肝素抗凝血漿對釩酸鹽氧化法測定總膽紅素的影響.docVIP

肝素抗凝血漿對釩酸鹽氧化法測定總膽紅素的影響 張偉雯楊鳳嘯：廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院廣東廣州510150 【摘要】目的 探討肝素抗凝血漿對釩酸鹽氧化法測定總膽紅素（TotalBilirubin，TB）結(jié)果的影響。方法采用釩酸鹽氧化法平行測定300例患者的血清和肝素抗凝血漿標(biāo)本中TB含量，并對兩種方法的檢測結(jié)果進(jìn)行分析和比較。結(jié)果肝素抗凝血漿致釩酸鹽氧化法測定TB結(jié)果降低。TB含量在1?7300mol/L范圍內(nèi)，肝素抗凝血漿的TB檢測結(jié)果普遍低于血清245mol/L；隨著TB濃度的升高，檢測結(jié)果的偏差越大；血清TB值y對于肝素抗凝血漿TB值?x?的校正公式為：?y?=1?1974?x?+2?2047；線性試驗和方法比較試驗均顯示兩者具有良好的相關(guān)性。結(jié)論肝素抗凝血漿致釩酸鹽氧化法測定TB結(jié)果降低。 【關(guān)鍵詞】肝素釩酸鹽氧化法總膽紅素 【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofheparinonthetotalbilirubinleveldetectedbyvanadateoxidationmethod. MethodsVanadateoxidationmethodwasappliedtodetecttotalbilirubininarangeof300heparinanticoagulantplasmaandserumsamples. ResultsHeparinmadelowresaltinthedetectionofvanadateoxidationmethod;thetotalbilirubininheparinanticoagulantplasmawaslowerthanserum. ConclusionInordertoensuretheaurateandrisibleresult;theserumsamplesshouldbeadoptedinsteadofheparinanticoagulantplasmasamples. 【Keywords】Heparin,VanadateOxidationMethod,TotalBilirubin 【Authorsaddress】TheThirdAffiliatedHospitalofGuangzhouMedicalUniversity,Guangzhou,GuangdongProbince510150PRC? doi:10.3969/j.issn.1671-332X.xx.06.030 膽紅素是老化的紅細(xì)胞中血紅蛋白經(jīng)過單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)處理后的代謝產(chǎn)物，血液中膽紅素的改變能反映出機(jī)體中某些臟器（如肝臟、膽囊、腎臟等）的功能狀況?1?。其準(zhǔn)確有效的測定有助于判斷黃疸的程序和類型。長期以來，人們一直在尋找測定膽紅素行之有效又適合臨床需求的方法，而釩酸鹽氧化法測定膽紅素的誕生，恰恰解決了這方面的需求，因此，釩酸鹽氧化法也成為目前各臨床實驗室測定膽紅素中應(yīng)用較為普遍的方法之一。由于釩酸鹽氧化法使用的反應(yīng)起動劑（釩酸鹽）本身呈淺黃綠色，在450nm處有一定的吸光度（A值），反應(yīng)啟動后的讀點比實際值略高，從而使反應(yīng)前后的A值減小，這種差異在A值變化較小的低值總膽紅素（TotalBilirubin，TB）的檢測中易于體現(xiàn)出來。在臨床生化檢測工作中，血清的分離需要2030min，若對一些急診項目的檢測嘗試以肝素抗凝血漿取代血清，可以減少等待血清分離的時間，實現(xiàn)結(jié)果的快速報告?2?。但在測定過程中我們發(fā)現(xiàn)，用肝素抗凝血漿代替血清測定TB時（釩酸鹽氧化法），其測定結(jié)果往往偏低。為進(jìn)一步解釋此現(xiàn)象，筆者收集300份來本院就診的患者的血清和肝素抗凝血漿標(biāo)本進(jìn)行TB的測定，分析比較兩者之間的差別，以評價肝素抗凝血漿是否滿足于臨床實驗室的檢測需求。? 1材料與方法? 1.1儀器? 日立Hitachi7170全自動生化分析儀。? 1.2檢測試劑與器材? 利德曼生化股份有限公司生產(chǎn)的總膽紅素測定試劑盒-TBIL（釩酸鹽氧化法；Lot：305062D）。主要組成成分R1：檸檬酸緩沖液（100mM），反應(yīng)促進(jìn)劑（1mmol/L），表面活性劑（2mmol/L）；R2：磷酸緩沖液（10mM），偏釩酸鈉（4mmol/L）。陽普醫(yī)療科技股份有限公司生產(chǎn)的普通真空管和肝素抗凝管。? 1.3檢測原理? 在pH3?0附近，表面活性劑和釩酸作用于膽紅素，使之氧化成膽綠素，而此時膽紅素所持有的黃色減少，由此測定釩酸鹽氧化前后450nm處吸光度差值求出樣本中膽紅素濃度?3?。 1.4方法? 1.4.1標(biāo)本采集選擇300例來我院就診的患者，采用真空采血針按常規(guī)方法采集兩管靜脈血：一管為普通真空管，離心分離血清；另一管為肝素抗凝管，離心分離血漿。2h內(nèi)完成檢測。另以每100l同一患者的血清和肝素抗凝血漿標(biāo)本分裝，置于-20冰凍避光保存。? 1.4.2實驗操作采用同一儀器，同一試劑，同一方法，同一操作人員，盡可能做到其它條件一致。分別對300份血清和肝素抗凝血漿標(biāo)本平行測定其TB含量，并將結(jié)果記錄下來，進(jìn)行對比分析。? 1.4.3線性試驗取無明顯脂血溶血的高TB病人血清和肝素抗凝血漿標(biāo)本各一例，用釩酸鹽氧化法測得血清TB=335?1mol/L，血漿TB=286?4mol/L。對兩例標(biāo)本用生理鹽水進(jìn)行2、4、8、16、32、64倍稀釋，共計取得7個不同濃度