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文檔簡介
1、主題2:動物細(xì)胞工程,向舊的學(xué)習(xí);1.植物細(xì)胞工程實(shí)際應(yīng)用的三個方面是什么?2.微繁殖屬于什么樣的繁殖方式,為什么能保持優(yōu)良品種的遺傳特性?3.作物脫毒應(yīng)選擇哪些部位、細(xì)胞和原因?4.人工種子的成分?人工種皮(胚乳)應(yīng)該添加什么成分?5.與天然種子相比,人工種子有什么優(yōu)勢?6.單倍體育種的過程和優(yōu)勢?7.在植物組織培養(yǎng)過程中,人工種子和細(xì)胞產(chǎn)品的工業(yè)生產(chǎn)使用哪個階段的產(chǎn)品?動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合、單克隆抗體技術(shù)、核移植、動物細(xì)胞工程的常用技術(shù)、動物細(xì)胞工程的其他基礎(chǔ)、學(xué)習(xí)目標(biāo)、理解和記憶動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理、過程和條件。2003年,四川少年小林燃放鞭炮,造成面部和四肢嚴(yán)重?zé)齻透腥?。為了挽?/p>
2、兒子的生命,小林的父親和母親懇求醫(yī)生,燒傷整形外科主任魏平最終同意進(jìn)行一次罕見的皮膚移植。為了完全覆蓋被嚴(yán)重?zé)齻透腥镜暮⒆拥膫?,醫(yī)生們把從父親和兒子身上取下的所有皮膚都切成指甲大小的碎片,兒子和父親的皮膚被間隔地嵌入。據(jù)估計(jì),父親的皮膚可以在兒子身上存活至少半年甚至更長時間,這給自己的皮膚生長帶來了活力,而孩子的康復(fù)指日可待。我的兒子拿起鞭炮,嚴(yán)重?zé)齻透腥?。我父親切了成千上萬塊皮。想想吧!小林在皮膚燒傷后很容易生病。為什么?2.選擇植皮時,理論上誰的皮膚最好?為什么?健康的皮膚是有限的。你能通過其他方式得到你自己的皮膚嗎?1。動物細(xì)胞培養(yǎng),即取出相關(guān)的_ _ _ _ _ _ _ _ _
3、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _,3。原則:1 .概念:細(xì)胞增殖;2.起點(diǎn):終點(diǎn):組織細(xì)胞、細(xì)胞、組織、單細(xì)胞、培養(yǎng)基、細(xì)胞生長和增殖。閱讀課本第44頁第五段,回答與動物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的問題。結(jié)合圖表,試著用文字和箭頭來說明其過程,胰蛋白酶處理,取動物組織塊,切割,單細(xì)胞,細(xì)胞懸液,原代培養(yǎng),傳代培養(yǎng),第二,過程,1。動物胚胎或年輕個體的器官或組織通常在取材時用作動物細(xì)胞培
4、養(yǎng)材料。原因是什么?由于上述材料細(xì)胞分化程度低,分裂增殖能力強(qiáng)。在動物細(xì)胞培養(yǎng)之前,應(yīng)該對去除的動物組織做什么?治療的目的是什么?切割并用胰蛋白酶或膠原酶處理一段時間,以便將組織塊分散到單個細(xì)胞中。3.為什么組織細(xì)胞應(yīng)該在培養(yǎng)前分散成單細(xì)胞?擴(kuò)大細(xì)胞與培養(yǎng)基的接觸面積,促進(jìn)細(xì)胞對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝廢物的排出。4.用胰蛋白酶處理細(xì)胞培養(yǎng)物顯示了細(xì)胞間物質(zhì)的成分。用胃蛋白酶可以嗎?細(xì)胞之間的物質(zhì)是蛋白質(zhì);不能。由于動物細(xì)胞培養(yǎng)的最適酸堿度為7.2-7.4,胰蛋白酶作用的最適酸堿度為7.2-8.4,胃蛋白酶的最適酸堿度為2,胃蛋白酶在酸堿度為7.2-7.4的動物細(xì)胞培養(yǎng)基中無活性。胰蛋白酶會消化培
5、養(yǎng)的細(xì)胞嗎?為什么?胰蛋白酶可以消化細(xì)胞間的蛋白質(zhì),也可以長時間消化細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì),這對細(xì)胞是有害的。因此,有必要控制胰蛋白酶的消化時間,強(qiáng)調(diào)一點(diǎn):細(xì)胞粘附的過程,細(xì)胞粘附:分散在培養(yǎng)瓶懸浮液中的細(xì)胞迅速粘附在瓶壁上,稱為細(xì)胞粘附。培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿壁要求:表面光滑、無毒、易于附著。當(dāng)粘附細(xì)胞分裂和生長,直到它們的表面相互接觸,細(xì)胞將停止分裂和增殖,這被稱為細(xì)胞接觸抑制。重點(diǎn)2:接觸抑制,瓶壁細(xì)胞數(shù)為單層,原代培養(yǎng),動物組織消化后的原代培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng):被瓶壁覆蓋的細(xì)胞需要再次用胰蛋白酶處理,然后在不同的瓶中培養(yǎng)以保持細(xì)胞增殖。這種培養(yǎng)過程被稱為亞文化。1.為什么要進(jìn)行亞文化?由于細(xì)胞
6、的接觸抑制,3。目前使用或冷凍保存的正常細(xì)胞通常在10代以內(nèi)。為什么?2.繼代培養(yǎng)中第10代細(xì)胞和第50代細(xì)胞的主要區(qū)別是什么?經(jīng)過50代,細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化,具有癌變和失去接觸抑制的特點(diǎn)。10代以內(nèi)細(xì)胞的遺傳物質(zhì)沒有改變,正常的二倍體核型得以保持。胰蛋白酶處理,切割,單細(xì)胞,細(xì)胞懸液,原代培養(yǎng),傳代培養(yǎng),第二,總結(jié)過程,動物胚胎或幼動物的組織和器官,原代培養(yǎng)的特點(diǎn):細(xì)胞粘附,接觸抑制,在10代傳代培養(yǎng)內(nèi),遺傳物質(zhì)保持不變,保持正常的二倍體核型。傳代約10-50代,生長緩慢,完全停止,某些細(xì)胞核類型可能改變(遺傳物質(zhì)可能改變)。繼續(xù)傳代培養(yǎng)幾個細(xì)胞以獲得永生,而這些細(xì)胞發(fā)生變異,遺傳物質(zhì)
7、發(fā)生了變化,這相當(dāng)于癌細(xì)胞。分化程度低,分裂和增殖能力強(qiáng),易吸收營養(yǎng)和排出代謝廢物,接觸抑制。動物細(xì)胞培養(yǎng)最終能像植物組織培養(yǎng)一樣培養(yǎng)成新的個體嗎?1.動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞生長的特點(diǎn),如貼壁生長和接觸抑制。繼代培養(yǎng)一段時間后,大多數(shù)細(xì)胞死亡,少數(shù)細(xì)胞存活并獲得永生,它們的遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化。不能,因?yàn)楦叨确只膭游锛?xì)胞的全能性受到抑制,總結(jié)和思考,4。動物細(xì)胞培養(yǎng)條件:1)無菌無毒環(huán)境:適宜溫度:人和哺乳動物細(xì)胞的最適溫度為36.50.5。適宜的酸堿度:酸堿度:7.2-7.4,液體合成培養(yǎng)基:(糖、氨基酸)、促生長因子(水、無機(jī)鹽、微量元素)等。通常會添加血漿和血清等天然成分。4)氣體環(huán)境:
8、2)營養(yǎng):3)溫度和酸堿度:“95空氣5CO2”混合氣體培養(yǎng)箱。氧氣是細(xì)胞新陳代謝所必需的;CO2維持培養(yǎng)液的酸堿度。培養(yǎng)基和所有培養(yǎng)器具的無菌處理;在培養(yǎng)液中加入抗生素以防止培養(yǎng)過程中的污染。定期更換培養(yǎng)基以去除代謝物并防止對培養(yǎng)細(xì)胞的傷害。為什么要添加血清?常用的動物血清主要包括胎牛血清和新生牛血清,血清中已知的成分主要包括蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖和激素。蛋白質(zhì)主要是白蛋白和球蛋白。氨基酸是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,12種氨基酸不是細(xì)胞自身合成的,必須由培養(yǎng)基提供。激素包括胰島素、生長激素和各種生長因子,如表皮生長因子、成纖維細(xì)胞生長因子、增殖刺激因子(MSA)、胰島素樣生長因子(IGFl、
9、IGF2)等。因此,在細(xì)胞培養(yǎng)中,為了保證細(xì)胞的順利生長和增殖,一般需要加入10%-20%體積的血清。動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:(P46的最后一段),1。生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品,如病毒疫苗、干擾素和單克隆抗體。在基因工程中的應(yīng)用主要作為受體細(xì)胞3。檢測有毒物質(zhì)來判斷某些物質(zhì)的毒性。細(xì)胞的生理學(xué)、藥理學(xué)和病理學(xué)研究,如抗癌藥物篩選、細(xì)胞全能性、細(xì)胞增殖、固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和植物細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物、水、無機(jī)鹽、有機(jī)物質(zhì)、植物激素、糖、氨基酸、生長促進(jìn)因子、無機(jī)鹽、微量元素、血清、血漿、1。植物繁殖的新方法。農(nóng)作物新品種的培育。電池產(chǎn)品的工業(yè)生產(chǎn)。蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)。利用基因工程作為受體細(xì)胞。有毒物質(zhì)的檢測。病理學(xué)和藥理學(xué)等的研究。1.回答以下關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題:在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂并在細(xì)胞表面生長時,細(xì)胞將停止分裂和增殖,這稱為細(xì)胞性。此時,瓶壁上形成的細(xì)胞數(shù)量使得粘附的細(xì)胞需要用酶處理,可用的酶是。隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增加,大多數(shù)細(xì)胞分裂停止,然后出現(xiàn)這種現(xiàn)象;然而,很少有細(xì)胞能夠持續(xù)增殖,其中一些會由于遺傳物質(zhì)的變化而變成細(xì)胞。這些細(xì)胞的粘附力和膜表面蛋白(糖蛋白)的數(shù)量是_ _ _ _ _。單層、胰蛋白酶、衰老甚至死亡、接觸抑制、永生、還原、還原、相互接觸,回答以下關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題:要檢查
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