高中生物：19 現(xiàn)代生物科技-屆江蘇高三生物模擬試卷分類匯編（6月刊）

（江蘇省百校聯(lián)考2021屆高三年級(jí)第三次考試生物試題）如圖是“DNA的粗提取和鑒定”

實(shí)驗(yàn)中幾個(gè)重要操作的示意圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.圖①的原理是DNA不溶于酒精，某些蛋白質(zhì)可溶于酒精

B.圖①和圖③都需用玻棒沿一個(gè)方向輕緩攪拌，以防止破壞DNA

C.若圖③操作后接圖②操作，則DNA留在濾液中

D.若圖④操作后接圖②操作，則DNA留在紗布上

【答案】B

【解析】

【分析】DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是：

①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利

用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；

②DNA不容易酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白

質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離；

③DNA對(duì)于酶、高溫和洗滌劑的耐受性，蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是不能水解DNA,蛋白

質(zhì)不能耐受較高溫度，DNA能耐受較高溫度洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜，但是對(duì)DNA沒有影響；

④在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。

【詳解】A、DNA不溶于酒精，95%的冷酒精凝集效果最佳，所以圖①的原理是DNA不溶

于酒精，某些蛋白質(zhì)可溶于酒精，以便除去溶于酒精的雜質(zhì)，提取含雜質(zhì)較少（或較純凈）

的DNA,A正確；

B、圖①玻璃棒逆時(shí)針方向攪拌，目的是提取出含雜質(zhì)較少的DNA,圖③玻璃棒順時(shí)針方

向攪拌，目的是溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNA,B錯(cuò)誤；

C、圖③操作是加入蒸儲(chǔ)水，破碎細(xì)胞，圖②操作是過濾，獲取含DNA的濾液，使DNA留

在濾液中，C正確；

D、圖④操作是去除濾液中雜質(zhì)，析出DNA,圖②操作是過濾，將DNA留在紗布上，D正

確。

故選Bo

（江蘇省百校聯(lián)考2021屆高三年級(jí)第三次考試生物試題）下面是單克隆抗體制備過程示意

圖，1?6代表相關(guān)過程，a?e代表相關(guān)細(xì)胞，以下敘述錯(cuò)誤的是（）

A.過程1是給小鼠注射特定抗原蛋白，以刺激小鼠產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞

B.c細(xì)胞有三種種類，每種細(xì)胞染色體組數(shù)是相等的，e細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞

C.過程2的促融方法可以采用電融合技術(shù)，這種技術(shù)能擊穿核膜促使核融合

D.過程3是抗體檢測(cè)及克隆產(chǎn)生陽性細(xì)胞的過程，此過程要進(jìn)行兩次

【答案】C

【解析】

【分析】單克隆抗體技術(shù)是一種免疫學(xué)技術(shù)，將產(chǎn)生抗體的單個(gè)B淋巴細(xì)胞同骨髓腫瘤細(xì)胞

進(jìn)行細(xì)胞融合，獲得既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖的雜種細(xì)胞，并以此生產(chǎn)抗體。是僅由

一種類型的細(xì)胞制造出來的抗體，對(duì)應(yīng)于多克隆抗體、多株抗體一一由多種類型的細(xì)胞制造

出來的一種抗體。

【詳解】A、過程1是給小鼠注射特定抗原蛋白，以刺激小鼠產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞，

以便后續(xù)的提取與單克隆抗體的制備，A正確；

B、c細(xì)胞有三種種類（B細(xì)胞-B細(xì)胞，B細(xì)胞-瘤細(xì)胞，瘤細(xì)胞-瘤細(xì)胞），每種細(xì)胞染色體組

數(shù)是相等的，都是四個(gè)染色體組，e細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，B正確；

C、過程2的促融方法可以采用電融合技術(shù)，這種技術(shù)能擊穿細(xì)胞膜促使核融合，C錯(cuò)誤；

D、過程3是抗體檢測(cè)及克隆產(chǎn)生陽性細(xì)胞的過程，此過程要進(jìn)行兩次，第一次是檢測(cè)獲得

雜交瘤細(xì)胞，第二次是收獲能產(chǎn)生單抗的雜交瘤細(xì)胞，D正確。

故選C。

（南京市、鹽城市2021屆高三年級(jí)第二次模擬考試）精子載體法是以精子作為外源基因載

體攜帶外源基因進(jìn)入卵細(xì)胞，下圖表示用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程。下列敘述正確的

是（）

標(biāo)記F外源基因嗽胞

①二元G3璃二0一

肅魏凝畝受精卵早期胚胎代孕母鼠轉(zhuǎn)基

成熟精子的精子因鼠

A.①過程需將成熟的精子放入ATP溶液中進(jìn)行獲能處理

B.②采用體外受精技術(shù)，受精卵中的遺傳物質(zhì)來自于父母雙方

C.②③過程所用培養(yǎng)液的成分相同且都加入動(dòng)物血清

D.④過程需要對(duì)受體母鼠用相關(guān)激素進(jìn)行同期發(fā)情處理

【答案】D

【解析】

【分析】

分析題圖：圖示表示培育轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程，其中①是篩選獲得導(dǎo)入外源基因的精子的

過程，②是體外受精過程，③是早期胚胎培養(yǎng)過程，④是胚胎移植過程。

【詳解】A、①過程需將成熟的精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中，用

化學(xué)藥物誘導(dǎo)精子獲能，A錯(cuò)誤；

B、②采用體外受精技術(shù)，受精卵中的遺傳物質(zhì)來自于父母雙方和外源基因，B錯(cuò)誤；

C、②為體外受精過程，③為早期胚胎培養(yǎng)過程，前者在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐羞M(jìn)

行，后者在發(fā)育培養(yǎng)基中進(jìn)行，這兩個(gè)過程所用培養(yǎng)液的成分不完全相同，C錯(cuò)誤；

D、胚胎移植時(shí)，需對(duì)供體和受體使用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，以保證胚胎移植入相同的生

理環(huán)境，D正確。

故選D。

（南京市、鹽城市2021屆高三年級(jí)第二次模擬考試）如圖是利用煙草葉片分離原生質(zhì)體的

過程。下列敘述正確的是（）

吸掉酶液

酚撕去下表皮保濕18h___________

表皮已消毒酶溶液及滲透壓穩(wěn)定原生質(zhì)體沉于原生質(zhì)體懸浮于一重新懸浮于

的葉片劑，葉段漂浮其上培養(yǎng)皿底清洗培養(yǎng)基蔗糖清洗培養(yǎng)基

取少蚩樣品用血

以適當(dāng)?shù)拿芏戎匦?/p>

細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)重新懸浮

懸浮于培養(yǎng)基中?于培養(yǎng)基原生質(zhì)體色細(xì)胞碎片

HilliMMi

A.若葉片取自離體培養(yǎng)的無菌苗，可無需消毒且分離的原生質(zhì)體再生細(xì)胞壁能力較強(qiáng)

B.應(yīng)將葉片去除下表皮的一面朝下，置于含有纖維素酶和果膠酶的等滲或低滲溶液中

C.將酶解裝置改為錐形瓶，置于低速搖床上輕輕震蕩，有利于原生質(zhì)體從組織中釋放

D.用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板檢測(cè)原生質(zhì)體的密度，初始培養(yǎng)密度過高會(huì)影響細(xì)胞的分裂

【答案】ACD

【解析】

【分析】

1、植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化

生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。

2、植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而利用植物

的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流

動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。

【詳解】A、若葉片取自離體培養(yǎng)的無菌苗，可無需消毒，且更容易分離到原生質(zhì)體，分離

的原生質(zhì)體活力、再生細(xì)胞壁的能力均較強(qiáng)，A正確；

B、應(yīng)將葉片去除下表皮的一面朝下，置于等滲溶液中，高滲液會(huì)使原生質(zhì)體失水，低滲液

會(huì)使原生質(zhì)體吸水（原生質(zhì)體無細(xì)胞壁，過度吸收會(huì)漲破），B錯(cuò)誤；

C、將酶解裝置改為錐形瓶，置于低速搖床上輕輕振蕩以促進(jìn)酶解，有利于原生質(zhì)體從組織

中釋放，C正確；

D、用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板檢測(cè)原生質(zhì)體密度，初始培養(yǎng)密度過高，會(huì)消耗大量營養(yǎng)物質(zhì)，排泄大

量廢物，會(huì)影響細(xì)胞分裂，D正確。

故選ACDo

（南京市2021屆高三年級(jí)第三次模擬考試）酵母菌細(xì)胞壁的主要成分是幾丁質(zhì)。釀酒酵母產(chǎn)

酒精能力強(qiáng)，但沒有合成淀粉酶的能力；糖化酵母能合成淀粉酶，但酒精發(fā)酵能力弱?？蒲?/p>

人員通過兩種途徑改良酵母菌種，實(shí)現(xiàn)以淀粉為底物高效生產(chǎn)酒精的目的。下列敘述正確的

是

f釀酒國母融合▲一舞選

逐往I八雜種酎母旦西

I聯(lián)㈱--":目旃母國一鑒定

逐徑n：糖化漸母塔目的基因無「年酒第母」J

A.途徑I需用纖維素酶處理酵母菌，再利用PEG誘導(dǎo)融合

B.途徑II需要以淀粉酶基因作為目的基因構(gòu)建表達(dá)載體

C.途徑I和途徑II最終獲得的目的酵母菌染色體數(shù)目相同

D.以淀粉轉(zhuǎn)化為還原糖的效率作為最終鑒定目的菌的指標(biāo)

【答案】B

【解析】

【分析】識(shí)圖分析可知，途徑工利用了細(xì)胞融合技術(shù)，酵母菌細(xì)胞存在細(xì)胞壁，如果使二者

細(xì)胞融合，必須出去細(xì)胞壁，根據(jù)酵母菌細(xì)胞壁的主要成分是幾丁質(zhì)，利用酶的專一性應(yīng)該

選擇幾丁質(zhì)酶去除細(xì)胞壁，形成原生質(zhì)體，融合后誘導(dǎo)再生新的細(xì)胞壁，形成雜種細(xì)胞即雜

種酵母，該細(xì)胞融合了釀酒酵母和糖化酵母二者的遺傳物質(zhì)，形成了異源多倍體，染色體數(shù)

目為二者之和。途徑n利用了基因工程的方法，將從糖化酵母中獲取的目的基因（淀粉酶基

因）導(dǎo)入的酒精酵母中，使其既有合成淀粉酶的能力又有較強(qiáng)的產(chǎn)酒精能力。轉(zhuǎn)基因的過程

中需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，利用Ca2+轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入酵母菌，然后可以在個(gè)體水平上進(jìn)行鑒定。

【詳解】A.途徑I需用幾丁質(zhì)酶處理酵母菌，再利用PEG誘導(dǎo)融合，A錯(cuò)誤；

B.根據(jù)題意，途徑n是將糖化酵母的淀粉酶基因提取出來，作為目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體,

從而獲得目的酵母菌，B正確；

C.途徑I獲得的目的菌株為多倍體，是原來兩種酵母菌染色體數(shù)目之和，途徑II獲得的目的

酵母菌染色體數(shù)目與原來酵母菌染色體數(shù)目相同，C錯(cuò)誤；

D.鑒定目的菌株的依據(jù)是酵母菌合成淀粉的能力和酒精發(fā)酵的能力，D錯(cuò)誤。

故選Bo

（南京市2021屆高三年級(jí)第三次模擬考試）下列關(guān)于胚胎工程在動(dòng)物育種中應(yīng)用的敘述，

錯(cuò)誤的是（）

A.從家兔輸卵管沖取的卵子可以直接與獲能的精子在體外受精

B.移植的胚胎中一定含有來自不同個(gè)體的數(shù)量相等的遺傳物質(zhì)

C.桑根胚時(shí)期進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割

D.鑒定胚胎性別時(shí)可根據(jù)減數(shù)第一次分裂中期細(xì)胞中染色體的形態(tài)確定

【答案】BCD

【解析】

【分析】

1、動(dòng)物排出的可能是初級(jí)卵母細(xì)胞也可能是次級(jí)卵母細(xì)胞，都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，

達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)，才具備與精子受精的能力。

2、胚胎移植的基本程序：①對(duì)供、受體的選擇和處理；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的

收集、檢查、培養(yǎng)或保存；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查.對(duì)受體母牛進(jìn)行是否妊

娠的檢查。

【詳解】A、從輸卵管中沖取的卵子已經(jīng)成熟，可以直接與獲能的精子在體外受精，A正確;

B、移植的胚胎可以通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)、核移植技術(shù)，體外受精等獲取，這些技術(shù)獲得的胚胎

含有不同個(gè)體的數(shù)量不等的遺傳物質(zhì)，B錯(cuò)誤；

C、在囊胚時(shí)期進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后的胚胎的

恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育，C錯(cuò)誤；

D、鑒定胚胎性別時(shí)取的是滋養(yǎng)層細(xì)胞，進(jìn)行DNA鑒定，滋養(yǎng)層細(xì)胞不進(jìn)行減數(shù)分裂，也可

以觀察有絲分裂中期細(xì)胞中染色體的形態(tài)來鑒定胚胎性別，D錯(cuò)誤。

故選BCD?

【點(diǎn)睛】

（2021屆新高考基地學(xué)校高三第二次大聯(lián)考）下列關(guān)于培養(yǎng)基的敘述簿送是（）

A.培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性

B.植物組織培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中的蔗糖可作為碳源并調(diào)節(jié)滲透壓

C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基需添加經(jīng)高壓蒸汽滅菌的動(dòng)物血清

D.培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞時(shí)，一般需在培養(yǎng)皿底部制備一層飼養(yǎng)層細(xì)胞

【答案】C

【解析】

【分析】

培養(yǎng)基的成分一般都有微生物生長(zhǎng)所必需的營養(yǎng)：碳源、氮源、無機(jī)鹽、水。因微生物不同，

對(duì)碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子的需求也不相同，可以根據(jù)微生物的生長(zhǎng)需求制備特殊的

選擇培養(yǎng)基，來獲得單一純種。

【詳解】A、不同微生物對(duì)培養(yǎng)基中的pH的要求不同，培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基調(diào)

至中性或弱堿性，A正確；

B、植物組織培養(yǎng)時(shí)，配置MS培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供碳源，同時(shí)調(diào)節(jié)滲透壓，B

正確；

C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要添加血清等成分，血清不能進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，C錯(cuò)誤；

D、培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞時(shí)，一般要在培養(yǎng)皿底部制備一層飼養(yǎng)層細(xì)胞，目的是促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)（增

殖），抑制細(xì)胞分化，D正確。

故選

Co

（2021屆新高考基地學(xué)校高三第二次大聯(lián)考）某科研小組擬培育一種名貴菊花的脫毒苗，

其技術(shù)路線為“制備MS固體培養(yǎng)基一外植體消毒一接種一培養(yǎng)一移栽一栽培”，相關(guān)敘述

鎮(zhèn)送的是（）

A.取材部位應(yīng)選擇植物頂端分生區(qū)附近，因其分裂旺盛且病毒少

B.外植體消毒常進(jìn)行流水沖洗、酒精處理、消毒液處理等措施

C.為充分利用培養(yǎng)條件.每個(gè)錐形瓶可接種6?8個(gè)外植體

D.外植體接種一培養(yǎng)一移栽的過程中不需要更換培養(yǎng)基

【答案】D

【解析】

【分析】1、愈傷組織的形成

（1）在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，需要的條件：①消毒

滅菌；②一定濃度的植物激素；③適宜的溫度；④充足的養(yǎng)料。

（2）植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：植物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂

素。同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí)，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)

胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，細(xì)胞既分裂也分化。

（3）消毒和滅菌：外植體可以用酒精消毒；操作前手需用酒精消毒；培養(yǎng)基需用高壓蒸汽

滅菌。

【詳解】A、取材部位一般選擇植物頂端分生區(qū)附近，因其分裂旺盛且病毒少，易于培養(yǎng)，

A正確；

B、外植體必須消毒，可以用酒精消毒，同時(shí)也可以進(jìn)行流水沖洗、消毒液處理，B正確；

C、為充分利用培養(yǎng)條件.每個(gè)錐形瓶可接種6s8個(gè)外植體，將封口膜重新扎好，C正確；

D、培養(yǎng)的不同階段，對(duì)主要營養(yǎng)物質(zhì)和激素的需求不同，所以培養(yǎng)過程中要及時(shí)調(diào)整各種

營養(yǎng)物質(zhì)、激素的比例，及時(shí)更換培養(yǎng)基，否則會(huì)導(dǎo)致外植體死亡，D錯(cuò)誤。

故選D。

（2021屆新高考基地學(xué)校高三第二次大聯(lián)考）目前世界上僅剩下兩頭雌性北方白犀牛，實(shí)

驗(yàn)室只留有冷凍的雄性北方白犀牛的精子?？茖W(xué)家欲通過某些胚胎工程技術(shù)嘗試拯救該物

種，下列說法正確的是（）

A.可從雌性北方白犀牛卵巢中采集卵母細(xì)胞后立即進(jìn)行體外受精

B.冷凍精子解凍后進(jìn)行離心分離，注入化學(xué)藥物后使精子獲能

C.用雌性北方白犀牛體細(xì)胞進(jìn)行克隆出多頭子代后，讓其自行繁衍

D.選擇合適的早期胚胎進(jìn)行移植，使其發(fā)育成完整個(gè)體

【答案】BD

【解析】

【分析】

胚胎移植：（1）概念：是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過體外受精及其它方式得到的胚

胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。

其中提供胚胎的個(gè)體稱為“供體"，接受胚胎的個(gè)體稱為“受體"。（2）胚胎移植的基本程序主

要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體

質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵

處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查,

此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑根或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。

【詳解】A、從雌牛的卵巢中采集的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能進(jìn)行體外

受精，A錯(cuò)誤；

B、對(duì)動(dòng)物的精子常用化學(xué)誘導(dǎo)法，即用一定濃度的肝素（或鈣離子載體A23187溶液）誘

導(dǎo)精子獲能，B正確；

C、用雌性北方白犀牛體細(xì)胞進(jìn)行克隆出多頭子代后，只能獲得雌性白犀牛，后代不能自行

繁衍，C錯(cuò)誤；

D、可以采用早期胚胎培養(yǎng)，然后采用合適的早期胚胎進(jìn)行胚胎移植，獲得更多的個(gè)體，D

正確。

故選BDo

（高三第三次調(diào)研測(cè)試）栽培種馬鈴薯是四倍體，野生種馬鈴薯是二倍體?？蒲腥藛T嘗試將

野生種馬鈴薯與栽培種馬鈴薯的原生質(zhì)體融合培養(yǎng)，以改良栽培種的遺傳特性。相關(guān)敘述錯(cuò)

誤的是（）

A.野生種馬鈴薯和栽培種馬鈴薯是兩個(gè)不同的物種，存在生殖隔離

B.制備馬鈴薯的原生質(zhì)體，可用纖維素酶處理植物細(xì)胞

C,可用聚乙二醇、滅活的病毒、電激等方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合

D.制備原生質(zhì)體和誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合都需要在等滲或略高滲溶液中進(jìn)行

【答案】C

【解析】

【分析】

植物細(xì)胞融合的方法：物理法（離心、振動(dòng)、電刺激等）和化學(xué)法（聚乙二醇）；動(dòng)物細(xì)胞

融合的方法：物理法（離心、振動(dòng)、電刺激等）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病

毒）。

【詳解】A、野生種馬鈴薯和栽培種馬鈴薯是兩個(gè)不同的物種，存在生殖隔離，A正確；

B、制備馬鈴薯的原生質(zhì)體，可用纖維素酶處理植物細(xì)胞，去除細(xì)胞壁，B正確；

C、可用聚乙二醇、電激等方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，而滅活的病毒只能誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，

C錯(cuò)誤；

D、制備原生質(zhì)體和誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合都需要在等滲或略高滲溶液中進(jìn)行，D正確。

故選Co

【點(diǎn)睛】

（高三第三次調(diào)研測(cè)試）為解決腎供體不足的問題，科研人員進(jìn)行相應(yīng)的前期研究。利用“異

源囊胚補(bǔ)全法”在大鼠體內(nèi)培育出了小鼠腎臟（過程如下圖），其中Sam基因是腎臟發(fā)育的

必需基因。相關(guān)敘述正確的是（）

熒光蛋白

熒光標(biāo)記

基因標(biāo)記?：.

B的腎臟

的小鼠?ES細(xì)9胞.?2尸以33一3”?上

缺失Salil基因大鼠

的大鼠受精卵

A.過程①細(xì)胞分化程度越低，胚胎移植后的排異反應(yīng)越低

B.過程②的目的是讓大鼠ES細(xì)胞與小鼠ES細(xì)胞發(fā)生融合

C.過程③操作之前需對(duì)代孕大鼠進(jìn)行超數(shù)排卵和同期發(fā)情處理

D.大鼠體內(nèi)的小鼠腎臟是否全由小鼠ES細(xì)胞發(fā)育而來還需進(jìn)一步鑒定

【答案】D

【解析】

【分析】

題圖分析：圖示為利用"異源囊胚補(bǔ)全法”在大鼠體內(nèi)培育出了小鼠腎臟的過程如圖，其中

①表示把缺失Salil基因的小鼠的受精卵發(fā)育為囊胚過程，②表示將熒光蛋白標(biāo)記的小鼠的

ES細(xì)胞導(dǎo)入大鼠囊胚，③表示胚胎移植，④表示分娩。

【詳解】A、受體不會(huì)對(duì)外來的胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，即胚胎移植不會(huì)出現(xiàn)排異反應(yīng)，A

錯(cuò)誤；

B、過程②的目的是表示將熒光蛋白標(biāo)記的小鼠的ES細(xì)胞導(dǎo)入大鼠囊胚，并且使小鼠的Salil

基因表達(dá)，B錯(cuò)誤；

C、過程③操作之前只需對(duì)代孕大鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理，C錯(cuò)誤;

D、大鼠體內(nèi)的小鼠腎臟是否全由小鼠ES細(xì)胞發(fā)育而來還需進(jìn)一步鑒定，不能憑表型就確

定，D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】

（蘇北名校2021屆高三生物模擬考試）在單克隆抗體制備中，關(guān)于雜交瘤細(xì)胞制備的敘述，

正確的是

A.可利用電激等物理方法直接誘導(dǎo)兩個(gè)細(xì)胞的融合

B.可利用細(xì)胞中染色體的數(shù)目和形態(tài)篩選出雜交瘤細(xì)胞

C.利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性和基因重組等原理

D.用選擇培養(yǎng)基篩選得到的雜交瘤細(xì)胞可直接用于生產(chǎn)單克隆抗體

【答案】A

【解析】

【分析】單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細(xì)胞與效應(yīng)B細(xì)胞結(jié)合，經(jīng)過選擇培養(yǎng)基篩選后得到

雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)專一抗體檢測(cè)后培養(yǎng)能夠產(chǎn)生特定的抗體的雜交瘤細(xì)胞即可獲得單克隆抗體

的技術(shù)。該技術(shù)涉及細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。

【詳解】誘導(dǎo)細(xì)胞融合通常有物理法、化學(xué)法、生物法等，電激和離心是常用的物理融合法,

A選項(xiàng)正確；雜交瘤細(xì)胞的篩選需要使用特定的篩選培養(yǎng)基，觀察細(xì)胞染色體數(shù)目和形態(tài)只

能判斷細(xì)胞是否融合，B選項(xiàng)錯(cuò)誤；雜交瘤細(xì)胞的制備利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，但不涉及基

因重組，C選項(xiàng)錯(cuò)誤；經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體

檢測(cè)，才能用于生產(chǎn)單克隆抗體，D選項(xiàng)錯(cuò)誤。

（蘇北名校2021屆高三生物考前模擬考試）人心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白I（cTnl）在血液中含量

上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗cTnl單克隆抗體，科研人員完成了以下過程。下

列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

注射

cTnl二務(wù)小鼠一AB淋巴細(xì)胞一）

融amk7②一吊分泌-抗cTnl單

一甲―乙一丙一克隆抗體

骨慚瘤細(xì)胞,

A.反復(fù)給小鼠注射cTnl的目的是讓小鼠體內(nèi)產(chǎn)生更多的抗體

B.人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得甲常用的方法可用滅活的病毒誘導(dǎo)

C.經(jīng)檢測(cè)、篩選后的丙，既能無限增殖又可分泌特異性抗體

D.抗cTnl單克隆抗體檢測(cè)心肌損傷具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)

【答案】A

【解析】

【分析】過程①表示篩選雜交瘤細(xì)胞；②過程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進(jìn)行抗

體陽性檢測(cè)，之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè)，并多次重復(fù)上述操作，其目的是篩選獲得能產(chǎn)生特

異性強(qiáng)、靈敏度高的抗cTnl抗體的雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞具有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特

點(diǎn)，具有的特點(diǎn)是既能產(chǎn)生特定抗體，又能無限增殖。

【詳解】A、用cTnl作為抗原反復(fù)注射小鼠，其目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多的B淋巴細(xì)胞，A

錯(cuò)誤；

B、注射抗原一段時(shí)間后，取B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，常用的誘導(dǎo)因素有滅活的

病毒、PEG等，B正確；

C、由以上分析可知，經(jīng)兩次篩選后，獲得到的丙細(xì)胞具有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特點(diǎn)，具

有的特點(diǎn)是既能產(chǎn)生特定抗體，又能無限增殖，C正確；

D、與傳統(tǒng)抗體的制備方法相比，經(jīng)此方法制備的抗cTnl單克隆具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、

可大量制備等優(yōu)點(diǎn)，D正確。

故選Ao

（蘇北名校2021屆高三生物考前模擬考試）某課外活動(dòng)小組獲得了一株性狀優(yōu)良的結(jié)球生

菜，并利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)其進(jìn)行快速繁殖。下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.使用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精對(duì)外植體進(jìn)行消毒

B.為保持結(jié)球生菜的優(yōu)良遺傳性狀，應(yīng)選用花粉進(jìn)行培養(yǎng)

C.在誘導(dǎo)生根時(shí)，培養(yǎng)基中應(yīng)提高細(xì)胞分裂素的比例和用量

D.經(jīng)再分化產(chǎn)生的不定芽可經(jīng)人工薄膜包裝制成人工種子

【答案】D

【解析】

【分析】植物組織培養(yǎng)是將離體的植物組織在含有營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素等的培養(yǎng)基中無菌培

養(yǎng)，使其形成芽、根，并發(fā)育成完整植株的技術(shù)。植株組織培養(yǎng)的對(duì)象是用于培養(yǎng)的植物器

官和組織。培養(yǎng)的目的可以是得到完整植株，也可以是愈傷組織或器官等。去分化階段不需

要光照，而在愈傷組織分化成芽和根的過程中需要光照，植株通過光合作用制造有機(jī)物。單

倍體育種中利用花藥的離體培養(yǎng)，就是利用了組織培養(yǎng)技術(shù)。

【詳解】A、使用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精對(duì)外植體進(jìn)行消毒，A錯(cuò)誤；

B、由于產(chǎn)生花粉過程中發(fā)生基因分離，故為保持結(jié)球生菜的優(yōu)良遺傳性狀，應(yīng)選用體細(xì)胞

進(jìn)行培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；

C、在誘導(dǎo)生根時(shí)，培養(yǎng)基中應(yīng)提高生長(zhǎng)素的比例和用量，C錯(cuò)誤；

D、用人工薄膜將胚狀體、不定芽等分別包裝可制成人工種子，故經(jīng)再分化產(chǎn)生的不定芽可

經(jīng)人工薄膜包裝制成人工種子，D正確。

故選D。

（蘇北名校2021屆高三生物模擬考試）為研究治療性克隆技術(shù)能否用于帕金森病的治療，

科研人員利用人帕金森病模型鼠進(jìn)行如下圖所示實(shí)驗(yàn)，下列相關(guān)敘述正確的是（）

鼠皮膚細(xì)胞

令①②③④

、核移植早期胚胎培養(yǎng)誘導(dǎo)分化移植

一——4fv

胚胎干細(xì)胞神經(jīng)元

去核卵母細(xì)胞

A.過程①中選擇MII中期的卵母細(xì)胞有利于細(xì)胞核全能性恢復(fù)

B.過程②重組細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)歷了卵裂、桑根胚、原腸胚和囊胚等過程

C.過程③的關(guān)鍵是利用特定條件誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)

D.過程④對(duì)受體小鼠無需注射免疫抑制劑以抑制其細(xì)胞免疫功能

【答案】ACD

【解析】

【分析】

1、細(xì)胞分化是指在個(gè)體發(fā)育中，由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)，結(jié)構(gòu)和生理

功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)：基因的選擇性表達(dá)。

2、動(dòng)物早期胚胎發(fā)育過程：受精卵三卵裂好桑根胚玲囊胚玲原腸胚玲幼兒，其中囊胚期開始

出現(xiàn)細(xì)胞分化。

3、題圖分析：①表示核移植過程，②表示早期胚胎培養(yǎng)，③表示誘導(dǎo)分化，④表示器官

或細(xì)胞移植。

【詳解】A、由于卵母細(xì)胞含有易于細(xì)胞核表達(dá)的物質(zhì)，過程①中選擇Mil中期的卵母細(xì)胞

有利于細(xì)胞核全能性恢復(fù)，A正確；

B、過程②重組細(xì)胞培養(yǎng)并獲取胚胎干細(xì)胞，依次經(jīng)歷了卵裂、桑根胚、囊胚，B錯(cuò)誤；

C、過程③的關(guān)鍵是利用特定條件誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)，使之分化形成神經(jīng)元，C

正確；

D、由于移植神經(jīng)元來自于小鼠自身皮膚的誘導(dǎo)分化，不會(huì)出現(xiàn)免疫排斥，因此④對(duì)受體小

鼠無需注射免疫抑制劑，D正確。

故選ACDo

（2021屆江蘇省徐州市高三5月考前模擬生物試題）下圖為單克隆抗體的制備流程示意圖。

有關(guān)敘述正確的是（）

抗原一?小鼠一?甲一

篩選②大規(guī)模、的古嚶尸抹

①乙----*丙一,,丁+*生》單克隆抗體

骨髓培養(yǎng)

瘤細(xì)胞

A.甲是從已免疫的小鼠脾臟細(xì)胞中獲得的T淋巴細(xì)胞

B.①表示將骨髓瘤細(xì)胞去核后進(jìn)行細(xì)胞融合

C.乙為融合細(xì)胞同時(shí)具有細(xì)胞甲和骨髓瘤細(xì)胞的特性

D.②表示篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞

【答案】D

【解析】

【分析】1、單克隆抗體的制備過程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B

細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)

雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。

2、題圖分析：①表示細(xì)胞融合過程，②表示篩選能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞。

【詳解】A、甲是從已免疫的小鼠脾臟細(xì)胞中獲得的B淋巴細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B、①是完整骨髓瘤細(xì)胞與免疫的B淋巴細(xì)胞融合的過程，B錯(cuò)誤；

C、③中的融合細(xì)胞不一定同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性，也可能是瘤瘤細(xì)胞或

BB細(xì)胞,C錯(cuò)誤;

D、②表示篩選能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞，然后進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)，D正確。

故選D?

【點(diǎn)睛】

（鹽城市2021屆高三年級(jí)第三次模擬考試）馬鈴薯四倍體栽培種沒有青枯病的抗性基因，少

數(shù)馬鈴薯野生種存在青枯病的抗性基因。由于核型等差異，野生種難以與四倍體馬鈴薯栽培

種直接雜交繁育，為獲得具有抗青枯病的馬鈴薯栽培種，研究人員進(jìn)行了植物體細(xì)胞雜交的

實(shí)驗(yàn)研究，過程如下圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（）

----------1②,-------------------（③

細(xì)胞（C）］―［愈傷組織（D）|―?胚狀體（E）

A.在低滲溶液中，用纖維素酶和果膠酶處理A和B以獲得兩種原生質(zhì)體

B.培育成的馬鈴薯新品種與野生型或四倍體栽培種之間存在核型差異

C.過程②的培養(yǎng)基中需添加等量的生長(zhǎng)素類和赤霉素類植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑

D.③為再分化過程，可用DNA分子雜交技術(shù)鑒定植株的抗病性狀

【答案】B

【解析】

【分析】1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合

成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。

2、過程：（工）誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等?；瘜W(xué)法一般是用聚乙

二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑。（2）細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成。（3）植物體細(xì)胞

雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束。（4）雜種植株的特征：具備

兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。

3、意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。

【詳解】A、酶解法可用于去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，但不能在低滲溶液中進(jìn)行，否則原生

質(zhì)體會(huì)吸水漲破，A錯(cuò)誤；

B、培育成的馬鈴薯新品種是細(xì)胞融合的結(jié)果，其為六倍體，與野生型（二倍體）或四倍體

栽培種之間存在核型差異，B正確；

C、過程②是植物組織培養(yǎng)的脫分化過程，其的培養(yǎng)基中需添加等量的生長(zhǎng)素類和細(xì)胞分裂

素類植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，C錯(cuò)誤；

D、③為再分化過程，植株的抗病性狀是由蛋白質(zhì)表現(xiàn)出來的，采用抗原-抗體雜交的方法

簡(jiǎn)單D錯(cuò)誤。

故選Bo

【點(diǎn)睛】

（2021屆江蘇省揚(yáng)州市高三下學(xué)期最后一卷生物試題）我國科研人員利用大鼠、小鼠兩個(gè)

遠(yuǎn)親物種創(chuàng)造出世界首例異種雜合二倍體胚胎干細(xì)胞（AdESCs）,過程如下圖所示。該細(xì)胞

可分化成各種雜種體細(xì)胞，為研究不同物種性狀差異的分子機(jī)制提供了模型。相關(guān)敘述不正

確的是（）

令C）-Q-

小鼠單倍體囊胚1孤雌單倍體QQO

__胚胎干細(xì)胞Q：Q

\oOO***

。單倍體囊胚2髓睪髓AdESCs

A.單倍體囊胚1最可能由小鼠的卵細(xì)胞經(jīng)體外誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得

B.體外培養(yǎng)AdESCs需向培養(yǎng)液中添加動(dòng)物血清等天然成分

C.該項(xiàng)技術(shù)突破生殖隔離獲得了哺乳動(dòng)物遠(yuǎn)親物種的雜種細(xì)胞

D.AdESCs的染色體組數(shù)與大鼠-小鼠體細(xì)胞融合的雜種細(xì)胞相同

【答案】D

【解析】

【分析】

分析題圖：小鼠的卵細(xì)胞體外培養(yǎng)到囊胚時(shí)期，取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞培養(yǎng)成孤雌單倍體胚胎干細(xì)

胞，取大鼠的精子體外培養(yǎng)到囊胚時(shí)期，取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞培養(yǎng)成孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞，兩

種胚胎融合成異種雜合二倍體胚胎干細(xì)胞（AdESCs）0

【詳解】A、單倍體囊胚1能發(fā)育成孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞，因此單倍體囊胚1最可能是由

小鼠的卵子（卵細(xì)胞）發(fā)育而來，所采用的技術(shù)應(yīng)為早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)，A正確；

B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，使用的培養(yǎng)液除含有一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽外，還需添加維生素、

激素、氨基酸、核甘酸等營養(yǎng)成分以及動(dòng)物血清等天然成分，B正確；

C、由于物種間存在生殖隔離，因此自然情況下哺乳動(dòng)物遠(yuǎn)親物種間的配子往往無法完成受

精作用，或者即便能完成也不能發(fā)育，該項(xiàng)技術(shù)突破生殖隔離獲得了哺乳動(dòng)物遠(yuǎn)親物種的雜

種細(xì)胞，C正確；

D、結(jié)合分析可知，該AdESCs是"雜合二倍體胚胎干細(xì)胞"，故體內(nèi)有2個(gè)染色體組，但小鼠

■■大鼠雜交細(xì)胞，是由體細(xì)胞融合產(chǎn)生，因此雜交細(xì)胞中通常含有4個(gè)染色體組，兩者染色

體組數(shù)不同，D錯(cuò)誤。

故選D。

（2021屆江蘇省揚(yáng)州市高三下學(xué)期最后一卷生物試題）20世紀(jì)70年代，F(xiàn)redsanger發(fā)明

了雙脫氧終止法對(duì)DNA進(jìn)行測(cè)序。其原理如圖，在4個(gè)試管中分別加入4種脫氧核昔三磷

酸（dNTP）和1種雙脫氧核昔三磷酸（ddNTP）；ddNTP可以與dNTP競(jìng)爭(zhēng)核昔酸鏈延長(zhǎng)位

點(diǎn)，并終止DNA片段的延伸。在4個(gè)試管中DNA鏈將會(huì)分別在A、C、G及T位置中止，

并形成不同長(zhǎng)度的DNA片段。這些片段隨后可被電泳分開并顯示出來。下列說法中簿送的

是（）

5,四翁.

3'^^未知序列|

+

|dATP,dCTP,dGTP,dTTP|

Illi

+ddATP+ddCTP+ddGTP+ddTTP

A.這種測(cè)序方法需要引物和耐高溫的DNA連接酶

B.電泳圖譜中的箭頭所指的DNA片段以鳥喋吟結(jié)尾

C.測(cè)得未知DNA的序歹!j為5'-GATTCGAGCTGA-3'

D.ddNTP與dNTP競(jìng)爭(zhēng)的延長(zhǎng)位點(diǎn)是核甘酸鏈的5沫端

【答案】ACD

【解析】

【分析】PCR技術(shù)：

1.概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；

2.原理：DNA復(fù)制;

3.前提條件：要有一段已知目的基因的核昔酸序列以便合成一對(duì)引物；

4.條件：模板DNA、四種脫氧核昔酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；

5.過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條

件下氫鍵可自動(dòng)解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】A、PCR測(cè)序需要引物和耐高溫的DNA聚合酶，A錯(cuò)誤；

B、電泳圖譜中的箭頭所指的DNA片段以鳥嘿吟結(jié)尾，B正確；

C、由圖可知：測(cè)得未知DNA的序歹!］為5JTCAGCTCGAATC-3',C錯(cuò)誤;

D、ddNTP與dNTP競(jìng)爭(zhēng)的延長(zhǎng)位點(diǎn)是核昔酸鏈的3,末端，D錯(cuò)誤。

故選ACDo

【點(diǎn)睛】

非選擇題

（江蘇省百校聯(lián)考2021屆高三年級(jí)第三次考試生物試題）圖1表示含有目的基因D的DNA

片段長(zhǎng)度（bp即堿基對(duì)）和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)

有MspI、BamHI、MboI、SmaI4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別

為CJCGG、GJGATCC、［GATC、CCCJGGG。請(qǐng)回答下歹U問題：

_____史磐ID_______

111111111r*i?I'iji111rMi111111r*i111111111

GGATCCCpPGGGCCCGGGGGATCC

CCTAGGGfcbcCCGGGCCCCCTAGG

IIIII「IIL.」I樂IIIL」IIIIIll「lIIII」Illi

.534bp-'-:口7^p-658加：J

圖1

圖2

（1）若用限制酶SmaI完全切割圖1中DNA片段，其產(chǎn)物長(zhǎng)度為。

（2）若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被T—A堿基對(duì)替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞。從

隱性純合子分離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段，用限制酶SmaI完全切割，產(chǎn)物中共有

種不同DNA片段。為了提高實(shí)驗(yàn)成功率，需要通過技術(shù)擴(kuò)增目的基

因，以獲得目的基因的大量拷貝，該技術(shù)原理為o

（3）若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進(jìn)行，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選

用的限制酶是。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用

添加的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，想進(jìn)一步篩選出含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞，還需要接種到含

的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

（4）假設(shè)用BamHI切割DNA獲取目基因，用MboI切割質(zhì)粒，然后形成重組質(zhì)粒，

若將插入在抗生素B抗性基因處的目的基因重新切割下來，能否再次用BamHI

（填：可以、不可以、不一定），原因是：。

【答案】⑴..537bp、790bp、661bp（2）.2⑶.PCR⑷.DNA雙鏈復(fù)制（5）.

BamHI（6）.抗生素B（7）.抗生素A（8）.不一定（9）.因?yàn)槟康幕蚝涂股谺

抗性基因拼接處不一定出現(xiàn)GGATCC

【解析】

【分析】分析圖1：圖1基因片段中含有2個(gè)限制酶Sma工（識(shí)別序歹!JCCCJGGG）的切割

位點(diǎn)，因此用SmaI切割可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段。

分析圖2：圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列，其中有MspI、BamHI>MboI3種

限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，分別為CJCGG、GJGATCC、JGATC、CCCJGGG。

【詳解】（1）SmaI識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)是CCCJGGG,可知其切割產(chǎn)生的末端是平末端,

產(chǎn)物長(zhǎng)度是534+3=537bp、796-3-3=790bp>658+3=661bp。

（2）基因D會(huì)被SmaI切割形成三個(gè)片段（長(zhǎng)度分別為537bp、790bp、661bp）；若圖1

中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被T-A堿基對(duì)替換，則基因D就突變?yōu)榛騞,且基因d只有一個(gè)

SmaI的酶切位點(diǎn)，因而基因d會(huì)被SmaI切割形成兩個(gè)片段（長(zhǎng)度分別為1327bp、661bp）。

為了提高實(shí)驗(yàn)成功率，可以通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增目的基因，以獲得目的基因的大量拷貝，

該技術(shù)模擬了體內(nèi)DNA復(fù)制的過程，原理為DNA雙鏈復(fù)制。

（3）由圖可知，目的基因D兩側(cè)都是限制酶BamHI的識(shí)別序列，因此應(yīng)選用限制酶BamH

I切割圖1中含有目的基因D的外源DNA分子和圖2中的質(zhì)粒。用BamHI切割質(zhì)粒后會(huì)破

壞抗生素A抗性基因，但不會(huì)破壞抗生素B抗性基因，因此一般需要用添加抗生素B的培

養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)；若想進(jìn)一步篩選出含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞，還需要接種到含抗生素A的培

養(yǎng)基中培養(yǎng)篩選出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌。

（4）假設(shè)用BamHI切割DNA獲取目的基因，用MboI切割質(zhì)粒，然后形成重組質(zhì)粒，若

將插入在抗生素B抗性基因處的目的基因重新切割下來,再次用BamHI不一定能將其切割,

因?yàn)槟康幕蚝涂股谺抗性基因的粘性末端隨意連接，拼接處不一定出現(xiàn)GGATCCo

【點(diǎn)睛】本題結(jié)合基因結(jié)構(gòu)和質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖，考查基因工程的原理和技術(shù)，解題關(guān)鍵是識(shí)

記基因工程的原理、工具及操作步驟；分析圖1,明確其含有2個(gè)Smal的酶切位點(diǎn)，可被

切成3段；結(jié)合圖1和圖2選擇合適的限制酶和抗生素；能根據(jù)基因工程對(duì)運(yùn)載體的要選擇

合適的運(yùn)載體。

(南京市2021屆高三年級(jí)第三次模擬考試)Cre/loxP重組酶系統(tǒng)是對(duì)轉(zhuǎn)基因受體細(xì)胞DNA

上的特定序列進(jìn)行定點(diǎn)切割和重新連接，從而在基因或染色體水平上對(duì)生物基因進(jìn)行遺傳改

造的一種技術(shù)。請(qǐng)回答下列問題：

(\t\t\

5ATAACTTCGTATA—ATGTATGC—TATACGAAGTTAT—3,

3TATTGAAGCATAT—TACATACG—ATATGCTTCAATA—5,

圖1

loxP待敲除基因loxP工,廠,片段1

DNA----------------------<\?------—酶