(好資料)3_急性中毒性腎功能不全

三、急性中毒性腎功能不全【實驗?zāi)康摹?復(fù)制急性中毒性腎功能不全的動物模型。2觀察急性腎功能不全時動物血氣、酸堿、血尿素氮、血清鉀及尿的變化，分析其發(fā)生機制?！緦嶒炘怼坎捎媚I毒物重金屬HgCl2溶液造成家兔急性腎小管壞死，復(fù)制急性腎功能不全的動物模型，通過觀察動物的血氣、酸堿、血尿素氮、血清鉀及尿的變化，學(xué)習(xí)急性腎衰時內(nèi)環(huán)境的變化?！緦嶒瀯游铩考彝?，體重1.52.5kg。【實驗藥品與器材】1%HgCl2溶液，3%戊巴比妥鈉溶液或20%氨基甲酸乙酯溶液，1%普魯卡因溶液，生理鹽水，1%肝素生理鹽水溶液；兔臺，手術(shù)器械，1ml和5ml注射器，試管，滴管，漏斗，吸管，試管夾，酒精燈，試管架，頸動脈插管，血氣分析儀，生化分析儀，離心機，光電比色計，水浴鍋?！居^察指標】全血：血氣分析儀測定pH值、PaCO2、HCO3-、K+、Na+和Cl-；血清：生化分析儀測定BUN；尿：尿量、尿蛋白定性和鏡檢；腎：大體、剖面?！緦嶒灧椒ㄅc步驟】1取家兔兩只，一只為正常對照，一只為中毒實驗兔。于實驗前一天稱重后，實驗兔皮下或肌肉注射1%HgCl2（按1.51.7ml/kg，一次注射），造成急性中毒性腎功能不全模型，對照兔則在相同部位注射同量的生理鹽水，作為對照。將兩只兔籠均置于大漏斗上，收集尿液,測量24h尿量。2實驗開始，家兔稱重后，20%氨基甲酸乙酯溶液(0.51g/kg體重)或3%戊巴比妥鈉（30mg/kg體重）耳緣靜脈注入麻醉后，仰臥固定于兔臺。下腹部剪毛，在恥骨聯(lián)合上1.5cm處作長約4cm的正中切口，分離皮下組織，沿腹白線切開腹膜，暴露膀胱，穿刺取出全部尿液，供尿蛋白定性和尿液鏡檢。3頸部正中切口，分離一側(cè)頸總動脈，頸動脈插管內(nèi)注入肝素生理鹽水溶液，進行頸動脈插管。4抽取0.5ml動脈血作血氣分析，取3ml動脈血（滴入肝素數(shù)滴后）離心（1500轉(zhuǎn)/分，510分鐘），取血清供尿素氮測定用。5尿常規(guī)檢查：(1)將尿液1500轉(zhuǎn)/分離心510分鐘。(2)顯微鏡檢查 取尿沉渣，涂在玻片上，觀察有無異常成分（細胞和管型）。(3)尿蛋白定性檢查 取大試管盛尿液，傾斜試管于酒精燈上，將試管中的尿加熱至沸騰，觀察有無混濁，加數(shù)滴醋酸，再加熱至沸騰，混濁不退為蛋白陽性，按其混濁程度以-、+、+、+、+表示之?！?”表示尿液清晰無混濁“+”表示尿液出現(xiàn)輕度白色混濁（含蛋白0.010.05g%）“+”表示尿液稀薄乳樣混濁（含蛋白質(zhì)0.050.2g%）“+”表示尿液乳濁或有少量絮片存在（含蛋白0.20.5g%）“+”表示尿液出現(xiàn)絮狀混濁 (含蛋白質(zhì)0.5g%)如加醋酸后混濁消失，是因加醋酸可除去磷酸鹽或碳酸鹽所形成的白色混濁。6血清尿素氮的測定取三只試管分別標號后按下表操作：試劑(ml)1（空白管）2（標準管）3（樣品管）尿素氮試劑505050二乙酰單肟試劑050505蒸 餾 水01尿素標準液011：5稀釋的血清01將上述各管充分搖勻，置沸水浴中加熱15分鐘，用自來水冷卻3分鐘，在540nm波長下比色，記錄標準管的光密度讀數(shù)（D標）及樣品管的光密度讀數(shù)（D樣）。計算每100ml血清中尿素氮的含量(mg)=0.002=10=血清尿素氮(mg%) （公式12-1）原理：血清尿素在強酸條件下與二乙酰單肟和氨硫脲煮沸，生成紅色復(fù)合物（二嗪衍生物）7形態(tài)學(xué)觀察：將對照及中毒家兔一并處死，取出腎臟，稱重，計算腎重與體重之比。觀察并比較2只家兔腎臟的大體形態(tài)、顏色、光澤、條紋等。組織切片示教：于顯微鏡下觀察皮質(zhì)腎小管上皮有無明顯的變化、壞死、脫落；管腔有無蛋白、紅細胞、管型等?！緦嶒灲Y(jié)果與分析】 全血 血清 尿 腎pH值 paCO2 HCO3- K+Na+K+ BUN 尿量 蛋白 鏡檢 大體剖面12【思考題】1根據(jù)什么判斷急性腎功能不全模型復(fù)制成功？2各指標變化的機制是什么？附錄：血清尿素氮測定試劑的配制12%二乙酰單肟試劑 稱取二乙酰單肟2g，蒸餾水溶解并加至100ml。2尿素氮試劑 取濃H2SO444ml，85%H3PO466ml，溶于100ml蒸餾水中，冷至室溫依次加硫氨脲50mg，溶解后再加硫酸鎘1.62g(3CdSO4.8H2O)或2.0 g(3CdSO4.6H2O)，溶解后加蒸餾水至1升，存冰箱，可保存6月。3尿素氮標準儲備液(20mg%) 精確稱取尿素4