藥劑學(xué)畢業(yè)論文

安徽中醫(yī)學(xué)院 2007級(jí)碩士研究生開題報(bào)告 洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 Study on Loxoprofen Sodium Osmotic Pump Controlled Release Tablets 姓 名： 專 業(yè)： 藥 劑 學(xué) 研究方向： 藥物制劑新技術(shù) 導(dǎo) 師： 教授 2009年 9月 10 目 錄 一 立題依據(jù)與研究背景 1 1 研究 背景 1 2 立題依據(jù) 2 二 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀 3 1 洛索洛芬鈉的基本理化性質(zhì) 3 2 洛索洛芬鈉 的 作用機(jī)制及藥動(dòng)學(xué)研究 3 3 洛索洛芬鈉 的臨床適用癥 4 4 滲透泵 片概況 4 三 課 題研究?jī)?nèi)容 、 擬解決的問題以及 技術(shù)路線 6 1 課題的研究?jī)?nèi)容 6 2 課題 擬解決的問題 6 3 技術(shù)路線 7 四 可行性分析 15 五 實(shí)驗(yàn)進(jìn)度安排 15 六 預(yù)期成果 15 七 經(jīng)費(fèi)預(yù)算 15 參考文獻(xiàn) 16 洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 1 一 立題依據(jù)與研究背景 1 研究背景 解熱鎮(zhèn)痛藥是一類具有解熱、鎮(zhèn)痛作用，且大多數(shù)還具有顯著的抗炎、抗風(fēng)濕作用的藥物，故稱為解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥（ antipyretic analgesic and anti-inflammatory drugs）。鑒于此本類藥物的抗炎作用與具有甾體結(jié)構(gòu)的糖皮質(zhì)激素不同， 1974年在意大利米蘭召開的國(guó)際會(huì)議中，將本類藥物歸入非甾體抗炎藥 （ non-steroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDs） 1。 自 1899年德國(guó)拜爾公司研制出乙酰水楊酸（阿司匹林） (acetylsalicylic acid, aspirin, ASA)2問世以來的百年間，發(fā)現(xiàn)了許多不同類別的非甾體抗炎藥，極大的豐富了臨床治療學(xué)，并廣泛應(yīng)用于臨床。目前，非甾體抗炎藥 是全球處方藥和非處方藥用量最大的藥物之一，在內(nèi)、外、婦、兒科均廣泛使用，在風(fēng)濕病臨床中也占有很重要的地位。 阿司匹林是 非甾體抗炎藥的原形藥物，至今仍在使用，并且開發(fā)其新的用途。20世紀(jì) 50年代出現(xiàn)的吡唑酮類藥物，如保泰松，以及 20世紀(jì) 60年代上市的吲哚乙酸類藥物，如吲哚美辛（消炎痛） ，以其強(qiáng)大的抗炎、鎮(zhèn)痛作用而廣泛應(yīng)用于臨床。 20世紀(jì) 70年代至今，可謂非甾體抗炎藥發(fā)展最快的年代，相繼上市的丙酸類藥物，如布洛芬和酮基布洛芬等；苯乙酸類藥物，如雙氯芬酸；萘乙酸類藥物，如萘普生等。這些新型藥物由于在化學(xué)結(jié)構(gòu)上的變更，與阿司匹林或保泰松或吲哚美辛相比，療效相當(dāng)或更好，而不良反應(yīng)的發(fā)生率和嚴(yán)重程度均明顯下降。此外，為了提高療效，同時(shí)減少其不良反應(yīng)，出現(xiàn)了不同劑型的非甾體抗炎藥，如戴芬（德國(guó)生 產(chǎn)）是雙氯滅酚的雙釋膠囊，布洛芬緩釋劑型芬必得等 3。 近年來 ， 國(guó)內(nèi)外已證實(shí)非甾體抗炎藥主要的作用機(jī)制是抑制花生四烯酸(arachidonicacid, AA)代謝中的環(huán)氧化酶 (Cyclooxygenase, COX)和脂氧化酶 (LOX),阻礙前列腺素 (PG)、前列環(huán)素 (PGI)和白三烯 (LT)的致炎增敏作用 4。 前列腺素 和前列環(huán)素能使血管舒張并增強(qiáng)血管通透性 ,間接成為引起炎癥的媒介 ,并 且 延長(zhǎng) 炎癥 時(shí)間 ，此外，前列腺素還可以使痛覺神經(jīng)末梢增敏，產(chǎn)生疼痛 。 白三烯 是過敏性慢反應(yīng)物質(zhì) (SRS-A)的主要成分 ,能 增強(qiáng)血管通透性并促進(jìn)血漿滲出。通過 AA代謝所產(chǎn)生的大部分炎癥介質(zhì)均可為 NSAID所阻斷 5。 除此之外 ， 非甾體抗炎藥的作用機(jī)制還包括 ： 解除氧化磷酸化偶聯(lián) ； 抑制溶洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 2 酶體酶釋放 ； 從血漿蛋白里置換出內(nèi)源性抗炎多肽 ； 抑制補(bǔ)體活化 ； 拮抗激酶活性及其產(chǎn)生 ； 抑制氧自由基產(chǎn)生 ； 抑制白細(xì)胞聚集和黏附 6。 非甾體抗炎藥 的種類繁多，其“家族成員”還在不斷增多，分類方法有很多種。 根據(jù)對(duì) COX抑制特性將 NSAIDs分為四類 ： 第一類 COX 1傾向性抑制劑 ，如小劑量腸溶性阿司匹林 ； 第二類為非選擇性 COX抑制劑 ， 如吲哚美辛 、 雙氯芬酸等 ； 第三類為選擇性 COX 2抑制劑 ， 如美洛昔康等 ； 第四類為 COX 2特異性抑制劑 ，如 羅非昔布 、 塞來昔布 等 7。還可以根據(jù)其對(duì) 花生四烯酸 的不同代謝途徑來分類以及根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)來分類。 洛索洛芬鈉 （ Loxoprofen Sodium）又稱 環(huán)氧洛芬鈉、羅索普洛芬鈉、氯索洛芬鈉，由日本三共株式會(huì)社（ Sankyo）研發(fā)， 1986年 7月在日本以商品名為“樂松”（ Loxonin）上市。本品是第一個(gè)苯丙酸類前體型非甾體抗炎藥，具有良好的鎮(zhèn)痛、抗炎及解熱作用，尤其是鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)。其鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)度比吲哚美辛（消炎痛） 強(qiáng) 10倍，其 抗炎和解熱作用則與之相當(dāng)。由于本品為前體藥物，經(jīng)胃腸道吸收后 轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚源x產(chǎn)物而發(fā)揮作用，故對(duì)胃腸道副作用少，使用更加安全。臨床上廣泛用于治療慢性風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性 關(guān)節(jié)炎、骨性關(guān)節(jié)炎、變形性關(guān)節(jié)炎、腰疼等 8。 2 立題依據(jù) 近年來，為增加藥物的市場(chǎng)價(jià)值和競(jìng)爭(zhēng)力，開發(fā)藥物的新劑型成為重要的途徑。在各種投放于市場(chǎng)的新型給藥系統(tǒng)中，口服控釋給藥系統(tǒng)能夠減小血藥濃度的波動(dòng)和給藥次數(shù)，具有明顯的給藥方便性和較好的患者順應(yīng)性的優(yōu)點(diǎn)。在各種口服控釋給藥系統(tǒng)中，滲透泵片獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)已成為研究開發(fā)的熱點(diǎn)件 9-12。對(duì)于一般的口服控釋給藥系統(tǒng)，釋藥環(huán)境 pH值、食物和其他生理因素會(huì)影響藥物的釋放，而滲透泵片釋藥利用了滲透壓的原理，其釋藥行為對(duì)上述因素變化不敏感 ，釋藥達(dá)到均勻恒速， 并且體內(nèi)外試驗(yàn)相關(guān)性良好 ，可同時(shí)控釋多種藥物 13。 因此，被公認(rèn)是目前最理想的口服控釋給藥方法。 國(guó)內(nèi)外研究報(bào)道表明， 洛索洛芬鈉 顯著的治療效果和較小的副作用受到臨床醫(yī)生和患者的普遍認(rèn)可，是我國(guó)“九五”及 2010年醫(yī)藥科技發(fā)展規(guī)劃推薦品種 之一 。在日本專利 1997年 4月到期后，福建匯天生物藥業(yè)有限公司 1998年開始對(duì)該洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 3 品種進(jìn)行研制開發(fā)，并于 2002年 7月獲得國(guó)家新藥證書和生產(chǎn)批件。目 前，洛索洛芬鈉普通片、分散片、口腔速崩片、顆粒劑、膠囊劑、貼劑 。 國(guó)內(nèi)尚未見自主研制的緩控釋制劑上市。因此，積極開發(fā)推廣本品的新劑型是值得我們關(guān)注的一項(xiàng)工作。將 洛索洛芬鈉 制成控釋片劑，可以 減少給藥次數(shù)和保持平穩(wěn)的血藥濃度，為病人提供一種相比較而言較為安全、方便的服藥方式。 所以 本文選擇 洛索洛芬鈉 滲透泵型控釋片這一課題進(jìn)行研究與開發(fā)，力求通過對(duì)控釋制劑技術(shù)的研究，研制出設(shè)計(jì)合理，性質(zhì)穩(wěn)定，適于生產(chǎn)，同時(shí)具有廣大社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益的制劑新產(chǎn)品。 二 國(guó)內(nèi)外 研究現(xiàn)狀 1 洛索 洛芬鈉 的 基本 理化性質(zhì) Chemical structures of Loxoprofen Sodium 化學(xué)名： Monosodium 2- 4-(2-oxocyclopentyl)methylphenyl propanoate 分子式： C15H17O3 Na 分子量： 268.28 本品為白色 或淺黃色 結(jié)晶 或結(jié)晶性 粉末 ， 無氣味，味微甜咸 。 在水、甲醇中易溶 ，在 乙醇中溶解，在丙酮、氯仿、乙醚中不溶。 2 洛索洛芬鈉 的 作用機(jī)制及藥動(dòng)學(xué)研究 洛索洛芬鈉 為苯丙酸類非甾體抗炎藥，為非活性的前體藥。吸收后在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成活性代謝產(chǎn)物抑制環(huán)氧化酶，減少前列腺素生成，抑制中性粒細(xì)胞向炎癥部位的趨向性及抑制趨向因子形成而發(fā)揮作用 14。 本品口服后經(jīng)胃腸道迅速吸收，轉(zhuǎn)變?yōu)轫樖胶头词搅u基代謝物，其藥理活性是由反式羥基代謝物產(chǎn)生 15,16。健康成人單次口服 洛索洛芬鈉 60mg，迅速吸洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 4 收，在肝臟、腎臟、皮膚、其他細(xì)胞外間隙及四肢的炎性組織中濃度較高，在關(guān)節(jié)中濃度持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，而在腦組織和骨骼肌中濃度較低。服藥后，原形藥物的血藥濃度達(dá)峰時(shí)間大約為 30分鐘 ，反式羥基代謝物的血藥濃度達(dá)峰時(shí)間大約為50分鐘， 給藥 1小時(shí)后的洛索洛芬鈉原形及反式羥基代謝物的血漿蛋白結(jié)合率分別為 97.0%和 92.8%。本品大部分以原形藥物的葡萄糖醛酸的結(jié)合物或羥基化的葡萄糖醛酸結(jié)合物從尿液中排出，服藥 8小時(shí)內(nèi)約可排泄服用量的一半，服藥24小時(shí)后 血液 中基本檢測(cè)不到藥物。 健康成人口服本品每次 60mg，每日 3次，連續(xù) 5天，其吸收和排泄均與單次給藥無明顯差異，未見蓄積 17,18。 繆海均等 19選取 18例健康志愿者單劑量口服 60 mg洛索洛芬鈉片 ， 采用高效液相層析法測(cè)定血漿中洛索洛 鈉 藥物濃度， 結(jié)果證明本品口服吸收快 ， 消除半衰期短 。 3 洛索洛芬鈉 的 臨床適用 癥 洛索洛芬鈉具有起效迅速，抗炎強(qiáng)效且均衡，胃腸道刺激小的特點(diǎn)。臨床上可廣泛應(yīng)用于各種急性或慢性關(guān)節(jié)炎，如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、骨性關(guān)節(jié)炎和痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎等；軟組織風(fēng)濕病，如腰疼、頸臂肩綜合征、肩周炎 、網(wǎng)球肘 等；手術(shù)后、外傷后及拔牙后疼痛以及急性上呼吸道炎癥的解熱和鎮(zhèn)痛 14。 黃烽等 20選擇 52例活動(dòng)性強(qiáng)直性脊柱炎患者 ， 口服洛索洛芬鈉 ，經(jīng)過 4 wk的治療 ， 總有效率為 92. 42%， 其中對(duì)各主要療效指標(biāo)均有明 顯改善(P0.05)且 耐受性較好。施冶青等 21選擇骨關(guān)節(jié)炎患者 40例 ,采用對(duì)照法與試驗(yàn)組(口服洛索洛芬鈉片 )比較在治療前后組內(nèi)膝關(guān)節(jié)活動(dòng)痛、 15 m行走時(shí)間、日常活動(dòng)能力等指標(biāo) ， 均顯示有顯著性差異 ； 而組間比較均無顯著性差異。 4 滲透泵 片 概況 滲透泵型控釋制劑是以滲透壓作為釋藥動(dòng)力，以零級(jí)釋放動(dòng)力學(xué)為特征的一種釋藥系統(tǒng)。 它不僅能夠使血藥濃度較長(zhǎng)時(shí)間地維持在有效范圍內(nèi)，而且可減少用藥次數(shù)與全身副作用，提高了藥物的安全性和有效性。它具有如下優(yōu)點(diǎn) 22-28: （ 1） 藥物以零級(jí)速率釋放，降低了峰谷現(xiàn)象 ，使藥物因血藥濃度波動(dòng)而產(chǎn)生的毒副反應(yīng)降低到最小，非常適合于治療指數(shù)小的藥物。 （ 2） 相對(duì)于普通制劑藥物恒速釋放時(shí)間明顯延長(zhǎng) (通常為 12 24 小時(shí) )，因此可洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 5 減少服藥次數(shù)，提高患者順應(yīng)性，減輕刺激和不良反應(yīng)，特別適用于半衰期短需頻繁服用的藥物。 （ 3） 相對(duì)于其它緩控釋制劑其釋藥速率受外界環(huán)境因素 (如 pH 值、胃腸道蠕動(dòng)等 )影響小，因此個(gè)體差異小。 （ 4） 體內(nèi)外相關(guān)性好，可用體外釋藥參數(shù)預(yù)測(cè)體內(nèi)釋藥情況。 關(guān)于滲透泵制劑的文獻(xiàn)報(bào)到始見于 1955年 29， Rose等設(shè)計(jì)了一種利用滲透壓差為釋藥動(dòng)力的給藥裝置，主要 用于埋植在動(dòng)物體內(nèi)，達(dá)到長(zhǎng)時(shí)間定量釋藥的目的。該裝置體積較大，使用不便。隨著藥劑學(xué) 基本理論和制劑工藝學(xué)的發(fā)展，尤其是緩、控釋制劑的不斷開發(fā)應(yīng)用，使人們對(duì)滲透泵制劑的研究逐步重視。 20世紀(jì) 70年代中期， F.Theeuwes利用醋酸纖維素作為包衣材料，無機(jī)鹽或高分子聚合物作為滲透壓促進(jìn)劑，制備滲透泵型控釋制劑，大大簡(jiǎn)化了滲透泵制劑的結(jié)構(gòu)，使?jié)B透泵制劑更加適合于工業(yè)化生產(chǎn)，從而使其從實(shí)驗(yàn)室走向市場(chǎng)， 奠定了滲透泵制劑在緩、控釋制劑中的特殊地位。 按照其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，可將口服滲透泵片分為單層芯滲透泵片、雙層芯滲透泵片和三 層芯滲透泵片。單層芯滲透泵片的片芯一般包含藥物、滲透壓活性物質(zhì)和助懸劑 ， 外包一層控釋半透膜，然后用激光或機(jī)械打孔的方法在片芯包衣膜上開一個(gè)釋藥小孔?？诜笪改c道的水分通過半透膜進(jìn)入片芯，溶解片芯形成滲透壓活性物質(zhì)的飽和溶液及藥物的飽和溶液或混懸液，使膜內(nèi)具有很高的滲透壓，在膜內(nèi)外滲透壓差的作用下水源源不斷的進(jìn)入片芯，在包衣膜內(nèi)產(chǎn)生靜壓力，從而使藥液以恒定速率壓出釋藥孔 30，其流出量與滲透進(jìn)入膜內(nèi)的水量相等，直到包衣膜內(nèi)外滲透壓差為零。 對(duì)于一些難溶性藥物，單層芯滲透泵片不能滿足其理想釋藥的目的，通?？芍?成雙層芯滲透泵片，即在單層芯的基礎(chǔ)上，在藥物層上再加上一層推動(dòng)層，推動(dòng)層一般由高分子聚合物和滲透壓活性物質(zhì)組成，當(dāng)滲透泵片處于水性環(huán)境時(shí)，水通過包衣膜進(jìn)入片內(nèi)，推動(dòng)層高分子聚合物吸水膨脹，推動(dòng)藥物層經(jīng)釋藥孔釋藥。國(guó)內(nèi)有人以格列 吡嗪 31為模型藥物，研究了這種滲透泵片。三層芯滲透泵片將膨脹層置于中間，兩側(cè)為藥物層，當(dāng)膨脹層吸水膨脹后推動(dòng)兩側(cè)藥物層經(jīng)釋藥孔釋藥。由于雙層芯滲透泵片在打孔前需要對(duì)藥物層進(jìn)行識(shí)別，這個(gè)過程速度慢而且辨識(shí)準(zhǔn)確率也有待提高，而三層芯滲透泵片的片芯制備工藝復(fù)雜 32，洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 6 相比之下，單層芯滲 透泵片由于工藝簡(jiǎn)單而受到了廣大藥學(xué)工作者的青睞。 自 1983 年以來 ， 已有 10 多個(gè)采用口服滲透控釋技術(shù)的產(chǎn)品相繼在國(guó)外上市 ，且多為 1 日給藥 1 次 ， 以初級(jí)單室滲透泵控釋片和 推拉式滲透泵 為主 。 截至 2001年 12 月已有 261 項(xiàng)相關(guān)的美國(guó)專利 33。國(guó)內(nèi)于 20 世紀(jì) 80 年代初首次發(fā)表了有關(guān)滲透泵控釋制劑的研究論文 34, 1998 年國(guó)內(nèi)第一臺(tái)用于科研和小批量生產(chǎn)的控釋片劑激光打孔機(jī)研制成功 35。近年來國(guó)內(nèi)涌現(xiàn)出大量的相關(guān)研究報(bào)道 ， 并已有數(shù)個(gè)產(chǎn)品上市或注冊(cè)新藥 ， 多為每日給藥 1 次 ， 如硝苯地平 、 格列吡嗪 、 硫酸沙定胺醇控 釋制劑等。也有少數(shù)激光打孔裝置的研究報(bào)道和專利。與國(guó)外相比 ，我國(guó)在口服滲透泵給藥系統(tǒng)的基礎(chǔ)理論研究、藥用輔料供應(yīng)、生產(chǎn)設(shè)備、專利技術(shù)等方面仍存在較大差距。對(duì)口服滲透泵制劑的研究尚需深入、全面展開。 三 課題研究?jī)?nèi)容 、 擬解決的問題 以及 技術(shù)路線 1 課題的研究?jī)?nèi)容 1.1 洛索洛芬鈉 滲透泵片的 處方前 研究 1.2 洛索洛芬鈉滲透泵片 體外 分析方法的建立 1.3 洛索洛芬鈉滲透泵片的制備工藝的研究 1.4 洛索洛芬鈉滲透泵片的質(zhì)量控制和初步穩(wěn)定性的考察 1.5 洛索洛芬鈉滲透泵片 在家兔體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究 2 課題 擬解決的問題 本文選擇 洛索洛芬鈉 滲透泵型控釋片這一課題進(jìn)行研究與開發(fā)，以 洛索洛芬鈉 為模型藥物， 采 用促滲劑和阻滯劑等其他輔料作為片芯，制備了日服 兩 次的 洛索洛芬鈉 滲透泵型控釋片。從而達(dá)到減少服藥次數(shù)，減小血藥濃度波動(dòng) ， 降低副作用的目的。本文要解決的問題包括如下幾個(gè)方面 ： 2.1 確定 洛索洛芬鈉 最大紫外吸收波長(zhǎng)，測(cè)定 洛索洛芬鈉 在各種溶出介質(zhì)中的穩(wěn)定性和溶解度，為滲透泵制劑的研究工作打好基礎(chǔ)。 2.2 在現(xiàn)代藥物緩控釋理論的指導(dǎo)下，應(yīng)用緩控釋技術(shù)和手段， 針對(duì) 所研究的對(duì)象，利用統(tǒng)計(jì)學(xué)原理，進(jìn)行有滲透泵型控釋片的 處方篩選及制備工藝的研究。 洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 7 2.3 對(duì)模型藥物的劑型進(jìn)行體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究，擬建立專屬性高、靈敏度高、準(zhǔn)確的體內(nèi)測(cè)定方法，以證明滲透泵片的控釋效果。 綜上所述，本文將分為體外試驗(yàn)和體內(nèi)試驗(yàn)兩部分 :體外試驗(yàn)主要包括 釋放度試驗(yàn)測(cè)定方法的選擇、 含量 測(cè)定方法的選擇、制劑制備工藝的考察和優(yōu)化，以及緩控釋制劑體外釋藥機(jī)制的探討 ；體內(nèi)試驗(yàn)主要進(jìn)行了 洛索洛芬鈉 滲透泵片的體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)和體內(nèi)外相關(guān)性的研究，以期對(duì) 洛索洛芬鈉 滲透泵片質(zhì)量進(jìn)行合理的評(píng)價(jià)并為臨床合理用藥提供科學(xué)的依據(jù)。 3 技術(shù)路線 洛索洛芬鈉滲透泵片 處方前研究 滲透泵片含量測(cè)定方法的建立 滲透泵片釋放度測(cè)定 方法的建立 滲透泵片處方篩選和優(yōu)化 滲透泵片穩(wěn)定性考察 滲透泵片質(zhì)量控制 滲透泵片家兔體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究 洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 8 第一章 洛索洛芬鈉 處方前研究 要設(shè)計(jì)制備一個(gè)安全、有效和穩(wěn)定的藥物制劑，藥物處方前研究（ pharmaceutical preformulation studies）工作是至關(guān)重要的，是藥物制劑研究與開發(fā)必不可少的組成部分。在此，本章對(duì) 洛索洛芬鈉 的溶解度、 表觀油水分配系數(shù) 、 藥物溶液穩(wěn)定性進(jìn)行了考察。 1 分析方法的建立 1.1 吸收波長(zhǎng)的確立 精密稱取洛索洛芬鈉對(duì)照品適量，加溶劑溶解，稀釋，在 200 400nm 波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描，確定最大吸收波長(zhǎng)。 1.2 方法學(xué)驗(yàn)證：標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備、精密度實(shí)驗(yàn)、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)、加樣回收率試驗(yàn) 2 洛索洛芬鈉 溶解度的測(cè)定 2.1 洛索洛芬鈉在一些溶劑中的溶解性 按 中國(guó)藥典 2005 版二部凡例五（ 2）規(guī)定操作 ，取 洛索洛芬鈉 適量，于252 一定容量的溶劑中，每隔 5 min 強(qiáng)力振搖 30 s， 觀察 30 min 內(nèi)溶解情況，如 無目視可見的 溶質(zhì)顆粒時(shí)，即認(rèn)為已完全溶解?？疾?洛索洛芬鈉 在常用溶劑 蒸餾 水、甲醇、乙醇、乙醚、氯仿、丙酮中的溶解度情況。 2.2 洛索洛芬鈉在不同介質(zhì)的 平衡溶解度 取 過量的 洛索洛芬鈉對(duì)照品 ， 分別 加入 幾種溶劑制成 飽和溶液 ， 于 37 恒溫水浴 振搖兩天， 0.45m 微孔濾膜濾過， 棄去初濾液，取續(xù)濾液稀釋后 照紫外分光 光度法測(cè)定吸收度，直至吸收度不變?yōu)橹?，代入相?yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算溶解度 。 3 表觀油水分配系數(shù)的測(cè)定 本文采用正辛醇 /水系統(tǒng)經(jīng)典搖瓶法，測(cè)定 洛索洛芬鈉 的表觀油水分配系數(shù)。 4 在不同溶劑中的穩(wěn)定性 取 洛索洛芬鈉 適量，加 入 蒸餾水 、 0.1 mol/L HCL、 pH 6.8、 pH 7.4 磷酸鹽緩沖溶液 ，配制成濃度為 20g/ml 的供試品溶液，于 37 放置 24 h，分別于 1、 2、4、 6、 8、 10、 12、 24 h 測(cè)定 其 吸收度 ，考察洛索洛芬鈉在不同溶劑中的穩(wěn)定性 。 洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 9 第 二 章 洛索洛芬鈉 滲透泵片體外分析方法的建立 1 洛索洛芬鈉滲透泵片含量測(cè)定方法的建立 1.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的 選擇 精密稱取洛索洛芬鈉對(duì)照品適量，用 蒸餾水 溶解，稀釋 ， 在 200 400 nm 波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描。同時(shí)將制劑所用輔料按處方比例用同種方法稀釋，經(jīng)0.45m 微孔濾膜過濾后進(jìn)行紫外掃描。結(jié)果表明， 洛索洛芬鈉 在 222 nm 有最大吸收 ，且所用輔料在此波長(zhǎng)處無吸收，對(duì)主藥測(cè)定無干擾，故選擇 222 nm 作為含量測(cè)定的波長(zhǎng)。 1.2 色譜條件 色譜柱： 日本島津 VP-ODS（ 150 mm4.6 mm， 5m） ；流動(dòng)相： 甲醇 水 冰醋酸 三乙胺 (600 400 1 1)；流速： 1 ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)： 222 nm； 柱溫： 25 。 1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的 繪制 精密稱取 干燥至恒重的洛索洛芬鈉 對(duì)照品 10mg，置 100 ml 容量瓶中，用 蒸餾水 溶解并稀釋至刻度，搖勻得濃度為 100g/ml 的對(duì)照品溶液 。 分別 精密量取標(biāo)準(zhǔn)貯備液 0.5、 1.5、 3.0、 5.0、 7.0、 10.0mL 至 10mL 容量瓶中，加水至刻度，搖勻， 分別 進(jìn)樣 10 l， 記錄峰面積， 以峰面積 A 對(duì)進(jìn)樣濃度 C 作線性回歸，得標(biāo) 準(zhǔn)曲線的 回歸方程 。 1.4 精密度試驗(yàn) 分別取低、中、高三個(gè)濃度的 洛索洛芬鈉 標(biāo)準(zhǔn)溶液，一天內(nèi)重復(fù)測(cè)定 3 次，計(jì)算日內(nèi) 精密度 ；每天測(cè)定一次，連續(xù)測(cè)定 3 天，計(jì)算日間精密度。 1.5 回收率試驗(yàn) 精密稱取 洛索洛芬鈉 相當(dāng)于測(cè)定濃度 80%、 100%、 120%的水平 各三份，按處方比例加入輔料 ， 加水定容，過濾， 將續(xù)濾液按本部分 “ 1.2” 項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算測(cè)得量。以測(cè)得量對(duì)加入量計(jì)算回收率。 1.6 重復(fù) 性試驗(yàn) 取同一批 洛索洛芬鈉滲透泵片 ，照含量測(cè)定下的方法，分別 測(cè)定 6 次，計(jì)算標(biāo)示量和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。 洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 10 1.7 含量測(cè)定方法 取 洛索洛芬鈉滲透泵片 10 片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取約相當(dāng)于 洛索洛芬鈉 50mg 的細(xì)粉 ，置 100 ml 容量瓶中，加水 50ml， 振搖使其溶解 ，加水稀釋至刻度，搖勻，用 0.45m 微孔濾膜濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液 1ml，置 10ml 容量瓶中，加水稀釋至刻度 作為供試液，精密吸取上述溶液 101 注入液相色譜儀，記錄峰面積， 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算濃度，求 含量。 2 洛索洛芬鈉滲透泵片 釋放度 測(cè)定方法的建立 2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的 選擇 精密稱取洛索洛芬鈉對(duì)照品適量，用 溶 出介質(zhì) 溶解，稀釋 ， 按紫外分光光度法在 200 400 nm 波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描。同時(shí)將制劑所用輔料按處方比例用同種方法稀釋，經(jīng) 0.45m 微孔濾膜過濾后進(jìn)行紫外掃描。結(jié)果表明， 洛索洛芬鈉在 溶劑中的最大吸收波長(zhǎng)均為 222 nm，且所用輔料在此波長(zhǎng)處無吸收，對(duì)主藥測(cè)定無干擾，故選擇 222 nm 作為溶出介質(zhì)中藥物濃度的測(cè)定波長(zhǎng)。 2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的 繪制 精密稱取 干燥至恒重的洛索洛芬鈉 對(duì)照品 10mg，置 100 ml 容量瓶中，用 蒸餾水 溶解并稀釋至刻度，搖勻得濃度為 100g/ml 的對(duì)照品溶液 。 分別 精密量取標(biāo)準(zhǔn)貯備液 0.5、 1.5、 2.5、 3.5、 4.5、 5.5mL 至 10mL 容量瓶中，加水至刻度，搖勻， 用紫外分光光度法在 222 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，用吸收度 (A)對(duì)濃度 (C)作線性回歸，得回歸方程 。 2.3 回收率試驗(yàn) 精密稱取 洛索洛芬鈉 相當(dāng)于測(cè)定濃度 80%、 100%、 120%的水平 各三份，按處方比例加入輔料 ， 加水定容，過濾， 將續(xù)濾液 稀釋 ， 用紫外分光光度法在 222 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度， 代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算測(cè)得量。以測(cè)得量對(duì)加入量計(jì)算回收率。 2.4 精密度試驗(yàn) 分別取低、中、高三個(gè)濃度的 洛索洛芬鈉 標(biāo)準(zhǔn)溶液，一天內(nèi)重復(fù) 測(cè)定 3 次，計(jì)算日內(nèi) 精密度 ；每天測(cè)定一次，連續(xù)測(cè)定 3 天，計(jì)算日間精密度。 2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取 洛索洛芬鈉 適量，加 入 蒸餾水 、 0.1 mol/L HCL、 pH 6.8、 pH 7.4 磷酸鹽緩沖溶液 ，配制成濃度為 20g/ml 的供試品溶液，于 37 放置 24 h，分別于 1、 2、洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 11 4、 6、 8、 10、 12、 24 h 測(cè)定 其 吸收度 ，考察洛索洛芬鈉在不同 釋放介質(zhì) 中的穩(wěn)定性 。 2.6 釋放度 測(cè)定方法 依據(jù)中 國(guó)藥典 2005版二部附錄 XC關(guān)于溶出度的測(cè)定方法，建立了 洛索洛芬鈉滲透泵片 溶出度的測(cè)定方法。以 900 ml 蒸餾水為溶出介 質(zhì)，轉(zhuǎn)速為 100 r/min，溫度為 37 0.5 ，分別于 0.5、 1、 2、 4、 6、 8、 10、 12 h取樣 5 ml，同時(shí)補(bǔ)加 5 ml等溫度溶出介質(zhì)，樣品用 0.45m微孔濾膜過濾，必要時(shí)用溶出介質(zhì)稀釋適當(dāng)倍數(shù)，以蒸餾水為空白，在 222 nm出測(cè)定吸收度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算累計(jì)釋放百分率。 第 三 章 洛索洛芬鈉滲透泵片 的制備工藝研究 1 洛索洛芬鈉滲透泵片的 制備工藝 100 目過篩 適量粘合劑 制粒 干燥 藥物輔料 混合物 軟材 濕顆粒 干顆粒 整粒 壓片 包控釋衣膜 熟化 片芯 滲透泵片 成品 2 洛索洛芬鈉滲透泵片的 單因素考察 2.1 單因素考察判斷方法 體外釋放曲線是反映制劑體外釋藥行為的最重要指標(biāo)，是處方優(yōu)化、篩選的重要依據(jù)。對(duì)于體內(nèi)外相關(guān)性較好的制劑，體外釋放曲線可以直接反映藥物在體內(nèi)的吸收行為。近年來，體外釋藥行為評(píng)價(jià)與比較的研究報(bào)道很多， 主要有模型擬合法、方差分析 法、相似因子法等 ，其中相似因子法 (f2)以其簡(jiǎn)潔的運(yùn)算和可信的結(jié)果成為美國(guó) FDA 推薦的體外釋放度比較方法。因此，本文采用相似因子法 (f2)對(duì)滲透泵片的體外釋藥曲線進(jìn)行比較。 2.2 片芯處方的單因素考察 2.2.1 滲透壓促進(jìn)劑的種類對(duì)釋放的影響 2.2.2 滲透壓促進(jìn)劑的 用量 對(duì)釋放的影響 洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 12 2.2.3 滲透壓促進(jìn)劑的比例對(duì)釋放的影響 2.2.4 阻滯劑的種類對(duì)釋放的影響 2.2.5 阻滯劑的用量對(duì)釋放的影響 2.2.6 粘合劑的選擇 2.3 包衣液 處方的單因素考察 2.3.1 包衣溶劑對(duì)釋放的影響 2.3.2 包衣液濃度對(duì)釋放的影響 2.3.3 包衣增重對(duì)釋放的影響 2.4 工藝因素對(duì)釋放的影響 2.4.1 制片工藝 2.4.2 片芯壓力 2.4.3 片芯表面積 2.5 體外釋放條件對(duì)藥物釋放的影響 2.5.1 釋放介質(zhì) 2.5.2 溶出度的測(cè)定法 2.5.3 轉(zhuǎn)速 3 洛索洛芬鈉滲透泵片的 正交試驗(yàn)優(yōu)化處方 設(shè)計(jì) 4 因素 3 水平正交設(shè)計(jì)，選用 L9(34)表安排實(shí)驗(yàn)。 4 釋藥機(jī)理的初步探討 第 四 章 洛索洛芬鈉滲透泵片 的質(zhì)量控制 和初步穩(wěn)定性的考察 一 洛索洛芬鈉滲透泵片的 質(zhì)量控制 1 洛索洛芬鈉滲透泵片 含量 測(cè)定 見第二章含量測(cè)定方法對(duì)滲透泵片進(jìn)行含量測(cè)定。 洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 13 2 洛索洛芬鈉滲透泵片釋放度測(cè)定 見第二章釋放度測(cè)定方法，測(cè)定 滲透泵片 的釋放度 。 3 片重差異的測(cè)定 4 片劑硬度的測(cè)定 5 片劑含量均勻度的測(cè)定 6 有關(guān)物質(zhì)的檢查 二 初步穩(wěn)定性研究 1 考察項(xiàng)目與檢測(cè)方法 參照藥物穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)原則對(duì)藥物制劑穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)的要求， 分別以性狀、含量、有關(guān)物質(zhì)、 釋放度 作 為重點(diǎn)考察項(xiàng)目，對(duì) 洛索洛芬鈉滲透泵片 進(jìn)行穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，考察實(shí)驗(yàn)前后各考察指標(biāo)是否有明顯變化。各考察項(xiàng)目的檢測(cè)方法均參照上述質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究項(xiàng)下的相關(guān)方法。 2 影響因素試驗(yàn) 2.1 光穩(wěn)定性試驗(yàn) 取一批樣品置 表面皿 中，室溫條件下 ， 將放有樣品的表面皿置于光照強(qiáng)度為4 500 500 lx的光照箱中進(jìn)行光照試驗(yàn)。分別于 0、 5、 10天取樣 ， 按考察項(xiàng)目下的 方法檢測(cè)。 2.2 熱穩(wěn)定性試驗(yàn) 取一批樣品批號(hào)，于 60 烘箱中放置，分別于 0、 5、 10天取樣 ， 按考察項(xiàng)目下的方法檢測(cè)。 2.3 濕穩(wěn)定性試驗(yàn) 取一批樣品批號(hào)，分別放置于相對(duì)濕度為 75 %， 95 %的恒溫（ 25 ）密閉容器中，分別于 0、 5、 10天取樣 ， 按考察項(xiàng)目下的方法檢測(cè)。 3 加速實(shí)驗(yàn) 取 供試品三批，按 市售包裝，在穩(wěn)定 40 2 、相對(duì)濕度 75 % 5 %的條件下放置 6個(gè)月，所用設(shè)備應(yīng)能控制穩(wěn)定 2 、相對(duì)濕度 5 %，并能對(duì)真實(shí)溫度與濕度進(jìn)行監(jiān)測(cè)，在試驗(yàn)期間第 1、 2、 3個(gè)月末分別取樣一次，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目檢測(cè)。 洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 14 第 五 章 洛索洛芬鈉滲透泵片 在家兔體內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究 隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展及研究的深入，人們逐漸認(rèn)識(shí)到藥物制劑所產(chǎn)生的藥理效應(yīng)是受到各種復(fù)雜因素的影響，藥效不僅與藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)有關(guān)，而且還受到各種制劑因素和生物因素的影響。因此，研究藥物的吸收、分布、代謝和排泄過程的各種機(jī)理和理論 ，研究各種劑型因素和生物因素對(duì)藥效的影響，對(duì)控制藥物制劑的內(nèi)在質(zhì)量，確保藥物的最終安全和有效，具有十分重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。本章對(duì)市售片及自制 洛索洛芬鈉滲透泵片 的藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度進(jìn)行考察比較，用藥動(dòng)學(xué)參數(shù) (Cmax、 AUC 等 )來證實(shí) 洛索洛芬鈉滲透泵片 的控釋效果。 1 體內(nèi)分析方法的建立 1.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性 1.2 血漿樣品 的處理 和測(cè)定 1.3 分析方法的確認(rèn)： 方法專屬性 、 最低檢出限度 、 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 、 回收率實(shí)驗(yàn) 、 精密度 、穩(wěn)定性 2 藥物動(dòng)力學(xué)研究實(shí)驗(yàn)方法 2.1 受試試劑與參比試劑 2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 日本長(zhǎng)耳大白兔， 體重 2.0 2.5 kg，購(gòu)自安徽醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物房。 2.3 給藥和采血 2.4 血藥濃度測(cè)定結(jié)果 2.5 數(shù)據(jù)處理 血藥濃度數(shù)據(jù)和藥動(dòng)學(xué)參數(shù)采用 DAS軟件進(jìn)行自動(dòng)擬合處理，以 AIC值判斷房室模型和權(quán)重系數(shù)，求算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)和統(tǒng)計(jì)矩結(jié)果。 2.6 相對(duì)生物利用度的計(jì)算 以上述藥動(dòng)學(xué)參數(shù)中的 AUC 0-t數(shù)據(jù)，求算 洛索洛芬鈉滲透泵片 （受試制劑 T）與其普通片（參比制劑 R）同劑量的相對(duì)生物利用度。 相對(duì)生物利用度的計(jì)算公式 ： F (AUC 0-t)T/(AUC 0-t)R 100 % 2.7 體內(nèi)外相關(guān)性評(píng)價(jià) 洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 15 四 可行性分析 1 國(guó)內(nèi)外與 本課題相關(guān)聯(lián)的研究為本課題的進(jìn)行提供了 理論依據(jù)和技術(shù)保障 。 2 我的導(dǎo)師王成永教授具有豐富的理論知識(shí)與實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，完全能夠勝任本課題的指導(dǎo)工作。 3 本課題制劑學(xué)部分核心工作已基本完成，為課題生物藥劑學(xué)和藥物代謝動(dòng)力學(xué)部分打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。 4 在 學(xué)校、藥學(xué)院、研究生部等領(lǐng)導(dǎo) 和 老師的關(guān)懷與幫助 下 ， 相 信本課題能夠圓滿完成。 五 實(shí)驗(yàn)進(jìn)度安排 2008 年 9 月 2008 年 11 月 查閱 相關(guān)文獻(xiàn) 及實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作 2008 年 12 月 2009 年 2 月 洛 索洛芬鈉滲透泵片 的處方前研究 2009 年 3 月 2009 年 9 月 洛索洛芬鈉滲透泵片 的處方工藝研究和質(zhì)量控制研究 2009年 10月 2010年 1月 洛索洛芬鈉滲透泵片 在 家兔 體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究 2010年 2 2010年 6月 進(jìn)行資料整理和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)、撰寫論文 、 答辯 六 預(yù)期成果 1 按照中國(guó)藥典 2005版緩控釋制劑指導(dǎo)原則 ， 篩選出 洛索洛芬鈉滲透泵片 的最佳處方及制備工藝 。 2 對(duì) 滲透泵片 進(jìn)行合理、正確的質(zhì)量方法學(xué)考查，進(jìn)行初步質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。 3 發(fā)表與本課題相關(guān)論文一篇。 七 經(jīng)費(fèi)預(yù)算 洛索洛芬鈉滲透泵型控釋片的研究 16 主要用途 預(yù)算（元） 查閱文獻(xiàn)，打印資料 500 試劑和儀器 及檢測(cè)費(fèi)用 15000 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、飼料 1500 發(fā)表論文 1000 課題協(xié)作費(fèi) 2000 合 計(jì) 20000 參考文獻(xiàn) 1 劉昌治 ,劉晟 ,帥武平主編 .臨床藥品信息與商品名 M.合肥 :安徽科學(xué)技術(shù)出版社 ,2009:246 2 Sneader W. 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