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質(zhì)譜在化學(xué)與生物中的應(yīng)用,朱政 PIN:19120051203146 Email:,質(zhì)譜的方法與原理,傳統(tǒng)的有機(jī)質(zhì)譜分析,有機(jī)質(zhì)譜過(guò)去主要用于測(cè)定和分析普通的有機(jī)分子,對(duì)于多肽、蛋白質(zhì)及其他生物大分子則顯得無(wú)能為力。主要是因?yàn)檫@些風(fēng)物分子的分子量太大并且很脆弱,在達(dá)到其氣化高溫時(shí)就已分解。80年代以來(lái),有機(jī)質(zhì)譜獲得突破性進(jìn)展,相繼發(fā)明了快原子轟擊電離、電噴霧電離和基質(zhì)輔助激光解吸電離等軟電離技術(shù)。借助上述技術(shù),生物大分子可轉(zhuǎn)變成氣相離子,從而使質(zhì)譜分析跨入生物大分子的研究領(lǐng)域,并形成一個(gè)新的分支學(xué)科生長(zhǎng)點(diǎn)生物質(zhì)譜學(xué)。,化學(xué)電離法,生物大分子的分子量測(cè)定,蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定 蛋白質(zhì)類生物大分子分子量的測(cè)定有著十分重要的意義,如對(duì)均一蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定有促進(jìn)意義。 常規(guī)的分子量測(cè)定主要有滲透壓法、光散射法、超速高心法等。,簡(jiǎn)單計(jì)算:,從圖中可以看出同時(shí)出現(xiàn)了823電荷態(tài),并且表明P11542,P21696。用聯(lián)立方程可算出肌紅朊的分子量:,實(shí)際上計(jì)算機(jī)可直接得到表明電荷態(tài)與分子量的質(zhì)譜圖。,生物質(zhì)譜在蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用,電噴霧質(zhì)譜技術(shù)和基質(zhì)輔助激光解吸附質(zhì)譜技術(shù)是誕生于80年代末期的兩項(xiàng)軌電離技術(shù)。這兩項(xiàng)技術(shù)的出現(xiàn)使傳統(tǒng)的主要用于小分子物質(zhì)研究的質(zhì)譜技術(shù)發(fā)生了革命性的變革。它們具有高靈敏度和高質(zhì)量檢測(cè)范圍,使得在pmol的水平上準(zhǔn)確地分析分子量高達(dá)幾萬(wàn)到幾十萬(wàn)的生物大分子成為可能,并得到迅速的發(fā)展。,電噴霧質(zhì)譜技術(shù),電噴霧質(zhì)譜技術(shù)(Electrospray Ionizsation MassSpectrometry,ESI-MS)是在毛細(xì)管的出口處施加一高電壓,所產(chǎn)生的高電場(chǎng)使從毛細(xì)管流出的液體霧化成細(xì)小的帶電液滴,隨著溶劑蒸發(fā),液滴表面的電荷強(qiáng)度逐漸增大,最后液滴崩解為大量帶一個(gè)或多個(gè)電荷的離子,致使分析物以單電荷或多電荷離子的形式進(jìn)入氣相。電噴霧離子化的特點(diǎn)是產(chǎn)生高電荷離子而不是碎片離子,使質(zhì)量電荷比(m/z)降低到多數(shù)質(zhì)量分析儀器都可以檢測(cè)的范圍,因而大大擴(kuò)
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