體外分析技術(shù)課件

體外分析技術(shù)

體外分析技術(shù)體外分析技術(shù)分類放射免疫分析法免疫放射分析法非放射性標(biāo)記免疫分析技術(shù)體外分析技術(shù)

放射免疫分析法Radioimmunoassay，RIA基本原理基本方法質(zhì)量控制體外分析技術(shù)

基本原理利用特異抗體與標(biāo)記抗原和非標(biāo)記抗原的競爭結(jié)合反應(yīng)，通過測定放射性復(fù)合物量來計算出非標(biāo)記抗原量的一種超微量分析技術(shù)。體外分析技術(shù)

體外分析技術(shù)

B/(B+F)F/(B+F)B/F三種標(biāo)準(zhǔn)曲線F=游離*Ag,B=*AgAb,F+B=總*Ag體外分析技術(shù)

基本試劑抗體：高親和力、高特異性、高滴度標(biāo)記抗原（1）比活度和放化純度必須足夠高，以保證分析的靈敏度

（2）半衰期不能太短，使之有足夠長的壽命以完成整個分析過程（3）不改變原有抗原的特性（特異性、親和力、免疫活性等）標(biāo)準(zhǔn)品

體外分析技術(shù)

RIA操作的基本步驟加樣孵育分離結(jié)合與游離部分測定放射性數(shù)據(jù)處理，打印報告廢物處理體外分析技術(shù)

復(fù)合物和游離抗原的分離抗原抗體在液相環(huán)境中起反應(yīng)，終止反應(yīng)時用一定方法收集復(fù)合物測量放射性：雙抗體沉淀法，聚乙二醇沉淀法、葡萄球菌A蛋白沉淀法、活性炭吸附法、微孔濾膜過濾法等。預(yù)先將抗體吸附在某種固體支持物上，抗原抗體反應(yīng)就在支持物上進(jìn)行，反應(yīng)結(jié)束后只需將周圍未結(jié)合的游離抗原洗去，測定固體支持物上的放射性。體外分析技術(shù)

質(zhì)量控制質(zhì)量控制的目的：對分析工作的誤差進(jìn)行經(jīng)常性的檢查，遇有質(zhì)量異常則及時采取對策，以保證分析誤差控制在可接受的范圍內(nèi)，包括實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部和實(shí)驗(yàn)室間質(zhì)控兩方面。放射免疫分析誤差:隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差質(zhì)量控制指標(biāo):穩(wěn)定性、靈敏度、準(zhǔn)確度體外分析技術(shù)

免疫放射分析法

Immunoradiometricassay，IRMA

體外分析技術(shù)

基本原理用過量的標(biāo)記抗體與非標(biāo)記抗原形成復(fù)合物，用免疫吸附劑除去多余的游離抗體，復(fù)合物的放射性與非標(biāo)記抗原的量成正比。體外分析技術(shù)

體外分析技術(shù)

體外分析技術(shù)

IRMA的主要特點(diǎn)屬于非競爭性抗原抗體結(jié)合反應(yīng)抗原抗體復(fù)合物的量與所加非標(biāo)記抗原的量呈正相關(guān)在低劑量下不會有不確定因素IRMA的非特異性結(jié)合對低劑量區(qū)影響大，對分離條件的要求嚴(yán)格。對于RIA來講，低劑量區(qū)放射性高，非特異結(jié)合主要影響高劑量區(qū)。體外分析技術(shù)

非放射性標(biāo)記免疫分析技術(shù)提高靈敏度、減少放射性廢物、提高自動化程度體外分析技術(shù)

非放射性標(biāo)記免疫分析方法酶標(biāo)記免