新教材高中生物選擇性必修3課件：1 2 2 微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)(人教版)

第2課時(shí)微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)知識點(diǎn)1知識點(diǎn)2課時(shí)作業(yè)隨堂檢測///////1245/////////////////////網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建·晨讀必背3///////選擇培養(yǎng)基和微生物的選擇培養(yǎng)1聯(lián)想質(zhì)疑自主梳理1.選擇培養(yǎng)基允許抑制阻止目的菌抑制阻止脲酶尿素提醒：有些微生物可以利用其他微生物的代謝產(chǎn)物生長繁殖，因此能在選擇培養(yǎng)基上生長的微生物不一定都是所需的微生物，還需進(jìn)一步驗(yàn)證。2.微生物的選擇培養(yǎng)——稀釋涂布平板法900.1酒精酒精燃盡冷卻吸收恒溫培養(yǎng)箱單菌落兩種接種方法的比較項(xiàng)目平板劃線法稀釋涂布平板法用途一般用于菌種的純化一般用于篩選菌株優(yōu)點(diǎn)可對混合菌進(jìn)行分離可以計(jì)數(shù)缺點(diǎn)不能計(jì)數(shù)操作復(fù)雜，若平板不干燥，則效果不好；若菌液濃度大，則長不出單菌落培養(yǎng)結(jié)果(1)篩選分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源，且為液體培養(yǎng)基。()提示：選擇培養(yǎng)基一般為固體培養(yǎng)基。(2)能分解尿素的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)槠淠墚a(chǎn)生脲酶。()(3)稀釋涂布平板法能分離細(xì)菌，也能計(jì)數(shù)(

)(4)平板劃線法不僅能純化細(xì)菌，也能計(jì)數(shù)(

)×√√×[典型例題]

(2021·陜西漢中模擬)利用稀釋涂布平板法純化的大腸桿菌，經(jīng)培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上出現(xiàn)了多種菌落，不可能的原因是(

) A.培養(yǎng)基制備過程中被雜菌污染 B.接種過程中，無菌操作不符合要求 C.系列稀釋時(shí)，無菌操作不符合要求 D.使用涂布器時(shí)涂布不均勻

解析出現(xiàn)雜菌污染的原因可能有培養(yǎng)基制備過程中被雜菌污染；接種過程中，無菌操作不符合要求；系列稀釋時(shí)，無菌操作不符合要求等，A、B、C不符合題意；使用涂布器時(shí)涂布不均勻會導(dǎo)致菌落分布比較集中，不會導(dǎo)致雜菌污染，D符合題意。D[變式訓(xùn)練]

某學(xué)者欲研究被石油污染過的土壤中的細(xì)菌數(shù)并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列有關(guān)操作錯(cuò)誤的是(

) A.利用平板劃線法對細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù) B.利用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選能分解石油的細(xì)菌 C.采用稀釋涂布平板法分離菌種 D.稱取土壤和稀釋土壤溶液時(shí)應(yīng)在酒精燈火焰旁操作

解析平板劃線法能對細(xì)菌分離純化但不能計(jì)數(shù)，通常將被石油污染過的土壤浸出液稀釋后，采用稀釋涂布平板法分離分解石油的細(xì)菌菌種，并對菌種進(jìn)行計(jì)數(shù)，A錯(cuò)誤，C正確；篩選能分解石油的細(xì)菌只能利用以石油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，B正確；稱取土壤和稀釋土壤溶液過程中的每一步都要在酒精燈火焰旁操作，D正確。A尿素為該培養(yǎng)基的唯一氮源，只有能產(chǎn)生脲酶的微生物才能將尿素分解為氨供自身利用，其他微生物由于缺少氮源而無法生長繁殖。

如何進(jìn)一步鑒定選擇培養(yǎng)基上的菌落是分解尿素的細(xì)菌？提示：在培養(yǎng)基中添加酚紅指示劑，培養(yǎng)基變紅則可以初步鑒定為分解尿素的細(xì)菌。要設(shè)置空白對照實(shí)驗(yàn)，且一定要涂布至少3個(gè)平板作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。

1.鏟取土樣的鐵鏟和紙袋是否也需要滅菌？為什么？提示：需要，因?yàn)橐矔斐呻s菌污染，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。2.對接種環(huán)和涂布器進(jìn)行灼燒滅菌，在操作上有何區(qū)別？提示：接種環(huán)滅菌時(shí)，應(yīng)將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)的金屬絲燒紅；涂布器滅菌時(shí)，應(yīng)先將涂布器浸在酒精中，再放在火焰上灼燒，直到酒精燃盡。微生物的數(shù)量測定2聯(lián)想質(zhì)疑自主梳理素養(yǎng)提升1.微生物數(shù)量測定的基本方法一活菌30～300平均值少菌落細(xì)菌計(jì)數(shù)板血細(xì)胞計(jì)數(shù)板顯微鏡活菌死菌快速直觀2.土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(1)實(shí)驗(yàn)原理：絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成______的微生物才能分解尿素。利用以______作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可以從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌。脲酶尿素(2)方法步驟中性3～81×1041×1051×1061×103～1×10730～30030～37菌落數(shù)目穩(wěn)定特征(1)從土壤中取樣時(shí)，土層越淺越好()(2)來自土壤的微生物稀釋倍數(shù)越大越好(

)(3)測定不同微生物數(shù)量時(shí)，接種的土壤懸浮液的稀釋度相同(

)(4)菌落特征是鑒別菌種的重要依據(jù)()(5)利用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)量就是活菌的數(shù)量()×××√×科學(xué)探究——土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果。(1)甲同學(xué)在該濃度下涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230，該同學(xué)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果是否真實(shí)可靠？為什么？提示不真實(shí)可靠。為增加實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性，應(yīng)設(shè)置重復(fù)實(shí)驗(yàn)，在同一稀釋度下至少涂布3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)結(jié)果后計(jì)算平均值。(2)乙同學(xué)在該濃度下涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為21、212、256，該同學(xué)將21舍去，然后取平均值。該同學(xué)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的處理是否合理？為什么？提示不合理。微生物計(jì)數(shù)時(shí)，如果實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)重復(fù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果差別很大的情況，應(yīng)分析實(shí)驗(yàn)過程中可能的影響因素，找出差異的原因，而不能簡單地將結(jié)果舍棄后進(jìn)行計(jì)數(shù)。(3)某同學(xué)在三種稀釋度下吸取0.1mL的菌液涂布平板，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，得到以下的數(shù)據(jù)，試計(jì)算1g樣品的活菌數(shù)。提示

105的稀釋度下取0.1mL的菌液涂布的三個(gè)平板上的菌落數(shù)在30～300之間，計(jì)算其平均值為(212＋234＋287)/3≈244。進(jìn)一步可以換算出1g樣品中活菌數(shù)為(244÷0.1)×105＝2.44×108(個(gè))。(4)為什么統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目低？提示當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。微生物篩選過程中必要的兩種對照培養(yǎng)基及其作用[典型例題1]

(2021·四川綿陽期末)某同學(xué)將1mL土壤樣液稀釋100倍，在3個(gè)平板上用稀釋涂布平板法分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、57和58。下列敘述錯(cuò)誤的是(

) A.可得出土壤樣液中活菌大約為5.7×107個(gè)/L B.此方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比實(shí)際的活菌數(shù)目低 C.一般選擇菌落數(shù)為30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù) D.顯微鏡直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的是稀釋液中的活菌數(shù)D解析將1mL樣品稀釋100倍，在3個(gè)平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、57和58，據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為(56＋57＋58)÷3÷0.1×1000×100＝5.7×107，A正確；由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，在平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比實(shí)際的活菌數(shù)目低，B正確；為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，C正確；顯微鏡直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的是稀釋液中所有菌體的數(shù)目，包括活菌和死菌，D錯(cuò)誤。[典型例題2]

(2021·山東淄博月考)下列關(guān)于土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的敘述.正確的是(

) A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素 B.統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)目一般用平板劃線法 C.篩選分解尿素的細(xì)菌時(shí)，應(yīng)以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的營養(yǎng)物質(zhì) D.在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變藍(lán)，則表明篩選到了分解尿素的細(xì)菌

解析統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)目時(shí)一般用稀釋涂布平板法，B錯(cuò)誤；篩選分解尿素的細(xì)菌時(shí)應(yīng)以尿素作為培養(yǎng)基中的唯一氮源，培養(yǎng)基中還應(yīng)含有水、無機(jī)鹽、碳源等營養(yǎng)物質(zhì)，C錯(cuò)誤；在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，則表明篩選到了分解尿素的細(xì)菌，D錯(cuò)誤。A[變式訓(xùn)練]

(2021·襄陽五中調(diào)研)下列關(guān)于“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是(

) A.利用稀釋涂布平板法準(zhǔn)確估計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是有恰當(dāng)?shù)南♂尪?B.若要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照 C.該實(shí)驗(yàn)應(yīng)采用稀釋涂布平板法 D.用以尿素為唯一氮源且添加了酸堿緩沖劑的培養(yǎng)基來培養(yǎng)該細(xì)菌后不會使酚紅指示劑變紅B解析利用稀釋涂布平板法估算菌落數(shù)目的關(guān)鍵是有恰當(dāng)?shù)南♂尪龋粝♂尡稊?shù)太低，菌落太多，會長在一起，稀釋倍數(shù)太高，平板上菌落數(shù)目過少，都不宜進(jìn)行計(jì)數(shù)，A正確；若要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，需設(shè)置接種在沒有選擇作用的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上培養(yǎng)作為對照，B錯(cuò)誤；因要對細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，所以該實(shí)驗(yàn)應(yīng)采用稀釋涂布平板法，C正確；分解尿素的細(xì)菌能合成脲酶，將尿素分解產(chǎn)生氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，用以尿素為唯一氮源且添加了酸堿緩沖劑的培養(yǎng)基來培養(yǎng)該細(xì)菌，則能維持pH穩(wěn)定，不會使酚紅指示劑變紅，D正確。顯微鏡直接計(jì)數(shù)法本身不能區(qū)分細(xì)菌的死活，因此一般用來統(tǒng)計(jì)總菌數(shù)。但是，通過一定的輔助處理，可以實(shí)現(xiàn)活菌計(jì)數(shù)，如在計(jì)數(shù)前用臺盼藍(lán)染液進(jìn)行染色，可以通過統(tǒng)計(jì)無色細(xì)胞的個(gè)數(shù)來對活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。

1.為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度？提示：土壤中各種微生物的數(shù)量是不同的，為獲得不同類型的微生物，就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離。2.應(yīng)如何設(shè)置對照，判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用？提示：在全營養(yǎng)培養(yǎng)基上接種。3.用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)時(shí)，為什么通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中的活菌數(shù)？

提示：當(dāng)樣品稀釋度足夠高時(shí)，平板上的一個(gè)菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。(1)樣品稀釋液的最佳濃度為培養(yǎng)后每個(gè)平板上有30～300個(gè)菌落的濃度。細(xì)菌一般選用104、105、106倍的稀釋液進(jìn)行培養(yǎng)。(2)為排除非測試因素(培養(yǎng)基)的干擾，實(shí)驗(yàn)需設(shè)置不接種的全營養(yǎng)培養(yǎng)基進(jìn)行空白對照。(3)每一稀釋倍數(shù)的菌液都至少要涂布3個(gè)平板，作為重復(fù)實(shí)驗(yàn)，求其平均值，若其中有菌落數(shù)與其他平板差別很大的，則需要重新實(shí)驗(yàn)。

(1)分解尿素的細(xì)菌能夠合成脲酶，脲酶可將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高。因此，在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌時(shí)，培養(yǎng)基出現(xiàn)紅色。(2)在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅，剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物；而當(dāng)纖維素被纖維素分解菌分解后，復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以這些細(xì)菌為中心的透明圈。網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建·晨讀必背3思維導(dǎo)圖特定種類稀釋涂布晨讀必背1.在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。2.一些細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕?，脲酶能催化尿素分解產(chǎn)生NH3，NH3可作為這些細(xì)菌的氮源。3.當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少個(gè)細(xì)菌。4.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)；在同一稀釋度下，應(yīng)至少對3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出平均值。隨堂檢測41.分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，對培養(yǎng)基的要求是(

) ①加尿素②不加尿素③加瓊脂④不加瓊脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸鹽⑧不加硝酸鹽 A.①③⑤⑦ B.②④⑥⑧ C.①③⑤⑧ D.①④⑥⑦

解析要分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)基中尿素應(yīng)是唯一的氮源，不能加硝酸鹽；在固體培養(yǎng)基上形成菌落，要加瓊脂作凝固劑；分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，要加有機(jī)碳源(如葡萄糖)。C2.下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是(

)A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B.取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上C.將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24～48hD.確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)解析檢測細(xì)菌總數(shù)，用蒸餾水配制培養(yǎng)基，常用高壓蒸汽滅菌法滅菌后，取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上，將實(shí)驗(yàn)組和對照組放置在適宜條件下培養(yǎng)，在確定對照組無菌后，選擇菌落在30～300的平板為代表進(jìn)行計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。D3.(2021·青島二中期末)在涂布有大腸桿菌的培養(yǎng)基上進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，在a、b、c處分別貼浸有不同抗生素(濃度相同)的無菌濾紙片，d處濾紙片浸有無菌水。培養(yǎng)后的結(jié)果如圖。以下判斷錯(cuò)誤的是(

)

A.a處抑菌效果小于b處

B.b處的濾紙片沒有瀝干 C.c處抗生素?zé)o效

D.d為對照

解析a與b形成的透明圈大小相近，因此a、b處抑菌效果相似，A錯(cuò)誤；b處透明圈不規(guī)則，可說明b處的濾紙片沒有瀝干，B正確；c處的與d處相同，說明c處抗生素?zé)o效，C正確；d處用浸有無菌水的濾紙片，作為對照組，D正確。A4.(2021·湖北仙桃期末改編)如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。請據(jù)圖分析，下列說法錯(cuò)誤的是(

)AA.③號試管的稀釋倍數(shù)為103B.④號試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)可能為⑤號試管的10倍C.⑤號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×109D.將涂布器在酒精燈火焰上灼燒冷卻后，再進(jìn)行涂布解析③號試管的稀釋倍數(shù)是104，A錯(cuò)誤；④號試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，稀釋倍數(shù)是⑤號試管的1/10，如果稀釋倍數(shù)適當(dāng)，得到的菌落平均數(shù)可能是⑤號試管的10倍，B正確；⑤號試管利用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為(168＋175＋167)÷3÷0.1×106＝1.7×109，C正確；將涂布器在酒精燈火焰上灼燒冷卻后再進(jìn)行涂布，以免溫度過高殺死細(xì)菌，D正確。5.(2017·全國Ⅰ卷)某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}： (1)有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生___________。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是___________________________________________________________________ _______________________________________________________________，

但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是____________ ___________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。(2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇________(填“尿素”、“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是_______________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有______________________________________________________________________________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。答案(1)脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機(jī)物為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料(2)尿素其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用(3)為細(xì)菌生長提供無機(jī)鹽離子，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定解析(1)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。能分解尿素的細(xì)菌是一種分解者，屬于異養(yǎng)型生物，不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源。能分解尿素的細(xì)菌可以以葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是：一方面可氧化分解為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，另一方面其代謝中間產(chǎn)物可為多種有機(jī)物的合成提供原料。(2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，而其他兩組都含有含氮物質(zhì)NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用。(3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用：KH2PO4和Na2HPO4構(gòu)成緩沖對，可維持培養(yǎng)基的pH相對穩(wěn)定；KH2PO4和Na2HPO4能為微生物生長提供無機(jī)鹽。課時(shí)作業(yè)5知識點(diǎn)1選擇培養(yǎng)基1.(2021·江西九江聯(lián)考)最常用的接種微生物的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，下列關(guān)于二者的比較，正確的是(

)A

平板劃線法稀釋涂布平板法①需在無菌條件下操作不需無菌操作②培養(yǎng)基中不加瓊脂培養(yǎng)基中加有瓊脂③不可計(jì)算菌液中的活菌數(shù)可計(jì)算菌液中的活菌數(shù)④需要接種環(huán)需要涂布器A.③④ B.②④

C.①④ D.②③解析兩種方法都需要在無菌條件下操作，①錯(cuò)誤；兩種方法都需要配制固體培養(yǎng)基，均需要添加瓊脂，②錯(cuò)誤；平板劃線法不能對菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，稀釋涂布平板法能進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，③正確；平板劃線法的接種工具是接種環(huán)，稀釋涂布平板法的接種工具是涂布器，④正確，A符合題意。2.(2021·山東菏澤調(diào)研)在篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基中加入剛果紅染料，研究者觀察到幾個(gè)有透明圈的菌落。據(jù)圖分析正確的是(

) A.透明圈內(nèi)的剛果紅染料已被分解 B.菌落②中的菌株降解纖維素能力最強(qiáng) C.圖中菌落可能是細(xì)菌也可能是真菌 D.圖中培養(yǎng)基可用牛肉膏、蛋白胨配制

解析根據(jù)分析可知，透明圈不顯紅色的原因是其中的纖維素已被分解，A錯(cuò)誤；菌落①形成的透明圈直徑與菌落直徑之比最大，說明菌落①降解纖維素能力最強(qiáng)，B錯(cuò)誤；根據(jù)題干信息不能判斷圖中菌落的微生物類型，可能是細(xì)菌也可能是真菌，C正確；圖中培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源，不可用牛肉膏、蛋白胨配制，D錯(cuò)誤。C3.(2021·北京高二期末)禾草靈(FE)是一種現(xiàn)代農(nóng)業(yè)常用除草劑，大量使用后造成的環(huán)境污染日益嚴(yán)重，為獲得能高效降解FE的菌株，科學(xué)家通過實(shí)驗(yàn)獲得W1菌株并利用紫外分光光度計(jì)檢測其對FE的降解效果(FE特征吸收峰在239nm處)，以下說法不正確的是(

)BA.應(yīng)從大量使用FE的土壤中獲取菌株B.將土壤稀釋液滅菌后接種到選擇性培養(yǎng)基上C.應(yīng)使用以FE作為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選D.據(jù)吸收光譜可知，W1菌株對FE有明顯降解能力解析由于只有被除草劑嚴(yán)重污染過的土壤才可能含有高效降解該除草劑的分解菌，所以為了獲取能高效降解該除草劑的菌株，應(yīng)從大量使用FE的土壤采集土壤樣品，A正確；土壤稀釋液中含有能高效降解FE的菌株，若滅菌將無法得到目的菌株，B錯(cuò)誤；為獲得能高效降解FE的菌株，培養(yǎng)基應(yīng)以FE作為唯一碳源，這樣才能抑制或淘汰不能分解FE的微生物，C正確；據(jù)吸收光譜可知，經(jīng)W1菌株降解后在239nm處的特征吸收峰明顯減弱，說明W1菌株對FE有明顯降解能力，D正確。知識點(diǎn)2微生物的選擇培養(yǎng)4.(2021·山東青島期末)篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳

源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，若細(xì)菌能分解淀粉，培養(yǎng)平板

經(jīng)稀碘液處理，會出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈(如圖)，實(shí)驗(yàn)

結(jié)果見下表。菌種菌落直徑：C(mm)透明圈直徑：H(mm)H/C細(xì)菌Ⅰ5.111.22.2細(xì)菌Ⅱ8.113.01.6有關(guān)本實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是(

)A.培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質(zhì)B.篩選分解淀粉的細(xì)菌時(shí)，菌液應(yīng)稀釋后涂布C.以上兩種細(xì)菌均不能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外D.H/C值反映了兩種細(xì)菌分解淀粉能力的差異解析培養(yǎng)基一般含有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽和生長因子等成分，A正確；篩選淀粉分解菌時(shí)，需要對菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，B正確；由題意可知，以上兩種菌均會產(chǎn)生透明圈，說明兩種菌均可以產(chǎn)生淀粉酶并分泌到細(xì)胞外分解淀粉，C錯(cuò)誤；淀粉分解菌的H/C越大，說明其產(chǎn)生的淀粉酶分解的淀粉相對越多，可說明該淀粉分解菌分解淀粉的能力越強(qiáng)，D正確。C5.(2021·山東菏澤期末)有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)打算從受原油污染的土壤中篩選高效降解原油的菌株，下列有關(guān)做法錯(cuò)誤的是(

) A.純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，只能采用平板劃線法 B.無菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染 C.在篩選過程中應(yīng)選用選擇培養(yǎng)基，即將土壤樣品稀釋液接種到以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上 D.在微生物培養(yǎng)過程中，實(shí)驗(yàn)室常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌A解析純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，可采用平板劃線法和稀釋涂布平板法，A錯(cuò)誤；無菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染，B正確；在篩選過程中應(yīng)選用選擇培養(yǎng)基，即將土壤樣品稀釋液接種到以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從而提高該菌的篩選率，C正確；在微生物培養(yǎng)過程中，實(shí)驗(yàn)室常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，D正確。6.(2021·河南名校聯(lián)盟)用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)樣品中尿素分解菌的數(shù)目，為了提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度，往往要設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)，對于對照組的要求不包括(

) A.對照組培養(yǎng)基也嚴(yán)格滅菌，且不接種任何微生物 B.倒平板時(shí)，培養(yǎng)基的用量與實(shí)驗(yàn)組必須完全相同 C.所用培養(yǎng)基成分及pH大小與實(shí)驗(yàn)組保持一致 D.對照組和實(shí)驗(yàn)組均放在相同且適宜的條件下培養(yǎng)

解析對照組培養(yǎng)基也要嚴(yán)格滅菌，且不接種任何微生物，為空白對照，A不符合題意；進(jìn)行倒平板時(shí)對照組培養(yǎng)基用量的大小與實(shí)驗(yàn)組不一定絕對相同，且對實(shí)驗(yàn)結(jié)果無影響，B符合題意；pH為無關(guān)變量，因此對照組所用培養(yǎng)基的成分及pH應(yīng)與實(shí)驗(yàn)組完全一致，C不符合題意；對照組和實(shí)驗(yàn)組的培養(yǎng)基都要置于相同條件下培養(yǎng)，以保證單一變量，D不符合題意。BB知識點(diǎn)3微生物的計(jì)數(shù)7.(2021·河北邢臺期末)下列有關(guān)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)操作，錯(cuò)誤的是(

) A.取土壤用的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都需要滅菌 B.測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量一般選用1×102、1×103、1×104倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng) C.鑒定分解尿素的細(xì)菌，利用了尿素可被分解產(chǎn)生氨，從而使培養(yǎng)基pH升高的原理 D.每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果解析取土壤用的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都需要滅菌，A正確；土壤中細(xì)菌比真菌多，在測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量時(shí)，一般選用1×104、1×105和1×106倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；鑒定分解尿素的細(xì)菌的原理是該種細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶，脲酶能將尿素分解產(chǎn)生氨，從而使培養(yǎng)基pH升高，使酚紅指示劑變紅，C正確；為防止遺漏菌落，應(yīng)選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，D正確。8.(2021·山東淄博月考)某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計(jì)數(shù)。下列與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)問題的敘述，正確的是(

) A.實(shí)驗(yàn)用過的帶菌培養(yǎng)基經(jīng)過加熱后才能倒掉 B.可利用平板劃線法對細(xì)菌進(jìn)行分離純化并計(jì)數(shù) C.培養(yǎng)基中含有的蛋白胨主要為細(xì)菌培養(yǎng)提供氮源和維生素等 D.觀察細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)時(shí)，最好是在另一平板上接種清水作為對照實(shí)驗(yàn)

解析帶菌的培養(yǎng)基經(jīng)高壓蒸汽滅菌后才能倒掉，以免污染環(huán)境，加熱不能達(dá)到滅菌的目的，A錯(cuò)誤；利用稀釋涂布平板法對細(xì)菌進(jìn)行分離純化并計(jì)數(shù)，平板劃線法不能用于細(xì)菌的計(jì)數(shù)，B錯(cuò)誤；培養(yǎng)基中含有的蛋白胨主要為細(xì)菌培養(yǎng)提供了氮源和維生素等，C正確；要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種無菌水作為對照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，D錯(cuò)誤。C9.(2021·河北省張家口一中期初)下列有關(guān)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是(

) A.實(shí)驗(yàn)中采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，可以用于制取土壤稀釋液 B.分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌時(shí)，應(yīng)選擇以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基 C.測定土壤樣品中的活菌數(shù)目，常用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 D.接種土壤微生物稀釋液時(shí)，平板劃線法通過連續(xù)劃線的操作使微生物均勻分布B解析在分離土壤中的尿素分解菌實(shí)驗(yàn)中，采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，土樣中的微生物被殺死，再制取土壤稀釋液接種并培養(yǎng)，不會得到菌落，A錯(cuò)誤；分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌時(shí)，應(yīng)選擇以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，只有能利用尿素的細(xì)菌才能生長繁殖，B正確；測定土壤樣品中的活菌數(shù)目，常用稀釋涂布平板法，顯微鏡直接計(jì)數(shù)法是將活菌和死菌一同計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；接種土壤微生物稀釋液時(shí)，稀釋涂布平板法的操作使微生物均勻分布，D錯(cuò)誤。10.(2021·中原名校聯(lián)考)研究人員從土壤中篩選得到酵母菌纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對其降解纖維素的條件進(jìn)行了研究。據(jù)圖分析正確的是(

)BA.篩選該高產(chǎn)菌株需要在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中添加纖維素B.探究最適溫度時(shí)應(yīng)盡可能將發(fā)酵液的pH控制在9左右C.該酵母菌高產(chǎn)菌株產(chǎn)生纖維素酶的最適溫度是35℃D.利用該高產(chǎn)菌株降解纖維素時(shí)需嚴(yán)格保持厭氧環(huán)境解析要篩選酵母菌纖維素酶高產(chǎn)菌株應(yīng)在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；探究該酶的最適溫度時(shí)，pH為無關(guān)變量，應(yīng)控制在最適pH，即將發(fā)酵液的pH控制在9左右，B正確；由于圖中隨著溫度的升高，纖維素酶活性逐漸增高，還沒有到達(dá)頂點(diǎn)，故35℃不一定是其最適溫度，C錯(cuò)誤；酵母菌屬于兼性厭氧型生物，既能進(jìn)行有氧呼吸，也能進(jìn)行無氧呼吸，故利用該高產(chǎn)菌株降解纖維素時(shí)不需嚴(yán)格保持厭氧環(huán)境，D錯(cuò)誤。11.(2021·廣東東莞調(diào)研)S型菌有莢膜且具有毒性，R型菌無莢膜也無毒性，二者對青霉素敏感。已知在多代培養(yǎng)的S型菌中存在能抗青霉素的突變型(記為PenrS型，且對青霉素的抗性不是莢膜產(chǎn)生的)?，F(xiàn)用PenrS型菌和R型菌進(jìn)行如圖所示實(shí)驗(yàn)，下列分析最合理的是(

)DA.甲組中部分小鼠患敗血癥，可用青霉素治療B.乙組中加入青霉素后有兩種菌落繼續(xù)生長C.丙組培養(yǎng)基中生長的菌落是PenrS型菌D.甲組小鼠體內(nèi)分離的菌接種到含青霉素的培養(yǎng)基上只能產(chǎn)生一種菌落解析甲組中部分R型菌可轉(zhuǎn)化為PenrS型菌，使部分小鼠患敗血癥，由于PenrS型菌能抗青霉素，故不可注射青霉素治療，A錯(cuò)誤；乙組中可觀察到兩種菌落，加青霉素后只有被PenrS型的DNA轉(zhuǎn)化的R型菌的菌落能繼續(xù)生長，B錯(cuò)誤；丙組培養(yǎng)基中含有青霉素，R型菌不能生長也不能發(fā)生轉(zhuǎn)化，所以不會出現(xiàn)菌落，C錯(cuò)誤；甲組小鼠體內(nèi)分離的菌為PenrS型菌和R型菌，由于R型菌對青霉素敏感，PenrS型菌抗青霉素，所以將分離的菌接種到含青霉素的培養(yǎng)基上只能產(chǎn)生一種菌落，D正確。12.(2018·全國卷Ⅰ，37)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時(shí)間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。

回答下列問題： (1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制________的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有____________(答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與合成的生物大分子有____________(答出兩點(diǎn)即可)。(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是________，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是_______________________________________________________________________________________________。(4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133；乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中，乙同學(xué)的結(jié)果可信度低，其原因是___________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)細(xì)菌選擇(2)碳源、無機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈(4)乙同學(xué)的結(jié)果中，1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差解析(1)在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基。若M培養(yǎng)基是用于真菌的篩選，則應(yīng)加入鏈霉素以抑制細(xì)菌的生長，其屬于選擇培養(yǎng)基。(2)馬鈴薯浸出液中含有淀粉、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、無機(jī)鹽、水等多種物質(zhì)，因此，除氮源外其中還有微生物生長所需要的碳源、無機(jī)鹽