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文檔簡介
目錄
第一節(jié)全自動血液細胞分析儀操作規(guī)程
第二節(jié)尿液分析儀使用規(guī)程
第三節(jié)自動凝血儀操作規(guī)程
第四節(jié)半自動生化分析儀操作規(guī)程
第五節(jié)血常規(guī)檢驗操作規(guī)程
第六節(jié)尿常規(guī)檢驗操作規(guī)程
第七節(jié)肝功能檢驗操作規(guī)程
第八節(jié)腎功能檢驗操作規(guī)程
第九節(jié)血脂檢驗操作規(guī)程
第十節(jié)血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程
第十一節(jié)凝血四項檢驗操作規(guī)程
第十二節(jié)ABO血型正、反血型鑒定技術(shù)操作規(guī)程
第十三節(jié)交叉配血試驗技術(shù)操作規(guī)程
第一節(jié)全自動血液細胞分析儀操作規(guī)程
1、樣品分析前準備
1。1開機前的檢查、準備
在開啟分析儀電源之前,操作者須按以下要求進行檢查:
1。1」檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否充足,有無過期;試劑管路是否彎折,連接是否可靠。
1。1。2電源線是否正確連接.
1。1。3廢液桶是否清空。
LU4UPS電是否足夠,打印紙安裝是否正確,是否足夠。
1.1.5確保鍵盤正確連接到鍵盤接口上。
2?開機
1.2.1打開分析儀后面的電源開關(guān),電源指示燈鳧,屏幕上顯示"Initializing-".
1.2o2分析儀進行初始化,整個初始化過程持續(xù)約4?7分鐘。
I。2。3初始化過程結(jié)束后,系統(tǒng)自動進入“計數(shù)”界面.
1.3動物類型選擇
1.3。I按[菜單]鍵,移動光標,選擇“動物”,按[確認]進入“動物”界面.
1。3。2操作者根據(jù)測量的動物類型,選擇需要分析的動物類型.
2。1。1按[菜單]鍵,選擇“計數(shù)”,進入“計數(shù)”界面.再按[模式]鍵,將當前模式設(shè)置為“全血”模式。
2。1.2確認狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“就緒”,工作模式為“全血二
2。1.3將準備好的全血樣本放到采樣針下,使采樣針可以吸到樣本且針頭及容器底保持一定距離。
2.1.4按計數(shù)鍵,啟動樣本分析過程。此時,狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“運行”。
2。1。5采樣針自動吸取13ul的樣本后蜂鳴器響,在采樣針抬起后,移開樣本。
2。1.6分析完成后,按[F4]鍵進入“樣本信息編輯“界面。按[F9]鍵進入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下,按[F8]
鍵在全拼和五筆輸入法之間進行切換,輸入樣本信息,輸入完成后,點擊“確認”,保存輸入的內(nèi)容并返回
到“計數(shù)”界面。
2.1.7按[打印]鍵打印樣本分析報告。
2.1。8按照此操作過程進行其余樣本的分析。
21,2預(yù)稀釋樣本分析
2.2.1按[菜單]鍵,選擇“計數(shù)”,進入“計數(shù)”界面。再按[模式]健,將當前模式設(shè)置為“預(yù)稀釋”模
式。按[稀釋]鍵,屏幕彈出“加稀釋液”對話框,取一個干凈的樣本杯放在采樣針下,按計數(shù)鍵,微傾斜樣本
杯一定角度讓分析儀自動排出的I6ml稀釋液沿管壁流入樣本杯中,避免產(chǎn)生氣泡或濺出。
2.2.2加完稀釋液后,按[確認二鍵,“加稀釋液”對話框關(guān)閉,分析儀自動清洗采樣針.
2.2。3采集20ul血液迅速注入盛有稀釋液的樣本杯中混勻.
2。2.4確認狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“就緒”,工作模式為“預(yù)稀釋”。
202。5將準備好的預(yù)稀釋樣衣放到采樣針下,使采樣針可以吸到樣本且針頭及容器底保持一定距離。
2.2.6按計數(shù)犍,啟動樣本分析過程。此時,狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“運行
2.2.7采樣針自動吸取0。7ml的樣本后蜂鳴器響,在采樣針抬起后,移開樣本.
2.2.8分析完成后,按[F4]鍵進入“樣本信息編輯”界面.按[F9]鍵進入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下,按[F8]
鍵在全拼和五筆輸入法之間進行切換,輸入樣本信息,輸入完成后,點擊“確認”,保存輸入的內(nèi)容并返回到
“計數(shù)”界面。
2。2。9按[打印]鍵打印樣本分析報告.
2.2o10按照此操作過程進行其余樣本的分析.
3、樣品分析結(jié)束后
3。I按[菜單]鍵,彈出系統(tǒng)菜單,選擇“關(guān)機二
3.2界面彈出“關(guān)機”對話框,點擊“確認”進入關(guān)機界面。
3.3將E-Z清洗液放到采樣針下,按計數(shù)鍵,采樣針將自動吸取E-Z清洗液,執(zhí)行液路和計數(shù)池的清洗。
3.4按照界面提示信息,將E-Z清洗液放到采樣針下,按計數(shù)鍵,采樣針將再次自動吸取E—Z清洗液,
執(zhí)行液路和計數(shù)池的清洗.
3。5執(zhí)行完成后,界面提示“請關(guān)閉電源”是,關(guān)閉分析儀的電源開關(guān)。
"6關(guān)閉電源后檢杳分析儀是否有滲漏,并將血液分析儀的周邊環(huán)境打掃干凈°
第二節(jié)尿液分析儀使用規(guī)程
本測試儀是一項精密儀器,為了更好的維護和使用本儀器必須遵照以卜操作規(guī)程。
一、操作步驟
1.尿液分析儀的通訊電纜及電腦背面的通訊端口相連,接通電源,先打開電腦,再打開分析儀;儀器啟動,
風(fēng)扇轉(zhuǎn)動,推進器移動,屏幕顯示“系統(tǒng)正在測試……”,此時系統(tǒng)正在自檢,顯示屏顯示主菜單,工作臺
檢條區(qū)有紅色光交替閃爍,用戶可以開始測試
2。點擊電腦桌面尿液分析軟件;
3.將試紙條的試劑區(qū)完全浸入新鮮的、充分混合的、未離心的樣本中立即取出,將試紙條的側(cè)邊沿尿樣
容器的管壁刮去多余尿液;
4.將蘸有尿液的試紙平放在工作臺的檢條區(qū),確保試紙同工作臺前壁接觸;
5.儀器檢測到試紙存在后,推進器將試紙推到測試區(qū)進行測試;
6。當推進器退回原位,放下一條試紙……,這樣實現(xiàn)連續(xù)測試;
7.當工作臺上所有的試紙條測試完畢,打卬結(jié)果輸出結(jié)束后,按菜單鍵進入儀器設(shè)置,將電源開關(guān)撥到
“斷(。)”位置,關(guān)閉儀器電源。
二、儀器維護
1.不要在儀器通電狀態(tài)下清潔儀器;
2.不要用汽油、油漆稀釋劑、米化合物等可能腐蝕儀器的有機溶劑擦拭儀器;
3.不要用水清洗液晶屏,不要用任何會擦傷工作臺和白基準的物質(zhì)擦拭工作臺;
4.不要用任何溶劑清潔白基準,如果白基準有明顯劃痕或損壞,請及供應(yīng)商聯(lián)系;
5.用柔軟干布或沾有溫和去污劑的軟布擦拭儀器,保持儀器涓潔;
6.用柔軟、無磨損的布擦拭液晶屏;
7。為使儀器正常運行并提供準確的測試結(jié)果,必須定期從儀器中取下推進器、T作臺、步進板、用清水
沖洗,用軟布依次擦干保持工作臺的清潔。
三、注意事項
Io測試時不要將儀器放置在陽光直射的地方,以免影響測試精度;
20請在測試前核對尿液分析試紙型號,避免因使用的尿液分析試紙型號不正確而導(dǎo)致測試結(jié)果錯誤;
3.請勿使用過有效期或變質(zhì)的尿液分析試紙:
4.尿樣本中血的濃度高時,可影響測試的準確性,儀器能夠識別出高濃度血尿并打印出“結(jié)果無效”
的提示;
5.必須在推進器動作前,將待測試紙條放好;
60在放置試紙條時應(yīng)確保試紙條前端接觸工作臺前壁;
7。如果儀器測試頭下發(fā)生故障導(dǎo)致紙條運行受阻。關(guān)掉儀器,拉出工作臺,取出受阻試紙條后,重新安
裝工作臺。開機自檢后,對未得出結(jié)果的樣本重測。
第三節(jié)自動凝血儀操作規(guī)程
1、儀器的常規(guī)操作
io1打開電源開關(guān)前的檢查。
檢查廢液瓶及洗液瓶.如果洗液瓶中洗液的液面過低,請用蒸儲水或去離子水將罐充滿.清空廢液瓶。
管道連接檢查各種管線的連接。確保沒有管子脫落或扭結(jié),電源線被安仝的插入交流插座.確保打印機
中有足夠的紙張以供打印當天所需處理的所有樣本結(jié)果.
補充反應(yīng)杯丟棄用過的反應(yīng)杯,加入適量的干凈的反應(yīng)杯。
1.2打開電源
開機順序:打印機一壓力單元—電源單元和主單元(右側(cè)).
打開電源后,儀器自動進入自檢。
將病人樣本,質(zhì)控及試劑分別按要求準備就緒,進入分析過程:
試劑準備一SetReagent-*輸入確認試劑體積一補充反應(yīng)杯-*安放樣本架
1.3樣本分析:
WorkList-*IDNo.Entry-*輸入樣本號-ENTER■*選擇所需檢測的項目(一變?yōu)?),確認所有的
設(shè)置結(jié)束后—ENTER一按屏幕右上方“Start”鍵,執(zhí)行分析。
分析完畢,儀器進入準備狀態(tài)。
1.4關(guān)機前的工作
每日清潔所有樣本針和試劑針:
在主菜單屏上按下【Rinseprobe】鍵。將出現(xiàn)清洗針屏。按下【Exculc】鍵。
1.5關(guān)機
關(guān)閉電源。
2.儀器保養(yǎng)
2.1每日保養(yǎng)
清洗樣品針
每次做完試驗都必須清洗樣品針,主要是預(yù)防堵針,執(zhí)行IRinseProbel-*|Excutel
清空垃圾箱
2o2清空廢液
查看儀器后面防逆流瓶TrapChamber有無水,防止因為有水而導(dǎo)致真空泵不能抽真空
在洗液瓶中注蒸儲水,最高不要超過上面的凹槽,防止因水過滿,工作時水回流到壓力泵和壓力傳感器上導(dǎo)致
人為破壞.
2.3每周保養(yǎng)
做一次管路清潔,執(zhí)行[SpecialOperate][Rinse&Prepare]
清潔儀器
2.4每半年保養(yǎng)
清洗洗液瓶內(nèi)部,清洗洗液瓶出水管上的過濾網(wǎng)一次。
2.5每三或六個月保養(yǎng)
清潔傳動滑軌(X軸、丫軸)并上潤滑油。防止因積塵而使樣品針運行不到位,向下扎錯位置造成樣品
針彎曲或斷裂
第四節(jié)半自動生化分析儀操作規(guī)程
【操作規(guī)程】
io開機之前檢查電源線是否連接無誤,電源要求接地良好;連接打印機電源線,接通打印機電源開關(guān);將廢
液管插入廢液容器內(nèi);接通顯示器開關(guān)及主機背部電源開關(guān)。
2.開機->自檢后->鍵入Enter,確定已設(shè)定測式參數(shù)->鍵入Enter,進入編制工作表一在設(shè)置欄,開啟聯(lián)機打
印一儀器預(yù)熱20分鐘后,調(diào)用已設(shè)定測試項目進行樣品測定一打印結(jié)果一清洗儀器一關(guān)機。
3。吸液口由不銹鋼保護管和鋼管內(nèi)聚四氟乙烯吸液管組成,應(yīng)注意保護,不要碰彎.
40切忌在帶電狀態(tài)下連接任何連接口。
【儀器的保養(yǎng)及維護】
|0日常保養(yǎng)T作主要是清洗流動比色皿,每天工作結(jié)束后,要用蒸飽水清洗。具體方法如卜’:將吸液管插
入蒸福水中,向上扳動吸液開關(guān),反復(fù)沖洗流動比色皿,直到蒸傕水的吸光度值正常為止。
2。每周要用專門的清洗劑清洗一次流動比色皿,清洗時,讓清洗劑停留在比色皿中約半小時,然后排掉,
再用蒸儲水沖洗干凈,最后注入蒸儲水。
3.不使用儀器時,流動比色皿內(nèi)一定要保證充滿蒸儲水。
4。更換打印機色帶時.嚴格遵照打印機操作手冊,避免不規(guī)范操作.
5。光源燈更換時一定要先切斷儀器的電源,手不可觸摸光源燈的玻璃部分,萬一光源燈的玻璃部分弄臟
了,可用無水乙醉將污物除去。
6.更換的蠕動泵管尺寸材料應(yīng)及原泵管?致,如不?致則要重新調(diào)整吸液量.
第五節(jié)血常規(guī)檢驗操作規(guī)程
【標本】
抗凝靜脈血(有些儀器也可用末梢血)。
【方法】
血液細胞自動分析儀測定法。
【試劑】
血液細胞自動分析儀配套試劑。
【操作】
詳見血液細胞自動分析儀使用手冊。
【附注】
lo血常規(guī)包括白細胞計數(shù)及分類、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細胞比枳、血小板計數(shù)等項目.這些
項目亦有相應(yīng)的手工方法,詳見有關(guān)資料。
2。半自動及全自動血液細胞分析儀從設(shè)計上均要求用抗凝靜脈血。其優(yōu)點為:
(1)靜脈血能正確地反映病人實際情況,重復(fù)性好;
(2)利于延長儀器的使用壽命;
(3)解決了采血盤的交叉感染問題等。
3。血細胞計數(shù)應(yīng)用EDTA-K;:為抗凝劑(EDTA?L?2乩01。5?2。2mg可抗凝1ml血)。
4。貯血容器應(yīng)選用有蓋塑料管??鼓杉笤谑覝刂匈A存應(yīng)不超過6h;如需制作血涂片應(yīng)在2h內(nèi)
完成.
5o測定前必須將EDTA-L抗凝血充分混勻.
6.血細胞分析儀測定最適溫度為18?22℃,低于15℃或高于30C,均可使細胞體積發(fā)生改變,影響各
參數(shù)的結(jié)果。
7.血細胞分析儀用于白細胞分類只能當作一種過篩手段,當白細胞、紅細胞、血紅蛋白和血小板的任何
一項有明顯
升高或降低;白細胞分類出現(xiàn)異常結(jié)果(中間細胞群百分率28.啖);紅細胞、白細胞和血小板的任何一個直
方圖出現(xiàn)異常圖形等情況,須用顯微鏡檢查及分類。
第六節(jié)尿常規(guī)檢驗操作規(guī)程
【標本】
新鮮尿液。
【方法】
化學(xué)試帶法。
【試劑】
各型號尿液化學(xué)分析儀配套試帶。
[操作]
詳見尿液化學(xué)分析儀使用手冊。
【附注】
1.尿常規(guī)檢查使用尿液化學(xué)分析儀,目前能進行8?10項檢測(PIK蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅
素、尿膽素原、亞硝酸鹽、比重、白細胞)。這些項目亦有相應(yīng)的手工方法,詳見有關(guān)資料。
20必須了解所用試帶各膜塊注意事項、藥物干擾。
3.要注意尿液化學(xué)分析儀測定結(jié)果及手工法的差異,必要時用手工法復(fù)查。
4.尿液化學(xué)分析儀檢測僅是一個過篩手段,當?shù)鞍住㈦[血、白細胞等出現(xiàn)異常結(jié)果(如尿蛋白“+”或
以上)時,應(yīng)進行鏡檢.
5.尿液顏色、透明度等一般性狀異常時也應(yīng)報告。
第七節(jié)肝功能檢驗操作規(guī)程
血清總膽紅素(TBIL)和結(jié)合膽紅素(DBIL)測定
改良J-G法
【試劑】
參照書刊文獻(如《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第二版)自配,配制標準液的膽紅素應(yīng)符合如下標準,純
膽紅素的氯仿溶液在25c當光徑1.000±0oOOlCm,波長453nm條件下其摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在60700±1600范圍
內(nèi),偶氮膽紅素的摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在74380+866范圍內(nèi),配制標準液的稀釋劑須含白蛋白,可用牛血清白蛋
白或人血清代替人血清白蛋白。標準液應(yīng)貯於棕色瓶中避光保存,在市售試劑中以含堿性酒石酸的靈敏度特
異性高。
[操作]
按試劑盒說明書或相應(yīng)書刊文獻規(guī)程手工操作,比色測定,波長600nmo制作準曲線.血樣測定,從標準
曲線上求TBIL及DBIL的含量以umol/L報告。
也可按廠家提供的試劑及儀器使用的說明書的要求將相應(yīng)的程序及參數(shù)設(shè)入,用自動生化分析儀測定.
【標本】
血清,空腹血為宜,脂血、脂溶性色素及嚴重溶血干擾此測定,暫不能測定的標本應(yīng)避光俁存,室溫可穩(wěn)
定8h,2?8c可保存48h。
含疊氮鈉作防腐劑的質(zhì)控血清不宜用此法測定膽紅素.
膽紅素氧化酶(BOD)法
【試劑】
市售成套試劑.BOD試劑復(fù)溶后2?8c可保存一周。
【操作】
按廠家提供的試劑及儀器說明書要求設(shè)置程序輸入?yún)?shù)用自動生化分析儀測定。波長450或460nm.
【標本】
血清要求及改良J-G法相似。
二甲亞楓(DMSO)法
【試劑】
市售現(xiàn)成試劑。
[操作]
按試劑盒說明書手工操作比色測定或用自動生化儀測定。波長560nmo
【標本】
血清、輕度脂血,溶血標本對?結(jié)果無明顯影響、重度脂血、溶血標本須作標本空白進行較正。
血氨測定
【方法】
酶兩點法。
【試劑】
市售成套試劑。
【操作】
按試劑及儀器使用說明書要求,設(shè)入相應(yīng)的程序及各項參數(shù)、用自動生化分析儀測定。波長340nm。
【標本】
EDTA。Na?抗凝血漿。靜脈采血后及EDTA。Na?混勻,立即置冰水中盡快分離出血漿,加塞置2?4c保存,
在2、3h內(nèi)分析,-20C可也定24h0溶血標本忌用。
第八節(jié)腎功能檢驗操作規(guī)程
尿素氮
1。檢測目的;
槍測血清、血漿或尿液中尿素的含量,為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果,以及對健
康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。
2.標本要求:
2.1病人準備:空腹12小時。
2.2標本類型:血清、肝素化的血聚或24小時尿。
3<?設(shè)備和試劑:
3.1儀器設(shè)備:邁瑞半自動生化分析儀
3.2試劑材料:試劑
3。3試劑的貯存:
3。3.12?8c密閉避光貯存至標簽所注失效期.
3。3.2開蓋上機2?8c避光穩(wěn)定30天。
3o3.3變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值〈1。000時,不能繼續(xù)使用。
3.4注意:此試劑為體外診斷用,禁止入口,吞下有害。試劑含有疊氮化鈉,誤入眼、口中或沾染到皮膚I:請
立即用清水徹底沖洗,必要時到醫(yī)院就診.疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物,故廢棄
時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。
3。5試劑準備:即開即用的,無需特殊準備。
4操作步驟.
.見生化分正儀操作流程。
5。質(zhì)量控制:
5.1質(zhì)控物:RANDOX多項人基質(zhì)血清
5。2質(zhì)控措施:
5。2。1室內(nèi)質(zhì)控:每日日常工作前進行。
5.2.2室間質(zhì)控:參加北京臨床檢驗中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評.
6.干擾因素:
總膽紅素W40mg/dL,血紅蛋白W450mg/dL,抗壞血酸W400mg/dL對本法無干擾。
7。參考區(qū)間及可報區(qū)間:
7。1參考范圍:血清/血漿2.86?8。20mmol/L
24小時尿15?35g/24h
7。2可報范|制:0.00?35。00nlmol/L.樣品Urea含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做,結(jié)果乘以稀釋倍
數(shù)。
8.異常結(jié)果處理:
結(jié)果異常、及臨床診斷不符,應(yīng)復(fù)查或及臨床聯(lián)絡(luò).
肌酊
lo檢測目的;
檢測血清、血漿或尿液中肌酊的含量,為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果,以及對健
康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。
3.標本要求:
3。1病人準備:空腹12小時.
3。2標本類型:血清、肝素化的血漿或尿液。
4.設(shè)備和試劑:
4。1儀器設(shè)備:邁瑞半自動生化分析儀
4.2試劑材料:試劑
4。3試劑的貯存:
4.3.12?8℃密閉避光貯存至標簽所注失效期。
4。3o2開蓋上機2?8℃避光穩(wěn)定30天。
4。3。3變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值)0。050時,不能繼續(xù)使用。
4。4注意:此試劑為體外診斷用,禁止入口,吞下有害.試劑含有疊氮化鈉,誤入眼、口中或沾染到皮膚上請
立即用清水徹底沖洗,必要時到醫(yī)院就診.疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物,故廢棄
時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。
4。5試劑準備:即開即用的,無需特殊準備。
5.操作步驟:
見半自動生化分析儀操作流程。
6.質(zhì)量控制:
6o1質(zhì)控物:RANDOX多項人基質(zhì)血清
6.2質(zhì)控措施:
6.2.1室內(nèi)質(zhì)控:每日日常工作前進行。
6.2,2室間質(zhì)控:參加臨床化學(xué)室間質(zhì)評。
7.干擾因素:
直接膽紅素<257umol/L,血紅蛋白W005g/L,抗壞血酸W3mmol/L,甘油三酯<1500mmol/L,肝素〈50KU/L,
枸椽酸鈉W10g/L對本法無干擾。
8o參考區(qū)間及可報區(qū)間:
8.1參考范圍:血清/血漿53。0?123。Oumol/L(男性)
44。0?106。Oumol/L(女性)
首次晨尿1530-15320umol/L
24小時尿6.6?15。0mmol/24h
8.2可報范圍:0o0-8840.0ymol/Lo樣品Crea含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做,結(jié)果乘以稀釋
倍數(shù)。
9。異常結(jié)果處理:
結(jié)果異常、及臨床診斷不符,應(yīng)復(fù)杳或及臨床聯(lián)絡(luò)。
9o危急值及處理方法:
>177mnol/Lo及時及臨床聯(lián)絡(luò)。
10o實驗室解釋:
增高:嚴重腎功能不全、各種胃障礙、肢端肥大癥等。
降低:營養(yǎng)不良、多尿等。
第九節(jié)血脂檢驗操作規(guī)程
標本采集及處理
1.受檢者抽血前二周應(yīng)保持平衡的飲食習(xí)慣,近期體重穩(wěn)定無外傷,手術(shù)等意外情況。并注意如有使用
降糖、降脂、降壓、避孕藥,B-受體阻滯劑,免疫抑制劑,激素藥物等,則應(yīng)根據(jù)所用藥物特性停藥數(shù)天
或數(shù)周后再作血液脂類檢測.
2.空腹抽血,TG,脂蛋白,載脂蛋白測定應(yīng)至少禁食12小時(僅作膽固醇測定不必強求空腹)24小時內(nèi)
不作劇烈運動。抽血前不要久站立。至少應(yīng)靜坐5分鐘。抽血時止血帶使用不可超過1分鐘。
3.標本用血清,也可用肝素或EDTA.Na?抗凝之血漿.EDTA。Na?濃度不宜太高.
4.血標本室溫放置不得超過3h,放置30?45分鐘后應(yīng)即時分離出血清(漿)蓋封於4c冰箱中可穩(wěn)定
至少4天,如需長期保存,應(yīng)於一70C中冰凍存放,不可反復(fù)凍融。
血清總膽固醇(TC)測定
酶法(CHOD?PAP法)
【試劑】
市售現(xiàn)成試劑。
【操作】
按試劑及儀器使用說明書要求設(shè)定程序,輸入?yún)?shù)用自動或半自動生化分析儀測定(速率法)終點法可手
工操作,用普通分光光度計比色測定。波長50()nm或520nm。
【標本】
I能清(漿)參看本節(jié)的標本采集及處理。
【附注】
本法為中華醫(yī)學(xué)會檢驗學(xué)會推薦的TC測定常規(guī)方法(中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志,1995、18:185).
膽固醇標準液以定值參考血清為宜,而不宜用Choi的水溶液作標準。Choi定值質(zhì)控血清亦不應(yīng)用作標
準液。
主要技術(shù)指標:終點法批內(nèi)CV<1.5%、批間CVW2.5%o靈敏度:顯色劑用酚時,TC5.2mmol/L(200mg/dl)
時的吸光度(A500nm)約0。30?0。35,故A500nm=0。005時TC濃度約為0.08mmol/L(3mg/dL),測定范圍:
當血清及試劑用量之比為1:10()時其測定的上界為13nunol/L(500ng/dL)o
血清甘油三酯(TG)測定
酶法(GPO~PAP法)
【試劑】
市售現(xiàn)成試劑。有兩種。
一步酶法單一試劑,二步酶法雙試劑。
標準液(參考物)?步酶法之用三油酸甘油酯水溶液,也可用甘油,但甘油不適用於二步酶法.
【操作】
按試劑及儀器使用說明書要求設(shè)定程序和參數(shù),用自動或半自動生化分析儀測定,終點法可用普通分光光
度計手工操作,比色測定。波長500nm。
【標本】
血清(漿)參看本節(jié)標本采集及處理。
【附注】
本法在操作程序上分為一步隨法及二步施法,二步陋法為中華醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)會的推薦方法(中華醫(yī)學(xué)檢驗
雜志1995、18:249)。現(xiàn)階段允許二法并存,要求逐步過渡到統(tǒng)一采用二步酶法,在方法尚未統(tǒng)一前,實驗
室報告TG測定結(jié)果時應(yīng)注明“除FG值”或“未除FG值”.
主要枝術(shù)指標:酶試劑用緩沖液配制后,20、25℃應(yīng)穩(wěn)定1天,4'C可穩(wěn)定3?7天,試劑空白為A500nmW
005;顯色后穩(wěn)定230min:測定上界11。3nimo1/L(1OOmg/dL);
精密度:批內(nèi)CVW2%,批間CVW5%:靈敏度:2mme1/LTGA500nm20。2。
血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL—C)測定
磷筲酸鎂沉淀法
【試劑】
市售成套試劑,沉淀劑,酶試劑(同TG測定)。
【操作】
按試劑盒說明書操作.
1.沉淀含apoB的脂蛋白。
2.測定上清液(只含HDL)的膽固醇含量(方法同酶法TC測定)。
【標本】
血清(漿)。
硫酸葡聚糖一鎂沉淀法
【試劑】
市售成套試劑:總HDL試劑,HDL3試劑,酶試劑(同TC試劑)。
【操作】
按試劑說明書操作:
1.沉淀含apoB的脂蛋白,(總HDL試劑);
2.沉淀含apoB的脂蛋白及HDL2(HDL3試劑);
3.測定總HDL?C及HDL3、C<同酶法TC測定),并計算出HDL2?C量。
【標本】
血清(漿)血樣在室溫中不宜久放,應(yīng)即時測定,原則應(yīng)低溫保存。
直接HDL?C測定法
【試劑】
市售專門的試劑,無沉淀劑.酶試劑同TC測定.(如日本第一化學(xué)藥品株式會社的產(chǎn)品).
【操作】
按試劑盒及儀器使用說明書要求設(shè)置程序,輸入?yún)?shù)直接用自動或半自動生化分析儀測定,無須沉淀離
心分離出HDL步驟。
【標本】
血清(漿)。
血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測定
1.Friedwald工式計算法:
(1)1JJL—C=TC-IIDL-C-TG/5(以mg/dl為單位計);
(2)LDL—C=TC-HDL—C-TG/2.2(以mmol/L為單位計);
(3)只有當血TGV4.52nlmo/L結(jié)果才較準確;
(4)只有TC、TG、HDL—C三項測定都準確且符合標準化要求時,才可計算出LDL-C的近似值.
2.聚乙烯硫酸沉淀法
【試劑】
沉淀劑市售,酶試劑同TC測定。
【操作】
1.TC測定。
2.選擇性沉淀血清中LDL,測定上清液之HDL-C及VLDL—O之和的量,(同TC測定).
3.計算出LDL-C的含量。
【標本】
血清.
血清載脂蛋白Al(apoAl)測定
免疫透射比濁法。波長340nm?本法批間CVV5%。
【試劑】
市售試劑盒,試劑2?8C保存,不同批號試劑不能混合使用,抗血清效價不應(yīng)低於16。
【操作】
按試劑及儀器使用說明書要求,設(shè)定程序和參數(shù)用自動生化分析儀測定,也可用特定蛋白分析儀作速率
法散射比濁測定,或用含340nm的分光光度計手工操作測定。
【標本】
血清。
血清載脂蛋白B(apoB)測定
免疫透射比濁法。波長340nm,本法批間CV<5%.
【試劑】
市售試劑,2?8c保存,不同批號試劑不能混合使用,抗血清效價不應(yīng)低於1:128。
【操作】
參看apoAl測定。
【標本】
血清.
第十節(jié)血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程
1。檢測目的:
檢測血清或血漿中葡萄糖的含量,為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果,以及對健康人群
正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值.
3。標本要求:
3。1病人準備:空腹12小時。
3。2標本類型:血清或NaF抗凝的血漿.采血后及時分離,以避免血清或血漿中葡葡糖被細胞利用而降低。
4.設(shè)備和試劑:
4。1儀器設(shè)備:奧林巴斯AU600生化分析儀
4。2試劑材料:四川邁克公司試劑
參及反應(yīng)成份:
R1:酚(12.Ommol/L)
R2:GOD(235KU/L)、POD(25KU/L)、4—AAP(1。20mmol/L)
4。3試劑的貯存:
4.3<12?8℃密閉避光貯存全標簽所注失效期.
4。3.2開蓋上機2?8℃避光穩(wěn)定30天。
4。3。3變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值〉0。150時,不能
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