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文檔簡介
,細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法,通過細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上的操作,按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合科學(xué)技術(shù)。,什么叫細(xì)胞工程?,植物細(xì)胞工程,動(dòng)物細(xì)胞工程,2.1 植物細(xì)胞工程,2.1.1植物細(xì)胞工程的基本技術(shù),1、植物組織培養(yǎng)技術(shù),2、植物體細(xì)胞雜交技術(shù),一、植物組織培養(yǎng),1、原理: 植物細(xì)胞具有全能性,細(xì)胞中含有本物種的全套遺傳信息。,為什么植物細(xì)胞在植物體內(nèi)沒能發(fā)育成完整植株? 細(xì)胞失去了全能性 細(xì)胞中的基因部分丟失 細(xì)胞中的基因進(jìn)行選擇性表達(dá) 細(xì)胞中的基因變異不同,怎樣條件下才能讓細(xì)胞發(fā)育成一株完整植株?,離體、提供適宜的營養(yǎng)條件,切取 形成層,無菌接種,誘導(dǎo)愈傷組織的形成,試管苗的形成,培養(yǎng)室,移栽,脫分化,再分化,培養(yǎng)基不同,通過調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂素和生長素的比例關(guān)系,排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞,下面是植物組織培養(yǎng)的簡略表示。請(qǐng)回答:,(1)表示 ,它能被培養(yǎng)為的根本原因是 。實(shí)現(xiàn)此過程需要的條件是 。 (2)表示 ,他的細(xì)胞特點(diǎn)是 . (3)若是花粉,則是 ,這項(xiàng)技術(shù)可用 在 上。 (4)若是胡蘿卜根細(xì)胞,則培養(yǎng)成的的葉片的顏色是 ,說明根尖細(xì)胞中有 。,外植體,植物細(xì)胞具有全能性,脫離母體后,給予適宜的營養(yǎng)條件和外界條件,愈傷組織,排列疏松、高度液泡化、薄壁,單倍體植株,單倍體育種,綠色,表達(dá)葉綠體的基因,二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù),二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù),雜種植株,融合的原生質(zhì)體,再生出細(xì)胞壁,脫分化,愈傷組織,再分化,植物細(xì)胞的融合,植物組織培養(yǎng),植物細(xì)胞A,原生質(zhì)體B,原生質(zhì)體A,雜種細(xì)胞,去 壁,去 壁,人 工 誘 導(dǎo),方法?,促進(jìn)融合的方法?,融合完成的 標(biāo)志,植物細(xì)胞B,1、為什么“番茄馬鈴薯”超級(jí)雜種植株沒有如科學(xué)家所想像的那樣,地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯?,生物基因的表達(dá)不是孤立的,它們之間是相互調(diào)控,相互影響的。在雜交植株中雖有兩種生物的遺傳物質(zhì),但它們的表達(dá)相互干擾,不能再像馬鈴薯和番茄中遺傳物質(zhì)一樣有序表達(dá)了。,二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù),1、步驟是去掉_使植物細(xì)胞成為_,最常用的方法是_,需要用到 。 2、步驟一般常用的化學(xué)試劑是_,目的是_。,細(xì)胞壁,原生質(zhì)體,酶解法,PEG,誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,纖維素酶和果膠酶,3、步驟成功的標(biāo)志是 ,與其完成有關(guān)的細(xì)胞器主要有 。 4、在利用雜種細(xì)胞培育成雜種植株的過程中,運(yùn)用的技術(shù)手段是_其中步驟相當(dāng)于_步驟相當(dāng)于_。與此有關(guān)的激素主要是 。,再生細(xì)胞壁,高爾基體、線粒體,植物組織培養(yǎng)技術(shù),脫分化,再分化,生長素和細(xì)胞分裂素,5、從理論上講,雜種植株的育性為_。運(yùn)用傳統(tǒng)有性雜交方法能否實(shí)現(xiàn)?_。因此這項(xiàng)技術(shù)對(duì)于培養(yǎng)作物新品種方面的重大意義在于_。,可育,不能,克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,6、利用植物體細(xì)胞雜交的方法培育作物新品種的過程中,遺傳物質(zhì)的傳遞是否遵循孟德爾的遺傳規(guī)律?為什么?,不遵循 因?yàn)闆]有經(jīng)過減數(shù)分裂產(chǎn)生配子的過程,只是兩種體細(xì)胞內(nèi)遺傳物質(zhì)的融合,而非有性生殖過程,2.1 植物細(xì)胞工程,2.1.2植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用,一、植物繁殖的新途徑,微型繁殖,脫毒苗,人工種子,再分化胚狀體,目前采用 技術(shù)來脫除病毒,生產(chǎn)脫毒苗,其依據(jù)是 和 。,莖尖組織培養(yǎng),莖尖不帶病毒,植物細(xì)胞有全能性,制造人工種子的種皮相當(dāng)于種子中的 ,其中除了各種營養(yǎng)成分外還可以加入 。,胚乳或子葉,農(nóng)藥、植物激素、抗生素等,2.1 植物細(xì)胞工程,2.1.2植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用,一、植物繁殖的新途徑,微型繁殖,脫毒苗,人工種子,二、作物新品種的培育,單倍體育種,突變體誘變育種,再分化胚狀體,脫分化愈傷組織,三、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn),細(xì)胞發(fā)酵罐,脫分化愈傷組織,常用技術(shù),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 核移植 動(dòng)物細(xì)胞融合 單克隆抗體,是基礎(chǔ),2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù),動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官,不可用胃蛋白酶(PH2.0) 處理時(shí)間適當(dāng),細(xì)胞貼壁、接觸抑制 單層細(xì)胞,1、過程,1)、無菌、無毒的環(huán)境 2)、營養(yǎng) 3)、溫度和PH 36.5 +0.5度 ;PH為7.2-7.4。 4)、氣體環(huán)境:,獨(dú)特:液體培養(yǎng)基 、加動(dòng)物血清、葡萄糖,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù),2、培養(yǎng)條件,添加一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液,5% CO2 :維持培養(yǎng)液的PH,去核的卵母細(xì)胞,供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞,受體細(xì)胞激活,完成分裂、發(fā)育成胚胎,胚胎移植,供體細(xì)胞培養(yǎng),(M卵母細(xì)胞),減數(shù)第二次分裂中期,10代以內(nèi),克隆動(dòng)物,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù),1.(2011紹興模擬)某研究小組為測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性,準(zhǔn)備對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞(甲)和正常肝細(xì)胞(乙)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。下列說法正確的是( ) A.甲、乙細(xì)胞是直接從人體肝臟中取出的 B.甲、乙細(xì)胞在克隆培養(yǎng)過程中,均需要加入血清 C.細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的作用是刺激細(xì)胞的呼吸 D.在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時(shí),也可用胃蛋白酶處理,2.我國科學(xué)家在山東萊陽農(nóng)學(xué)院培養(yǎng)出了克隆?!翱悼怠焙汀半p雙”,其過程如圖所示:,下列敘述中錯(cuò)誤的是( ) A.該過程利用了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性 B.A母牛和B母牛與“康康”“雙雙”之間不存在真正意義上的親子代關(guān)系 C.該過程體現(xiàn)的方法為拯救瀕危動(dòng)物提供了一種新思路 D.“康康”、“雙雙”之間若進(jìn)行器官移植,則會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng),核移植技術(shù)生產(chǎn)的克隆動(dòng)物,屬于無性繁殖,雜種細(xì)胞,仙臺(tái)病毒 皰疹病毒 新城雞瘟病毒,融合過程:,原理:,細(xì)胞膜的流動(dòng)性,2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體,特定的選擇性培養(yǎng)基,克隆有絲分裂增殖,雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):,單克隆抗體的特點(diǎn):,2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體,小鼠先免疫才得漿細(xì)胞,單克隆抗體的應(yīng)用,可用于作為診斷試劑:有準(zhǔn)確,高效,簡易、快速的優(yōu)點(diǎn) 可用于疾病治療 可用于運(yùn)載藥物(作為運(yùn)載對(duì)應(yīng)疾病的藥物的 “生物導(dǎo)彈“。),2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體,(1)若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞,則B細(xì)胞是取自 體內(nèi)的 細(xì)胞,促進(jìn)d過程的常用誘導(dǎo)劑是 或 。,(2)假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合,則可形成 種類型的C細(xì)胞,因此需用培養(yǎng)基篩選和檢測(cè) 出 (填特點(diǎn))的D細(xì)胞用于培養(yǎng)。 此抗體的特點(diǎn) 。,注射了抗原的動(dòng)物或人,漿,PEG,滅活的病毒,3,既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體,特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備,(3)制備單克隆抗體的原理是 , 。 (4)制備單克隆抗體用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段有 。 (5)D細(xì)胞的名稱是 ,常用的培養(yǎng)方法是 和 。,只能產(chǎn)生一種特異性
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