云南栽培稻種SSR遺傳多樣性比較.docVIP

云南栽培稻種ssr遺傳多樣性比較植物chinesebulletinofbotany2009,44(4):457_463,www.doi:1o.3969.issn.16743466.2009.04.007?研究報(bào)告-云南栽培稻種ssr遺傳多樣性比較呂廣磊一,藺忠龍2,3白現(xiàn)廣3,kyung.homa4,付堅(jiān)2劉芳芳3,黃興奇2,jae.gyungway4,程在全2云南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院,昆明650201:云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)與種質(zhì)資源研究所,昆明6502230云南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,昆明650091:韓國(guó)農(nóng)業(yè)生物技術(shù)遺傳資源所,韓國(guó)水原4417o7摘要采用64個(gè)ssr標(biāo)記對(duì)96份云南水稻(oryzasafiva)地方品種和選育品種的遺傳多樣性進(jìn)行比較分析.結(jié)果發(fā)現(xiàn)64個(gè)標(biāo)記都具有多態(tài)性,共檢測(cè)到741個(gè)等位基因,每個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)檢測(cè)到的等位基因數(shù)為229個(gè),平均11.57個(gè):nei基因多樣性指數(shù)(,_fe)范圍在0.345(rm321)一0.932(rm1)之間,平均為o.56.水稻品種的遺傳多樣性并非按地理位置均勻分布,而是在相似系數(shù)為0.17的水平上明顯分為2個(gè)不同類群,即秈稻類群和粳稻類群,且秈粳亞種間的ssr多樣性差異不明顯,秈稻平均等位基因數(shù)(ap)和nei基因多樣性指數(shù)(ap=10.6,he=o.46)與粳稻品種(ap=10.7,he=o.48)十分接近,可能與這些品種間存在一定頻率的基因交流有關(guān).糯稻和非糯稻在秈稻群和粳稻群中都有表現(xiàn),沒有特別的分布規(guī)律.云南栽培稻選育品種與地方稻親緣關(guān)系較近,其遺傳基礎(chǔ)可能來源于云南水稻地方品種.本研究結(jié)果表明,ssr標(biāo)記能較好地區(qū)分云南栽培稻品種,且云南水稻地方品種遺傳多樣性豐富,存在大量的優(yōu)質(zhì)性狀可供育種實(shí)踐選擇.關(guān)鍵詞栽培稻,遺傳多樣性,選育品種,地方品種,ssr呂廣磊,藺忠龍,白現(xiàn)廣,kyung-homa,付堅(jiān),劉芳芳,黃興奇,jae-gyungway,程在全(2009).云南栽培稻種ssr遺傳多樣性比較.植物44.457-463.水稻(oryzasativa)是我國(guó)最重要的糧食作物之一,其播種面積和總產(chǎn)量均居糧食作物首位(程式華和李建,2007).全國(guó)約60%的人13以大米為主食.我國(guó)近代有計(jì)劃,有目的地進(jìn)行水稻良種選育始于1919年,經(jīng)過80多年的育種實(shí)踐,培育了5000多份水稻新品種并投入生產(chǎn)應(yīng)用(華蕾等,2007).云南得天獨(dú)厚的自然環(huán)境為形成豐富的稻作資源創(chuàng)造了條件,同時(shí)多樣的民族文化又不斷促進(jìn)著稻作資源的豐富和發(fā)展,使云南成為中國(guó)栽培稻的遺傳多樣性中心(高立志和洪德元,1999).云南栽培稻具有豐富的品種多樣性,包括水稻和陸稻,粘稻和糯稻以及秈稻和粳稻(zengeta1.,2001),同時(shí)也包括地方品種和選育品種,是同時(shí)擁有全國(guó)3種野生稻資源的兩個(gè)省份之一.這些豐富的水稻品種在保證當(dāng)?shù)丶Z食安全和維持農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展方面起到重要作用,同時(shí)對(duì)水稻品種改良具有重要的潛在價(jià)值(盧寶榮等,2002).但目前對(duì)云南栽培稻尚缺乏系統(tǒng)的研究,在實(shí)際生產(chǎn)中利用云南栽培稻的優(yōu)良性狀相當(dāng)困難.因此不斷用地方種或野生近緣種擴(kuò)大現(xiàn)有育成水稻品種的遺傳基礎(chǔ),有利于選育出新的優(yōu)質(zhì),高產(chǎn),抗逆品種,以源源不斷地滿足糧食可持續(xù)生產(chǎn)的需要.楊官品等(1998)通過對(duì)238份水稻品種的ssr(simplesequencerepeat)分析,認(rèn)為現(xiàn)代水稻品種的遺傳多樣性并不比地方種低.齊永文等(2006)的研究證實(shí)我國(guó)水稻品種自20世紀(jì)50年代以來遺傳多樣性有下降的趨勢(shì),但自20世紀(jì)80年代始,遺傳基礎(chǔ)又有所擴(kuò)大.華蕾等(2007)采用40個(gè)ssr標(biāo)記,比較分析了20世紀(jì)50年代(78份)和近1o年(73份)共151份我國(guó)常規(guī)稻主栽品種的遺傳差異,結(jié)果表明近10年來我國(guó)常規(guī)稻主栽品種丟失了一部分等位基因,因此提出在水稻育收稿日期:2008-11-28;接受日期:2009-0313基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金(no.30660090),云南省科技攻關(guān)項(xiàng)目(no.2006ng34),云南省基礎(chǔ)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(no.2008c004z),云南省人才培養(yǎng)項(xiàng)目(no.2006cy0144)和云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院與韓國(guó)rda合作項(xiàng)目通訊作者.e-mail:458植物44(4)2009種工作中應(yīng)加強(qiáng)更廣泛的種質(zhì)親本的選擇.云南是中國(guó)地方稻種的基因多樣性中心,更是世界上最大的稻種遺傳生態(tài)多樣性中心之一(zengetal.,2001,2003).然而過去對(duì)云南水稻品種的研究只著重從局部分析云南水稻地方品種或選育品種的遺傳多樣性,而未全面地對(duì)云南栽培稻品種的遺傳多樣性進(jìn)行分析,而且采用的分子標(biāo)記和材料數(shù)量較少,不能充分說明問題.為此,本研究利用大量的ssr標(biāo)記全面分析云南栽培稻代表材料的遺傳多樣性,同時(shí)比較云南水稻地方品種與選育品種之間可能的親緣關(guān)系.共采用64個(gè)ssr標(biāo)記對(duì)96份云南水稻地方品種和選育品種的遺傳多樣性進(jìn)行比較分析,從而為水稻育種親本的選擇和開展分子標(biāo)記輔助選擇育種提供參考依據(jù).1材料與方法1.1供試材料根據(jù)水稻(oryzasatival_)的形態(tài),生理特性和抗病性如耐冷,優(yōu)質(zhì)(直鏈淀粉含量在15%以下),抗白葉枯病和香米等特性,從6000份云南水稻地方品種和選育品種中選取96份代表性品種(表1).所有品種在云南省種質(zhì)資源庫中都有不同的保存編號(hào).1.2方法1.2.1基因組dna的提取水稻基因組dna的提取采用改良的ctab法(murrayandthompson,1980).1.2.2ssr擴(kuò)增反應(yīng)及聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)ssr擴(kuò)增反應(yīng)及聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)在韓國(guó)農(nóng)業(yè)生物技術(shù)遺傳資源所(nationalinstituteofagriculturalbiotechnology,niab)進(jìn)行.針對(duì)水稻抗病,抗冷,優(yōu)質(zhì)和香味等特性根據(jù)已發(fā)表的水稻微衛(wèi)星引物序列(concettaeta1.,2004;余顯權(quán)等,2005;張濤等,2008;劉洋等,2008),選擇分布于水稻12條染色體上的64對(duì)ssr引物(l,表2)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析.pcr儀為mjresearch生產(chǎn)的ptc一200型梯度熱循環(huán)儀.pcr反應(yīng)總體積為25li包括50mmol-lkci,10mmol?l_.trisci(ph9.0),1.5mmol-l-.mgcl2,200pmol-ldntp,50100ng的水稻基因組dna,1個(gè)單位的taq聚合酶和o.1bmol-l引物.擴(kuò)增程序?yàn)?94.c預(yù)變性5分鐘94.c變性1分鐘,55.c退火1分鐘,72.c延伸1分鐘,40個(gè)循環(huán):72.c延伸1o分鐘.采用濃度為6%的非變性聚丙烯酰胺凝膠恒壓電泳分析擴(kuò)增產(chǎn)物.用銀染法染色后拍照.1.2,3統(tǒng)計(jì)與分析每對(duì)ssr引物檢測(cè)1個(gè)位點(diǎn),視每條多態(tài)性帶為1個(gè)等位基因,將檢測(cè)到的每條帶視為1個(gè)性狀,有此帶時(shí)賦值為1,無此帶時(shí)賦值為0.每2份材料間的遺傳差異按nei(1987)的方法計(jì)算遺傳距離d,即d=1一【2my,(+mv)】.式中mx和mv分別為x和y兩材料的總片段數(shù),mx為兩材料的公共片段數(shù).根據(jù)所得的遺傳距離,用統(tǒng)計(jì)分析軟件ntsyspc2.1進(jìn)行聚類分析,并繪制樹狀圖.1.2.4遺傳多樣性評(píng)價(jià)多態(tài)位點(diǎn)的平均等位基因數(shù)ap,即ap=.apdnp.式中api為第i個(gè)多態(tài)位點(diǎn)上的等位基因數(shù),1p為所檢測(cè)的多態(tài)位點(diǎn)的總數(shù).平均基因多樣性指數(shù)he,即he=11in.q.io式中qj為第i個(gè)位點(diǎn)第j個(gè)等位基因的頻率,n為檢測(cè)的位點(diǎn)數(shù).2結(jié)果與討論2.1ssr多態(tài)性分析用篩選到的覆蓋水稻所有染色體的64對(duì)ssr引物對(duì)96份云南栽培稻材料進(jìn)行ssr.pcr擴(kuò)增,發(fā)現(xiàn)64個(gè)ssr位點(diǎn)全部具有多態(tài)性,共擴(kuò)增出741個(gè)多態(tài)性片段,分子量變異范圍為9o一365bp,每個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)檢測(cè)到的等位基因數(shù)為229個(gè),平均每一位點(diǎn)檢測(cè)表1水稻品種及其來源table1cultivarvarietiesandsourcesofriceusedinthisstudy呂廣磊等:云南栽培稻種ssr遺傳多樣性比較459no.nameofvarietiesoriginclassificationno.nameofvarietiesoriginclassificationlandrace49heijienuoshuangbaixianindica1xiaobaigu1lanchanxianjaponica50haonuoyanggengmaxianjaponica2xiaobaigu2lanchanxianindica51ga0shanxiaobaigujinpingxianindica3beizinuopuerxianja.)onica52xiushuigujiangchengxianindica4xihuangnuomojiangja.)onlca53dachinuojiangchengxianindica5kunmingxiaobaigukunmingja.)onlca54baiwulugujiangchengxianindica6xintuanheigulijiangja.)onlca55yimingjiangchengxianindica7banjiemangweixixianja.)onlca56xiaobainuojiangchengxianindica8laoluochuanlufengxianja.)onlca57hongjulaopigujiangchengxianindica9ashugujiangchengxianja.)onlca58annangujiangchengxianindica10hongiiandaogujiangchengxianja.)onlca59simaonuogujiangchengxianindica11laozhaogujjangchengxianja.)onlca60jiudigujiangchengxianjaponica12wulugujiangchengxianj.)onlca61dingbangujiangchengxianjaponica13xiyuanjiangjiangchengxjanindica62liandaogujiangchengxianindica14sanbangqishlluo1oehongjaponica63heikenuogujian9chengxianindica15sanbangqish_luo2ruiliindica64maoxiannuojiangchengxianjaponica16sanbangqisuo3tengch0ngxianjaponica65daxiangnuogujjangchengxianindica17daxiangrujiangchengxianjaponica66xiangnuomenglianxianindica18haonuonaijenglianxianjaponica67beizinuoxuanweilndica19niganximengxianjaponica68aogenaximengxianindica20huangpixiangmojiangxianindica69daxiangnuojingdongxianjaponica21zhushinuomojiangxianjaponica70xinhuagujianchuanxianjaponica22xiaohuanuomojiangxianjaponica71chengjiangh0ngguchengjiangxianjaponica23honggujinghongxianjaponica72dabaigumojiangxianjaponica24huangxinnuolianghexianjaponicaimprovedvariety25damaonuolianghexianjaponica73hexi39yunnanjaponica26xiangnuoyingjiangxianjaponica74hexi40yunnanjaponica27dabaigulinxiangqvindica75hexi41yunnanlndica28dabainuolinxiangqvindica76hexi42yunnanjaponica29lengshuigujiangchengxianjaponica77yunleng10yunnanjaponica30shandixjaobaigulanchanxianjaponica78yunleng13yunnanjapomca31erpigulangchangxianindica79yunleng14yunnanjapomca32erzaogulangchangxianjaponica80yunleng22yunnanjapomca33heibeizigulangchangxianjaponica81yunleng24yunnanja.3onlca34maxiangupuerxianindica82yunleng25yunnanja.3onica35qitougujingdongxianjaponica83yinguangyunnanja.3onlca36honglaohanjingdongxianjaponica84dianxi4yunnanja.3onlca37gaojiaonuojingdongxianindica85dianxi6yunnanja.3onlca38bailianjiagujingdongxianjaponica86dianchao601yunnanja.:)onlca39erkuaimojiangxianjaponica87dalijing4yunnanja.)onica40dashaoguxinpingxianindica88yunlu28yunnanja.)onlca41zhongbaimiyimenxianindica89yunlu29yunnanja.3onlca42daligushuangbaixianindica90jing95-512yunnanja.3onlca43yuxinuoyuxiindica91fengdao14yunnanja.3omca44dayangguguangnanxianindica92fengdao15yunnanja.3onlca45dongnuotengchongxianindica93gaojing63yunnanjaponica46beiziguxuanweiindica94zhanjing13yunnanjaponica47tuanjienuofuningxianindica959326yunnanjaponica48heizhiganchannixianindica96hejing9yunnanlndica460植物44(4)2009表2ssr位點(diǎn)及其等位基因數(shù)table2ssrlociinvestigatedandtheirallelenumbersinricelocusnumberchr0mlocusnumberchrom.ofosomeofosomeallelesallelesrm2381rm1221o5rm580111rm5647135rm220161rm13125rm100381rm225116rm121691mrg2392156rm1032101rm3814106rm1291rm1o346rm581rm253126rm672rm31587rm7192rm339137rm11082rm1306117rm236132rm25678rm3271o2rm30848rm250182rm40778rm1313122rm264148rm15462rm1376108rm174152rm16o149rm8573rm34999rm5711o3rm5471129rm4113rm2581o1orm16873rm32121orm25193rm17191orm3436153rm2221210rm6676163rm2021311rm13563rm20622rm187114rm2241411rm1153144rm2291311rm1359224rm2541o11rm252184rm18122211rm267155rm309812mrg2295125rm17912rm2685rm5191o12到11.57個(gè)等位基因.本研究結(jié)果與朱作峰等(2002)提出的栽培稻基因多樣性下降,雜合度降低,等位基因數(shù)減少的結(jié)論略有不同,這主要是因?yàn)楸狙芯恐羞x取的云南栽培稻品種絕大部分屬于云南地方品種,這些地方品種的人為種間交流及其產(chǎn)地具有的復(fù)雜地理氣候條件造成了其品種的多樣化.nei基因多樣性指數(shù)(產(chǎn),e)范圍在o.345(rm321)一0.932(rm1)之間,平均為0.56.由于nei基因多樣性指數(shù)是等位基因數(shù)和頻率的函數(shù),因此具有較高基因多樣性指數(shù)值的ssr標(biāo)記(如rm1)具有較高的檢測(cè)效率.根據(jù)云南稻作資源目錄和云南稻種資源核心種質(zhì)庫記載,本研究所選的96份云南栽培稻中有60份屬于粳稻品種,36份屬于秈稻品種.其中粳稻品種占所有品種的比例為62.9%,共檢測(cè)到684個(gè)等位基因,占等位基因總數(shù)的92.3%,不同位點(diǎn)的等位基因數(shù)為229個(gè),平均10.7個(gè),平均nei基因多樣性指數(shù)為0.48.秈稻品種的ssr多樣性與粳稻品種十分接近,在36份秈稻品種中檢測(cè)到的等位基因數(shù)為676個(gè),占總數(shù)的91.2%,不同位點(diǎn)的等位基因數(shù)為422個(gè),平均10.6個(gè),平均he為0.46.這與華蕾等(2007)的研究結(jié)果有所不同,他們認(rèn)為我國(guó)常規(guī)稻主栽品種秈粳亞種間ssr多樣性差異明顯,秈稻平均等位基因數(shù)(p=4.4)和he(0.458)大于粳稻品種(ap=4.0,he=o.395).本研究中秈粳亞種間ssr多樣性差異不明顯可能有兩方面的原因,一方面所選栽培稻品種中地方品種占絕大多數(shù)并且品種數(shù)目粳稻大于秈稻,另一方面也可能與這些品種間存在一定頻率的基因交流有關(guān).2.2聚類分析根據(jù)nei(1987)的方法計(jì)算遺傳距離,用upgma法(sokalandmichener,1958)對(duì)所有材料進(jìn)行聚類分析,并繪制樹狀圖.結(jié)果如圖1所示,所有供試材料大致可分為2大類群,即栽培稻第1類群和栽培稻第2類群,這些品種的遺傳多樣性并非均勻地按地理位置分布,而是在相似系數(shù)為o.17的水平上明顯分為2個(gè)不同類群:秈稻類群和粳稻類群.糯稻和非糯稻品種散布在秈稻群和粳稻群之中,沒有特別的分布規(guī)律.選育品種絕大多數(shù)屬于粳稻品種,其中較多品種與地方稻親緣關(guān)系較近,其遺傳基礎(chǔ)可能來源于云南水稻地方品種.此外,品種問的遺傳差異與其采集地的關(guān)系不很明顯.但來自同一地區(qū)的品種較多地聚在一起,遺傳背景較近,而從云南不同地區(qū)采集的同一品種的遺傳背景并不相近,遺傳多樣性相當(dāng)豐富.因此需要制定合適的策略以有效保護(hù)云南水稻地方品種的遺傳多樣性.各類群之間的遺傳多樣性存在差異.從聚類圖呂廣磊等:云南栽培稻種ssr遺傳多樣性比較461010028圖196份云南水稻栽培品種的ssr聚類分析圖中數(shù)字代表水稻品種編號(hào),同表1.045coefficient063figure1ssrdendrogramof96varietiesofcultivatedricefromyunnanthenumbersinthefigurerepresentedtheno.ofricevarieties,whichwasindicatedintable1081住侶伯笛伸髓0挖仃5;s;0盯昭:g跎丌g;g:0科卯g柏帕駝2.j玎鉍侶w船;2帖5:睨佰#;站f;的侶町462植物44(4)2009(圖1)中可以看出各品種問的相似系數(shù)為0.17-0.81,表明這些水稻品種間的遺傳差異確實(shí)較大,其中粳稻類群的平均相似系數(shù)為0.43,秈稻類群的平均相似系數(shù)為o.37.比較不同材料間的遺傳距離可以看出,秈稻類群間的平均遺傳距離大于粳稻類群間的平均遺傳距離,說明秈稻類群?jiǎn)柕牟町惔笥诰绢惾?這與由平均nei基因多樣性指數(shù)所得出的結(jié)論有所不同,可能是由于兩者的評(píng)價(jià)指標(biāo)不同所導(dǎo)致.對(duì)名稱相同而來自不同產(chǎn)地的云南水稻地方品種進(jìn)行聚類分析(圖1),發(fā)現(xiàn)它們的親緣關(guān)系并不都十分接近,如分別來自德宏,瑞麗和騰沖的三磅七十籮品種,其中三磅七十籮1(來自德宏)和三磅七十籮3(來自騰沖)的親緣關(guān)系十分接近,屬于粳稻品種,而三磅七十籮2(來自瑞麗)卻和它們的親緣關(guān)系十分疏遠(yuǎn),屬于秈稻品種.由聚類圖可以看出三磅七十籮1與三磅七十籮3的同源性最高,即親緣關(guān)系最近,這可能與二者屬于同一個(gè)品系有關(guān),也可能是由于德宏和騰沖兩地地理位置較近,人為種間交流或自然原因造成的.而有些來自不同產(chǎn)地的名稱相同的水稻品種有較大差異,主要是因?yàn)樵颇系靥幧锒鄻有灾行?具有復(fù)雜的地理氣候條件和豐富多樣的民族文化,從而導(dǎo)致了對(duì)水稻品種需求的多樣化,實(shí)際上這些材料的遺傳背景并不相同,未必是1個(gè)品種或1個(gè)基因型.朱明雨等(2004)認(rèn)為云南水稻品種尤其是地方水稻品種具有豐富的遺傳多樣性.本研究進(jìn)一步證實(shí)了該結(jié)論,表明云南栽培稻受地理?xiàng)l件和民族文化的影響較大,利用ssr標(biāo)記可以確定云南地方水稻品種之間的遺傳差異并進(jìn)行譜系分析,將不同來源和不同生態(tài)型的品種劃分到相應(yīng)類群.大量研究表明,實(shí)驗(yàn)中選用引物的對(duì)數(shù)對(duì)聚類分析結(jié)果影響很大,肖小余等(2006)提出引物雖然用得越多越好,但是存在成本和效率的問題.同時(shí)ssr引物的開發(fā)對(duì)多樣性分析也非常重要(王桂玲等,2007).本實(shí)驗(yàn)中所選用的64對(duì)引物覆蓋水稻的12條染色體.既滿足了實(shí)驗(yàn)的需要,而且成本較低,效率較高.通過對(duì)云南栽培稻品種的ssr分析表明,云南水稻地方品種遺傳多樣性豐富,有大量的優(yōu)質(zhì)性狀在育種實(shí)踐中可供選擇.遺傳多樣性是生物多樣性研究的核心,它可以反映物種的遺傳背景,育種潛力和利用價(jià)值,對(duì)保護(hù)和發(fā)掘利用優(yōu)良物種具有重要意義.眾多的研究表明目前中國(guó)雜交水稻親本的遺傳資源匱乏(王三良和許可,1996;賀浩華等,2006),現(xiàn)有可利用資源的遺傳差異較狹窄,而遺傳差異較大的資源又難以很好地應(yīng)用于生產(chǎn)中.這種矛盾可能正是導(dǎo)致目前雜交水稻產(chǎn)量,品質(zhì)和抗性難以大幅度提高的重要原因之一(張濤等,2008),因此雜交水稻突破性育種成就的取得主要依賴于種質(zhì)資源的掌握和利用.地方稻雖然遺傳資源豐富,但在實(shí)際生產(chǎn)中難以得到更為有效的利用,其主要原因是目前對(duì)它們的研究相對(duì)較少,而本研究結(jié)果可為水稻育種親本選配,雜種優(yōu)勢(shì)的有效利用和開發(fā)新的遺傳資源提供參考信息.參考文獻(xiàn)程式華,李建(2007).現(xiàn)代中國(guó)水稻.北京:金盾出版社.pp.15.高立志,洪德元(1999).中國(guó)稻屬研究的主要進(jìn)展.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)32,1046.賀浩華,羅小金,朱昌蘭,賀曉鵬,傅軍如,孫俊立,張洪亮,李自超(2006).雜交稻部分不育系與恢復(fù)系的ssr分類.作物32.169175.華蕾,袁筱萍,余漢勇,王一平,徐群,湯圣祥,魏興華(2007).我國(guó)水稻主栽品種ssr多樣性的比較分析.中國(guó)水稻科學(xué)21,150-154.劉洋,徐培洲,張紅宇,徐建第,吳發(fā)強(qiáng),吳先軍(2008).水稻抗稻瘟病pib基因的分子標(biāo)記輔助選擇與應(yīng)用.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)41,914.盧寶榮,朱有勇,王云月(2002).農(nóng)作物遺傳多樣性農(nóng)家保護(hù)的現(xiàn)狀及前景.生物多樣性1o,409415.齊永文,張冬玲,張洪亮,王美興,孫俊立,廖登群,魏興華,裘宗恩,湯圣祥,曹永生,王象坤,李自超(2006).中國(guó)水稻選育品種遺傳多樣性及其近5o年變化趨勢(shì).科學(xué)通報(bào)51,693-699.王桂玲,秦智偉,周秀艷,趙咫尺(2007).黃瓜果瘤的遺傳及ssr標(biāo)記.植物學(xué)通報(bào)24,168172.王三良,許可(1996).我國(guó)秈型雜交水稻育種現(xiàn)狀,問題與對(duì)策.雜交水稻11(3),14.肖小余,王玉平,張建勇,李仕貴,榮廷昭(2006).四川省主要雜交稻親本的ssr多態(tài)性分析和指紋圖譜的構(gòu)建與應(yīng)用.中國(guó)水稻科學(xué)20,17.楊官品,maroofmas,張啟發(fā),秦昌華,羅忠訓(xùn)(1998).水稻一多拷貝微衛(wèi)星dna多態(tài)性分析.遺傳20,2730.余顯權(quán),蔣向輝,吳海濱,趙德剛,方宣鈞(2005).貴州地方耐冷水稻品種的ssr遺傳多樣性分析.西南農(nóng)業(yè)18,14.張濤,鄭家奎,徐建第,蔣開鋒,吳先軍,汪旭東(2008).香稻品種的遺傳多樣性研究.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)41,625635.朱明雨,王云月,朱有勇盧寶榮(2004).云南地方水稻品種遺傳多樣性分析及其保護(hù)意義.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)23,187191.朱作峰,孫傳清,付永彩,張培江,王象坤(2002).用ssr標(biāo)記比較亞洲栽培稻與普通野生稻的遺傳多樣性.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)35.14371441.concettaa,annam,marcoa,marchettiaa,shankar,parkwd(2004).developmentofdnamarkerssuitableformarkerassistedselectionofthreepigenesconferringresis-呂廣磊等:云南栽培稻種ssr遺傳多樣性比較463tancetomultiplepyriculariagfiseapathotypes.cropsci44.1790-1798.murraymg,thompsonwf(198o).rapidisolationofhighmo-lecularweightplantdna.nucleicacidsres8,43214325.neim(1987).molecularevolutionarygenetic.newyork:colum?biauniversitypress.pp.190191.sokalrr,michenercd(1958).astatisticmethodforevaluatingsystematicrelationships.univkansasscibull28,14091439.zengyw,lizc,yangzy,wangxk,shesq,zhanghl(2001).ecologicalandgeneticdiversityofricegermplasminyunnan,china.pfanfgenetresournews/125.2428.zengyw,shensq,lizc,yangzy,wangxk,zhanghl,wengs(2003).ec0geographicandgeneticdiversitybasedonm0rph010gicaicharactersofindigenousrice(oryzasalival.)inyunnan,china.genetresourcropevol50,567577.comparativeassessmentofsimplesequencerepeatgeneticdiversityincultivatedricefromyunnanguangleilq一,zhonglonglin一,xianguangbai3jkyung?homa,jianfu,fangfangliu.xingqihuang.jaegyungway,zaiquanchengcollegeofagriculturalandbiotechnology,yunnanagriculturaluniversity,kunming650201,china;biotechnologyandgeneticgermplasminstitute,yunnanacademyofagriculturalsciences,kunming650223,china.collegeoflifesciences,yunnanuniversity,kunming650091,chinageneticresourcedivision,nationalinstituteofagriculturalbiotechnology,suwon441707,r.0.koreaabstractatotalof64simplesequencerepeat(ssr)markerswereusedtoinvestigatethegeneticdiversityof96ricelandracesandimprovedvarietiesf