DB15T 3684-2024蓖麻組織培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程

15I本文件起草單位：通遼市農(nóng)牧科學(xué)研究所、內(nèi)蒙劉涵淼、李雅劍、賈興田、齊金全、張超、柳1蓖麻組織培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程21)混合薰蒸消毒，在密閉條件下熏蒸消毒20min～30min,消毒后要打開門窗通風(fēng)換氣。接種前臭氧紫外燈照射消毒20min,并用75%酒精玻璃器具(三角瓶、培養(yǎng)皿)、金屬器具(鑷子、手術(shù)刀)采用高溫高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌處理，蒸氣壓力102.9kPa(1.05kg/cm2),溫度121℃,時(shí)間20min。有污染的培養(yǎng)容器用高溫高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌，蒸氣壓力102.9kPa(1.05kg/cm2),溫度121℃,時(shí)間60min。滅菌后去除培養(yǎng)基，用流水洗凈后存放。使用高溫高壓蒸汽滅菌鍋滅菌，蒸氣壓力102.9kPa(1.05kg/cm2),溫度121℃,時(shí)間20min。將常用試劑配制成50～100倍的母液，按照GB/T60母液貼上標(biāo)簽，注明溶液名稱、配制倍數(shù)、配制日期、配制者等信息，并于在700mL蒸餾水中加入30g蔗糖與5.7g瓊脂，蒸餾水定容至1L。攪拌均勻后分裝到100mL的三角31/8MS+1.0mg/LNAA+30g/L蔗糖+7.5g/L瓊脂粉。標(biāo)明培養(yǎng)基編號(hào)、種類、配制日期，在4℃條件下貯藏備用，貯存時(shí)間不應(yīng)超過1個(gè)月。選擇飽滿的種子去殼后放入無菌的大燒杯中，在超凈工作臺(tái)中先用75%的酒件為溫度25℃、光照強(qiáng)度2000Lx、光照時(shí)間16h/d。直插入預(yù)培養(yǎng)培養(yǎng)基上進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)。培養(yǎng)條件為溫度25℃、光照強(qiáng)度2000Lx、光照時(shí)間16h/d。將預(yù)培養(yǎng)7d的子葉節(jié)轉(zhuǎn)入(切面插入)不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行芽誘導(dǎo)培養(yǎng)，每瓶接種6～8個(gè)，培養(yǎng)25d~30d。培養(yǎng)條件為溫度25℃、光照強(qiáng)度2000Lx、光照時(shí)間16h將不定芽數(shù)大于2個(gè)的植株轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)根的再生，每瓶接種6～8個(gè)，培養(yǎng)條件為溫度25℃、光照強(qiáng)度2000Lx、光照時(shí)間16h/d。生根過程為25d~30d,根數(shù)1～5條即可煉苗移栽。選擇根芽發(fā)育良好的組培苗，打