2020 pcr考試試題及答案

2020pcr考試試題及答案

一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR技術(shù)的主要發(fā)明人是（）A.KaryMullisB.JamesWatsonC.FrancisCrickD.RosalindFranklin答案：A2.PCR反應(yīng)中，DNA變性所需的溫度一般是（）A.55-60℃B.72℃C.90-95℃D.37℃答案：C3.以下哪種物質(zhì)不是PCR反應(yīng)的基本成分（）A.模板DNAB.引物C.RNA聚合酶D.dNTPs答案：C4.在PCR反應(yīng)中，引物的作用是（）A.提供起始合成的3'-OH末端B.提供起始合成的5'-OH末端C.終止反應(yīng)D.提供能量答案：A5.PCR反應(yīng)的循環(huán)次數(shù)一般為（）A.1-5次B.10-20次C.20-30次D.50-100次答案：C6.以下哪種PCR技術(shù)可以用于定量分析（）A.普通PCRB.實(shí)時(shí)熒光定量PCRC.巢式PCRD.反向PCR答案：B7.PCR反應(yīng)中，延伸階段的溫度一般是（）A.55-60℃B.72℃C.90-95℃D.37℃答案：B8.如果PCR反應(yīng)沒(méi)有得到預(yù)期的產(chǎn)物，可能的原因不包括（）A.引物設(shè)計(jì)錯(cuò)誤B.模板DNA質(zhì)量差C.反應(yīng)體系中酶量過(guò)多D.反應(yīng)溫度合適答案：D9.在PCR反應(yīng)中，dNTPs的作用是（）A.作為合成DNA的原料B.作為酶的激活劑C.作為引物D.作為緩沖劑答案：A10.以下關(guān)于PCR的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.具有高度的特異性B.靈敏度高C.只能擴(kuò)增DNAD.可以在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的DNA答案：C二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)的特點(diǎn)包括（）A.特異性強(qiáng)B.靈敏度高C.簡(jiǎn)便快捷D.對(duì)模板要求低答案：ABC2.影響PCR反應(yīng)的因素有（）A.引物B.模板C.酶D.反應(yīng)溫度和時(shí)間答案：ABCD3.以下哪些是PCR技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域（）A.基因克隆B.疾病診斷C.法醫(yī)學(xué)鑒定D.遺傳疾病的檢測(cè)答案：ABCD4.以下屬于PCR衍生技術(shù)的有（）A.巢式PCRB.多重PCRC.反向PCRD.實(shí)時(shí)熒光定量PCR答案：ABCD5.在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)，需要考慮的因素有（）A.引物長(zhǎng)度B.引物的GC含量C.引物的特異性D.引物之間不能互補(bǔ)答案：ABCD6.PCR反應(yīng)體系中，緩沖液的作用包括（）A.維持pH值B.提供離子環(huán)境C.穩(wěn)定酶活性D.作為底物答案：ABC7.以下關(guān)于實(shí)時(shí)熒光定量PCR的描述正確的是（）A.可以實(shí)現(xiàn)對(duì)起始模板的定量分析B.有熒光染料法和熒光探針?lè)–.靈敏度高D.特異性強(qiáng)答案：ABCD8.巢式PCR的優(yōu)點(diǎn)包括（）A.提高特異性B.提高靈敏度C.降低非特異性擴(kuò)增D.操作簡(jiǎn)單答案：ABC9.在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)，防止污染的措施有（）A.實(shí)驗(yàn)分區(qū)B.使用一次性耗材C.嚴(yán)格的操作規(guī)范D.定期對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行清潔答案：ABCD10.以下關(guān)于PCR反應(yīng)中模板DNA的說(shuō)法正確的是（）A.可以是基因組DNAB.可以是cDNAC.質(zhì)量會(huì)影響反應(yīng)結(jié)果D.純度要求高答案：ABCD三、判斷題（每題2分，共10題）1.PCR只能擴(kuò)增雙鏈DNA。（）答案：錯(cuò)誤2.引物在PCR反應(yīng)中是可以重復(fù)利用的。（）答案：錯(cuò)誤3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR比普通PCR更加靈敏。（）答案：正確4.PCR反應(yīng)中，延伸時(shí)間越長(zhǎng)越好。（）答案：錯(cuò)誤5.巢式PCR是進(jìn)行兩輪PCR反應(yīng)。（）答案：正確6.在PCR反應(yīng)體系中，dNTPs的濃度越高越好。（）答案：錯(cuò)誤7.只要引物設(shè)計(jì)正確，PCR就一定能得到目的產(chǎn)物。（）答案：錯(cuò)誤8.所有的RNA都可以通過(guò)反轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行PCR擴(kuò)增。（）答案：錯(cuò)誤9.PCR反應(yīng)中，酶的活性不受溫度影響。（）答案：錯(cuò)誤10.多重PCR是在一個(gè)反應(yīng)體系中同時(shí)擴(kuò)增多個(gè)目的基因。（）答案：正確四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共4題）1.簡(jiǎn)述PCR的基本原理。答案：PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，以擬擴(kuò)增的DNA分子為模板，以一對(duì)分別與模板互補(bǔ)的寡核苷酸片段為引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留復(fù)制的機(jī)制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成。通過(guò)多次循環(huán)，使目的DNA片段得到大量擴(kuò)增。2.請(qǐng)說(shuō)明在PCR反應(yīng)中引物設(shè)計(jì)的重要性及原則。答案：重要性：引物是PCR反應(yīng)的關(guān)鍵因素，直接影響反應(yīng)的特異性和擴(kuò)增效率。原則：合適的長(zhǎng)度（一般18-30bp）、合適的GC含量（40%-60%）、引物特異性強(qiáng)、引物之間不能互補(bǔ)等。3.簡(jiǎn)述實(shí)時(shí)熒光定量PCR的工作原理。答案：在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)強(qiáng)度也隨之變化。通過(guò)檢測(cè)每個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)，可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR反應(yīng)進(jìn)程，并且根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)起始模板進(jìn)行定量分析。4.說(shuō)明巢式PCR的操作過(guò)程。答案：先進(jìn)行第一輪PCR，以基因組等為模板，使用一對(duì)引物擴(kuò)增出包括目的片段在內(nèi)的較大DNA片段；然后以第一輪PCR產(chǎn)物為模板，使用內(nèi)部引物進(jìn)行第二輪PCR，從而特異性地?cái)U(kuò)增出目的DNA片段。五、討論題（每題5分，共4題）1.討論P(yáng)CR技術(shù)在新型冠狀病毒檢測(cè)中的應(yīng)用。答案：PCR技術(shù)可用于檢測(cè)新冠病毒的核酸。通過(guò)設(shè)計(jì)針對(duì)新冠病毒特定基因序列的引物，從患者樣本中提取核酸進(jìn)行PCR擴(kuò)增。若能擴(kuò)增出特定產(chǎn)物，則為陽(yáng)性，有助于快速診斷感染病例，對(duì)疫情防控有重要意義。2.如何提高PCR反應(yīng)的特異性？答案：可從引物設(shè)計(jì)、優(yōu)化反應(yīng)條件兩方面入手。設(shè)計(jì)特異性強(qiáng)、長(zhǎng)度和GC含量合適的引物，嚴(yán)格控制反應(yīng)溫度、時(shí)間、酶量和模板質(zhì)量等反應(yīng)條件。3.請(qǐng)分析PCR技術(shù)在基因工程中的作用。答案：在基因工程中