學(xué)習(xí)微生物培養(yǎng)的基本技術(shù).ppt

1、學(xué)習(xí)微生物培養(yǎng)的基本技術(shù),實驗原理 1.配制培養(yǎng)基時要注意原料的選擇和調(diào) 節(jié)適宜的PH 2.配制好的培養(yǎng)基必須經(jīng)過滅菌，滅菌是指殺死一定環(huán)境中的所有微生物細胞、芽孢和孢子。 3.對不同的材料，應(yīng)當(dāng)采取不同的滅菌方法：培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法，而接種環(huán)則用火焰灼燒法,方法步驟：,一、細菌的培養(yǎng)技術(shù)：,1、培養(yǎng)基的配制：,1、稱量,2、溶化,3、調(diào)PH,4、培養(yǎng)基的分裝,5、加棉塞,6、包扎,加入材料（蛋白胨、牛肉膏、瓊脂等）加熱溶化,1mol/L的NaOH溶液，PH試紙，7476,棉塞能防止雜菌污染，保證通氣良好。不能太松、不難太緊，2/3在管內(nèi),1,正確,2、滅菌,開鍋加水 放入待滅菌的材

2、料：管口向上，豎放，不能太擠 加蓋 排出鍋內(nèi)冷空氣：達49Kpa時，排氣兩次 維持：98 Kpa，20min 排氣：鍋內(nèi)壓力降為0時，才能排氣,3、擱置斜面,將鍋內(nèi)試管等取出，在冷卻至50時，擱置 斜面，斜面長度不能超過試管總長度的1/2,4、接種,洗凈雙手，用酒精擦拭 等手上酒精揮發(fā)以后，點燃酒精燈 接種,左手夾住菌種試管和接種斜面試管，擰松棉塞,接種環(huán)灼燒滅菌,右手無名指和小指夾住棉塞（不能放下）， 灼燒管口一周,接種環(huán)伸入試管內(nèi)，在末長菌的部位冷卻， 后挑取少量菌體，立即抽出,在火焰旁迅速將接種環(huán)由斜面底部向外輕輕 畫蛇形細線,抽出接種環(huán)，再用火焰灼燒管口，并在火焰 上方將棉塞塞上,熄滅

3、酒精燈 填寫標(biāo)簽,5、培養(yǎng),25 C 57天 37 C 24小時,1不同微生物生長所要求的最適溫度不同。請就測定大腸桿菌生長最適溫度的實驗回答下列問題： (1)配制的相應(yīng)培養(yǎng)基可屬于 。 A天然培養(yǎng)基 B半固體培養(yǎng)基 C液體培養(yǎng)基 D伊紅一美藍選擇培養(yǎng)基,課堂練習(xí),AC,(2)依次按稱量、溶化、調(diào)pH、分裝(每管5ml)、 、包扎的順序，完成培養(yǎng) 基的配制，再用 （方法） 滅菌后，取8支試管，分別標(biāo)明20、28、37、45四種溫度，每種溫度2管。,加棉塞,高壓蒸氣滅菌法,(3)向每管中接人處于 期的大腸桿 菌菌液0lml，混勻。在相應(yīng)溫度下培養(yǎng) 24h。,對數(shù),(4)測定結(jié)果顯示，45下的菌體

4、最少，因為細胞內(nèi)的 等發(fā)生了不可逆的破壞。,蛋白質(zhì)和核酸,（2008理綜天津卷）31、（16分） 莠去津是一種含氮的有機化合物，它是廣泛使用的除草劑之一。 莠去津的作用機理之一是阻斷光反應(yīng)中的電子傳遞過程，影響NADP形成，進而影響在中進行光合作用的暗反應(yīng)過程，最終抑制雜草生長。,NADPH,葉綠體基質(zhì),從使用莠去津農(nóng)田中，選到了能遺傳的耐莠去津雜草，將它與敏感莠去津植株雜交，結(jié)堅果見下表：,由表推斷，控制該耐藥性狀的基因位于。,細胞質(zhì)中,某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)。請回答與此實驗相關(guān)的問題。 （1）培養(yǎng)基中含有的蛋白

5、胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了_和_。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是_和_。 （2）對培養(yǎng)基進行滅菌，應(yīng)該采用的方法是_ 。,氮源,碳源,無機鹽,水,高壓蒸汽滅菌,（3）為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于_ _ 中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37。要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種_作為對照進行實驗。,（4）培養(yǎng)20小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有_種細菌。一般說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細菌污染的程度越_。,恒溫培養(yǎng)箱,無菌水,多,高,（5）如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐_細菌，這種培養(yǎng)基被稱為_ 。,

6、鹽,選擇性培養(yǎng)基,16在光亮處用一種培養(yǎng)液分別培養(yǎng)綠藻和酵母菌，其結(jié)果如右圖，造成這種結(jié)果的原因是培養(yǎng)液中 A缺少無機鹽 B含氧量太高 C缺少有機養(yǎng)分 D不含二氧化碳,C,17右圖是細菌的生長速度曲線，根據(jù)曲線回答下列問題： (1)活細菌數(shù)量最多時對應(yīng)的是曲線中的 段。 總菌數(shù)目(包括死菌和活菌)最多的時期對應(yīng)曲線中的 段。,(2)3段中生長速度下降的原因是 。,3,4,營養(yǎng)物質(zhì)的消耗；有害代謝產(chǎn)物的積累，Ph 值變化,(3)調(diào)整期出現(xiàn)的原因是細菌接種到新的培養(yǎng)基上后，需要重新合成必需的酶，輔酶或某些必需中間代謝產(chǎn)物，以適應(yīng)新環(huán)境，這種調(diào)節(jié)方式屬 。,酶合成的調(diào)節(jié),(4)處于對數(shù)期的微生物，代謝旺盛，生長迅速，如果用作菌種，可在短時間內(nèi)得到大量微生物，以縮短發(fā)酵周期，曲線中屬于這一時期的是 段。,2,3（重慶）下列有關(guān)大腸桿菌的敘述，正確的是 A大腸桿菌以復(fù)制方式進行繁殖，其