河北省pcr上崗證考試題及答案VIP

河北省pcr上崗證考試題及答案

單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)的基本步驟不包括（）A.變性B.復(fù)性C.延伸D.轉(zhuǎn)錄2.Taq酶的特點(diǎn)是（）A.耐高溫B.耐低溫C.催化DNA水解D.催化RNA合成3.PCR引物設(shè)計(jì)的原則不包括（）A.長度合適B.避免互補(bǔ)C.富含ATD.特異性強(qiáng)4.以下哪種物質(zhì)不是PCR反應(yīng)體系的成分（）A.dNTPB.模板DNAC.限制性內(nèi)切酶D.引物5.進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)，使用的微量移液器量程為10-100μl，吸取50μl液體應(yīng)選擇（）A.10μl檔B.50μl檔C.100μl檔D.任意檔6.PCR產(chǎn)物分析最常用的方法是（）A.質(zhì)譜分析B.凝膠電泳C.高效液相色譜D.比色法7.引物的作用是（）A.提供模板B.激活Taq酶C.引導(dǎo)DNA合成D.降解模板DNA8.一個(gè)完整的PCR反應(yīng)循環(huán)包括（）A.1個(gè)步驟B.2個(gè)步驟C.3個(gè)步驟D.4個(gè)步驟9.影響PCR反應(yīng)特異性的主要因素是（）A.模板濃度B.引物特異性C.Taq酶活性D.反應(yīng)溫度10.進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求（）A.無需清潔B.普通環(huán)境C.嚴(yán)格清潔，防止污染D.潮濕環(huán)境多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域包括（）A.疾病診斷B.法醫(yī)鑒定C.基因克隆D.物種進(jìn)化研究2.以下屬于PCR反應(yīng)體系組成成分的有（）A.Mg2?B.緩沖液C.Taq酶D.引物3.設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)需要考慮的因素有（）A.引物長度B.引物GC含量C.引物3’端的穩(wěn)定性D.引物與模板的互補(bǔ)性4.可能導(dǎo)致PCR擴(kuò)增失敗的原因有（）A.模板質(zhì)量差B.引物設(shè)計(jì)不合理C.Taq酶失活D.反應(yīng)體系污染5.下列哪些儀器在PCR實(shí)驗(yàn)中可能會(huì)用到（）A.移液器B.離心機(jī)C.熒光定量PCR儀D.凝膠成像系統(tǒng)6.PCR技術(shù)按功能可分為（）A.普通PCRB.熒光定量PCRC.巢式PCRD.反向PCR7.關(guān)于PCR產(chǎn)物的檢測，說法正確的有（）A.凝膠電泳可判斷產(chǎn)物大小B.熒光定量PCR可對產(chǎn)物定量C.測序可確定產(chǎn)物序列D.比色法能直接檢測產(chǎn)物濃度8.在PCR實(shí)驗(yàn)操作中，正確的做法有（）A.戴手套防止污染B.準(zhǔn)確吸取試劑C.及時(shí)清潔儀器D.隨意混合試劑9.影響PCR反應(yīng)效率的因素包括（）A.模板濃度B.引物濃度C.反應(yīng)溫度D.反應(yīng)時(shí)間10.以下哪些措施可以防止PCR實(shí)驗(yàn)中的污染（）A.分區(qū)操作B.使用一次性耗材C.定期清潔儀器D.空氣消毒判斷題（每題2分，共10題）1.PCR技術(shù)可以擴(kuò)增任意長度的DNA片段。（）2.Taq酶沒有校對功能。（）3.引物的GC含量越高越好。（）4.PCR反應(yīng)體系中dNTP濃度越高越好。（）5.進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)，可不考慮實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生。（）6.熒光定量PCR只能對RNA進(jìn)行定量分析。（）7.巢式PCR比普通PCR的特異性更高。（）8.只要引物與模板有部分互補(bǔ)就能進(jìn)行PCR擴(kuò)增。（）9.PCR產(chǎn)物的大小與引物的設(shè)計(jì)有關(guān)。（）10.離心機(jī)在PCR實(shí)驗(yàn)中主要用于分離液體和固體。（）簡答題（每題5分，共4題）1.簡述PCR反應(yīng)的基本原理。答案：PCR基于DNA半保留復(fù)制原理。通過高溫變性使雙鏈DNA解鏈為單鏈，低溫復(fù)性讓引物與模板單鏈結(jié)合，適溫下Taq酶以dNTP為原料，沿引物引導(dǎo)方向合成互補(bǔ)鏈，經(jīng)多輪循環(huán)擴(kuò)增目的DNA片段。2.引物設(shè)計(jì)的基本要求有哪些？答案：長度一般18-25bp；GC含量40%-60%；避免自身互補(bǔ)、引物二聚體形成；3’端穩(wěn)定性好，堿基盡量為G或C；具有特異性，與模板準(zhǔn)確互補(bǔ)結(jié)合。3.簡述防止PCR實(shí)驗(yàn)污染的主要措施。答案：實(shí)驗(yàn)分區(qū)，如試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)等；使用一次性耗材；定期清潔儀器設(shè)備；實(shí)驗(yàn)人員做好防護(hù)，戴手套口罩等；空氣定期消毒。4.熒光定量PCR的主要優(yōu)點(diǎn)是什么？答案：能實(shí)時(shí)監(jiān)測PCR進(jìn)程，對起始模板進(jìn)行準(zhǔn)確的定量分析；靈敏度高，可檢測低拷貝模板；特異性強(qiáng)，通過熒光信號(hào)判斷；重復(fù)性好，結(jié)果可靠，能有效減少假陽性。討論題（每題5分，共4題）1.討論在臨床診斷中，PCR技術(shù)可能存在的局限性及改進(jìn)措施。答案：局限性有易污染致假陽性，靈敏度高可能誤檢微量病原體，對技術(shù)人員要求高。改進(jìn)措施包括嚴(yán)格分區(qū)操作、規(guī)范流程防污染，結(jié)合其他診斷方法提高準(zhǔn)確性，加強(qiáng)人員培訓(xùn)。2.結(jié)合實(shí)際，談?wù)勅绾蝺?yōu)化PCR反應(yīng)條件以獲得理想結(jié)果。答案：可調(diào)整模板、引物、dNTP、Taq酶濃度；優(yōu)化變性、復(fù)性、延伸溫度和時(shí)間；根據(jù)模板和引物特性篩選合適的緩沖液、Mg2?濃度；通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳反應(yīng)條件。3.分析PCR技術(shù)在法醫(yī)鑒定中的應(yīng)用及意義。答案：應(yīng)用于犯罪現(xiàn)場微量生物樣本檢測，如血液、毛發(fā)等。意義在于提供準(zhǔn)確個(gè)體識(shí)別信息，為案件偵破提供關(guān)鍵證據(jù)，提高司法公正性和效率，推動(dòng)法醫(yī)科學(xué)發(fā)展。4.探討PCR技術(shù)未來的發(fā)展趨勢。答案：未來將朝著更簡便、快速、靈敏、高通量方向發(fā)展。如開發(fā)新的酶和反應(yīng)體系提高性能，與其他技術(shù)聯(lián)用拓展應(yīng)用領(lǐng)域，發(fā)展便攜式設(shè)備滿足現(xiàn)場檢測需求。答案單項(xiàng)選擇題1.D2.A3.C4.C5.B6.B7.C8.C9.B10.C多項(xiàng)選擇題1.ABCD2.ABC