或一項(xiàng)以上項(xiàng)目不合格本文件要求時，在同批產(chǎn)品中加倍抽樣進(jìn)行復(fù)檢，復(fù)檢結(jié)果合格，則該批次判為合格品。若復(fù)檢結(jié)果中仍有一項(xiàng)或一項(xiàng)以上不符合本文件要求時，則該批次判為不合格。7標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸、貯存7.1標(biāo)志7.1.1產(chǎn)品銷售包裝的標(biāo)志應(yīng)符合GB15346的規(guī)定，應(yīng)明確標(biāo)明產(chǎn)品名稱、主要成分、執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)號、生產(chǎn)廠及地址、生產(chǎn)日期、批號、保質(zhì)期等。7.1.2產(chǎn)品運(yùn)輸包裝應(yīng)標(biāo)明產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)廠及地址、凈重、毛重、規(guī)格數(shù)量、生產(chǎn)日期、保質(zhì)期、執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)號及符合GB/T191規(guī)定的包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志。7.2包裝產(chǎn)品宜采用專用塑料袋雙層密封包裝，應(yīng)符合GB