（藥劑學(xué)專業(yè)論文）環(huán)孢素固體分散體膠囊的研制及載體促吸收機(jī)理的研究.pdf

目錄 中文摘要 英文摘要 前言 第一章環(huán)孢素固體分散體的制備及體外研究 】材料和儀器 2 實(shí)驗(yàn)方法和內(nèi)容 2 1h p l c 方法的建立與評價(jià) 2 1 1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 2 1 2 回收率試驗(yàn) 2 1 3 精密度試驗(yàn) 2 1 4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 2 2c y a 在不同濃度s l s 中溶解度的測定及溶出介質(zhì)的選擇 2 3 固體分散體的制備 2 3 1 溶劑法 2 3 2 溶劑熔融法 2 4 物理混合物的制備 2 5 溶解度實(shí)驗(yàn) 2 6c y a 固體分散體的物相鑒定 2 6 1 差示掃描量熱分析 2 6 2x 射線衍射分析 2 6 3 熱臺(tái)顯微鏡 2 6 4 表面形態(tài) 2 6 5 紅外光譜( f t i r ) 2 7 體外溶出度測定 2 8 數(shù)據(jù)處理 2 8 1 龜相似因子法 2 8 2 平均溶出時(shí)間( m d t ) 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論 3 1h p l c 方法的建立與評價(jià) 3 1 1 輔料及樣品的h p l c 圖譜 3 1 2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 3 1 3 回收率試驗(yàn) 1 4 1 1 2 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 4 4 4 4 4 4 5 5 5 5 6 7 一一_ii_一一_一一1_一一，i，i，l，i，l，l，i 1； 3 6 1 2 以f 1 2 7 為載體制備的固體分散體 3 6 1 - 3 以f 6 8 為載體制備的l 司體分散體 3 6 1 4 以p v p 為載體制備的固體分散體 3 6 2 以蒸餾水為溶出介質(zhì) 3 6 2 1 以p s 為載體 3 6 2 2 以f 1 2 7 、f 6 8 為載體 4 小結(jié) 參考文獻(xiàn) 第二章環(huán)孢素膠囊的制備及穩(wěn)定性研究 1 材料和儀器 2 實(shí)驗(yàn)方法和內(nèi)容 2 1 固體分散體制備過程各因素對藥物溶出的影響 2 2 休止角的測定 2 3 主藥與輔料相互作用研究 2 4 粉末吸濕性考察 2 5 臨界相對濕度( c r h ) 的測定 2 6c y a 膠囊的制備 2 7c y a 膠囊溶出度試驗(yàn) 2 7 1h p l c 方法的建立與評價(jià) 2 7 1 1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 3 5 7 8 8 0 2 2 7 7 7 7 8 8 8 9 9 9 9 9 3 3 3 3 3 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 2 7 1 2 回收率試驗(yàn) 2 7 1 3 精密度試驗(yàn) 2 7 1 4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 2 7 2c y a 膠囊溶出度測定方法 2 7 3c y a 溶出度均一性試驗(yàn)及溶出曲線 2 8 膠囊中c y a 含量測定方法 2 8 1h p l c 方法的建立與評價(jià) 2 8 1 1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 2 8 1 2 精密度試驗(yàn) 2 8 1 3 提取回收率試驗(yàn) 2 9 有關(guān)物質(zhì)的測定 2 9 1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 2 9 2 有關(guān)物質(zhì)的測定方法 2 1 0c y a 膠囊的穩(wěn)定性試驗(yàn) 2 1 0 1 影響因素試驗(yàn) 2 1 0 1 1 光照試驗(yàn) 2 1 0 1 2 高溫試驗(yàn) 2 1 0 1 3 高濕試驗(yàn) 2 1 0 2 加速試驗(yàn) 2 1 0 3 長期試驗(yàn) 2 1 1x 一射線衍射分析 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論 3 1 固體分散體制備各因素對藥物溶出的影響 3 2 休止角的測定 3 3 主藥與輔料相互作用研究 3 4 粉末吸濕性 3 5 臨界相對濕度 3 6 溶出度試驗(yàn)中h p l c 分析方法評價(jià) 3 6 1 相關(guān)圖譜 3 6 2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 3 6 3 回收率試驗(yàn) 3 6 4 精密度 3 6 5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 3 7 溶出度均一性試驗(yàn)及溶出曲線 鑼如如如如如如如如釘釘釘釘引釘”釘”記鉉鉉記鉉鈣鈐鉆卯鼴弼鈔鈔勢 3 8c y a 膠囊的含量測定方法 3 8 1 相關(guān)圖譜 3 8 2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 3 8 3 提取回收率試驗(yàn) 3 8 4 精密度試驗(yàn) 3 9 有關(guān)物質(zhì)的測定方法 3 1 0c y a 膠囊的穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果 3 1 0 1 影響因素試驗(yàn) 3 1 0 1 1 光照試驗(yàn) 3 1 0 。1 2 高溫試驗(yàn) 3 1 0 1 3 高濕試驗(yàn) 3 1 0 2 加速試驗(yàn) 3 1 0 3 長期試驗(yàn) 3 1 lx 一射線衍射分析結(jié)果 4 小結(jié) 參考文獻(xiàn) 第三章環(huán)孢素固體分散體大鼠口服生物利用度研究 1 材料和儀器 2 實(shí)驗(yàn)方法和內(nèi)容 2 1 血藥濃度測定方法的建立與評價(jià) 2 1 1 色譜條件 2 1 2 血樣處理 2 1 3 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 2 1 4 絕對回收率 2 1 5 方法回收率 2 1 6 日內(nèi)和日間精密度 2 1 7 檢測限 2 2c y a 固體分散體的大鼠口服吸收實(shí)驗(yàn) 2 2 1 給藥與取樣 2 2 2 血藥濃度測定 2 2 3 藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)計(jì)算和統(tǒng)計(jì)處理 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 3 1 血藥濃度測定方法的建立與評價(jià) 3 1 1 空白血樣及樣品的h p l c 圖譜 2 2 2 3 4 4 4 4 5 6 7 8 9 o 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 q q q q q 們甜酡以配“甜甜甜舒鉑卯醯矽加鉈記記記住記乃刀乃仍乃仍刀弭弭 弭 似 3 1 2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 3 1 3 絕對回收率 3 1 4 方法回收率 3 1 5 日內(nèi)和日問精密度 3 2c y a 固體分散體及s a n d i m m u nn e o r a l 的血藥濃度數(shù)據(jù) 3 3 模型擬合及藥動(dòng)學(xué)參數(shù) 4 小結(jié)0 0 參考文獻(xiàn) 第四章環(huán)孢素膠囊的人體生物利用度及生物等效性試驗(yàn) l 材料和儀器 2 實(shí)驗(yàn)方法 2 1h p l c 方法的建立與評價(jià) 2 。1 1 色譜條件 2 1 2c y a 標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液的制備 2 1 3c y a 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)工作液的制備 2 1 4 內(nèi)標(biāo)c y d 工作液 2 1 5 標(biāo)準(zhǔn)全血樣品的制備 2 1 6 人全血樣品的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)的制備 2 1 7 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 2 1 8 專一性( 干擾試驗(yàn)) 2 1 9 最低檢測限 2 1 1 0 準(zhǔn)確度 2 1 1l 精密度 2 1 1 1 1 批內(nèi)精密度 2 1 1 1 2 批間精密度 2 1 1 2 提取回收率 2 1 1 3 穩(wěn)定性 2 1 1 3 1 樣品在全自動(dòng)進(jìn)樣器中的穩(wěn)定性 2 1 1 3 2 多次凍融試驗(yàn) 2 2 人全血樣品的處理 2 3 臨床試驗(yàn)方案 2 3 1 受試者要求 2 - 3 2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 2 4 藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)計(jì)算方法 乃乃”侉舳引引引跎跎跎跎距跎跎跎昭黔昭船路路犯站犯昭跗舛辨舛舛 3 3 藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù) 9 6 4 小結(jié) 9 7 參考文獻(xiàn) 9 8 第五章大鼠在體腸回流法研究環(huán)孢素的吸收行為 9 9 1 材料和儀器 9 9 2 實(shí)驗(yàn)方法 1 0 0 2 1h p l c 方法的建立與評價(jià) 1 0 0 2 1 1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 1 0 0 2 1 2 回收率和穩(wěn)定性試驗(yàn) 1 0 0 2 2 大鼠在體腸回流實(shí)驗(yàn) 1 0 0 2 2 1 實(shí)驗(yàn)裝置 1 0 0 2 。2 2 在體腸回流試驗(yàn)方法 l o l 2 2 3 數(shù)據(jù)處理 1 0 1 2 3 腸壁的物理吸附 1 0 2 2 4c y a 最佳吸收部位研究】0 2 2 5c y a 濃度對藥物吸收的影響 1 0 2 2 6s a n d i m m u nn e o r a l 與c y a 固體分散體在體吸收的比較 1 0 2 2 7n a + 濃度的影響 1 0 2 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1 0 2 3 1c y a 分析方法評價(jià) 1 0 2 3 1 1 相關(guān)圖譜 1 0 3 3 1 2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 1 0 3 3 2c y a 在宅白腸回流液中穩(wěn)定性和回收率試驗(yàn)1 0 3 3 3 腸壁的物理吸附 1 0 4 3 4c y a 的最佳吸收部位1 0 5 3 5c y a 濃度對藥物吸收的影響一 1 0 6 3 6n a + 濃度的影響 1 0 7 3 7 新山地明與固體分散體中c y a 的在體吸收 1 0 8 4 討論 1 0 8 4 1 回流液中藥物濃度的選擇 1 0 8 4 2 流速的影響 1 0 8 4 3 小腸吸收水分的影響 1 0 8 4 4 管道系統(tǒng)對藥物吸附的影響 1 0 8 5 小結(jié) 1 0 9 參考文獻(xiàn) 1 1 0 第六章p s 對細(xì)胞色素p 4 5 0 酶活性的影響研究 1 1 2 1 材料和儀器 1 1 2 2 實(shí)驗(yàn)方法 1 1 3 2 1h p l c 分析方法 1 1 3 2 2 人肝微粒體制備 1 1 3 2 3p s 對人肝臟微粒體代謝的影響1 1 3 2 4 統(tǒng)計(jì)分析 1 1 4 3 結(jié)果與討論 1 1 4 3 1h p l c 分析方法 1 1 4 3 2p s 對p 4 5 0 酶活性的影響 1 1 9 3 2 1p s 對c y p l a 2 的影響 1 1 9 3 2 2p s 對c y p 2 a 6 的影響1 2 0 3 2 3p s 對c y p 2 d 6 的影響 1 2 1 3 2 4p s 對c y p 3 a 4 的影響 1 2 2 4 小結(jié) 1 2 3 參考文獻(xiàn) 1 2 3 第七章p s 對p - 糖蛋白抑制作用的研究 1 2 5 l 材料與儀器 1 2 6 2 實(shí)驗(yàn)方法 2 1p s 臨界膠束濃度的測定 2 2r 1 2 3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 2 3 細(xì)胞單層培養(yǎng) 2 4 細(xì)胞毒性評價(jià)一m t t 法 2 5 攝取實(shí)驗(yàn) 2 5 1 時(shí)間對r 1 2 3 攝取的影響 2 5 2p s 濃度和p 糖蛋白抑制劑對r 1 2 3 攝取的影響 2 6 轉(zhuǎn)運(yùn)試驗(yàn) 2 7 數(shù)據(jù)處理 2 8p s 對細(xì)胞膜流動(dòng)性的影響 2 9p s 對細(xì)胞中a t p 的影響 2 1 0p s 對p g pa t p 酶活性的影響 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 3 1p s 臨界膠束濃度的測定 3 2r 1 2 3 標(biāo)準(zhǔn)曲線 3 3m t t 法結(jié)果 3 4 細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)結(jié)果” 3 。4 1 時(shí)間對r 1 2 3 攝取的影響 3 4 2p s 濃度和p 糖蛋白抑制劑對r 1 2 3 攝取的影響 3 5p s 濃度對r 1 2 3 跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的影響 3 6p s 對細(xì)胞膜流動(dòng)性的影響 3 7p s 對細(xì)胞內(nèi)a t p 的影響 3 8p s 對p g pa t p 酶活性的影響 4 小結(jié) 參考文獻(xiàn) 全文結(jié)論 本文創(chuàng)新點(diǎn) 攻讀博士期間發(fā)表論文情況 致謝 1 2 6 1 2 6 】2 6 1 2 6 1 2 7 1 2 7 1 2 7 1 2 7 1 2 7 1 2 8 1 2 8 1 2 8 1 2 9 1 2 9 1 2 9 l3 0 13 0 l3 l 13 l 1 3 2 13 3 1 3 7 13 9 1 4 0 1 4 l 1 4 2 1 4 5 1 4 7 1 4 8 1 4 9 中文摘要 環(huán)孢素固體分散體膠囊的研制及載體促吸收機(jī)理的研究 摘要 環(huán)孢素( c y c l o s p o r i n ea ，c y a ) 是由l1 個(gè)親脂性氨基酸組成的中性環(huán)狀多 肽，2 0 世紀(jì)8 0 年代以來被廣泛地應(yīng)用于臨床器官移植，用以提高移植后的存活率， 已經(jīng)成為當(dāng)前最主要的免疫抑制劑之一。c y a 因在水中幾乎不溶并受到腸道及肝 臟中的代謝酶細(xì)胞色素p 4 5 0 3 a 4 ( c y p 3 a 4 ) 的代謝和腸道外向轉(zhuǎn)運(yùn)載體蛋白p 糖 蛋白( p g p ) 的外排作用，而使口服生物利用度較低( 2 0 一5 0 ) 。本文研鋁w j c y a 同體 分散體，并探討載體對c y p 3 a 活性和p g p 外排作用，以期通過提高c y a 溶解度和 溶出速度、載體對c y p 3 a 活性和p g p 外排作用的抑制來提高該藥物的i z i 服生物利 用度。 首先，以泊洛沙姆4 0 7 ( f 1 2 7 ) 、泊洛沙姆1 8 8 ( f 6 8 ) 、硬脂酸聚烴氧( 4 0 ) 酯( p s ) 及p v p k 2 9 ，3 2 為載體，以溶劑法及溶劑一熔融法制備y c y a 固體分散體。紅外光譜 的結(jié)果顯示，藥物與載體間無明顯的相互作用；差示掃描量熱分析( d s c ) 、熱臺(tái) 顯微鏡( h s m ) 、x 射線衍射( p x r d ) 等結(jié)果顯示所制備的固體分散體巾藥物均以 無定犁或分子狀態(tài)存在，而在物理混合物中則以結(jié)晶形式存在。以f 1 2 7 、f 6 8 及 p s 為載體制備的固體分散體在0 1 l 二烷基硫酸鈉( s l s ) 中6 0 m i n 的累積溶出百 分率超過9 0 ，而以p v p 為載體制備的固體分散體在0 1 s l s 中6 0 m i n 的累積溶出 百分率則低于7 0 。 以水為溶出介質(zhì)時(shí)，p s c y a 固體分散體隨著p s c y a 比例的增火，6 0 m i n 藥 物累積溶出百分率加大，當(dāng)p s c y a 比例超過7 ：1 時(shí)，藥物溶出速度不隨p s 增加 而加快，在此比例以上的固體分散體的累積溶出百分率均超過9 0 0 0 ；而以f 6 8 、 f 1 2 7 為載體制備的固體分散體在水中的溶出呈現(xiàn)倒鐘狀，表明這兩種載體對藥物 的增溶作用有限，難以維持藥物溶出時(shí)的漏槽狀態(tài)。 溶劑熔融法制備固體分散體過程中的乙醇用量、攪拌速度、水浴溫度、粉 體粒度在實(shí)驗(yàn)范圍內(nèi)均不影響藥物的溶出度。最終確定制備條件為：4 m l g 的乙 醇用量、8 0 0 r p m 的攪拌速度、6 5 。c 制備溫度及8 0 目粉體。加入2 的微粉硅膠可 顯著提高粉體的流動(dòng)性。 灌裝膠囊后，影響因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明光、高濕及高溫均可使c y a 固體分散 體膠囊的有關(guān)物質(zhì)含量增加，其中高溫還會(huì)降低本品的溶出度，高濕( 2 5 、 r h 9 2 5 ) 條件下易吸潮變質(zhì)，說明本品對高溫和高濕更加敏感，因此產(chǎn)品應(yīng)密 閉防潮包裝，并在貯存時(shí)避免高溫。 加速實(shí)驗(yàn)及長期試驗(yàn)結(jié)果表明，c y a 膠囊經(jīng)雙層鋁塑復(fù)合膜包裝后，在 中文摘要 4 0 。c 7 5 r h 條件下放置一個(gè)月，溶出度即顯著下降，p x r d 結(jié)果顯示藥物重新 析出結(jié)晶。在3 0 。c 6 0 r h 放置六個(gè)月及在2 5 6 0 r h 貝! 、= 存十八個(gè)月基本穩(wěn)定。 大鼠分別以l m g 1 0 0 9 的劑量灌胃給予c y a 固體分散體與n e o r a l 固后，兩者 的血藥濃度一時(shí)問曲線相似，c y a 固體分散體和n e o r a l 卻的各動(dòng)力學(xué)參數(shù)如下： c m 戤分別為2 3 4 8 6 5 士4 9 5 9 6 和2 5 5 7 3 8 士5 5 5 0 9 n g m l ；t m 戤分別為2 0 0 士0 6 7 和 1 7 1 士0 6 7 h 、a u c o - 6 0 分別為4 0 2 8 3 9 9 士5 2 0 3 1 6 和4 1 0 2 1 1 0 士6 2 3 9 8 7n g m l h ： m r t o - 6 0 分別為1 7 9 6 士1 8 8 和1 7 9 7 士1 。2 9 h 。c y a 固體分散體的a u c 為n e o r a i 的9 8 2 0 ，表明c y a 制成固體分散體后，大鼠口服后可有效地促進(jìn)藥物在胃腸 道的吸收，達(dá)到與自微乳化制劑相似的吸收效果。 健康志愿者單次口h 艮c y a 固體分散體膠囊與參比制劑自微乳化軟膠囊后， c v a 固體分散體和n e o r a l 固的各動(dòng)力學(xué)參數(shù)如下：c m 戕分別為1 5 0 0 3 士3 4 8 8 和 l7 4 2 9 士3 61 3n g m l ；t m 觚分別為2 6 3 + 0 5 5 和1 3 9 士0 4 9 h ；a u c o - 2 4 分別為 7 9 9 3 0 士2 5 3 5 1 和8 2 9 5 6 士2 2 9 5 6n g m l h ；a u c 吣分別為8 8 5 1 7 土2 8 1 5 0 和 9 2 5 8 0 士2 5 2 3 7 n g m l h ；m l 玎4 分別為6 4 8 士1 1 5 和5 7 6 士1 0 4 h 。兩者的a u c o - 2 4 、 a u c 、c m a x 具有生物等效性。t m 戤經(jīng)w i l c o x o ns i g n 檢驗(yàn)，試驗(yàn)制劑與參比制劑 在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有差異( p 0 0 5 ) ，明顯優(yōu)丁結(jié)腸( p o 0 1 ) ，說i _ i , q c y a 在小腸段吸收較好。在實(shí)驗(yàn)濃 度范圍內(nèi)，藥物累積吸收量與c y a 濃度呈正比，說明藥物吸收為被動(dòng)擴(kuò)散過程， 提高藥物在胃腸道中的溶解度有利于藥物吸收。降低回流液中n a + 濃度，單位面 秋藥物的累積吸收量無顯著性差異，表明藥物吸收為非n a + 依賴。相同濃度的新 山地明與固體分散體溶液回流后，藥物的累積吸收量之間無顯著性差異，再次證 明兩種制劑的吸收程度相似。 采用人肝微粒體，考察了p s 對c y p l a 2 ，c y p 2 a 6 ，c y p 2 d 6 ，c y p 3 a 4 各酶 活性的影響，發(fā)現(xiàn)p s 對c y p l a 2 ，c y p 2 a 6 ，c y p 2 d 6 和c y p 3 a 4 均有一定的抑 制作用，且均隨p s 濃度的增大，抑制作用加強(qiáng)。抑制c y p l a 2 ，c y p 2 a 6 ，c y p 2 d 6 和c y p 3 a 4 酶活性5 0 所需p s 的濃度( i c s o ) 分別為0 3 7 0 5 ，1 9 4 2 ，1 0 0 5 和0 6 5 8 5 1 1 1 9 m l 。p s 對各酶抑制作用由大至小分別為c y p i a 2 、c y p 3 a 4 、c y p 2 d 6 和 c y p 2 a 6 。表明p s 在體內(nèi)可能抑制c y p 3 a 4 而增加c y a 的吸收。 不同濃度的p s 均可顯著提高p - g p 底物羅丹明1 2 3 ( r 1 2 3 ) 細(xì)胞內(nèi)攝取量和腸腔 側(cè)( a 側(cè)) 至基底側(cè)( b 側(cè)) 的轉(zhuǎn)運(yùn)量，同時(shí)顯著降低r 1 2 3 從b 側(cè)至a 側(cè)的排放量 ( p 0 0 5 ) t h ee x p e r i m e n t a lr e s u l t si l l u s t r a t e dt h a ts o l i dd i s p e r s i o ni s au s e f u la p p r o a c ht oi m p r o v et h eb i o a v a i l a b i l i t yo ft h i sp o o r l yw a t e r - s o l u b l ed r u g t h eb i o a v a i l a b i l i t yo fc y as o l i dd i s p e r s i o n a f t e rs i n g e d o s i n gw a sc o n d u c t e di n h e a l t h y v o l u n t e e r s b yu s i n gs a n d i m m u nn e o r a l a sar e f e r e n c e t h e p h a r m a c o k i n e t i ep a r a m e t e r sf o rs o l i dd i s p e r s i o na n ds a n d i m m u nn e o r a i w e r ea s f o l l o w s ：c m a ) ：15 0 0 3 + 3 4 8 8 ，17 4 2 9 - a ：3 61 3 n g m l ；t m 姒：2 6 3 + 0 5 5 ，1 3 9 - a ：0 4 9 h ； a u c o - 2 4 ：7 9 9 3 0 - j ：2 5 3 5 1 ，8 2 9 5 6 + 2 2 9 5 6 n g m l h ；a u c o 。：8 8 5 1 7 + 2 8 1 5 0 ， 9 2 5 8 0 a ：2 5 2 3 7 n g m l h ；m r t o - 2 4 ：6 4 8 + 1 1 5 ，5 7 6 + 1 0 4 h s t a t i s t i c a l a n a l y s e s r e v e a l e dt h a tt h e r ew a sn os i g n i f i c a n td i f f e r e n c eb e t w e e nt h et w of o r m u l a t i o n sf o r a u c o - 2 4 、a u c a n dc m 艤o ft h e9 0 c o n f i d e n c ei n t e r v a l ，i n d i c a t i n gt h a tt h et w o p r e p a r a t i o n sw e r eb i o e q u i v a l e n t t m a ) co fc y as o l i dd i s p e r s i o nw a sl o n g e rt h a t t h a t o f s a n d i m m u nn e o r a l 固( p o 0 5 ) t h e d r u ga b s o r p t i o nf r o mt h e s et h r e es e c t i o n sw e r em u c hh i g h e rt h a nt h a tf r o mt h ec o l o n ( p 0 o1 ) ，i n d i c a t i n gt h a tc y a w a sm a i n l ya b s o r b e df r o mt h eu p p e rp a r to fi n t e s t i n e t h ea c c u m u l a t e da b s o r p t i o no fc y ai n c r e a s e dl i n e a r l y w i t hi t sc o n c e n t r a t i o n ， m e a n i n gt h a tap a s s i v ed i f f u s i o nm e c h a n i s mw a sd o m i n a t e d t h er e s u l t si l l u s t r a t e d t h a tt h ep r e p a r a t i o no fs o l i dd i s p e r s i o nw a sh e l p f u lf o rt h ed r u ga b s o r p t i o nb yt h e i m p r o v e m e n to fc y as o l u b i l i t ya n dd i s s o l u t i o n i nt h eg a s t r o i n t e s t i n a lt r a c k t h e c o n c e n t r a t i o no fn a + d i d n ti n f l u e n c et h ea c c u m u l a t e da m o u n to fd r u gs i g n i f i c a n t l y ( p 0 0 5 ) t h ee x p e r i m e n ti l l u s t r a t e dt h a tt h e e n h a n c e ds o l u b i l i t ya n dd i s s o l u t i o nb yt h eu s eo fs o l i dd i s p e r s i o ni so n eo f t h er e a s o n s f o rt h ei m p r o v e db i o a v a i l a b i l i t yo ft h ep r e p a r a t i o n t h ei n h i b i t i v ep o t e n t i a lo fp so nc y p ia 2 ，2 a 6 ，2 d 6a n d3 a 4i nh u m a nl i v e r m i c r o s o m e sw a se v a l u a t e d t h eh u m a nl i v e rm i c r o s o m e sw e r ep r e i n c u b a t e dw i t h t h et e s ta r t i c l ea t3 7 0 cf o r15m i n u t e s ，a n dt h e ni n c u b a t e dw i t hs e l e c t i v es u b s t r a t e so f c y pia 2 ，2 a 6 ，2 d 6a n d3 a 4i np r e s e n c eo fn a d p h ，t h ec o f a c t o ro fc y t o c h r o m e p 4 5 0o x i d a s e s a t3 7 0 cf o r3 0m i n u t e s t h ef o r m a t i o n so fm e t a b o l i t e so fc y p 4 5 0 1a 2 ，2 a 6 ，2 d 6a n d3 a 4w e r em e a s u r e db yh p l ca n di n h i b i t i o na n di t sk i n e t i c sw e r e c a l c u l a t e db yc o m p a r i s o nw i t hn e g a t i v ec o n t r o lr e s p e c t i v e l y t h er e s u l t ss h o w e d t h a tt h ei n h i b i t o r yp o t e n t i a l ( i c 5 0 ) o fp so nc y p l a 2 ，2 a 6 ，2 d 6a n dc y p 3 a 4w e r e 0 3 7 0 5m g m l ，1 9 4 2m g m l ，1 0 0 5m g m la n d0 6 5 8 5m g m lr e s p e c t i v e l y t h e s e r e s u l t sd e m o n s t r a t e dt h a tp sm a ye n h a n c et h ea b s o r p t i o no fc y a i nv i v ot h r o u t ht h e i n h i b i t i o no f a c t i v i t yo f c y p 3 a 4 p - g l y c o p r o t e i n s ( p g p ) a r et h eb e s tk n o w n e f l u x e r sp r e s e n ti ns e v e r a lc a n c e rc e l l l i n e s ，a n di ti sw e l ld o c u m e n t e dt h a tp g pi so v e r e x p r e s s e di nc a c o 一2c e l l s t h e c a c o 2c e l ll i n ei su s e di nt h ei n v e s t i g a t i o nf o rt h es t u d yo ft h et h ec h a r a c t e r i s t i c a l u p t a k e ，t r a n s p o r to fr h o d a m i n e12 3 ( r i2 3 ) ，as u b s t r a t eo fp - g p ，i nt h ep r e s e n c eo r w i t h o u tt h ea d d i t i o no fp sa td i f f e r e n tc o n c e n t r a t i o n t h ec y t o t o x i ca c t i v i t yw a s e v a l u a t e du s i n gas t a n d a r dm t t ( 3 - ( 4 ，5 一d i m e t h y l t h i a z o l - 2 一y i ) l ，5 一d i p h e n y l t e t r a z o l i u m b r o m i d e ) a s s a y t h em t tr e s u l t ss h o w e d t h a tp sa tc o n c e n t r a t i o n sb e l o w 8 0 0 g m ld i d n ti n f l u e n c et h ev i a b i l i t yo fc a c o - 2 u p t a k e o fr12 3i n t ot h ec a c o - 2 w a ss i g n i f i c a n t l yi m p r o v e db yt h ea d d i n go fp ss o l u t i o na td i f f e r e n tc o n c e n t r a t i o n s ， 6 前言 前言 環(huán)孢素( 又名環(huán)孢素a ，c y c l o s p o r i n e ，c y c i o s p o r i n ea