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緒論1 微生物、微生物學(xué)的概念1.微生物:一群形態(tài)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、 肉眼看不見的低等生物的統(tǒng)稱。2 微生物學(xué):研究微生物及其生命活動(dòng)規(guī)律的科學(xué)。2 微生物有哪些共性1 個(gè)體小,形態(tài)簡(jiǎn)單;2 分布廣,種類多;3 繁殖快,數(shù)量大;4 比值大,代謝強(qiáng)(表面積與體積比值大);5.適應(yīng)強(qiáng),易變異。3 微生物在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中有那些應(yīng)用?土壤與土壤肥力的形成與發(fā)展;有機(jī)物的分解和生物固氮;引起病害并對(duì)植物病蟲害的生物防治產(chǎn)生植物生長(zhǎng)刺激素(赤霉素)有機(jī)肥料的腐熟4 細(xì)胞生物的三界元系統(tǒng)?三元界系統(tǒng):真細(xì)菌或稱細(xì)菌 古細(xì)菌或稱古菌 真核生物5 微生物學(xué)的兩個(gè)重要奠基人對(duì)微生物學(xué)科發(fā)展的主要貢獻(xiàn)?1.微生物學(xué)的開山鼻祖 列文虎克 1673年用自己制造的顯微鏡觀察到了被他稱為“小動(dòng)物”的微生物世界。2.奠基人之一法國(guó)的巴斯德卓越貢獻(xiàn):徹底否定了“自生說”學(xué)說; 免疫學(xué)預(yù)防接種;證實(shí)了發(fā)酵是由微生物引起的; 發(fā)明巴斯德消毒法3.奠基人之二德國(guó)的柯赫 微生物基本操作技術(shù): 配制培養(yǎng)基用固體培養(yǎng)基分離純化微生物技術(shù) 病原細(xì)菌的研究: 證實(shí)炭疽病的病原菌是炭疽病菌。發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原菌(獲得諾貝爾獎(jiǎng))提出了柯赫法則第一章 原核微生物1 有哪些染色法可以用于細(xì)菌的染色?細(xì)菌是透明或半透明,染色后宜于觀察。常用的染色法有:1 簡(jiǎn)單染色:常用來觀察細(xì)菌的形態(tài)、大小和排列方式。用一種染液染色菌體。一般菌體被染上染料的顏色。2 負(fù)染色法:用襯托的方法將無色的觀察對(duì)象顯現(xiàn)出來,如對(duì)莢膜的染色。3 革蘭氏染色法:細(xì)菌的鑒別性染色。是一種經(jīng)驗(yàn)染色法。2 為什么說細(xì)菌的形態(tài)并不是固定不變的?影響細(xì)菌形態(tài)的因素:培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)基成分、濃度、pH值細(xì)菌形態(tài)易受環(huán)境影響,如培養(yǎng)時(shí)間、溫度、培養(yǎng)基成分、PH值等。但同一種菌:幼齡和條件適宜,細(xì)菌形態(tài)正常;老齡或有藥物、抗生素等不正常條件存在,細(xì)菌出現(xiàn)畸形,如果轉(zhuǎn)到合適新鮮的培養(yǎng)基中培養(yǎng),又可恢復(fù)原有形態(tài)。3 細(xì)菌的基本形態(tài)有哪幾種?球狀、桿狀、螺旋狀4 比較革蘭氏陽性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的異同點(diǎn)。 G+菌細(xì)胞壁一層 :2080nm的肽聚糖層(含磷壁酸)【由肽聚糖和磷壁酸組成】G-菌細(xì)胞壁兩層:外膜:脂多糖、脂蛋白、脂類28nm的肽聚糖層(不含磷壁酸)G-菌肽聚糖含量較少,網(wǎng)孔較大,脫色后網(wǎng)孔增大,結(jié)晶紫、碘復(fù)合物易被有機(jī)溶劑抽提,G+菌確不這樣。除去細(xì)胞壁后革蘭氏陽性菌變?yōu)楦锾m氏陰性菌5 結(jié)合細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)說明革蘭氏染色的機(jī)制。 v 革蘭氏染色原理:第一步:結(jié)晶紫使菌體著上紫色第二步:碘和結(jié)晶紫形成大分子復(fù)合物,分子大,能被細(xì)胞壁阻留在細(xì)胞內(nèi)。第三步:酒精脫色,細(xì)胞壁成分和構(gòu)造不同,出現(xiàn)不同的反應(yīng)。G+ 菌:細(xì)胞壁厚,肽聚糖含量高,交聯(lián)度大,當(dāng)乙醇脫色時(shí),肽聚糖因脫水而孔徑縮小,故結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被阻留在細(xì)胞內(nèi),細(xì)胞不能被酒精脫色,仍呈紫色。G菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮,因其含脂量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫-碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁,酒精將細(xì)胞脫色,細(xì)胞無色,沙黃復(fù)染后呈紅色。6 細(xì)菌的質(zhì)粒和擬核有什么區(qū)別? (1)擬核細(xì)菌等原核生物沒有典型的細(xì)胞核,脫氧核糖核酸相對(duì)集中在核質(zhì)區(qū)形成擬核,又叫核質(zhì)體、核區(qū)。由大型環(huán)狀雙鏈DNA纖絲不規(guī)則地折疊或纏繞而構(gòu)成的無核膜、核仁的區(qū)域無組蛋白,又稱細(xì)菌染色體。(2)質(zhì)粒細(xì)菌細(xì)胞中染色體以外的環(huán)狀雙螺旋DNA分子,穩(wěn)定遺傳。質(zhì)??梢元?dú)立進(jìn)行復(fù)制,有的質(zhì)粒也能整合到染色體上。對(duì)細(xì)菌的生存無決定性影響。7 區(qū)分菌落、菌苔、菌膜和菌環(huán)的概念。1 菌落:?jiǎn)蝹€(gè)菌體在固體平面培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖時(shí)形成肉眼可見的群體。該群體稱為菌落單一菌落由一個(gè)菌體繁殖而成2 菌苔:菌體在固體斜面培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖時(shí)形成的肉眼可見的群體。3 菌膜:菌體在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)繁殖時(shí),在液體表面形成的一層薄膜4 菌環(huán):菌體在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)繁殖8 研究菌落有哪些作用?1 分離純培養(yǎng) 2 計(jì)數(shù)9 芽孢、莢膜、菌膠團(tuán)、鞭毛的概念?l 芽孢的定義:某些種類細(xì)菌生長(zhǎng)發(fā)育到一定階段,于細(xì)胞內(nèi)形成的休眠體,又叫內(nèi)生芽孢l 莢膜的定義:細(xì)胞壁表面的粘性物,有一定外形,很厚,相對(duì)穩(wěn)定附著在細(xì)胞壁外。是細(xì)胞構(gòu)造的一部分。l 菌膠團(tuán)的定義:許多細(xì)菌的莢膜融合為一團(tuán)膠狀物,內(nèi)含多數(shù)細(xì)菌。l 鞭毛的定義:某些細(xì)菌從細(xì)胞質(zhì)膜和細(xì)胞壁伸至細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)細(xì)絲10 細(xì)菌芽孢的特性有哪些? 休眠細(xì)胞 不具有繁殖力 難染色 (壁厚質(zhì)濃) 抗逆性強(qiáng)(熱、紫外線、有毒物)11 放線菌菌絲形態(tài)由哪幾部分組成? (1)營(yíng)養(yǎng)菌絲 (2)氣生菌絲 (3)孢子絲 (4)分生孢子12 細(xì)菌和放線菌菌落的特點(diǎn)分別是什么? 細(xì)菌菌落一般特點(diǎn):凝膠狀、表面較光滑、濕潤(rùn)、與培養(yǎng)基結(jié)合不緊密,易用針挑起。 放線菌菌落一般特點(diǎn):(1)致密、堅(jiān)硬、多皺、不易用針挑起,不透明。(2)孢子成熟后,表面粉末狀,干燥13 細(xì)菌有哪些基本結(jié)構(gòu),有哪些特殊結(jié)構(gòu)? (一)細(xì)菌細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu) 1 細(xì)胞壁;2 細(xì)胞膜;3 原生質(zhì);4 核質(zhì)與質(zhì)粒; 5 內(nèi)含物(二)細(xì)菌細(xì)胞的特殊結(jié)構(gòu) 1 芽孢;2 莢膜;3 鞭毛;4 傘毛(纖毛)14 細(xì)菌的主要繁殖方式是什么?(一)裂殖 :一個(gè)母細(xì)胞分裂成兩個(gè)子細(xì)胞(二)芽殖:母細(xì)胞表面生一突起,漸長(zhǎng)大同母細(xì)胞分開,細(xì)胞壁全為新合成物質(zhì)。(巴斯德菌、芽生球菌、生芽桿菌。)第二章 真核微生物1 名詞解釋 營(yíng)養(yǎng)菌絲體 氣生菌絲體 芽殖 一個(gè)母細(xì)胞形成多個(gè)芽體。霉菌 具繁茂菌絲的真菌的統(tǒng)稱。假菌絲 芽殖迅速時(shí),子細(xì)胞未經(jīng)脫離又進(jìn)行出芽,形成的串列細(xì)胞(酵母菌)假根 根霉的匍匐枝與基質(zhì)接觸處分化形成的根狀菌絲。作用是固著和吸收營(yíng)養(yǎng)。菌核 菌絲團(tuán)組成的一種硬的休眠體。有暗色的外皮。環(huán)境適宜時(shí)生出分生孢子梗。吸器 某些寄生性真菌從菌絲上生出的旁枝,侵入寄主細(xì)胞形成指狀、球狀、叢枝狀結(jié)構(gòu)。吸收養(yǎng)料。2 說明霉菌的菌絲有哪些特點(diǎn)?(1)有隔菌絲與無隔菌絲無隔菌絲:?jiǎn)渭?xì)胞有隔菌絲:多細(xì)胞 (1多核 / 細(xì)胞)(2)菌絲特化的特殊結(jié)構(gòu)菌核、假根、吸器、菌索3 主要霉菌的代表屬與人類的關(guān)系如何? 毛霉 孢子梗直接從菌絲伸出,單生或分枝。生長(zhǎng)迅速。乳白色。分解蛋白質(zhì)制腐乳。分解淀粉用于酒曲 根霉 與毛霉的主要區(qū)別在于有假根和匍匐枝,與假根相對(duì)處向上生出孢囊梗。常見黑根霉、米根霉 引起饅頭等發(fā)霉;分解淀粉釀造業(yè)糖化菌(藥酒、酒曲) 曲霉 黑曲霉作酒 米曲霉作醬 黃曲霉食品變質(zhì)、物品發(fā)霉 青霉 點(diǎn)青霉、產(chǎn)黃青霉青霉素 污染果品、飼料、谷物 4 酵母菌的形態(tài)有哪些特點(diǎn)?一般為單細(xì)胞的子囊菌。寬15um,長(zhǎng)530um球形、卵圓形、香腸形、檸檬形等;易形成假菌絲5 霉菌如何進(jìn)行繁殖(從無性繁殖和有性繁殖兩方面說明)? (一) 無性繁殖(主要)1 菌絲片斷繁殖 2 產(chǎn)生無性孢子(主要): 游動(dòng)孢子、孢囊孢子、分生孢子、厚垣孢子(厚壁孢子)、粉孢子(節(jié)孢子)(二) 有性繁殖(不常出現(xiàn))形成有性孢子。僅發(fā)生在特定條件。卵孢子、接合孢子、子囊孢子、擔(dān)孢子經(jīng)過質(zhì)配、核配、減數(shù)分裂三個(gè)階段6 哪些霉菌屬于單細(xì)胞的?哪些霉菌屬于多細(xì)胞的?7 說明根霉的形態(tài)?霉菌的形態(tài):分枝或不分枝。管狀。直徑210um8 酵母菌、霉菌的菌落特征分別是什么?酵母菌的菌落形態(tài):與細(xì)菌相似,比細(xì)菌大、厚,不透明,表面光滑、濕潤(rùn)、粘稠,易用針挑起。多呈乳白色注:在液體培養(yǎng)基中形成沉淀、混濁、菌膜。霉菌的菌落特征:比細(xì)菌菌落大,由菌絲組成疏松的絨毛狀、絮狀或蜘蛛網(wǎng)狀,有的無固定大小,延至整個(gè)培養(yǎng)基中,產(chǎn)色素,使菌落顯色。9 如何區(qū)別細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌? 第三章 非細(xì)胞結(jié)構(gòu)微生物病毒Virus1 病毒的基本特征是什么? 沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)。 形體微小,具有比較原始的生命形態(tài)和生命特征。 嚴(yán)格活細(xì)胞寄生。在活體外無生命特征。 只含一種核酸RNA或DNA。 依靠自身的核酸進(jìn)行復(fù)制,DNA或RNA含有復(fù)制、裝配子代病毒所必須的遺傳信息。 缺乏完整的酶和能量系統(tǒng)。2 病毒的結(jié)構(gòu)怎樣?病毒粒子有哪些構(gòu)型?(一)多數(shù)病毒的基本結(jié)構(gòu)衣殼:成分蛋白質(zhì),包在外部。核心:成分核酸,在內(nèi)部。衣殼和核心組成 核衣殼 裸露病毒只有核衣殼結(jié)構(gòu) 包膜病毒核衣殼外包有包膜(二)病毒殼體的對(duì)稱性1 螺旋對(duì)稱型殼體 代表:煙草花葉病毒2 二十面體對(duì)稱型殼體 3 雙對(duì)稱型殼體 代表:大腸桿菌 T4噬菌體3 說明病毒和病毒粒子的區(qū)別。病毒是一種生物實(shí)體。具有化學(xué)大分子屬性,專性活細(xì)胞寄生,既具有細(xì)胞外的感染顆粒形式,又具有細(xì)胞內(nèi)的繁殖性基因形式的獨(dú)特非細(xì)胞型生物類群。病毒粒子位于細(xì)胞外環(huán)境中的成熟具侵染力的病毒顆粒;是病毒的細(xì)胞外顆粒形式;是病毒的感染性形式4 根據(jù)包含體在寄主細(xì)胞內(nèi)的部位可將昆蟲病毒分為哪幾種類型?(1)核型多角體病毒NPV細(xì)胞核(2)質(zhì)型多角體病毒CPV細(xì)胞質(zhì)(3)顆粒體病毒GV細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)(4)無包含體病毒5 類病毒、擬病毒、朊病毒的概念。 類病毒:一種只有侵染性小分子RNA而沒有蛋白質(zhì)的感染因子。裸露閉合環(huán)狀RNA分子。 (人的風(fēng)濕?。?擬病毒:存在于植物“真病毒”顆粒中的小的環(huán)狀RNA分子。 (苜蓿暫時(shí)性條斑病毒含有。) 朊病毒:只含蛋白質(zhì)外殼不含核酸的病毒(瘋牛病)6 噬菌體、烈性噬菌體和溫和噬菌體的概念。 噬菌體:侵染細(xì)菌、放線菌、真菌等微生物的病毒。 毒性噬菌體:侵染寄主引起寄主細(xì)胞裂解的噬菌體。 溫和噬菌體:侵染寄主不引起寄主細(xì)胞裂解的噬菌體。7 試述毒性噬菌體增殖的過程。1 吸附: 擴(kuò)散吸附在特定部位。 吸附專性強(qiáng)受體2 侵入: 核酸注入細(xì)菌細(xì)胞內(nèi),蛋白質(zhì)殼體留在外面3 復(fù)制: 在寄主細(xì)胞內(nèi):核酸復(fù)制、蛋白質(zhì)合成4 裝配: 組裝噬菌體5 釋放: 產(chǎn)生溶菌酶,寄主細(xì)胞破裂。新噬菌體從細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到外界8 原噬菌體、溶源現(xiàn)象的概念。 溶源現(xiàn)象:溫和噬菌體侵入寄主細(xì)胞后潛伏在細(xì)胞內(nèi)將核酸整和到寄主染色體上,同步復(fù)制,隨菌體分裂傳給子代。該現(xiàn)象稱之。 原(前)噬菌體:整合到細(xì)菌染色體上的噬菌體核酸。第四章 微生物的營(yíng)養(yǎng)生理1 說明微生物四種營(yíng)養(yǎng)類型的特點(diǎn)。(一)光能無機(jī)營(yíng)養(yǎng)型(光能自養(yǎng)型微生物) 藻類、藍(lán)細(xì)菌、光合細(xì)菌(紫硫細(xì)菌、綠硫細(xì)菌)1 碳源以CO2 為惟一碳源2 能源光轉(zhuǎn)變?yōu)?ATP(二)光能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型(光能異養(yǎng)型微生物) 紅螺菌屬.1 碳源有機(jī)物作供氫體和碳源,要有CO2存在。2 能源光具有光合色素(三)化能無機(jī)營(yíng)養(yǎng)型(化能自養(yǎng)型微生物) 氫細(xì)菌、硫化細(xì)菌、鐵細(xì)菌、硝化細(xì)菌。1 碳源以 C O2為惟一碳源。2 能源無機(jī)物氧化產(chǎn)生能量。產(chǎn)能有限,生長(zhǎng)遲緩。(四)化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型(化能異養(yǎng)型微生物) 絕大多數(shù)細(xì)菌、放線菌和全部真菌、病毒。1 碳源有機(jī)物2 能源有機(jī)物氧化獲得。2 培養(yǎng)基的概念。人工配制的適合于微生物生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。3 什么是合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基與半合成培養(yǎng)基的優(yōu)缺點(diǎn)?根據(jù)化學(xué)組成分類:(1)天然培養(yǎng)基:完全用天然物質(zhì)或其浸出汁配制。優(yōu)點(diǎn):配制方便,成本較低,營(yíng)養(yǎng)豐富。生產(chǎn)上用缺點(diǎn):成分不確定。(2)合成培養(yǎng)基: 全由化學(xué)成分已知的物質(zhì)配制的培養(yǎng)基。成分確定。高氏培養(yǎng)基、察氏培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn):成分確定,重復(fù)性強(qiáng),宜于科學(xué)研究 如菌種選育,遺傳分析。實(shí)驗(yàn)室用。缺點(diǎn):費(fèi)用較高。(3)半合成培養(yǎng)基:由部分天然物質(zhì)和一些成份已知的化學(xué)藥品配制而成。 牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn):營(yíng)養(yǎng)成分更全面、均衡。實(shí)驗(yàn)室、發(fā)酵業(yè)用得最多4 瓊脂作為培養(yǎng)基凝固劑具備哪些條件?瓊脂的特性:成分為多縮半乳糖,絕大多數(shù)微生物不能利用,融化溫度96 ,凝固溫度45,對(duì)微生物無毒性 5 區(qū)分基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基?(1)基礎(chǔ)培養(yǎng)基:定義:含有一般微生物生長(zhǎng)繁殖所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。例如:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(細(xì)菌)(2)加富培養(yǎng)基(營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基)定義:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)制成的營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基。例如:加入血清、血液、酵母浸膏、動(dòng)植物組織液作用:培養(yǎng)異養(yǎng)型微生物,富集、分離微生物(3)選擇培養(yǎng)基定義:將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基。特點(diǎn):加入相應(yīng)的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抑制不需要微生物的生長(zhǎng),利于所需要微生物的生長(zhǎng)。加富培養(yǎng)基:增加分離的微生物的數(shù)量,形成生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)。選擇培養(yǎng)基:抑制不需要的微生物的生長(zhǎng),使所需要的微生物增殖。(4)鑒別培養(yǎng)基定義:鑒別不同微生物類型的培養(yǎng)基。特點(diǎn):加入某種特殊化學(xué)物質(zhì),微生物生長(zhǎng)后 產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物作用:快速分類鑒定,分離篩選某微生物菌種6 什么是生長(zhǎng)因子?生長(zhǎng)因子分成哪幾類?概念:需求量不大,但對(duì)微生物的生長(zhǎng)有特殊作用的有機(jī)物質(zhì)。種類:維生素類硫胺素、生物素、核黃素等。氨基酸類蘇氨酸、亮氨酸等。堿基類嘌呤、嘧啶第五章 微生物的代謝1 微生物的有氧呼吸、無氧呼吸和發(fā)酵的概念。2 如何區(qū)分有氧呼吸、無氧呼吸和發(fā)酵?有氧呼吸定義:微生物氧化底物時(shí)以分子氧作為最終電子受體的氧化作用。最終電子受體氧氣 O2參與的微生物需氧和兼性厭氧微生物呼吸基質(zhì) (底物):化能異養(yǎng)微生物有機(jī)物化能自養(yǎng)微生物無機(jī)物 無氧呼吸定義:微生物氧化底物,底物氧化脫下的氫和電子經(jīng)呼吸鏈傳遞最終交給無機(jī)化合物的過程。最終電子受體無機(jī)物(NO3-、NO2-、CO2等)參與的微生物厭氧菌和兼性厭氧菌。呼吸基質(zhì)(底物)有機(jī)物 發(fā)酵 定義:以小分子有機(jī)物為最終電子受體的生物氧化過程。有機(jī)物為呼吸基質(zhì)的中間產(chǎn)物。最終電子受體有機(jī)物參與的微生物厭氧菌和兼性厭氧菌。不經(jīng)過電子傳遞體。是底物水平磷酸化。常見的發(fā)酵有:乙醇發(fā)酵、乳酸發(fā)酵、丁酸發(fā)酵3 什么是次生代謝產(chǎn)物?4 有哪幾種次生代謝產(chǎn)物?舉例。次生代謝:微生物合成一些對(duì)其本身的生命活動(dòng)沒有明確功能的物質(zhì)的過程。又為支路代謝次生代謝產(chǎn)物:微生物在次生代謝過程中合成的對(duì)其自身生命活動(dòng)沒有明確功能的物質(zhì)。常見的次生代謝產(chǎn)物:抗生素、激素、毒素、色素5 呼吸作用的概念。簡(jiǎn)生物氧化基質(zhì)釋放能量的過程。復(fù)生物氧化中,呼吸基質(zhì)脫下的氫和電子經(jīng)載體傳遞最終交給受體的生物學(xué)過程。主要呼吸基質(zhì):葡萄糖、果糖。6 赤霉素如何促植物生長(zhǎng)?(激素)赤霉素是植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑一種。主要促進(jìn)作物生長(zhǎng)發(fā)育、提早成熟、提高產(chǎn)量,打破種子等繁殖器官休眠。特別對(duì)雜交水稻制種中解決花期不遇有特殊功效。在葡萄、柑桔、菠蘿、蔬菜等作物廣泛使用。 7 根據(jù)微生物與氧氣的關(guān)系,可把微生物分成哪幾種類型? 1 需氧(好氣)微生物呼吸類型有氧呼吸培養(yǎng)方式固體表面,液體淺層,通氣,振蕩。如青霉,枯草桿菌等多種細(xì)菌放線菌真菌2 厭氧(嫌氣)微生物呼吸類型無氧呼吸和發(fā)酵培養(yǎng)方式抽真空;在N2、H2條件下;固體穿刺。如:乳酸桿菌,梭狀芽孢桿菌,產(chǎn)甲烷桿菌為生么有氧氣不能生活? 原因:有氧存在,代謝產(chǎn)生H2O2和O2-, H2O2有毒,該類微生物沒有分解H2O2的氧化酶3 兼性厭氧微生物呼吸類型無氧時(shí)發(fā)酵;有氧時(shí)有氧呼吸。如:大腸桿菌,酵母菌。第七章 微生物的生長(zhǎng)與環(huán)境條件1 微生物的生長(zhǎng)包括哪幾個(gè)方面?細(xì)胞物質(zhì)增加體積增大(個(gè)體發(fā)育)細(xì)胞數(shù)量增加個(gè)數(shù)增多(個(gè)體繁殖)2 微生物的純培養(yǎng)的概念。用哪些方法可以獲得微生物的純培養(yǎng)體?概念:由一個(gè)細(xì)胞繁殖得到的后代( 得到的是只含一種微生物的培養(yǎng)體)獲得純培養(yǎng)體的方法:在固體平板上常用下列三種方法1)稀釋平板分離法2)平板劃線分離法3) 涂布平板法3 微生物生長(zhǎng)曲線的概念。生長(zhǎng)曲線的各個(gè)分期的特點(diǎn)是什么?少量純菌接種到一定量的液體培養(yǎng)基內(nèi),在適宜的溫度下培養(yǎng),并定時(shí)取樣測(cè)定活細(xì)菌的數(shù)目和重量的變化,以活細(xì)菌個(gè)數(shù)的對(duì)數(shù)或細(xì)菌重量為縱坐標(biāo),以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)作圖,所得的曲線即為細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線。細(xì)菌生長(zhǎng)曲線分期及特點(diǎn)(1)適應(yīng)期特點(diǎn):初:細(xì)菌數(shù)目不增加,體積增長(zhǎng)快。后:個(gè)體菌體繁殖,個(gè)數(shù)少許增加。曲線平緩。大量誘導(dǎo)酶的合成應(yīng)用:縮短此期,提高設(shè)備利用率加大接種量 用對(duì)數(shù)期的種子 調(diào)整培養(yǎng)基的成分,使種子培 養(yǎng)基含有發(fā)酵培養(yǎng)基的成分(2)對(duì)數(shù)期特點(diǎn):分裂快,數(shù)目增多?;罹鷶?shù) 死菌數(shù)曲線直線上升此時(shí)細(xì)胞的大小、組成、生理特征等均趨于一致,代謝活躍,生長(zhǎng)速率高,代時(shí)穩(wěn)定應(yīng)用:接種用的好種子;代謝、生理研究的好材料(3)穩(wěn)定期特點(diǎn):儲(chǔ)存物積累,養(yǎng)料消耗多。 芽孢形成,抗生素產(chǎn)生。 繁殖速率下降,死亡速率上升。 新增菌死亡菌 曲線平坦應(yīng)用:發(fā)酵產(chǎn)物形成的重要時(shí)期(抗生素、氨基酸等), 生產(chǎn)上應(yīng)盡量延長(zhǎng)此期,提高產(chǎn)量,措施如下: 補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(補(bǔ)料) 調(diào)pH 調(diào)整溫度 (4)衰亡期 特點(diǎn):菌體死亡速度大于繁殖速度。 死亡菌活菌數(shù)。自溶。曲線下降應(yīng)用:一般不作應(yīng)用4 滅菌、消毒、抑菌、無菌操作、無菌、除菌的概念。滅菌:用理化方法殺死物體表面及內(nèi)部所有微生物(包括芽孢)的過程。滅菌劑.消毒:殺死病原微生物的措施。(消毒劑:用于消毒的化學(xué)藥劑).抑菌:(1)防腐:抑制霉腐微生物生長(zhǎng)的措施(理化因素)。 防腐劑(抑菌劑):用于防腐的化學(xué)藥劑。 (2)化療:抑制病原微生物生長(zhǎng)的措施。無菌操作:防止微生物進(jìn)入物體的技術(shù)。無菌:指沒有活的微生物(包括芽孢)。 6 除菌:應(yīng)用機(jī)械方法(過濾、離心分離、靜電吸附)除去液體或氣體中的微生物。5 根據(jù)微生物的生長(zhǎng)溫度及最適溫度的不同,可把微生物劃分成哪幾種類型?1 低溫型微生物(嗜冷微生物2中溫型微生物(嗜溫微生物3高溫型微生物(嗜熱微生物)6 試比較干燥熱空氣箱滅菌和高壓蒸汽滅菌的異同。為什么干熱滅菌比濕熱滅菌效果好?干燥熱空氣箱滅菌用法:160-170,2小時(shí)(利用熱空氣滅菌 ) 特點(diǎn):由于空氣傳熱穿透力差,菌體在脫水狀態(tài)下不易殺死。所以溫度高、時(shí)間長(zhǎng)。高壓蒸汽滅菌法利用水的沸點(diǎn)隨水蒸氣壓力的增加而上升,以達(dá)到高溫滅菌目的的方法。 方法:一般121(1kg/cm2或15磅/英寸2)20-30min適用:耐高溫物品如培養(yǎng)基,無菌水,培養(yǎng)皿。 注意事項(xiàng):滅菌開始排凈冷空氣;滅菌終了,緩慢降壓;滅菌結(jié)束,趁熱取出物品濕熱滅菌較干熱滅菌效果好的原因1) 特點(diǎn):溫度低、時(shí)間短、滅菌效果好。2) 滅菌效果好的原因: 菌體內(nèi)含水量越高凝固溫度越低。 蒸汽冷凝會(huì)放出潛熱。飽和水蒸汽穿透力強(qiáng)。濕熱易破壞細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)大分子的穩(wěn)定性,主要破壞氫鍵結(jié)構(gòu)。7 水活度、光氧化作用、酚系數(shù)的概念。l 水活度:水的可給性以水活度表示,用水的活度值aw為指標(biāo)。在一定溫度和壓力條件下,溶液中的蒸汽壓(p)與純水蒸汽壓(p0)之比。 l 光氧化作用:光線被細(xì)胞內(nèi)的色素吸收,當(dāng)有氧時(shí),細(xì)胞內(nèi)的一些酶、敏感成分失活,導(dǎo)致微生物死亡。無氧,則無損害。l 酚系數(shù): 用于比較其它消毒劑藥效的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。 被測(cè)消毒劑作一系列稀釋,使其在一定溫度、一定時(shí)間內(nèi)殺死測(cè)試微生物,與在同樣條件下達(dá)到同樣效果的酚的稀釋度的比值 8 配制培養(yǎng)基時(shí)可以用哪些手段調(diào)節(jié)pH值?1 培養(yǎng)基中的蛋白胨、氨基酸有一定的緩沖能力。加入緩沖物質(zhì)磷酸鹽、碳酸鹽等9 有哪些環(huán)境因素可以影響氧化還原電位?升高:通氧氣、加氧化劑、代謝產(chǎn)生H2、H2S、Fe2+、Fe3+、PH值下降降低:厭氣、加還原劑、PH值升高10 紫外線通過什么機(jī)制殺菌?在實(shí)際中如何應(yīng)用? 殺菌原理: (1)作用于相鄰的胸腺嘧啶,形成二聚體引起DNA結(jié)構(gòu)變形,阻礙正常的堿基配對(duì),從而造成菌的變異或死亡.(光復(fù)活酶可修復(fù),避光操作) (2)有氧時(shí),使氧變?yōu)樾律鷳B(tài)氧O殺菌。 應(yīng)用: 表面消毒或空氣滅菌、淺層水的滅菌。 育種的誘變劑 不能穿透玻璃11 有哪些有機(jī)化學(xué)藥物可以殺菌?(列出4種)1酚類 2醇類 3醛類 4酸類 5表面活性劑第八章 微生物生態(tài)1 微生物生態(tài)系統(tǒng)的特點(diǎn)(1)微環(huán)境(緊密圍繞微生物細(xì)胞的環(huán)境) (2)穩(wěn)定性:高度多樣性的群落能在一定程度上應(yīng)付環(huán)境條件的變化。(3)適應(yīng)性:微生物以改變?nèi)后w的結(jié)構(gòu)來適應(yīng)新環(huán)境。2 為什么說土壤是微生物生活的良好環(huán)境?空氣是微生物生活的環(huán)境嗎?1 提供養(yǎng)分 2 通氣保水 3滲透壓 4PH值 5保溫性(晝夜溫差、季節(jié)溫差變化?。? 土壤中有哪些微生物種類?微生物在土壤中的分布特點(diǎn)?(一)土壤中微生物的種類1)細(xì)菌 量最多。占全部土壤微生物總量的1/4. 種類最多、功能多樣。形態(tài):桿菌球菌螺旋狀菌。氧氣需要:好氧菌厭氧菌營(yíng)養(yǎng)類型:有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型無機(jī)營(yíng)養(yǎng)型。(2)放線菌(僅次于細(xì)菌)特點(diǎn):菌絲不發(fā)達(dá),多以孢子存在。 干旱、荒漠土放線菌比例升高。 堿性、有機(jī)物多的溫暖地帶酸性、貧瘠低溫的地帶。(3)真菌 (4)藻類與原生動(dòng)物(二)微生物在土壤中的分布體現(xiàn)分布不均勻的特點(diǎn)。1 土壤團(tuán)聚體(大部分)不均勻2 微生物的垂直分布 不均勻4 微生物之間有哪些相互關(guān)系?(一)互生關(guān)系 兩種獨(dú)自生活的生物共同生活可以相互獲利,或一種生物為另一種生物創(chuàng)造有利的條件。(二)共生關(guān)系 兩種生物生活在一起不能分離,彼此依賴,生理上相互分工,組織上形成新的結(jié)構(gòu)。(三)寄生關(guān)系 一種生物依賴另一種活生物獲取營(yíng)養(yǎng)進(jìn)行生活,使寄主受損甚至死亡。(四)競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系 多種微生物共同生活在一個(gè)環(huán)境中,因一種微生物優(yōu)先利用有限養(yǎng)料,致使另一種微生物養(yǎng)料缺乏生長(zhǎng)受阻。(五)獵食關(guān)系 一種生物捕食另一種生物為食并消化的現(xiàn)象(六)拮抗關(guān)系 微生物產(chǎn)生的特殊次生代謝產(chǎn)物能抑制或殺死一種或少數(shù)幾種微生物。5 附生微生物 定居于活植物莖、葉表面的微生物(地上部分)根圈 也稱根際。生長(zhǎng)的植物根系直接影響的土壤范圍。根系表面至幾毫米的土壤區(qū)域。有效吸收養(yǎng)分。根圈效應(yīng) 生活在根圈中的微生物,在數(shù)量、種類和活性上與根圈外的微生物相比,有一定的特異性。該現(xiàn)象稱之為根圈效應(yīng)根瘤 固氮微生物在植物根內(nèi)形成的共生組織。根瘤菌 能侵染豆科植物根部形成根瘤和固定大氣中的氮?dú)獾募?xì)菌。人工培養(yǎng)桿狀。類菌體 根瘤菌在根瘤中呈棒狀、“T”、 “Y”形,這種形態(tài)叫類菌體。無細(xì)胞壁。固氮。難培養(yǎng)菌根 真菌和植物根的共生聯(lián)合體菌根菌 能形成菌根的真菌外生菌根 菌根菌交織成菌套包在根系外。泡囊叢枝菌根 哈蒂氏網(wǎng) 菌套內(nèi)層有許多菌絲透過根的皮層進(jìn)入皮層組織,在外皮層細(xì)胞間蔓延,將細(xì)胞整個(gè)包裹起來,形成的一種特殊結(jié)構(gòu)6 根瘤菌的生理特性和根瘤菌的固氮特性分別是什么?根瘤菌的生理特性:好氧、化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型、無芽孢、革蘭氏染色陰性。根瘤菌的固氮特性:侵染性、寄生專一性(由菌體和植物兩者的遺傳性決定)、有效性7 如何區(qū)分有效根瘤和無效根瘤?根瘤固氮的標(biāo)志是什么?有效根瘤:個(gè)大、有固氮能力、粉紅色、含較多豆血紅蛋白。無效根瘤:個(gè)小,無固氮能力、淺白色或綠色,不含或少含豆血紅蛋白。根瘤有效性標(biāo)志:含類菌體;呈紅色。8 豆血紅蛋白的作用是什么?調(diào)節(jié)氧濃度和氧壓(低濃度和高流量的氧氣)吸收滲入根瘤內(nèi)的氧然后緩慢放出。與固氮正相關(guān)9 外生菌根對(duì)植物生長(zhǎng)的作有哪些?如何應(yīng)用外生菌根?1)對(duì)植物營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)的作用擴(kuò)大寄主植物的吸收面。產(chǎn)生生長(zhǎng)刺激素。2)對(duì)防御林木根部病害的作用外生菌根根圈微生物防御病菌侵染。菌套和哈蒂氏網(wǎng)的機(jī)械屏障作用。植物產(chǎn)生抑制病菌的物質(zhì)。產(chǎn)生抗生素。應(yīng)用: 在木材生產(chǎn)中用客土法和人工接種法使幼苗形成菌根。有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值10 叢枝菌根如何影響植物生長(zhǎng)?如何應(yīng)用叢枝菌根?叢枝菌根增加了根圈的范圍。增加了根圈微生物的數(shù)量。加強(qiáng)植物吸收磷素和其它元素可以減輕植物病害應(yīng)用: 豆科植物進(jìn)行根瘤菌和V-A菌根的雙接種;育苗苗圃、營(yíng)養(yǎng)缽育種用宿主繁殖方式接種可行。第九章 微生物在自然界中的物質(zhì)轉(zhuǎn)化1氨化作用:含氮有機(jī)物通過微生物的分解轉(zhuǎn)化成氨的作用。硝化作用:在有氧氣時(shí),微生物將氨氧化為硝酸的作用反硝化作用:硝酸鹽在通氣不良環(huán)境中(無氧),被反硝化細(xì)菌還原成NO2或 N2的過程。生物固氮作用:微生物還原空氣中的氮?dú)猓∟2)為氨的過程氨效應(yīng):環(huán)境中的氨或固氮酶固定的氨如果不及時(shí)轉(zhuǎn)化,超過一定濃度對(duì)固氮作用起抑制效應(yīng),阻遏固氮基因的表達(dá)。2 硝化作用和反硝化作用發(fā)生的條件有哪些?說說這兩個(gè)作用對(duì)農(nóng)業(yè)和環(huán)境生態(tài)的意義。硝化作用:在有氧氣時(shí),微生物將氨氧化為硝酸的作用反硝化作用:硝酸鹽在通氣不良環(huán)境中(無氧),被反硝化細(xì)菌還原成NO2或 N2的過程。硝化作用1 參加硝化作用的微生物硝化細(xì)菌:硝酸細(xì)菌、亞硝酸細(xì)菌(兩類細(xì)菌相伴而生,作用相連)2 硝化作用的農(nóng)業(yè)和環(huán)境意義:有利方面: (1)利于植物吸收,提高產(chǎn)量。(易溶于水,不被土粒吸附) (2)促進(jìn)難溶性磷酸鹽溶解 不利方面: (1)易隨水流失,造成浪費(fèi)和環(huán)境污染。 硝態(tài)氮肥料利用率在低于40。流失的硝酸鹽導(dǎo)致湖泊和近海的富營(yíng)養(yǎng)化。 (2)影響人類健康 植物累積NO3-N,青儲(chǔ)植物被反硝化細(xì)菌還原成NO2-N,在窯中積累,人吸入致死克服措施:(1)深施硝態(tài)氮肥料。 (2)集中施N素化肥。 (3)加施N肥增效劑反硝化過程(1)造成土壤和化肥氮素?fù)p失的重要原因:向土壤中施用硝化抑制劑可阻止反硝化作用。(2)破壞大氣層中的臭氧層:O3阻擋紫外線,可防止對(duì)生物的傷害。3 生物固氮在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的意義。(1)常溫、常壓,不消耗能源(與工業(yè)固氮比) (2)提高土壤的氮素養(yǎng)料(3)不污染環(huán)境 (4)保證了生態(tài)平衡4 試分析有機(jī)質(zhì)分解中的C/N 比值與土壤肥力的關(guān)系。如何用來指導(dǎo)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)?有機(jī)質(zhì)分解中的C/N 比值與土壤肥力的關(guān)系(1)C/N25:1,N全部進(jìn)行微生物合成作用,暫不向土壤釋放N.(2)C/N 小于25:1,N 除能滿足微生物合成作用外,富余氮素釋放到土壤中供植物吸收。(3)C/N 大于25:1,N 素不足,限制了微生物的生長(zhǎng)繁殖,從土壤中奪取有效氮,與植物爭(zhēng)氮。對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的指導(dǎo)應(yīng)用(1)C/N 比值很大的稻草、麥稈不能直接、單獨(dú)施用于正在生長(zhǎng)的田地。 原因:很長(zhǎng)時(shí)間內(nèi),會(huì)引起作物的缺氮現(xiàn)象。 正確施用:先堆積腐漚,降低其 C/N值,后施用。(2)堆漚制肥時(shí),加入一些含氮量高的人畜糞尿,加速腐爛分解的速度。(3)根據(jù)有機(jī)肥料的腐熟度(C/N問題)決定施肥和耕翻時(shí)期、深度和方式。G+與G-菌比較成分占細(xì)胞壁干重的%G+細(xì)菌G-細(xì)菌肽聚糖含量很高(5090)含量很低(10)磷壁酸含量較高(50)無類脂質(zhì)一般無(2)含量較高(20)蛋白質(zhì)無含量較高微生物吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的方式有哪幾種?各有何特點(diǎn)?試比較它們的異同。 答:微生物吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)方式的比較吸收方式(名稱)定義特點(diǎn)吸收的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)單純擴(kuò)散是指細(xì)胞膜在無載體蛋白參與下,單純依靠物理擴(kuò)散的方式讓許多小分子、非電離分子尤其是親水分子被動(dòng)通過的一種物質(zhì)運(yùn)輸方式。1、由高濃度向低濃度運(yùn)輸;2、無特異載體蛋白;3、不需消耗能量;4、運(yùn)輸速度慢;5、在運(yùn)輸過程中物質(zhì)不發(fā)生化學(xué)變化等。水、溶于水的氣體(如CO2、O2)、小的極性分子(如尿素、乙醇、甘油、脂肪酸等)、和某些氨基酸、離子等。促進(jìn)擴(kuò)散指物質(zhì)在運(yùn)輸過程中,必須借助存在細(xì)胞膜上的特異載體蛋白的協(xié)助,但不消耗能量的一類擴(kuò)散性運(yùn)輸方式。1、由高濃度向低濃度運(yùn)輸;2、需特異載
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