GB5009.148-2014食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)植物性食品中游離棉酚的測(cè)定.pdf

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) GB 5009.1482014 2014-12-01 發(fā)布 2015-05-01 實(shí)施 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物性食品中游離棉酚的測(cè)定 GB 5009.1482014 I 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)代替 GB/T 5009.1482003植物性食品游離棉酚的測(cè)定 。 本標(biāo)準(zhǔn)與 GB/T 5009.1482003 相比，主要變化如下： 修改了原理； 修改了檢出限； 增加了附錄 A 中樣品加標(biāo)液相色譜圖 A.2。 GB 5009.1482014 1 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物性食品中游離棉酚的測(cè)定 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了植物油或以棉籽餅為原料的其他液體食品中游離棉酚的測(cè)定方法。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于植物油或以棉籽餅為原料的其他液體食品中游離棉酚的測(cè)定。 2 原理 植物油中游離棉酚經(jīng)無(wú)水乙醇提取，利用高效液相色譜法檢測(cè)，色譜峰保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。 以棉籽餅為原料的水溶性液體樣品中的游離棉酚經(jīng)無(wú)水乙醚提取，濃縮至干，再加入乙醇溶解，利用高效液相色譜法檢測(cè)，色譜峰保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。 3 試劑和材料 注：除非另有說(shuō)明，本方法所用試劑均為分析純，水為 GB/T 6682 規(guī)定的一級(jí)水。 3.1 試劑 3.1.1 磷酸（H3PO4）。 3.1.2 無(wú)水乙醇（CH3CH2OH）。 3.1.3 丙酮（C3H6O）。 3.1.4 氮?dú)猓∟2）。 3.1.5 甲醇（CH3OH）。 3.2 試劑配制 磷酸溶液：取300 mL水，加6.0 mL磷酸，混勻，經(jīng)0.45 m濾膜過(guò)濾。 3.3 標(biāo)準(zhǔn)品 棉酚(C32H34O10) 標(biāo)準(zhǔn)品：純度95%。 3.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 3.4.1 棉酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1.0 mg/mL）：準(zhǔn)確稱(chēng)取0.1 g（精確到0.0001 g）棉酚純品，用丙酮溶解，并定容至100 .00mL。 3.4.2 棉酚中間標(biāo)準(zhǔn)溶液（50g/mL）：取1 mg/mL棉酚儲(chǔ)備液5.0 mL于100 mL容量瓶中，用無(wú)水乙醇定容至刻度。 3.4.3 棉酚標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確吸取 1.00mL、2.00 mL、5.00 mL、8.00 mL 棉酚標(biāo)準(zhǔn)溶液于 10 mL 容量瓶中，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，此溶液相應(yīng)于 5 g/mL、10 g/mL、25 g/mL、40 g/mL 的標(biāo)準(zhǔn)系列。 GB 5009.1482014 2 4 儀器和設(shè)備 4.1 高效液相色譜儀：帶紫外檢測(cè)器或者二極管陣列檢測(cè)器。 4.2 濃縮儀。 4.3 離心機(jī)：3000 r/min。 5 分析步驟 5.1 試樣制備 5.1.1 植物油：稱(chēng)取油樣 1g（精確至 0.01g）于離心試管中，加入 5 mL 無(wú)水乙醇，劇烈振搖 2 min，靜置分層（或冰箱過(guò)夜） ，取上清液濾紙過(guò)濾，4000 r/min 離心 10 min，上清液過(guò) 0.45 m 濾膜，即為試樣液。 5.1.2 以棉籽餅為原料的水溶性液體樣品： 稱(chēng)取樣品 10 g （精確至 0.01g） 于離心試管中， 加入 10 mL無(wú)水乙醇，振搖 2 min，靜置 5 min，取上層乙醚層 5 mL，用氮?dú)獯蹈?，?1.0 mL 無(wú)水乙醇定容，過(guò)0.45 m 濾膜，即為試樣液。 5.2 色譜測(cè)定 5.2.1 參考色譜條件 色譜柱：C18柱，250 mm 4.6 mm，5 m，或具同等性能的色譜柱。 流動(dòng)相：甲醇磷酸溶液=8515。 流速：1.0 mL/min。 柱溫： 40 1。 測(cè)定波長(zhǎng)：235 nm。 進(jìn)樣體積：10 L。 5.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別將棉酚標(biāo)準(zhǔn)工作液注入高效液相色譜儀中，記錄峰高或峰面積。以峰高或者峰面積為縱坐標(biāo)，以棉酚標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（標(biāo)準(zhǔn)溶液液相色譜圖參見(jiàn)附錄A中圖A.1）。 5.2.3 試樣測(cè)定 將試樣液注入高效色譜儀中，記錄峰高或者峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算的待測(cè)液中棉酚的濃度（樣品加標(biāo)液相色譜圖參見(jiàn)附錄A中圖A.2）。 6 分析結(jié)果的表述 試樣5.1.1中游離棉酚含量按公式（1）計(jì)算： mcX5 （1） 式中： X試樣中棉酚的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）； m試樣的質(zhì)量，單位為克（g）； c測(cè)定試樣液中棉酚的含量，單位為微克每毫升（g/mL）； 5為 5.1.1 折合所用無(wú)水乙醇的體積，單位為毫升（mL） 。 GB 5009.1482014 3 試樣 5.1.2 中游離棉酚含量按公式（2）計(jì)算： mcX2 （2） 式中： X試樣中棉酚的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）； m試樣的質(zhì)量，單位為克（g）； c測(cè)定試樣液中棉酚的含量，單位為微克每毫升（g/mL）； 2為 5.1.2 折合所用無(wú)水乙醇的體積，單位為毫升（mL） 。 計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留二位有效數(shù)字。 7 精密度 在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的 10 % 。 8 其他 植物油體樣品取樣 1.0 g 時(shí)，檢出限為 2.5 mg/kg ，定量限為 7.5 mg/kg。以棉籽餅為原料的水溶性液體樣品取樣 10 g 時(shí)，檢出限為 0.25 mg/kg，定量限為 0.75 mg/kg。 GB 5009.1482014 4 附錄 A 棉酚標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品加標(biāo)色譜圖 A.1 棉