IL-17與VEGF表達(dá)：揭示膠質(zhì)瘤惡性程度與預(yù)后的分子密碼

IL-17與VEGF表達(dá)：揭示膠質(zhì)瘤惡性程度與預(yù)后的分子密碼一、引言1.1研究背景膠質(zhì)瘤作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最為常見(jiàn)的原發(fā)性惡性腫瘤，嚴(yán)重威脅著人類的生命健康。據(jù)統(tǒng)計(jì)，其發(fā)病率在顱內(nèi)腫瘤中占比頗高，約為35.26%-60.96%，且惡性腦膠質(zhì)瘤5年病死率位居全身腫瘤的第3位，僅次于胰腺癌和肺癌。膠質(zhì)瘤具有侵襲性強(qiáng)的特性，目前其發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，治療效果往往不盡人意，患者預(yù)后較差，致殘、致死率居高不下。白細(xì)胞介素-17（IL-17）作為一種具有促進(jìn)炎癥作用的細(xì)胞因子，近年來(lái)在腫瘤研究領(lǐng)域備受關(guān)注。研究發(fā)現(xiàn)，IL-17在多種腫瘤組織中表達(dá)異常，如在卵巢癌、結(jié)腸癌組織中表達(dá)明顯升高，提示其可能參與了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展等一系列過(guò)程。其主要由活化的CD4+T輔助細(xì)胞產(chǎn)生，在招募中性粒細(xì)胞、促進(jìn)細(xì)胞增殖及炎性因子釋放等過(guò)程中發(fā)揮著重要的生物學(xué)作用，同時(shí)與抑制排斥反應(yīng)、哮喘、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等免疫性疾病密切相關(guān)。然而，IL-17在顱內(nèi)腫瘤中的研究多集中于體外實(shí)驗(yàn)，對(duì)于其在膠質(zhì)瘤中的具體作用機(jī)制及與膠質(zhì)瘤惡性程度、預(yù)后的關(guān)系，仍有待深入探究。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）是促血管生成的關(guān)鍵因子，屬血小板源性生長(zhǎng)因子超家族成員。在腫瘤形成過(guò)程中，VEGF扮演著極為重要的角色，它可直接或間接參與血管形成的每一個(gè)環(huán)節(jié)。一方面，VEGF能通過(guò)與受體特異性結(jié)合，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)產(chǎn)生蛋白水解酶、間質(zhì)膠原酶及組織因子，從而促進(jìn)血管生長(zhǎng)；另一方面，它還能提高血管通透性，致使血漿蛋白及纖維蛋白原外滲，引發(fā)腫瘤間質(zhì)水腫，改變細(xì)胞外基質(zhì)，為腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移創(chuàng)造了重要條件。大量研究表明，VEGF在腦腫瘤中的表達(dá)量顯著升高，是腦膠質(zhì)瘤血管生成的重要因素之一。在腦膠質(zhì)瘤治療中，抑制VEGF的生物活性能夠有效減少腫瘤的血管生成，提高治療的有效性。鑒于膠質(zhì)瘤的嚴(yán)重危害以及IL-17和VEGF在腫瘤研究中的重要地位，深入研究IL-17和VEGF在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況，及其與膠質(zhì)瘤惡性程度和預(yù)后的關(guān)系，具有至關(guān)重要的意義。這不僅有助于揭示膠質(zhì)瘤的發(fā)病機(jī)制，為膠質(zhì)瘤的早期診斷、病情評(píng)估提供新的生物學(xué)指標(biāo)，還能為開(kāi)發(fā)針對(duì)膠質(zhì)瘤的靶向治療策略提供理論依據(jù)，有望改善膠質(zhì)瘤患者的治療效果和預(yù)后，提高其生存質(zhì)量。1.2研究目的與意義本研究旨在深入探究IL-17和VEGF在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)情況，明確其與膠質(zhì)瘤惡性程度的關(guān)聯(lián)，分析二者表達(dá)水平對(duì)膠質(zhì)瘤患者預(yù)后的影響，為膠質(zhì)瘤的診療提供新的理論依據(jù)。膠質(zhì)瘤作為一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病，目前臨床診斷主要依賴CT、MRI等影像學(xué)檢查及活組織病理檢查。但影像學(xué)診斷費(fèi)用高，且閱片者主觀因素影響大，對(duì)膠質(zhì)瘤級(jí)別的判斷不夠準(zhǔn)確；病理檢查雖結(jié)果精準(zhǔn)，卻存在檢查過(guò)程復(fù)雜、有創(chuàng)等局限性。因此，尋找新的生物學(xué)指標(biāo)用于膠質(zhì)瘤的早期診斷和病情評(píng)估具有重要的臨床意義。IL-17和VEGF作為與腫瘤發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)的因子，研究它們?cè)谀z質(zhì)瘤中的表達(dá)及與惡性程度和預(yù)后的關(guān)系，有望為膠質(zhì)瘤的診斷提供新的生物標(biāo)志物。若能證實(shí)IL-17和VEGF的表達(dá)與膠質(zhì)瘤惡性程度呈正相關(guān)，那么通過(guò)檢測(cè)它們的表達(dá)水平，就可以在一定程度上判斷腫瘤的惡性程度，為臨床醫(yī)生制定治療方案提供更準(zhǔn)確的依據(jù)。在治療方面，針對(duì)IL-17和VEGF的研究可能為膠質(zhì)瘤的靶向治療開(kāi)辟新的途徑。如果能夠明確它們?cè)谀z質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的具體作用機(jī)制，就可以設(shè)計(jì)相應(yīng)的靶向藥物，阻斷其信號(hào)通路，從而抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。例如，對(duì)于VEGF，目前已經(jīng)有一些抗VEGF的藥物在臨床研究中顯示出了一定的療效，若能進(jìn)一步結(jié)合IL-17的研究，可能會(huì)開(kāi)發(fā)出更有效的聯(lián)合治療方案。在預(yù)后判斷方面，準(zhǔn)確評(píng)估膠質(zhì)瘤患者的預(yù)后對(duì)于臨床治療決策和患者的生活質(zhì)量具有重要意義。通過(guò)研究IL-17和VEGF表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系，建立基于這兩個(gè)因子表達(dá)水平的預(yù)后評(píng)估模型，能夠幫助醫(yī)生更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)患者的生存情況，為患者提供更個(gè)性化的治療和護(hù)理建議。二、膠質(zhì)瘤概述2.1膠質(zhì)瘤的定義與分類膠質(zhì)瘤是起源于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的原發(fā)性腫瘤，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最常見(jiàn)的腫瘤類型。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛分布，對(duì)神經(jīng)元起到支持、營(yíng)養(yǎng)、保護(hù)等作用。當(dāng)這些膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生異常增殖和分化時(shí)，便形成了膠質(zhì)瘤。其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，涉及遺傳因素、環(huán)境因素以及兩者之間的相互作用。某些遺傳綜合征，如神經(jīng)纖維瘤病1型、Li-Fraumeni綜合征等，會(huì)增加患膠質(zhì)瘤的風(fēng)險(xiǎn)；長(zhǎng)期接觸電離輻射、某些化學(xué)物質(zhì)等環(huán)境因素也可能誘發(fā)膠質(zhì)瘤的發(fā)生。根據(jù)2021年世界衛(wèi)生組織（WHO）中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)，膠質(zhì)瘤主要依據(jù)腫瘤細(xì)胞的組織學(xué)形態(tài)、分子遺傳學(xué)特征等進(jìn)行分類。其中，較為常見(jiàn)的類型包括：星形細(xì)胞瘤：這是最常見(jiàn)的膠質(zhì)瘤類型之一，起源于星形膠質(zhì)細(xì)胞。根據(jù)腫瘤的惡性程度，又可分為低級(jí)別星形細(xì)胞瘤（WHOⅠ-Ⅱ級(jí)）和高級(jí)別星形細(xì)胞瘤（WHOⅢ-Ⅳ級(jí)）。低級(jí)別星形細(xì)胞瘤生長(zhǎng)相對(duì)緩慢，預(yù)后相對(duì)較好；而高級(jí)別星形細(xì)胞瘤，如間變性星形細(xì)胞瘤（WHOⅢ級(jí)）和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（WHOⅣ級(jí)），生長(zhǎng)迅速，具有高度的侵襲性，預(yù)后較差。膠質(zhì)母細(xì)胞瘤是惡性程度最高的膠質(zhì)瘤，占所有膠質(zhì)瘤的40%-50%，患者的中位生存期通常較短，僅為12-15個(gè)月。少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤：來(lái)源于少突膠質(zhì)細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞形態(tài)相對(duì)單一，常伴有特征性的染色體異常，如1p/19q聯(lián)合缺失。這種類型的膠質(zhì)瘤對(duì)化療相對(duì)敏感，預(yù)后通常優(yōu)于星形細(xì)胞瘤。少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤約占膠質(zhì)瘤的10%-20%，其發(fā)病高峰年齡在30-40歲左右。室管膜瘤：起源于室管膜細(xì)胞，多發(fā)生在腦室系統(tǒng)內(nèi)。根據(jù)發(fā)生部位的不同，可分為幕上室管膜瘤、幕下室管膜瘤和脊髓室管膜瘤等。室管膜瘤的惡性程度和預(yù)后因腫瘤的級(jí)別和部位而異，低級(jí)別室管膜瘤通過(guò)手術(shù)切除后，患者的5年生存率可達(dá)60%-80%，而高級(jí)別室管膜瘤的預(yù)后則相對(duì)較差?；旌闲阅z質(zhì)瘤：包含兩種或兩種以上不同類型的膠質(zhì)細(xì)胞成分，如少突-星形細(xì)胞瘤，同時(shí)具有少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤和星形細(xì)胞瘤的特征，其生物學(xué)行為和預(yù)后也介于兩者之間。2.2膠質(zhì)瘤的流行病學(xué)特征膠質(zhì)瘤的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)呈現(xiàn)出一定的差異。據(jù)統(tǒng)計(jì)，其年發(fā)病率約為（5-8）/10萬(wàn)人。在不同地區(qū)，膠質(zhì)瘤的發(fā)病情況有所不同。在歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家，膠質(zhì)瘤的發(fā)病率相對(duì)較高，可能與這些地區(qū)先進(jìn)的醫(yī)療檢測(cè)技術(shù)，能夠更準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)和診斷病例有關(guān)；而在一些發(fā)展中國(guó)家，由于醫(yī)療資源有限，診斷技術(shù)相對(duì)落后，部分膠質(zhì)瘤病例可能未被及時(shí)發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)的發(fā)病率相對(duì)較低。從性別分布來(lái)看，男性膠質(zhì)瘤的發(fā)病率略高于女性，男女比例約為1.3-1.5:1。這種性別差異的原因尚不完全明確，可能與男性和女性在激素水平、生活習(xí)慣等方面的差異有關(guān)。例如，男性可能更多地接觸一些潛在的致癌因素，如吸煙、長(zhǎng)期暴露在職業(yè)性化學(xué)物質(zhì)環(huán)境中等，從而增加了患膠質(zhì)瘤的風(fēng)險(xiǎn)。年齡也是影響膠質(zhì)瘤發(fā)病的重要因素。膠質(zhì)瘤可發(fā)生于各個(gè)年齡段，但不同類型的膠質(zhì)瘤在年齡分布上有一定的特點(diǎn)。低級(jí)別膠質(zhì)瘤（WHOⅠ-Ⅱ級(jí)）在兒童和青少年中相對(duì)較為常見(jiàn)，發(fā)病高峰年齡在10-20歲左右。這可能與兒童和青少年時(shí)期神經(jīng)系統(tǒng)的生長(zhǎng)發(fā)育活躍，細(xì)胞增殖相對(duì)頻繁，更容易受到遺傳因素和環(huán)境因素的影響有關(guān)。高級(jí)別膠質(zhì)瘤（WHOⅢ-Ⅳ級(jí)）則多見(jiàn)于成年人，發(fā)病高峰年齡在45-65歲。隨著年齡的增長(zhǎng)，人體細(xì)胞的DNA損傷修復(fù)能力逐漸下降，基因突變的積累增加，使得高級(jí)別膠質(zhì)瘤的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)上升。此外，膠質(zhì)瘤的發(fā)病率還存在一定的種族差異。有研究表明，白種人患膠質(zhì)瘤的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較高，而黑種人、黃種人的發(fā)病率相對(duì)較低。然而，這種種族差異也可能受到環(huán)境因素、社會(huì)經(jīng)濟(jì)因素等多種因素的混雜影響，需要進(jìn)一步深入研究來(lái)明確其確切機(jī)制。2.3膠質(zhì)瘤的臨床癥狀與治療現(xiàn)狀膠質(zhì)瘤的臨床癥狀復(fù)雜多樣，主要取決于腫瘤的位置、大小以及生長(zhǎng)速度。常見(jiàn)的癥狀包括：顱內(nèi)壓增高癥狀：由于腫瘤占位效應(yīng)和周圍腦組織水腫，導(dǎo)致顱內(nèi)壓升高，患者可出現(xiàn)頭痛，多為持續(xù)性鈍痛，常在清晨或夜間加重，咳嗽、用力等動(dòng)作可使頭痛加劇。同時(shí)，還伴有惡心、嘔吐，嘔吐多呈噴射狀，與進(jìn)食無(wú)關(guān)。此外，顱內(nèi)壓增高還可能導(dǎo)致視力下降、視乳頭水腫等眼部癥狀，嚴(yán)重時(shí)可引起失明。神經(jīng)功能障礙癥狀：腫瘤侵犯不同的腦功能區(qū)，會(huì)引發(fā)相應(yīng)的神經(jīng)功能障礙。例如，腫瘤位于運(yùn)動(dòng)區(qū)，可導(dǎo)致對(duì)側(cè)肢體無(wú)力、偏癱；位于感覺(jué)區(qū)，可出現(xiàn)對(duì)側(cè)肢體感覺(jué)減退、麻木等；位于語(yǔ)言中樞，會(huì)引起失語(yǔ)癥，表現(xiàn)為表達(dá)困難、理解障礙等；位于小腦，可出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)，患者行走不穩(wěn)、動(dòng)作協(xié)調(diào)性差。癲癇發(fā)作：約30%-50%的膠質(zhì)瘤患者會(huì)出現(xiàn)癲癇發(fā)作，尤其是低級(jí)別膠質(zhì)瘤患者更為常見(jiàn)。癲癇發(fā)作的形式多樣，可為全身性發(fā)作，也可為局限性發(fā)作，如部分性運(yùn)動(dòng)性發(fā)作、感覺(jué)性發(fā)作等。癲癇的發(fā)作可能是膠質(zhì)瘤的首發(fā)癥狀，容易被誤診為原發(fā)性癲癇。目前，膠質(zhì)瘤的治療主要以手術(shù)切除、放療、化療等綜合治療為主。手術(shù)治療：手術(shù)是膠質(zhì)瘤治療的重要手段，其目的是盡可能切除腫瘤組織，降低腫瘤負(fù)荷，緩解顱內(nèi)壓增高癥狀，同時(shí)獲取腫瘤組織進(jìn)行病理診斷和分子檢測(cè)，為后續(xù)治療提供依據(jù)。隨著顯微神經(jīng)外科技術(shù)、神經(jīng)導(dǎo)航技術(shù)、術(shù)中磁共振成像（iMRI）等技術(shù)的不斷發(fā)展，手術(shù)切除的安全性和切除程度得到了顯著提高。然而，由于膠質(zhì)瘤呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，與周圍正常腦組織邊界不清，難以完全切除，尤其是高級(jí)別膠質(zhì)瘤，術(shù)后復(fù)發(fā)率較高。對(duì)于一些位于重要功能區(qū)的膠質(zhì)瘤，手術(shù)切除還可能導(dǎo)致嚴(yán)重的神經(jīng)功能損傷，影響患者的生活質(zhì)量。放射治療：放療在膠質(zhì)瘤的治療中起著關(guān)鍵作用，可殺滅術(shù)后殘留的腫瘤細(xì)胞，延緩腫瘤復(fù)發(fā)，提高患者的生存率。傳統(tǒng)的外照射放療包括常規(guī)分割放療、適形放療和調(diào)強(qiáng)放療等，其中調(diào)強(qiáng)放療能夠更精確地照射腫瘤組織，減少對(duì)周圍正常組織的損傷。近年來(lái)，立體定向放射外科（SRS）如伽瑪?shù)?、射波刀等也逐漸應(yīng)用于膠質(zhì)瘤的治療，主要適用于體積較小、位置較深或手術(shù)難以切除的腫瘤。放療雖然能夠有效控制腫瘤生長(zhǎng)，但也會(huì)帶來(lái)一些副作用，如放射性腦損傷、腦水腫、認(rèn)知功能障礙等，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量?；瘜W(xué)治療：化療通過(guò)使用化學(xué)藥物抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和生長(zhǎng)。目前，替莫唑胺（TMZ）是治療膠質(zhì)瘤最常用的化療藥物，尤其是對(duì)于高級(jí)別膠質(zhì)瘤，TMZ同步放化療及輔助化療已成為標(biāo)準(zhǔn)治療方案。TMZ具有口服方便、能透過(guò)血腦屏障等優(yōu)點(diǎn)，可顯著延長(zhǎng)患者的生存期。然而，部分患者對(duì)TMZ存在耐藥性，導(dǎo)致化療效果不佳。此外，化療藥物還會(huì)引起骨髓抑制、胃腸道反應(yīng)、肝腎功能損害等不良反應(yīng)，限制了其臨床應(yīng)用。盡管目前針對(duì)膠質(zhì)瘤的治療方法不斷改進(jìn)，但膠質(zhì)瘤患者的總體預(yù)后仍然較差，尤其是高級(jí)別膠質(zhì)瘤患者，5年生存率較低。這主要是由于膠質(zhì)瘤的生物學(xué)特性復(fù)雜，其侵襲性生長(zhǎng)、高度異質(zhì)性以及對(duì)治療的耐受性等因素，使得現(xiàn)有的治療方法難以徹底根除腫瘤細(xì)胞。因此，尋找新的治療靶點(diǎn)和治療策略，提高膠質(zhì)瘤的治療效果，改善患者的預(yù)后，仍然是神經(jīng)外科領(lǐng)域面臨的重大挑戰(zhàn)。三、IL-17和VEGF的生物學(xué)特性3.1IL-17的生物學(xué)特性IL-17最初被命名為CTLA-8，后來(lái)經(jīng)過(guò)重新分類和命名。它是一種由活化的T細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子，屬于白細(xì)胞介素家族。在人體免疫系統(tǒng)中，IL-17主要由輔助性T細(xì)胞17（Th17）分泌，此外，γδT細(xì)胞、自然殺傷T（NKT）細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞等也能產(chǎn)生一定量的IL-17。Th17細(xì)胞是CD4+T細(xì)胞的一個(gè)亞群，在特定的細(xì)胞因子環(huán)境，如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-23（IL-23）等的刺激下，初始CD4+T細(xì)胞可分化為Th17細(xì)胞。IL-17家族包括IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E（也稱為IL-25）和IL-17F六個(gè)成員。其中，IL-17A是最早被克隆和研究最多的成員，也是目前被認(rèn)為在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用的主要亞型。IL-17家族成員在結(jié)構(gòu)上具有一定的相似性，它們的C端都含有5個(gè)空間上保守的半胱氨酸殘基，并形成典型的半胱氨酸結(jié)折疊結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)特征使得它們能夠與相應(yīng)的受體結(jié)合，從而啟動(dòng)下游的信號(hào)傳導(dǎo)通路。IL-17通過(guò)與細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合來(lái)發(fā)揮其生物學(xué)功能。IL-17受體家族包括IL-17RA、IL-17RB、IL-17RC、IL-17RD和SEF（也稱為IL-17RE）五個(gè)成員。這些受體亞基都是Ⅰ型跨膜蛋白，包含兩個(gè)細(xì)胞外Ⅲ型纖連蛋白樣結(jié)構(gòu)域和一個(gè)細(xì)胞質(zhì)SEF/IL-17R/TIR（SEFIR）結(jié)構(gòu)域。IL-17A和IL-17F主要通過(guò)與IL-17RA和IL-17RC形成的異二聚體受體結(jié)合，從而激活下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。三種相似的IL-17二聚體（IL-17A/A、IL-17A/F、IL-17F/F）與IL-17R的結(jié)合能力存在差異，其中IL-17A/A的結(jié)合能力最強(qiáng)，IL-17A/F次之，IL-17F/F最弱。在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)中，IL-17發(fā)揮著重要的促炎作用，是T細(xì)胞誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的早期啟動(dòng)因子。當(dāng)IL-17與其受體結(jié)合后，會(huì)激活一系列下游信號(hào)通路，其中主要包括核轉(zhuǎn)錄因子κB（NF-κB）途徑和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）途徑。在NF-κB途徑中，IL-17與受體結(jié)合后，招募銜接蛋白Act1，Act1與腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（TRAF6）相互作用，進(jìn)而激活I(lǐng)κB激酶（IKK）復(fù)合物，使IκB磷酸化并降解，釋放出NF-κB，NF-κB進(jìn)入細(xì)胞核，與靶基因啟動(dòng)子區(qū)域的κB位點(diǎn)結(jié)合，促進(jìn)炎性基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)。在MAPK途徑中，IL-17信號(hào)可激活細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（ERK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和p38MAPK等，這些激酶通過(guò)磷酸化一系列底物，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化、凋亡和炎癥反應(yīng)等過(guò)程。IL-17通過(guò)激活這些信號(hào)通路，誘導(dǎo)多種細(xì)胞產(chǎn)生一系列炎性細(xì)胞因子和趨化因子，如IL-6、IL-8、粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）、前列腺素E2（PGE2）等。IL-6是一種多效性的細(xì)胞因子，可促進(jìn)T細(xì)胞、B細(xì)胞的活化和增殖，增強(qiáng)免疫細(xì)胞的功能，同時(shí)還參與急性期反應(yīng)和炎癥的調(diào)節(jié)。IL-8是一種重要的趨化因子，能夠吸引中性粒細(xì)胞、T細(xì)胞等向炎癥部位遷移聚集，增強(qiáng)炎癥反應(yīng)。G-CSF可刺激骨髓中的粒細(xì)胞前體細(xì)胞增殖、分化和成熟，增加外周血中粒細(xì)胞的數(shù)量，提高機(jī)體的抗感染能力。PGE2則具有擴(kuò)張血管、增加血管通透性、促進(jìn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等作用，進(jìn)一步加劇炎癥反應(yīng)。此外，IL-17還能促進(jìn)細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）的表達(dá)，ICAM-1可介導(dǎo)白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，有利于白細(xì)胞穿越血管壁進(jìn)入炎癥組織，參與炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展。IL-17在多種生理和病理過(guò)程中都發(fā)揮著重要作用。在生理情況下，IL-17參與機(jī)體的固有免疫和適應(yīng)性免疫應(yīng)答，對(duì)于抵抗病原體感染具有重要意義。例如，在呼吸道感染中，IL-17可誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞產(chǎn)生抗菌肽和炎性細(xì)胞因子，招募中性粒細(xì)胞等免疫細(xì)胞到感染部位，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)病原體的清除能力。然而，在病理情況下，IL-17的異常表達(dá)與多種自身免疫性疾病、慢性炎癥性疾病以及腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的關(guān)節(jié)滑膜組織中，IL-17的表達(dá)水平顯著升高，它可促進(jìn)滑膜細(xì)胞的增殖、炎性細(xì)胞因子的分泌以及破骨細(xì)胞的活化，導(dǎo)致關(guān)節(jié)炎癥和骨質(zhì)破壞。在銀屑病患者的皮膚病變部位，IL-17也高表達(dá)，通過(guò)刺激角質(zhì)形成細(xì)胞增殖和炎癥因子的釋放，參與銀屑病的發(fā)病過(guò)程。在腫瘤方面，IL-17對(duì)腫瘤的作用具有雙重性，一方面，它可以通過(guò)促進(jìn)腫瘤血管生成、免疫逃逸等機(jī)制促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移；另一方面，在某些情況下，IL-17也可以激活機(jī)體的抗腫瘤免疫反應(yīng)，抑制腫瘤的發(fā)展。3.2VEGF的生物學(xué)特性VEGF是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子家族的重要成員，該家族還包括VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E以及胎盤生長(zhǎng)因子（PLGF）等。這些家族成員在結(jié)構(gòu)和功能上具有一定的相似性，但又各有特點(diǎn)。VEGF基因位于人類染色體6p21.3，全長(zhǎng)約14kb，由8個(gè)外顯子和7個(gè)內(nèi)含子組成。通過(guò)不同的剪接方式，可產(chǎn)生多種VEGF異構(gòu)體，如VEGF121、VEGF145、VEGF165、VEGF183、VEGF189和VEGF206等。其中，VEGF165是最主要的異構(gòu)體，在大多數(shù)組織中廣泛表達(dá)，它具有完整的生物學(xué)活性，既能促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，又能增加血管的通透性。VEGF121缺少外顯子6和7編碼的部分氨基酸序列，其不與細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合，呈自由分泌狀態(tài)，在促進(jìn)血管生成方面具有較強(qiáng)的活性。VEGF189和VEGF206則含有額外的外顯子編碼序列，它們與細(xì)胞外基質(zhì)的親和力較高，主要以結(jié)合形式存在于細(xì)胞表面或細(xì)胞外基質(zhì)中。從結(jié)構(gòu)上看，VEGF是一種高度糖基化的同源二聚體蛋白，每個(gè)單體由165-206個(gè)氨基酸組成。單體之間通過(guò)二硫鍵連接形成穩(wěn)定的二聚體結(jié)構(gòu)，這種二聚體結(jié)構(gòu)對(duì)于VEGF與受體的結(jié)合以及發(fā)揮生物學(xué)功能至關(guān)重要。VEGF分子包含多個(gè)結(jié)構(gòu)域，其中N端的信號(hào)肽序列負(fù)責(zé)引導(dǎo)VEGF分泌到細(xì)胞外；中間部分的結(jié)構(gòu)域含有與受體結(jié)合的位點(diǎn)，決定了VEGF與不同受體的親和力和特異性；C端的結(jié)構(gòu)域則參與了VEGF的二聚化以及與細(xì)胞外基質(zhì)的相互作用。VEGF主要通過(guò)與血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合來(lái)發(fā)揮其生物學(xué)功能。目前已發(fā)現(xiàn)的VEGF受體（VEGFR）主要有三種，分別為VEGFR1（Flt-1）、VEGFR2（KDR/Flk-1）和VEGFR3（Flt-4）。這些受體均屬于酪氨酸激酶受體家族，由胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)組成。胞外區(qū)含有多個(gè)免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域，負(fù)責(zé)與VEGF結(jié)合；跨膜區(qū)將受體錨定在細(xì)胞膜上；胞內(nèi)區(qū)則具有酪氨酸激酶活性，當(dāng)VEGF與受體結(jié)合后，受體發(fā)生二聚化并激活胞內(nèi)的酪氨酸激酶，進(jìn)而啟動(dòng)下游的信號(hào)傳導(dǎo)通路。VEGFR1和VEGFR2在血管內(nèi)皮細(xì)胞上廣泛表達(dá)，在腫瘤血管生成過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。VEGFR1對(duì)VEGF具有較高的親和力，但激酶活性較低，它主要通過(guò)調(diào)節(jié)VEGF的生物利用度，間接參與血管生成的調(diào)控。VEGFR2對(duì)VEGF的親和力稍低，但具有很強(qiáng)的激酶活性，是介導(dǎo)VEGF促血管生成作用的主要受體。當(dāng)VEGF與VEGFR2結(jié)合后，激活下游的多條信號(hào)通路，如磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）通路、絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路等。在PI3K/Akt通路中，VEGF與VEGFR2結(jié)合后，使PI3K的p85亞基與受體的磷酸化酪氨酸殘基結(jié)合，激活PI3K，進(jìn)而磷酸化Akt，激活的Akt可以促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的存活、增殖和遷移。在MAPK通路中，VEGF與VEGFR2結(jié)合后，通過(guò)激活Ras蛋白，依次激活Raf、MEK和ERK等激酶，最終促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和分化。VEGFR3主要表達(dá)于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞，在淋巴管生成過(guò)程中發(fā)揮重要作用。VEGF-C和VEGF-D是VEGFR3的主要配體，它們與VEGFR3結(jié)合后，可激活下游的信號(hào)通路，促進(jìn)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和淋巴管的生成。此外，VEGF還可以與神經(jīng)纖毛蛋白（NRP）等輔助受體結(jié)合，進(jìn)一步增強(qiáng)其與VEGFR的相互作用，調(diào)節(jié)血管生成和腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移。在腫瘤發(fā)展過(guò)程中，VEGF起著極為重要的作用。腫瘤細(xì)胞由于快速增殖，對(duì)氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求急劇增加，導(dǎo)致腫瘤組織局部處于缺氧狀態(tài)。缺氧環(huán)境會(huì)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞和腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞等細(xì)胞分泌大量的VEGF。VEGF通過(guò)與其受體結(jié)合，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移，誘導(dǎo)新的血管生成，為腫瘤細(xì)胞提供充足的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，滿足腫瘤生長(zhǎng)的需求。同時(shí)，VEGF還能增加血管的通透性，使血漿蛋白滲出到血管外，形成富含纖維蛋白的基質(zhì)，為腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移提供了有利的微環(huán)境。此外，VEGF還可以通過(guò)調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞功能，抑制機(jī)體的抗腫瘤免疫反應(yīng)，促進(jìn)腫瘤的免疫逃逸。例如，VEGF可以抑制樹(shù)突狀細(xì)胞的成熟和功能，減少T細(xì)胞的活化和增殖，促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的產(chǎn)生，從而削弱機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫監(jiān)視和清除能力。四、IL-17和VEGF在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)研究4.1研究設(shè)計(jì)與方法4.1.1研究對(duì)象選取本研究選取[具體時(shí)間段]在[醫(yī)院名稱]神經(jīng)外科就診并經(jīng)手術(shù)切除及病理證實(shí)為腦膠質(zhì)瘤的患者[X]例作為實(shí)驗(yàn)組。納入標(biāo)準(zhǔn)為：年齡18-70歲；術(shù)前未接受放療、化療及免疫治療；病理診斷明確；患者及家屬簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)包括：合并其他惡性腫瘤；患有嚴(yán)重的心、肝、腎等重要臟器疾?。淮嬖谧陨砻庖咝约膊』蚋腥拘约膊?；無(wú)法獲取足夠的腫瘤組織標(biāo)本。同時(shí)，選取同期在該醫(yī)院因顱腦外傷接受去骨瓣減壓手術(shù)且腦組織病理檢查正常的患者[X]例作為對(duì)照組。對(duì)照組患者在年齡、性別等方面與實(shí)驗(yàn)組患者具有可比性，以減少混雜因素對(duì)研究結(jié)果的影響。對(duì)所有入選患者的臨床資料進(jìn)行詳細(xì)記錄，包括年齡、性別、腫瘤部位、病理類型、病理分級(jí)等信息。根據(jù)2021年WHO中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)膠質(zhì)瘤患者的病理類型進(jìn)行準(zhǔn)確分類，如星形細(xì)胞瘤、少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤、室管膜瘤等，并明確其病理分級(jí)，分為低級(jí)別膠質(zhì)瘤（WHOⅠ-Ⅱ級(jí)）和高級(jí)別膠質(zhì)瘤（WHOⅢ-Ⅳ級(jí)）。通過(guò)對(duì)患者臨床資料的全面收集和整理，為后續(xù)分析IL-17和VEGF表達(dá)與膠質(zhì)瘤臨床特征的關(guān)系提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。4.1.2實(shí)驗(yàn)方法免疫組化法檢測(cè)IL-17和VEGF蛋白表達(dá)：免疫組化是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原的位置和含量。具體操作如下：將手術(shù)切除的腫瘤組織和正常腦組織標(biāo)本用10%中性甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，制成4μm厚的連續(xù)切片。切片經(jīng)脫蠟、水化后，采用高溫高壓抗原修復(fù)法，以增強(qiáng)抗原的暴露。用3%過(guò)氧化氫溶液孵育切片10-15分鐘，以消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性。加入正常山羊血清封閉非特異性抗原結(jié)合位點(diǎn)，孵育15-30分鐘。分別滴加鼠抗人IL-17單克隆抗體和鼠抗人VEGF單克隆抗體（工作濃度按照抗體說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋），4℃孵育過(guò)夜。次日，用磷酸鹽緩沖液（PBS）沖洗切片3次，每次5分鐘。滴加生物素標(biāo)記的二抗，室溫孵育15-30分鐘。再次用PBS沖洗后，滴加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素工作液，室溫孵育15-30分鐘。最后，用二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色劑顯色，蘇木精復(fù)染細(xì)胞核，鹽酸酒精分化，氨水返藍(lán)，脫水，透明，封片。結(jié)果判斷：在高倍鏡（×400）下觀察，IL-17和VEGF陽(yáng)性產(chǎn)物均定位于細(xì)胞質(zhì)，呈棕黃色或棕褐色顆粒。隨機(jī)選取5個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)腫瘤細(xì)胞，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分率。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞百分率和染色強(qiáng)度進(jìn)行綜合評(píng)分，陽(yáng)性細(xì)胞百分率：0分（＜10%）、1分（10%-＜26%）、2分（26%-75%）、3分（＞75%）；染色強(qiáng)度：0分（無(wú)色）、1分（淡黃色）、2分（棕黃色）、3分（棕色或棕褐色）。兩者計(jì)分乘積＞4分為陽(yáng)性表達(dá)，≤4分為陰性表達(dá)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)IL-17和VEGFmRNA表達(dá)：實(shí)時(shí)熒光定量PCR是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。具體步驟如下：使用Trizol試劑從腫瘤組織和正常腦組織中提取總RNA，按照試劑說(shuō)明書(shū)操作，確保RNA的純度和完整性。用分光光度計(jì)測(cè)定RNA的濃度和純度，A260/A280比值應(yīng)在1.8-2.0之間。取適量的總RNA，以oligo(dT)為引物，利用逆轉(zhuǎn)錄酶將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA。根據(jù)GenBank中IL-17和VEGF的基因序列，設(shè)計(jì)特異性引物，引物由專業(yè)生物公司合成。IL-17上游引物序列為[具體序列1]，下游引物序列為[具體序列2]；VEGF上游引物序列為[具體序列3]，下游引物序列為[具體序列4]。以β-actin作為內(nèi)參基因，其上游引物序列為[具體序列5]，下游引物序列為[具體序列6]。在實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀上進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，反應(yīng)體系包括cDNA模板、上下游引物、SYBRGreen熒光染料、PCR緩沖液、dNTPs和TaqDNA聚合酶等。反應(yīng)條件為：95℃預(yù)變性30-60秒；95℃變性5-10秒，60℃退火30-60秒，共40個(gè)循環(huán)。反應(yīng)結(jié)束后，根據(jù)儀器自動(dòng)生成的Ct值（循環(huán)閾值），采用2^(-ΔΔCt)法計(jì)算IL-17和VEGFmRNA的相對(duì)表達(dá)量。其中，ΔCt=Ct（目的基因）-Ct（內(nèi)參基因），ΔΔCt=ΔCt（實(shí)驗(yàn)組）-ΔCt（對(duì)照組）。4.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果4.2.1IL-17和VEGF在正常腦組織與膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)差異通過(guò)免疫組化和實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，結(jié)果顯示IL-17和VEGF在正常腦組織與膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)存在顯著差異。在免疫組化染色結(jié)果中，正常腦組織中IL-17陽(yáng)性表達(dá)率僅為[X]%，且染色強(qiáng)度較弱，多呈淡黃色，陽(yáng)性細(xì)胞主要散在分布于血管周圍及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中；而在膠質(zhì)瘤組織中，IL-17陽(yáng)性表達(dá)率高達(dá)[X]%，染色強(qiáng)度明顯增強(qiáng)，呈棕黃色或棕褐色，陽(yáng)性細(xì)胞廣泛分布于腫瘤細(xì)胞及腫瘤間質(zhì)中。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩者陽(yáng)性表達(dá)率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在VEGF的免疫組化檢測(cè)中，正常腦組織中VEGF陽(yáng)性表達(dá)率為[X]%，染色主要定位于血管內(nèi)皮細(xì)胞，呈淡黃色；膠質(zhì)瘤組織中VEGF陽(yáng)性表達(dá)率為[X]%，不僅在血管內(nèi)皮細(xì)胞中高表達(dá)，在腫瘤細(xì)胞中也有大量表達(dá)，染色呈棕黃色或棕褐色。兩組間陽(yáng)性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果也進(jìn)一步證實(shí)了這一差異。正常腦組織中IL-17mRNA的相對(duì)表達(dá)量為[X]，而膠質(zhì)瘤組織中IL-17mRNA的相對(duì)表達(dá)量為[X]，膠質(zhì)瘤組織中IL-17mRNA的表達(dá)水平顯著高于正常腦組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。對(duì)于VEGF，正常腦組織中VEGFmRNA的相對(duì)表達(dá)量為[X]，膠質(zhì)瘤組織中VEGFmRNA的相對(duì)表達(dá)量為[X]，同樣顯示出膠質(zhì)瘤組織中VEGFmRNA表達(dá)水平明顯高于正常腦組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這些結(jié)果表明，IL-17和VEGF在膠質(zhì)瘤組織中呈高表達(dá)狀態(tài)，提示它們可能參與了膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。IL-17的高表達(dá)可能通過(guò)激活相關(guān)信號(hào)通路，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲以及腫瘤微環(huán)境中的炎癥反應(yīng)；VEGF的高表達(dá)則可能促進(jìn)腫瘤血管生成，為腫瘤細(xì)胞提供充足的營(yíng)養(yǎng)和氧氣，支持腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。4.2.2IL-17和VEGF在不同病理分級(jí)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)變化進(jìn)一步分析不同病理分級(jí)膠質(zhì)瘤中IL-17和VEGF的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)兩者的表達(dá)水平與膠質(zhì)瘤的病理分級(jí)密切相關(guān)。低級(jí)別膠質(zhì)瘤（WHOⅠ-Ⅱ級(jí)）中，IL-17陽(yáng)性表達(dá)率為[X]%，免疫組化染色強(qiáng)度多為淡黃色，陽(yáng)性細(xì)胞主要分布于腫瘤細(xì)胞周邊；VEGF陽(yáng)性表達(dá)率為[X]%，染色主要集中在腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞及部分腫瘤細(xì)胞中，強(qiáng)度為淡黃色至棕黃色。在高級(jí)別膠質(zhì)瘤（WHOⅢ-Ⅳ級(jí)）中，IL-17陽(yáng)性表達(dá)率升高至[X]%，染色強(qiáng)度明顯增強(qiáng)，多呈棕黃色或棕褐色，陽(yáng)性細(xì)胞在腫瘤組織中彌漫分布；VEGF陽(yáng)性表達(dá)率高達(dá)[X]%，腫瘤細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞均呈現(xiàn)強(qiáng)陽(yáng)性染色，呈棕褐色。對(duì)不同病理分級(jí)膠質(zhì)瘤中IL-17和VEGF陽(yáng)性表達(dá)率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果顯示，隨著膠質(zhì)瘤病理分級(jí)的升高，IL-17和VEGF的陽(yáng)性表達(dá)率均顯著增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果也顯示，低級(jí)別膠質(zhì)瘤中IL-17mRNA的相對(duì)表達(dá)量為[X]，高級(jí)別膠質(zhì)瘤中為[X]；低級(jí)別膠質(zhì)瘤中VEGFmRNA的相對(duì)表達(dá)量為[X]，高級(jí)別膠質(zhì)瘤中為[X]。高級(jí)別膠質(zhì)瘤中IL-17和VEGFmRNA的表達(dá)水平均顯著高于低級(jí)別膠質(zhì)瘤，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。上述結(jié)果表明，IL-17和VEGF的表達(dá)水平與膠質(zhì)瘤的惡性程度呈正相關(guān)，即隨著膠質(zhì)瘤病理分級(jí)的升高，兩者的表達(dá)量逐漸增加。這提示IL-17和VEGF可能在膠質(zhì)瘤的惡性進(jìn)展過(guò)程中發(fā)揮著重要作用，其高表達(dá)可能促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移能力，導(dǎo)致膠質(zhì)瘤的惡性程度增加。因此，IL-17和VEGF有望作為評(píng)估膠質(zhì)瘤惡性程度的潛在生物學(xué)指標(biāo)，為臨床醫(yī)生制定治療方案和判斷患者預(yù)后提供重要參考。五、IL-17和VEGF表達(dá)與膠質(zhì)瘤惡性程度的關(guān)系5.1惡性程度評(píng)估指標(biāo)在評(píng)估膠質(zhì)瘤的惡性程度時(shí)，臨床上常采用多種指標(biāo)，這些指標(biāo)從不同角度反映了腫瘤的生物學(xué)行為和侵襲能力，為判斷腫瘤的嚴(yán)重程度和制定治療方案提供了重要依據(jù)。病理分級(jí)是評(píng)估膠質(zhì)瘤惡性程度的重要指標(biāo)之一，目前廣泛采用的是世界衛(wèi)生組織（WHO）中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)。該標(biāo)準(zhǔn)主要依據(jù)腫瘤細(xì)胞的組織學(xué)形態(tài)、細(xì)胞核的異型性、核分裂象的多少、有無(wú)壞死及血管內(nèi)皮細(xì)胞增生等特征進(jìn)行分級(jí)。其中，Ⅰ級(jí)膠質(zhì)瘤如毛細(xì)胞型星形細(xì)胞瘤，腫瘤細(xì)胞分化良好，生長(zhǎng)緩慢，呈良性生物學(xué)行為，手術(shù)切除后預(yù)后較好。Ⅱ級(jí)膠質(zhì)瘤包括彌漫性星形細(xì)胞瘤、少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤等，腫瘤細(xì)胞有一定的異型性，生長(zhǎng)相對(duì)緩慢，但具有潛在的惡性轉(zhuǎn)化傾向，術(shù)后易復(fù)發(fā)。Ⅲ級(jí)膠質(zhì)瘤如間變性星形細(xì)胞瘤、間變性少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤等，腫瘤細(xì)胞異型性明顯，核分裂象增多，可見(jiàn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增生，惡性程度較高，患者的生存期相對(duì)較短。Ⅳ級(jí)膠質(zhì)瘤以膠質(zhì)母細(xì)胞瘤為代表，是惡性程度最高的膠質(zhì)瘤，腫瘤細(xì)胞高度異型，核分裂象多見(jiàn)，常伴有大片壞死和微血管增生，腫瘤呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，侵襲性極強(qiáng)，患者預(yù)后極差。病理分級(jí)能夠直觀地反映腫瘤細(xì)胞的分化程度和形態(tài)學(xué)特征，是臨床判斷膠質(zhì)瘤惡性程度的基礎(chǔ)。增殖指數(shù)也是評(píng)估膠質(zhì)瘤惡性程度的關(guān)鍵指標(biāo)之一，其中最常用的是Ki-67指數(shù)。Ki-67是一種與細(xì)胞增殖密切相關(guān)的核蛋白，在細(xì)胞周期的G1、S、G2和M期均有表達(dá)，而在G0期不表達(dá)。通過(guò)免疫組化檢測(cè)腫瘤組織中Ki-67的表達(dá)水平，可反映腫瘤細(xì)胞的增殖活性。一般來(lái)說(shuō)，Ki-67指數(shù)越高，表明腫瘤細(xì)胞增殖越活躍，惡性程度越高。在低級(jí)別膠質(zhì)瘤中，Ki-67指數(shù)通常較低，一般小于10%，提示腫瘤細(xì)胞增殖相對(duì)緩慢；而在高級(jí)別膠質(zhì)瘤中，Ki-67指數(shù)明顯升高，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的Ki-67指數(shù)可高達(dá)30%-70%，表明腫瘤細(xì)胞增殖迅速，具有更強(qiáng)的侵襲性和轉(zhuǎn)移能力。Ki-67指數(shù)不僅有助于評(píng)估膠質(zhì)瘤的惡性程度，還對(duì)判斷患者的預(yù)后具有重要意義，高Ki-67指數(shù)的膠質(zhì)瘤患者往往預(yù)后較差。此外，腫瘤的侵襲范圍也是評(píng)估其惡性程度的重要因素。膠質(zhì)瘤呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，可侵犯周圍正常腦組織，其侵襲范圍越廣，對(duì)周圍神經(jīng)組織的破壞越嚴(yán)重，惡性程度也就越高。通過(guò)影像學(xué)檢查，如磁共振成像（MRI），可以清晰地顯示腫瘤的邊界和侵襲范圍。對(duì)于邊界清晰、局限生長(zhǎng)的膠質(zhì)瘤，其惡性程度相對(duì)較低；而邊界不清、廣泛浸潤(rùn)周圍腦組織的膠質(zhì)瘤，往往提示更高的惡性程度。腫瘤侵犯重要的腦功能區(qū)，如運(yùn)動(dòng)區(qū)、語(yǔ)言區(qū)等，還會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的神經(jīng)功能障礙，進(jìn)一步影響患者的預(yù)后。除了上述指標(biāo)外，分子生物學(xué)特征也在膠質(zhì)瘤惡性程度評(píng)估中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。例如，異檸檬酸脫氫酶（IDH）基因突變狀態(tài)與膠質(zhì)瘤的惡性程度和預(yù)后密切相關(guān)。IDH1或IDH2基因突變常見(jiàn)于低級(jí)別膠質(zhì)瘤和繼發(fā)性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，突變型IDH基因可導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞代謝異常，產(chǎn)生2-羥基戊二酸（2-HG），進(jìn)而影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展。攜帶IDH基因突變的膠質(zhì)瘤患者預(yù)后相對(duì)較好，而IDH野生型的膠質(zhì)瘤患者，尤其是膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者，惡性程度更高，預(yù)后更差。1p/19q聯(lián)合缺失也是一個(gè)重要的分子標(biāo)志物，多見(jiàn)于少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤。具有1p/19q聯(lián)合缺失的少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤對(duì)化療敏感，預(yù)后較好，而無(wú)1p/19q聯(lián)合缺失的腫瘤惡性程度相對(duì)較高。這些分子生物學(xué)指標(biāo)為膠質(zhì)瘤的精準(zhǔn)診斷和惡性程度評(píng)估提供了更深入的信息，有助于臨床醫(yī)生制定個(gè)性化的治療方案。5.2IL-17和VEGF表達(dá)與惡性程度指標(biāo)的相關(guān)性分析為深入探究IL-17和VEGF表達(dá)與膠質(zhì)瘤惡性程度的關(guān)系，對(duì)二者表達(dá)與惡性程度指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析。通過(guò)Spearman等級(jí)相關(guān)分析，結(jié)果顯示IL-17表達(dá)與膠質(zhì)瘤病理分級(jí)呈顯著正相關(guān)（r=[具體相關(guān)系數(shù)1]，P<0.05）。這表明隨著膠質(zhì)瘤病理分級(jí)的升高，IL-17的表達(dá)水平也隨之增加，進(jìn)一步證實(shí)了IL-17在膠質(zhì)瘤惡性進(jìn)展中可能發(fā)揮著重要作用。IL-17的高表達(dá)可能通過(guò)多種途徑促進(jìn)腫瘤的惡性發(fā)展，它可以激活核轉(zhuǎn)錄因子κB（NF-κB）信號(hào)通路，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞增殖相關(guān)基因的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖。IL-17還能刺激腫瘤微環(huán)境中的炎性細(xì)胞分泌炎性細(xì)胞因子，如IL-6、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等，這些炎性細(xì)胞因子不僅可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和存活，還能調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力。研究發(fā)現(xiàn)，IL-6可以通過(guò)激活JAK/STAT3信號(hào)通路，促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲。VEGF表達(dá)與膠質(zhì)瘤病理分級(jí)同樣呈顯著正相關(guān)（r=[具體相關(guān)系數(shù)2]，P<0.05）。VEGF作為促血管生成的關(guān)鍵因子，其表達(dá)水平與膠質(zhì)瘤的惡性程度密切相關(guān)。隨著膠質(zhì)瘤惡性程度的增加，腫瘤細(xì)胞對(duì)氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求急劇增加，這促使腫瘤細(xì)胞分泌更多的VEGF。VEGF與其受體結(jié)合后，激活下游的磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）通路和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移，誘導(dǎo)新的血管生成。這些新生血管不僅為腫瘤細(xì)胞提供了充足的氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，滿足了腫瘤快速生長(zhǎng)的需求，還為腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移提供了通道。研究表明，抑制VEGF的表達(dá)或阻斷其信號(hào)通路，可以顯著減少腫瘤血管生成，抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。將IL-17和VEGF表達(dá)與增殖指數(shù)（Ki-67指數(shù)）進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示IL-17表達(dá)與Ki-67指數(shù)呈正相關(guān)（r=[具體相關(guān)系數(shù)3]，P<0.05）。Ki-67指數(shù)反映了腫瘤細(xì)胞的增殖活性，IL-17與Ki-67指數(shù)的正相關(guān)關(guān)系進(jìn)一步表明IL-17可能通過(guò)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，從而增加膠質(zhì)瘤的惡性程度。IL-17可以上調(diào)細(xì)胞周期蛋白D1（CyclinD1）的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期，加速細(xì)胞周期進(jìn)程，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖。VEGF表達(dá)與Ki-67指數(shù)也呈正相關(guān)（r=[具體相關(guān)系數(shù)4]，P<0.05）。VEGF除了促進(jìn)血管生成外，還可以直接作用于腫瘤細(xì)胞，通過(guò)激活PI3K/Akt和MAPK等信號(hào)通路，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和存活。在膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中，抑制VEGF的表達(dá)可以降低Ki-67指數(shù)，抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。在分析IL-17和VEGF表達(dá)與腫瘤侵襲范圍的相關(guān)性時(shí)，發(fā)現(xiàn)IL-17表達(dá)與腫瘤侵襲范圍呈正相關(guān)（r=[具體相關(guān)系數(shù)5]，P<0.05）。IL-17可能通過(guò)調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的黏附分子和基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的表達(dá)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲。研究表明，IL-17可以上調(diào)MMP-2和MMP-9的表達(dá)，這些蛋白酶可以降解細(xì)胞外基質(zhì)，為腫瘤細(xì)胞的侵襲提供條件。VEGF表達(dá)與腫瘤侵襲范圍同樣呈正相關(guān)（r=[具體相關(guān)系數(shù)6]，P<0.05）。VEGF增加血管通透性，使血漿蛋白滲出形成富含纖維蛋白的基質(zhì)，為腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移提供了有利的微環(huán)境。VEGF還可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞表達(dá)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）相關(guān)標(biāo)志物，如E-cadherin表達(dá)降低，N-cadherin和Vimentin表達(dá)升高，從而增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力。5.3IL-17和VEGF影響膠質(zhì)瘤惡性程度的機(jī)制探討IL-17和VEGF在膠質(zhì)瘤惡性程度的發(fā)展中扮演著關(guān)鍵角色，它們通過(guò)多種復(fù)雜的機(jī)制促進(jìn)腫瘤的惡性進(jìn)展。IL-17主要通過(guò)調(diào)節(jié)炎癥微環(huán)境來(lái)影響膠質(zhì)瘤的惡性程度。腫瘤微環(huán)境是腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和轉(zhuǎn)移的重要場(chǎng)所，其中包含腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞以及細(xì)胞外基質(zhì)等多種成分。IL-17作為一種促炎細(xì)胞因子，在膠質(zhì)瘤微環(huán)境中發(fā)揮著多方面的作用。在炎癥微環(huán)境方面，IL-17可誘導(dǎo)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM）向M2型極化。TAM是腫瘤微環(huán)境中的重要免疫細(xì)胞，根據(jù)其功能狀態(tài)可分為M1型和M2型。M1型巨噬細(xì)胞具有抗腫瘤活性，能夠分泌炎性細(xì)胞因子和趨化因子，激活免疫細(xì)胞，殺傷腫瘤細(xì)胞；而M2型巨噬細(xì)胞則具有促腫瘤作用，可分泌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）等細(xì)胞因子，促進(jìn)腫瘤血管生成、免疫逃逸和腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移。IL-17通過(guò)與TAM表面的IL-17受體結(jié)合，激活下游的信號(hào)通路，促使TAM向M2型極化，從而增強(qiáng)腫瘤微環(huán)境的免疫抑制作用，為腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和擴(kuò)散創(chuàng)造有利條件。IL-17還能招募和活化中性粒細(xì)胞。中性粒細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境中既可以發(fā)揮抗腫瘤作用，也可能具有促腫瘤作用。在IL-17的作用下，中性粒細(xì)胞被招募到腫瘤組織中，并被活化?；罨闹行粤＜?xì)胞可釋放大量的活性氧（ROS）、蛋白酶和細(xì)胞因子，這些物質(zhì)一方面可以直接殺傷腫瘤細(xì)胞；另一方面，在腫瘤微環(huán)境中，它們也可能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。中性粒細(xì)胞釋放的基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）可以降解細(xì)胞外基質(zhì)，為腫瘤細(xì)胞的侵襲提供便利。中性粒細(xì)胞還可以通過(guò)分泌細(xì)胞因子，如IL-6、TNF-α等，進(jìn)一步調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境，促進(jìn)腫瘤的惡性進(jìn)展。在血管生成方面，IL-17可間接促進(jìn)膠質(zhì)瘤血管生成。雖然IL-17本身不直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，但它可以通過(guò)調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境中的其他細(xì)胞和細(xì)胞因子來(lái)影響血管生成。IL-17可以刺激腫瘤細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞分泌VEGF，VEGF是血管生成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，能夠促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管腔形成，從而為腫瘤的生長(zhǎng)提供充足的營(yíng)養(yǎng)和氧氣。IL-17還可以通過(guò)激活NF-κB信號(hào)通路，上調(diào)一些促血管生成因子的表達(dá)，如堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）等，協(xié)同VEGF促進(jìn)腫瘤血管生成。研究表明，在膠質(zhì)瘤動(dòng)物模型中，抑制IL-17的表達(dá)或阻斷其信號(hào)通路，可以減少腫瘤血管生成，抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。VEGF則主要通過(guò)直接參與血管生成過(guò)程來(lái)促進(jìn)膠質(zhì)瘤的惡性進(jìn)展。腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移依賴于充足的血液供應(yīng)，而VEGF在腫瘤血管生成中發(fā)揮著核心作用。VEGF與其受體VEGFR1和VEGFR2結(jié)合后，激活下游的多條信號(hào)通路。在PI3K/Akt通路中，VEGF與VEGFR2結(jié)合，使PI3K的p85亞基與受體的磷酸化酪氨酸殘基結(jié)合，激活PI3K，進(jìn)而磷酸化Akt。激活的Akt可以促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的存活、增殖和遷移。Akt可以抑制內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，增強(qiáng)其存活能力；還可以上調(diào)細(xì)胞周期蛋白D1（CyclinD1）的表達(dá)，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期，加速細(xì)胞周期進(jìn)程，從而促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。在MAPK通路中，VEGF與VEGFR2結(jié)合后，通過(guò)激活Ras蛋白，依次激活Raf、MEK和ERK等激酶。激活的ERK可以磷酸化一系列轉(zhuǎn)錄因子，如Elk-1、c-Jun等，這些轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)入細(xì)胞核，調(diào)節(jié)與細(xì)胞增殖、分化相關(guān)基因的表達(dá)，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和分化。VEGF還能增加血管通透性。它可以使血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的連接松弛，導(dǎo)致血漿蛋白滲出到血管外，形成富含纖維蛋白的基質(zhì)。這種基質(zhì)不僅為腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移提供了有利的支架，還可以吸引炎癥細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞聚集到腫瘤組織中，進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤微環(huán)境的形成和腫瘤的生長(zhǎng)。VEGF增加血管通透性還可以導(dǎo)致腫瘤間質(zhì)水腫，壓迫周圍的正常腦組織，加重患者的臨床癥狀。除了上述經(jīng)典的血管生成途徑外，VEGF還參與了腫瘤血管的異常結(jié)構(gòu)和功能的形成。在膠質(zhì)瘤中，由于VEGF的過(guò)度表達(dá)，腫瘤血管往往表現(xiàn)為結(jié)構(gòu)紊亂、管腔不規(guī)則、基底膜不完整等異常特征。這些異常的血管不僅影響了腫瘤的血液供應(yīng)，還使得腫瘤細(xì)胞更容易進(jìn)入血液循環(huán)，從而增加了腫瘤轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，VEGF可以調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞的緊密連接蛋白和黏附分子的表達(dá)，影響血管的正常結(jié)構(gòu)和功能。VEGF可以下調(diào)血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接蛋白ZO-1的表達(dá)，破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的緊密連接，導(dǎo)致血管通透性增加和血管結(jié)構(gòu)的不穩(wěn)定。六、IL-17和VEGF表達(dá)與膠質(zhì)瘤預(yù)后的關(guān)系6.1預(yù)后評(píng)估方法在探討IL-17和VEGF表達(dá)與膠質(zhì)瘤預(yù)后的關(guān)系時(shí)，準(zhǔn)確的預(yù)后評(píng)估方法至關(guān)重要。本研究主要采用生存期、復(fù)發(fā)率等常用指標(biāo)來(lái)評(píng)估患者的預(yù)后情況。生存期是衡量膠質(zhì)瘤患者預(yù)后的關(guān)鍵指標(biāo)之一，它反映了患者從確診或接受治療后存活的時(shí)間。本研究采用的是總生存期（OS），即從患者確診為膠質(zhì)瘤開(kāi)始，到因任何原因?qū)е滤劳龌螂S訪截止的時(shí)間。通過(guò)對(duì)患者的長(zhǎng)期隨訪，記錄每位患者的生存時(shí)間，以此來(lái)評(píng)估不同組患者的生存情況。為確保生存期數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和完整性，研究人員會(huì)定期與患者或其家屬進(jìn)行溝通，了解患者的生存狀態(tài)，并及時(shí)更新生存信息。對(duì)于失訪的患者，會(huì)詳細(xì)記錄失訪原因和時(shí)間，以便在數(shù)據(jù)分析時(shí)進(jìn)行合理處理。復(fù)發(fā)率也是評(píng)估膠質(zhì)瘤預(yù)后的重要指標(biāo)。膠質(zhì)瘤具有較高的復(fù)發(fā)率，尤其是高級(jí)別膠質(zhì)瘤，復(fù)發(fā)往往意味著病情的惡化和預(yù)后的不良。本研究通過(guò)定期的影像學(xué)檢查，如磁共振成像（MRI），來(lái)監(jiān)測(cè)患者腫瘤的復(fù)發(fā)情況。一般在患者手術(shù)后1個(gè)月進(jìn)行首次復(fù)查，之后根據(jù)患者的具體情況，低級(jí)別膠質(zhì)瘤患者每3-6個(gè)月復(fù)查一次，高級(jí)別膠質(zhì)瘤患者每2-3個(gè)月復(fù)查一次。若MRI檢查發(fā)現(xiàn)原手術(shù)部位或其他部位出現(xiàn)新的腫瘤病灶，結(jié)合臨床癥狀和體征，判斷為腫瘤復(fù)發(fā)。記錄每位患者的復(fù)發(fā)時(shí)間和復(fù)發(fā)次數(shù)，計(jì)算復(fù)發(fā)率，分析復(fù)發(fā)率與IL-17和VEGF表達(dá)之間的關(guān)系。隨訪方法采用門診隨訪和電話隨訪相結(jié)合的方式。門診隨訪時(shí)，患者需要攜帶近期的影像學(xué)檢查資料、病歷等，醫(yī)生會(huì)對(duì)患者進(jìn)行詳細(xì)的體格檢查，評(píng)估患者的神經(jīng)功能恢復(fù)情況，如語(yǔ)言、運(yùn)動(dòng)、認(rèn)知等方面的功能。同時(shí)，詢問(wèn)患者的癥狀變化，如頭痛、惡心、嘔吐、癲癇發(fā)作等情況是否加重或緩解。電話隨訪則主要用于了解患者的一般生活狀況、生存狀態(tài)以及是否出現(xiàn)新的癥狀等信息。通過(guò)定期的隨訪，能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)患者的病情變化，為后續(xù)的治療和研究提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)支持。為了提高隨訪的依從性，在患者出院時(shí)，會(huì)向患者和家屬詳細(xì)介紹隨訪的重要性和時(shí)間安排，并提供專門的隨訪聯(lián)系電話，方便患者隨時(shí)咨詢和溝通。在隨訪過(guò)程中，研究人員會(huì)耐心解答患者的疑問(wèn)，給予患者必要的指導(dǎo)和建議，以提高患者的配合度。6.2IL-17和VEGF表達(dá)對(duì)患者生存期和復(fù)發(fā)率的影響通過(guò)對(duì)[X]例膠質(zhì)瘤患者的長(zhǎng)期隨訪，分析IL-17和VEGF表達(dá)對(duì)患者生存期和復(fù)發(fā)率的影響。結(jié)果顯示，IL-17高表達(dá)組患者的中位生存期為[X]個(gè)月，明顯短于IL-17低表達(dá)組患者的中位生存期[X]個(gè)月，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這表明IL-17高表達(dá)與膠質(zhì)瘤患者的不良預(yù)后密切相關(guān)，可能是由于IL-17通過(guò)多種途徑促進(jìn)了腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移，從而縮短了患者的生存時(shí)間。同樣，VEGF高表達(dá)組患者的中位生存期為[X]個(gè)月，顯著短于VEGF低表達(dá)組患者的中位生存期[X]個(gè)月，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VEGF作為血管生成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，其高表達(dá)可導(dǎo)致腫瘤血管生成增加，為腫瘤細(xì)胞提供充足的營(yíng)養(yǎng)和氧氣，促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)和擴(kuò)散，進(jìn)而影響患者的預(yù)后。在復(fù)發(fā)率方面，IL-17高表達(dá)組患者的復(fù)發(fā)率為[X]%，明顯高于IL-17低表達(dá)組患者的復(fù)發(fā)率[X]%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這提示IL-17高表達(dá)可能增加了膠質(zhì)瘤的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，可能是因?yàn)镮L-17促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲能力，使得腫瘤細(xì)胞更容易在術(shù)后殘留并復(fù)發(fā)。VEGF高表達(dá)組患者的復(fù)發(fā)率為[X]%，也顯著高于VEGF低表達(dá)組患者的復(fù)發(fā)率[X]%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。VEGF促進(jìn)腫瘤血管生成，不僅為腫瘤細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，還可能為腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)提供了通道，使得VEGF高表達(dá)的患者更容易出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)。綜上所述，IL-17和VEGF高表達(dá)均與膠質(zhì)瘤患者較短的生存期和較高的復(fù)發(fā)率相關(guān)，表明這兩種因子在膠質(zhì)瘤的預(yù)后中起著重要作用，可作為評(píng)估膠質(zhì)瘤患者預(yù)后的潛在生物標(biāo)志物。在臨床實(shí)踐中，檢測(cè)膠質(zhì)瘤患者腫瘤組織中IL-17和VEGF的表達(dá)水平，有助于醫(yī)生更準(zhǔn)確地判斷患者的預(yù)后情況，為制定個(gè)性化的治療方案提供重要依據(jù)。6.3基于IL-17和VEGF表達(dá)的預(yù)后預(yù)測(cè)模型構(gòu)建為了更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)膠質(zhì)瘤患者的預(yù)后，本研究嘗試構(gòu)建基于IL-17和VEGF表達(dá)的預(yù)后預(yù)測(cè)模型。本研究采用多因素Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型進(jìn)行構(gòu)建。將患者的年齡、性別、腫瘤部位、病理類型、病理分級(jí)、IL-17表達(dá)水平、VEGF表達(dá)水平等因素作為自變量，將患者的總生存期作為因變量納入模型。在納入模型之前，對(duì)各變量進(jìn)行賦值處理，如年齡以實(shí)際年齡數(shù)值納入，性別男賦值為1，女賦值為0；腫瘤部位根據(jù)不同的腦區(qū)進(jìn)行分類賦值；病理類型按照星形細(xì)胞瘤、少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤、室管膜瘤等分別賦值；病理分級(jí)低級(jí)別賦值為1，高級(jí)別賦值為2；IL-17和VEGF表達(dá)水平根據(jù)免疫組化或?qū)崟r(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果，高表達(dá)賦值為1，低表達(dá)賦值為0。通過(guò)多因素Cox回歸分析，篩選出對(duì)患者總生存期有獨(dú)立影響的因素，并計(jì)算各因素的風(fēng)險(xiǎn)比（HR）及95%置信區(qū)間（CI）。構(gòu)建完成后，使用一致性指數(shù)（C-index）、校準(zhǔn)曲線和受試者工作特征曲線（ROC曲線）對(duì)模型進(jìn)行驗(yàn)證。一致性指數(shù)用于評(píng)估模型預(yù)測(cè)結(jié)果與實(shí)際觀察結(jié)果的一致性程度，取值范圍在0.5-1之間，越接近1表示模型的預(yù)測(cè)準(zhǔn)確性越高。校準(zhǔn)曲線則通過(guò)比較模型預(yù)測(cè)的生存率與實(shí)際觀察到的生存率，直觀地展示模型的校準(zhǔn)能力，理想情況下，校準(zhǔn)曲線應(yīng)與45°對(duì)角線重合。ROC曲線用于評(píng)估模型的區(qū)分能力，通過(guò)計(jì)算曲線下面積（AUC）來(lái)衡量，AUC取值范圍在0.5-1之間，AUC越大，說(shuō)明模型對(duì)不同預(yù)后患者的區(qū)分能力越強(qiáng)。將本研究構(gòu)建的預(yù)后預(yù)測(cè)模型應(yīng)用于臨床實(shí)踐，具有重要的價(jià)值。醫(yī)生可以根據(jù)患者腫瘤組織中IL-17和VEGF的表達(dá)水平，結(jié)合其他臨床因素，通過(guò)該模型快速、準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)患者的預(yù)后情況，為制定個(gè)性化的治療方案提供科學(xué)依據(jù)。對(duì)于預(yù)測(cè)預(yù)后較差的患者，醫(yī)生可以加強(qiáng)隨訪監(jiān)測(cè)，積極探索更有效的治療手段，如嘗試新的化療藥物、開(kāi)展臨床試驗(yàn)等；對(duì)于預(yù)測(cè)預(yù)后較好的患者，可以適當(dāng)減少過(guò)度治療，降低患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和治療相關(guān)的不良反應(yīng)，提高患者的生活質(zhì)量。該模型還可以幫助醫(yī)生評(píng)估不同治療方案對(duì)患者預(yù)后的影響，為臨床研究提供數(shù)據(jù)支持，有助于推動(dòng)膠質(zhì)瘤治療領(lǐng)域的發(fā)展。七、臨床應(yīng)用前景與挑戰(zhàn)7.1作為診斷和預(yù)后標(biāo)志物的應(yīng)用IL-17和VEGF在膠質(zhì)瘤中的高表達(dá)及其與惡性程度和預(yù)后的密切關(guān)系，使其具有作為診斷和預(yù)后標(biāo)志物的潛在價(jià)值。在診斷方面，目前膠質(zhì)瘤的診斷主要依賴于影像學(xué)檢查和組織病理學(xué)檢查，但這些方法存在一定的局限性。影像學(xué)檢查雖然能夠提供腫瘤的位置、大小和形態(tài)等信息，但對(duì)于早期微小腫瘤的檢測(cè)靈敏度較低，且難以準(zhǔn)確判斷腫瘤的性質(zhì)和惡性程度。組織病理學(xué)檢查雖然是診斷膠質(zhì)瘤的金標(biāo)準(zhǔn)，但屬于有創(chuàng)檢查，獲取標(biāo)本困難，且存在一定的風(fēng)險(xiǎn)。IL-17和VEGF作為潛在的診斷標(biāo)志物，具有一些獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。它們?cè)谀z質(zhì)瘤組織中的表達(dá)明顯高于正常腦組織，通過(guò)檢測(cè)腫瘤組織或體液（如腦脊液、血液）中IL-17和VEGF的水平，有望實(shí)現(xiàn)對(duì)膠質(zhì)瘤的早期診斷。研究表明，在膠質(zhì)瘤患者的腦脊液中，IL-17和VEGF的水平顯著升高，與腫瘤的病理分級(jí)呈正相關(guān)。通過(guò)檢測(cè)腦脊液中這兩種因子的水平，可以輔助診斷膠質(zhì)瘤，并評(píng)估其惡性程度。檢測(cè)體液中IL-17和VEGF的水平相對(duì)簡(jiǎn)便、微創(chuàng)，易于被患者接受。將IL-17和VEGF與其他診斷指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用，能夠提高診斷的準(zhǔn)確性?？梢詫⑺鼈兣c膠質(zhì)瘤相關(guān)的其他標(biāo)志物，如膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）、異檸檬酸脫氫酶（IDH）基因突變等結(jié)合起來(lái)，進(jìn)行綜合分析。GFAP是一種中間絲蛋白，在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中高表達(dá)，與膠質(zhì)瘤的診斷和預(yù)后密切相關(guān)。IDH基因突變狀態(tài)也是膠質(zhì)瘤的重要分子標(biāo)志物，不同的IDH突變類型與膠質(zhì)瘤的病理類型、惡性程度和預(yù)后密切相關(guān)。將IL-17、VEGF與GFAP、IDH基因突變等指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)，可以從多個(gè)角度提供信息，更準(zhǔn)確地診斷膠質(zhì)瘤，并判斷其惡性程度和預(yù)后。在預(yù)后評(píng)估方面，IL-17和VEGF的表達(dá)水平對(duì)預(yù)測(cè)膠質(zhì)瘤患者的預(yù)后具有重要意義。如前所述，IL-17和VEGF高表達(dá)的患者生存期較短，復(fù)發(fā)率較高。通過(guò)檢測(cè)腫瘤組織中這兩種因子的表達(dá)水平，醫(yī)生可以更準(zhǔn)確地判斷患者的預(yù)后情況，為制定個(gè)性化的治療方案提供依據(jù)。對(duì)于IL-17和VEGF高表達(dá)的患者，提示其預(yù)后較差，醫(yī)生可以加強(qiáng)隨訪監(jiān)測(cè)，積極采取更有效的治療措施，如嘗試新的化療藥物、開(kāi)展臨床試驗(yàn)等；對(duì)于低表達(dá)的患者，則可以適當(dāng)減少過(guò)度治療，降低患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和治療相關(guān)的不良反應(yīng)，提高患者的生活質(zhì)量。然而，IL-17和VEGF作為診斷和預(yù)后標(biāo)志物的臨床應(yīng)用仍面臨一些挑戰(zhàn)。目前檢測(cè)方法的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化問(wèn)題尚未完全解決。不同的檢測(cè)方法，如免疫組化、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、實(shí)時(shí)熒光定量PCR等，其檢測(cè)結(jié)果可能存在差異。即使是同一種檢測(cè)方法，由于實(shí)驗(yàn)條件、試劑質(zhì)量等因素的影響，也可能導(dǎo)致結(jié)果的不一致。因此，需要建立統(tǒng)一的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量控制體系，提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。個(gè)體差異也是影響IL-17和VEGF作為標(biāo)志物應(yīng)用的重要因素。不同患者之間的遺傳背景、生活習(xí)慣、基礎(chǔ)疾病等存在差異，這些因素可能會(huì)影響IL-17和VEGF的表達(dá)水平，從而影響其作為標(biāo)志物的準(zhǔn)確性。一些患者可能存在基因多態(tài)性，導(dǎo)致其對(duì)IL-17和VEGF的表達(dá)和功能產(chǎn)生影響。某些基礎(chǔ)疾病，如炎癥性疾病、心血管疾病等，也可能影響機(jī)體的免疫狀態(tài)和血管生成，進(jìn)而影響IL-17和VEGF的水平。在應(yīng)用IL-17和VEGF作為診斷和預(yù)后標(biāo)志物時(shí)，需要充分考慮個(gè)體差異，結(jié)合患者的具體情況進(jìn)行綜合分析。腫瘤微環(huán)境的復(fù)雜性也給IL-17和VEGF作為標(biāo)志物的應(yīng)用帶來(lái)了困難。腫瘤微環(huán)境中存在多種細(xì)胞和細(xì)胞因子，它們之間相互作用，形成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)。IL-17和VEGF的表達(dá)和功能受到腫瘤微環(huán)境中其他因素的影響，如免疫細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)等。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM）可以分泌多種細(xì)胞因子，調(diào)節(jié)IL-17和VEGF的表達(dá)和功能。腫瘤微環(huán)境中的缺氧、酸中毒等因素也會(huì)影響IL-17和VEGF的產(chǎn)生和信號(hào)傳導(dǎo)。因此，在研究和應(yīng)用IL-17和VEGF作為標(biāo)志物時(shí)，需要深入了解腫瘤微環(huán)境的影響，綜合考慮多種因素，以提高其應(yīng)用價(jià)值。7.2靶向治療的潛在可能性基于IL-17和VEGF在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的關(guān)鍵作用，以它們?yōu)榘悬c(diǎn)的靶向治療策略展現(xiàn)出潛在的治療前景。針對(duì)IL-17的靶向治療，主要是通過(guò)抑制IL-17的表達(dá)或阻斷其信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)。目前，已經(jīng)有一些針對(duì)IL-17的單克隆抗體藥物進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。司庫(kù)奇尤單抗（Secukinumab）是一種全人源化的抗IL-17A單克隆抗體，已被批準(zhǔn)用于治療銀屑病、強(qiáng)直性脊柱炎等自身免疫性疾病。在腫瘤治療方面，研究發(fā)現(xiàn)司庫(kù)奇尤單抗可以抑制IL-17A誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞增殖和遷移，降低腫瘤微環(huán)境中的炎癥反應(yīng)。在膠質(zhì)瘤動(dòng)物模型中，使用司庫(kù)奇尤單抗治療后，腫瘤的生長(zhǎng)和侵襲得到了一定程度的抑制，生存期有所延長(zhǎng)。Brodalumab也是一種抗IL-17受體A的單克隆抗體，它可以阻斷IL-17與受體的結(jié)合，從而抑制IL-17的信號(hào)傳導(dǎo)。臨床前研究表明，Brodalumab在抑制腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移方面也具有一定的潛力。除了單克隆抗體，小分子抑制劑也被用于靶向IL-17信號(hào)通路。一些研究發(fā)現(xiàn)，某些小分子化合物可以通過(guò)抑制IL-17信號(hào)通路中的關(guān)鍵激酶，如IKK、MAPK等，來(lái)阻斷IL-17的信號(hào)傳導(dǎo)，從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲。這些小分子抑制劑具有分子量小、滲透性好、可口服等優(yōu)點(diǎn)，為IL-17靶向治療提供了新的選擇。在VEGF靶向治療方面，目前已經(jīng)有多種藥物應(yīng)用于臨床。貝伐單抗（Bevacizumab）是一種重組的人源化單克隆抗體，它可以特異性地結(jié)合VEGF，阻斷VEGF與其受體的結(jié)合，從而抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，減少腫瘤血管生成。貝伐單抗已被美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)用于復(fù)發(fā)高級(jí)別膠質(zhì)瘤的治療。臨床研究表明，貝伐單抗單藥或與其他化療藥物聯(lián)合使用，可以顯著延長(zhǎng)復(fù)發(fā)高級(jí)別膠質(zhì)瘤患者的無(wú)進(jìn)展生存期。在一項(xiàng)針對(duì)復(fù)發(fā)高級(jí)別膠質(zhì)瘤患者的臨床試驗(yàn)中，使用貝伐單抗聯(lián)合伊立替康治療，患者的中位無(wú)進(jìn)展生存期達(dá)到了5.6個(gè)月。阿柏西普（Aflibercept）是一種重組融合蛋白，它可以與VEGF-A、VEGF-B和胎盤生長(zhǎng)因子（PIGF