臨床免疫學(xué)與檢驗第2章抗原抗體反應(yīng)多媒體.ppt

第二章 抗原抗體反應(yīng),第一節(jié) 抗原抗體反應(yīng)的原理 一、抗原抗體結(jié)合力 二、抗原抗體的親和性和親和力 三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體,第二節(jié) 抗原抗體反應(yīng)的特點 一、特異性 二、可逆性 三、比例性 四、階段性,第三節(jié) 影響抗原抗體反應(yīng)的因素 一、反應(yīng)物自身因素 二、環(huán)境因素,第四節(jié) 免疫學(xué)檢測技術(shù)的類型,思考題 小結(jié),第一節(jié) 抗原抗體反應(yīng)的原理,抗原抗體反應(yīng):指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。 物質(zhì)基礎(chǔ): 抗原表位與抗體高變區(qū)間的互補(bǔ)結(jié)合 抗原表位與抗體高變區(qū)的溝槽分子表面的結(jié)合 抗原抗體之間的結(jié)合力 親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體,靜電引力 （electrostatic forces） 范德華引力:作用最小 （van der Waals interactions） 氫鍵:最具特異性 （hydrogen bond ） 疏水作用力:作用最大 （hydrophobic interactions）,抗原抗體結(jié)合力示意圖,一、抗原抗體結(jié)合力,抗體分子上一個抗原結(jié)合點與對應(yīng)的抗原決定簇之間相適應(yīng)而存在著的引力，是抗原抗體間固有的結(jié)合力,親和力(affinity),抗原抗體親和力示意圖,二、抗原抗體的親和力和親合力,抗體結(jié)合部位與抗原表位之間結(jié)合的強(qiáng)度,親合力(avidity),抗原抗體親合力示意圖,可見反應(yīng),抗原抗體復(fù)合物 (疏水膠體),電解質(zhì),抗原 (親水膠體),抗體 (親水膠體),+,三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體,第二節(jié) 抗原抗體反應(yīng)的特點,特異性 可逆性 比例性 階段性,特異性：抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)的專一性,抗原抗體反應(yīng)特異性示意圖,分子基礎(chǔ):抗原表位與抗體分子高變區(qū)之間空間構(gòu)型的互補(bǔ)性,一、特異性,兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原表位，可與彼此相應(yīng)的抗血清發(fā)生反應(yīng),交叉反應(yīng)（cross reactions）,抗原抗體交叉反應(yīng)示意圖,二、可逆性,可逆性：抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合成復(fù)合物后，在一定條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性,影響因素： 抗體對相應(yīng)抗原的親合力親合力越高，結(jié)合越牢固，越不易解離 環(huán)境因素對復(fù)合物的影響pH、離子強(qiáng)度,前帶(prezone)：抗體過量 后帶(postzone)：抗原過量 等價帶(equivalence zone)： 抗原抗體比例合適,抗原抗體反應(yīng)比例性示意圖,比例性：抗原與抗體發(fā)生可見反應(yīng)需遵循一定的量比關(guān)系,三、比例性,第一階段：特異性結(jié)合階段，反應(yīng)快，不可見 第二階段：反應(yīng)可見階段，反應(yīng)慢，出現(xiàn)凝集、 沉淀和細(xì)胞溶解等現(xiàn)象,四、階段性,第三節(jié) 影響抗原抗體反應(yīng)的因素,抗原、抗體反應(yīng)物的自身因素 環(huán)境因素,一、反應(yīng)物自身因素,抗原:理化性狀、表位種類和數(shù)目 抗體:來源、特異性、親和性、效價,電解質(zhì): 生理鹽水或緩沖液 酸堿度: pH6pH9 溫 度: 1540，37最適,二、環(huán)境因素,第四節(jié) 免疫學(xué)檢測技術(shù)的類型,按實際用途分為: 免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry technique,IHCT) 免疫測定(immunoassay),按檢測現(xiàn)象分為: 放射免疫技術(shù) 熒光免疫技術(shù) 酶免疫技術(shù) 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù) 金免疫技術(shù),按測定反應(yīng)體系的物理狀態(tài)分為: 均相免疫測定(homogenous immunoassay） 非均相免疫測定(heterogenous immunoassay),標(biāo)記免疫技術(shù)：用熒光物質(zhì)、放射性核素、酶或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)等標(biāo)記抗原或抗體，進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)后，通過檢測標(biāo)記物對抗原或抗體進(jìn)行定性、定位或定量分析,1什么是抗原抗體反應(yīng)？ 抗原抗體反應(yīng)的原理是什么？ 2抗原抗體的結(jié)合力有哪些？ 3抗原抗體反應(yīng)有哪些特點？ 4如何理解抗原抗體反應(yīng)的特異性和交叉反應(yīng)？ 5什么是抗原抗體反應(yīng)的可逆性？有何應(yīng)用？ 6如何理解抗原抗體反應(yīng)的親和力和親合力？ 7抗原抗體反應(yīng)體系中為何要確定抗原、抗體的最適比例？ 8抗原抗體反應(yīng)有哪些影響因素？ 9基于抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)檢測技術(shù)有哪些？ 10什么是標(biāo)記免疫技術(shù)？標(biāo)記免疫技術(shù)有哪些類型？,思考題,小結(jié),抗原抗體反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。 抗原抗體之間的結(jié)合力涉及靜電引力、范德華引力、氫鍵和疏水作用力。 抗原抗體反應(yīng)的特點是特異性、可逆性、比例性和